Osteomas cutâneos miliares múltiplos da face - relato de caso / Multiple cutaneous miliary osteomas of the face: a case report

Introdução: Osteoma cutâneo miliar múltiplo é doença rara, caracterizada por tecido ósseo ectópico na derme e/ou hipoderme. Usualmente ocorre na face, em pessoas entre 17 e 79 anos. A etiologia é ainda desconhecida. Relata-se caso de paciente do sexo feminino, apresentando placa papulosa de coloração castanho-escura, endurecida, acometendo regiões malares e mentoniana, mal delimitada, com superfície irregular, formada por lesões papulonodulares, hipercrômicas, algumas branco-amareladas, há dois anos, referindo acne, desde os 16 anos de idade, não tratada, tendo o diagnóstico sido confirmado histopatologicamente e apresentado resultado terapêutico satisfatório com uso de tretinoína creme 0,1%.

Summary: Multiple cutaneous miliary osteoma is a rare condition characterized by ectopic bone tissue in the dermis and/or hypodermis. It usually occurs on the face, in individuals of 17 to 79 years old. Its etiology is still unknown. The present article reports the case of a female patient affected by a hardened, poorly delimited, papular plaque of dark brown hue and irregular surface, affecting the malar and mentonian regions. The patient sought medical care two years before the publication of this study, describing untreated acne since the age of 16. The papular plaque was composed of hyperchromic papular nodular lesions ­ some with white-yellowish hue. The diagnosis was confirmed histopathologically. Satisfactory therapeutic results were achieved with the use of 0.1% tretinoin cream.

Preservação da proteína verde fluorescente no tecido ósseo descalcificado / Preservation of the green fluorescent protein on decalcified bone tissue

A proteína verde fluorescente (GFP) foi originalmente descoberta no cnidário Aequorea victoria. Células-tronco GFP positivas podem ser rastreadas in vivo quando usadas na terapia de doenças. No entanto, no osso, a fluorescência gerada pela GFP pode ser perdida durante o processo de descalcificação, dificultando o rastreamento das células-tronco usadas no tratamento de doenças ou defeitos ósseos. O objetivo deste estudo foi comparar diferentes técnicas de preservação da GFP no tecido ósseo descalcificado. Foram utilizados fêmures de ratas GFP Lewis distribuídos em quatro grupos: 1) descalcificado em ácido fórmico e incluído em parafina; 2) descalcificado em ácido fórmico e submetido à criomicrotomia; 3) descalcificado em EDTA e incluído em parafina; e 4) descalcificado em EDTA com criomicrotomia. Secções de tecido ósseo de todos os grupos foram analisadas para identificação da fluorescência natural e posteriormente submetidas à imunofluorescência, sendo utilizados anti-GFP e Alexa Flúor 555. As imagens foram obtidas por microscopia confocal. Osteócitos, osteoblastos e células da medula óssea de ratos GFP somente tiveram sua fluorescência natural preservada no tecido ósseo descalcificado em EDTA e submetido à microtomia por congelação. Nos demais grupos, houve perda da fluorescência natural, e as células GFP somente puderam ser identificadas com o uso da reação de imunofluorescência com anti-GFP. Conclui-se que a descalcificação em EDTA e a criomicrotomia são as melhores técnicas para preservar a fluorescência natural das células GFP no tecido ósseo e que a visualização de células GFP em tecido ósseo descalcificado em ácido fórmico e incluído em parafina somente pode ser realizada com o uso da técnica de imunofluorescência.

