Development and validation of a new and economical stability indicating RP-HPLC method for cefixime trihydrate

ABSTRACT The present work describes the development of a new high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of Cefixime trihydrate under different stress conditons as specified by ICH. For the analysis, a Phenomenex (250 x 4.6 mm, 5 µm particle size) ODS column and a SPD 20 A UV detector at 289 nm was used. The selected mobile phase was 10 mM disodium hydrogen phosphate (with 0.5% TEA, pH adjusted to 6.3 with OPA) and methanol in the ratio of 75:25 (v/v) in isocratic mode at a flow rate of 1 mL.min-1.The linear regression analysis data for the calibration plots showed good linear relationship with r2 = 0.9997 in the concentration range of 5-100 μg.mL-1. The stress degradation was performed using acid, alkali, water, hydrogen peroxide and uv light.

RESUMO O presente trabalho descreve o desenvolvimento de um novo alta performance cromatografia líquida (HPLC) método para a determinação de cefixima tri-estresse sob diferentes condições, conforme especificado pelo ICH. Para a análise, a Phenomenex (250 x 4,6 mm, 5 µm de granulometria) ODS coluna e a SPD 20 um detector de UV em 289 nm foi utilizado. A fase móvel selecionado foi de 10 mM hidrogenofosfato dissódico (com 0,5% TEA, o pH ajustado para 6,3 com OPA) e de metanol em razão de 75:25 (v/v) no modo isocrático com uma taxa de fluxo de 1 mL.min-1. A análise de regressão linear para dados da calibração parcelas apresentaram boa relação linear com r2 = 0,9997 no intervalo de concentração de cerca de 5 100 µg.mL-1. Degradação do estresse foi realizado utilizando um ácido, alcalino, a água, o peróxido de hidrogênio e luz uv.

Simultaneous estimation of rosuvastatin and amlodipine in pharmaceutical formulations using stability indicating HPLC method

A viable cost-effective and isocratic approach employing C-18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 µm) based HPLC has been utilized to separate and estimate the drugs, rosuvastatin, amlodipine and their stress induced degradation products, simultaneously in pharmaceutical formulations. Focused on ICH guideline parameters, the efficient separation of both drugs and their degradation products was achieved by optimizing a 30:70 (v/v) solvent mixture of acetonitrile and 0.1 M ammonium acetate buffer (pH 5) as mobile phase. The flow rate of the mobile phase was 1.5 mL/min and all the detections were carried out at 240 nm using UV detector. The method was linear in the concentration range of 1-200 µg/mL for rosuvastatin with 0.996 coefficient of determination value. For amlodipine, linearity was in the range of 0.5-100 µg/ml with 0.994 coefficient of determination value. Both the drugs along with their degradation products were separated in less than twenty minutes. The results of within-day and between-day precision were varied from 0.72 to 1.81% for rosuvastatin and 0.83 to 1.88% for amlodipine. The results show that this ICH validated method can be employed successfully for the routine as well as stability quantification of both the active ingredients simultaneously in pharmaceutical formulations.

Utilizou-se abordagem de viabilidade custo-efetividade e isocrática, baseada em CLAE, empregando coluna C-18 (250 mm x 4,6 mm, 5 µm) para separar e avaliar os fármacos, rosuvastatina, anlodipino e seus produtos de degradação induzida por estresse, simultaneamente, em formulações farmacêuticas. Focada nos parâmetros das diretrizes da ICH, a separação eficiente de ambos os fármacos e de seus produtos de degradação foi obtida por meio da otimização da fase móvel com mistura de solventes 30:70 (v/v), respectivamente, acetonitrila e tampão acetato de amônio O,1 M (pH 5). A velocidade de fluxo da fase móvel foi de 1,5 mL/min e todas as detecções foram realizadas em 240 nm, utilizando detector de UV. O método foi linear no intervalo de concentração de 1-200 µg/mL para a rosuvastatina com coeficiente de determinação 0,996. Para o anlodipino, a linearidade ficou na faixa de 0.5-100 µg/mL, com coeficiente de determinação 0,994. Ambos os fármacos, junto com seus produtos de degradação, foram separados em menos de vinte minutos. Os resultados de precisão intra-dia e inter-dia variaram de 0,72 a 1,81% para a rosuvastatina e de 0,83 a 1,88%, para o anlodipino. Os resultados mostram que este método validado pelo ICH pode ser empregado com sucesso tanto para a rotina quanto para a quantificação simultânea da estabilidade de ambos os ingredientes ativos em formulações farmacêuticas.

Stability-indicating RP-HPLC method for simultaneous estimation of levosalbutamol sulfate and theophylline in combined dosage form

A novel, simple, accurate and precise RP-HPLC method for simultaneous determination of levosalbutamol sulfate and theophylline has been developed and validated. Separation was achieved on a Phenomenex; C18 column (250 mm × 4.6 mm i.d., 5 µm) using methanol: 10 mM TBAHS(tetrabutyl ammonium hydrogen sulfate) (50:50, v/v) as mobile phase at flow rate of 1.0 mL.min-1. The UV detection wavelength was 274 nm. The linearity is obeyed over a concentration range of 0.5-150 µg.mL-1 with correlation coefficient of 0.999 for both the drugs. The proposed method was validated by determining accuracy, precision, stability and system suitability parameters. The method was found to be robust. Specificity of the method was determined by subjecting the drugs to various stress conditions like acid, alkali, oxidation, thermal and photolytic degradation. The method was used successfully for the simultaneous determination of levosalbutamol sulfate and theophylline in syrup dosage form.

Desenvolveu-se e validou-se método de RP-HPLC novo, simples, exato e preciso de determinação simultânea do sulfato de levossalbutamol e teofilina.. A separação foi efetuada em uma coluna Phenomenex; C18 (250 mm x 4,6 mm d.i., 5 µm) utilizando metanol: TBAHS (hidrogenossulfato de tetrabutilamônio) 10 mM (50:50, v/v) como fase móvel, com fluxo de 1,0 mL.min-1. O comprimento de onda de detecção no UV foi 274 nm. Observou-se linearidade na faixa de concentração de 0,5-150 µg mL-1, com coeficiente de correlação de 0,999 para ambos os fármacos. O método proposto foi validado determinando-se exatidão, precisão, estabilidade e parâmetros de adequação do sistema. O método mostrou-se robusto. A especificidade do método foi determinada submetendo os fármacos a várias condições de estresse, como ácido, álcali, oxidação, degradação térmica e fotolítica. O método foi usado com sucesso para a determinação simultânea do sulfato de levossalbutamol e teofilina na forma de xarope.

Compatibility and stability of valsartan in a solid pharmaceutical formulation

Valsartan (VAL) is a highly selective blocker of the angiotensin II receptor that has been widely used in the treatment of hypertension. Active pharmaceutical ingredient compatibility with excipients (crospovidone, hypromellose, magnesium stearate, microcrystalline cellulose and titanium dioxide) is usually evaluated in solid pharmaceutical development. Compatibility and stability can be evaluated by liquid chromatography. Studies were performed using binary mixtures of 1:1 (w/w) VAL/excipient; samples were stored under accelerated stability test conditions (40 ºC at 75% relative humidity). The results indicate that VAL is incompatible with crospovidone and hypromellose, which reduced the VAL content and gave rise to new peaks in the chromatogram due to degradation products.

Valsartana (VAL) é um bloqueador altamente seletivo do receptor da angiotensina II, que tem sido amplamente utilizado para o tratamento da hipertensão. Testes de compatibilidade com excipientes usualmente empregados em formulações sólidas são utilizados no desenvolvimento de formulações sólidas. Neste trabalho, realizaram-se testes utilizando misturas binárias na proporção 1:1 (m/m) de VAL/excipiente e as amostras foram armazenadas em condições de estabilidade acelerada (40 ºC em 75% de umidade relativa). Os resultados obtidos indicam a incompatibilidade de VAL com crospovidona e hipromelose, através da redução do teor de VAL e a presença de novos picos no cromatograma provenientes de produtos de degradação.

Biological and physicochemical stability of ceftazidime and aminophylline on glucose parenteral solution

Ceftazidime is a broad spectrum antibiotic administered mainly by the parenteral route, and it is especially effective against Pseudomonas aeruginosa. The period of time in which serum levels exceed the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) is an important pharmacodynamic parameter for its efficacy. One of the forms to extend this period is to administer the antibiotic by continuous infusion, after prior dilution in a Parenteral Solution (PS). The present work assessed the stability of ceftazidime in 5% glucose PS for 24 hours, combined or not with aminophylline, through High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The physicochemical evaluation was accompanied by in vitro antimicrobial activity compared MIC test in the 24-hour period. Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa were the microorganisms chosen for the MIC comparison. The HPLC analysis confirmed ceftazidime and aminophylline individual stability on PS, while the MIC values were slightly higher than the mean described in the literature. When both drugs were associated in the same PS, the ceftazidime concentration by HPLC decreased 25% after 24 hours. Not only did the MIC values show high loss of antibiotic activity within the same period, but also altered MIC values immediately after the preparation, which was not detected by HPLC. Our results indicate that this drug combination is not compatible, even if used right away, and that PS might not be the best vehicle for ceftazidime, emphasizing the importance of the MIC evaluation for drug interactions.

Ceftazidima é um antimicrobiano administrado por via parenteral, que apresenta amplo espectro de ação, principalmente contra Pseudomonas aeruginosa. O tempo em que a concentração sérica de ceftazidima permanece acima da concentração mínima inibitória (MIC) é um importante parâmetro farmacodinâmico para a determinação da eficácia antimicrobiana e pode ser potencializado através da utilização de infusão contínua em soluções parenterais (PS). Este artigo visa a avaliar a estabilidade da ceftazidima em solução de glicose 5%, na presença e na ausência do fármaco aminofilina, através de cromatografia líquida de alta eficiência HPLC e MIC durante o período de 24 horas. Os microorganismos selecionados para a determinação do MIC foram Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. Os ensaios em cromatógrafo líquido confirmaram a estabilidade dos fármacos ceftazidima e aminofilina quando são individualmente associados em PS, enquanto os valores de MIC ficaram maiores que os valores encontrados na literatura. Quando ambos os fármacos foram associados na mesma solução parenteral a concentração de ceftazidima obtida por HPLC diminuiu 25% depois de 24 horas. Os valores de MIC mostraram maior decaimento da atividade antimicrobiana neste mesmo período e também valores de MIC alterados nas soluções preparadas no tempo zero, decaimento este que não foi detectado em HPLC. Os resultados indicaram incompatibilidade na associação dos fármacos em PS, enfatizando a importância dos resultados de MIC para interações de fármacos.