Green fluorescent protein (GFP) was originally derived from the cnidarians Aequorea victoria. GFP-positive stem cells can be tracked in vivo when used in the therapy of diseases. However, in the bone, the fluorescence generated by GFP can be lost during the decalcification process, hindering the tracking of stem cells used in the treatment of diseases or bone defects. The aim of this study was to compare different techniques of preservation of GFP in the decalcified bone tissue. Femurs of female Lewis GFP rats were distributed in four groups: 1) decalcified in formic acid and paraffin-embedded; 2) decalcified in formic acid submitted to cryomicrotomy; 3) decalcified in EDTA and paraffin-embedded and 4) decalcified in EDTA with cryomicrotomy. Sections of bone tissue of all the groups were analyzed for identification of the natural fluorescence and subsequently submitted to the immunofluorescence using anti-GFP and Alexa Flúor 555. The images were obtained by confocal microscopy. Osteocytes, osteoblasts and bone marrow cells of GFP rats only had natural fluorescence preserved in the bone tissue decalcified in EDTA and submitted to cryomicrotomy. In others groups there were loss of the natural fluorescence and the GFP cells could be only identified with the use of the immunofluorescence with anti-GFP. In conclusion, the decalcification in EDTA and the cryomicrotomy are the best techniques to preserve the natural fluorescence of the GFP cells in the bone tissue and the GFP cells in bone tissue decalcified in formic acid and paraffin-embedded can be visualized only with the use of the immunofluorescence with anti-GFP.

Tempo de descalcificação e preservação do núcleo celular de tecido mineralizado descalcificado com ácido nítrico a 5%, edta a 7% e Biodec - R / Time of decalcification and preservation of the cellular nucleus of the desmineralized tissue decalcified by nitric acid 5%, EDTA 7% and Biodec - R

Este estudo avaliou o tempo de descalcificação e a preservação dos núcleos celulares de tecido mineralizado de mandíbulas de ratos utilizando três soluções descalcificadoras (EDTA 7%, ácido nítrico 5% e Biodec-R). As mandíbulas de 15 ratos Wistar foram removidas e dissecadas obtendo-se dois blocos mandibulares de cada animal, posteriormente divididos em três grupos. Para a descalcificação dos espécimes do grupo A foi utilizado com o EDTA 7%, do grupo B e ácido nítrico 5% e do grupo C a solução Biodec-R, sendo registrados os tempos de descalcificação. Posteriormente, as peças foram processadas de acordo com protocolo histológico de rotina, sendo obtidos quatro cortes seriados que foram corados com hematoxilina-eosina para observação em microscopia de luz. Para avaliar a preservação dos núcleos celulares foram considerados quatro campos, selecionados aleatoriamente, adotando-se o escore: 0 – baixa preservação (de 0% e 20% das células com núcleo preservado); 1 – moderada preservação (de 20% e 50% das células com núcleo preservado); 2 – alta preservação (acima de 50% das células com núcleo preservado). A solução que descalcificou as peças em menor período de tempo foi o ácido nítrico (nove dias), seguida pela Solução Biodec-R (12dias) e EDTA (135 dias). Moderada preservação dos núcleos celulares foi evidenciada nos espécimes dos grupos B e C e alta preservação nos grupo A. Embora a solução de EDTA a 7% tenha sido a que necessitou de maior período de tempo para promover a descalcificação (135 dias), foi a mais eficaz na preservação dos núcleos celulares.

Estudo comparativo da morfologia da polpa dentária de dentes humanos submetidos à técnica de clivagem e a técnicas de descalcificação química / Comparative study of dental pulp morphology from human teeth submitted to cutting technique or chemistry decalcification technique

Os rápidos avanços do conhecimento acerca do reparo e regeneração tecidual, têm despertado o interesse pela biologia pulpar. Entretanto, para avaliar microscopicamente a dinâmica do tecido pulpar, é necessário, inicialmente, que o dente seja submetido aos processamentos histológicos de fixação e descalcificação. A descalcificação pode afetar o grau de coloração e pode causar desnaturação de proteínas. Além disso, é um processo demorado, visto que o dente requer um longo período de desmineralização. Assim, a proposta deste trabalho foi de avaliar qualitativamente a matriz extracelular e as células da polpa dentária, comparando três grupos: dois em que o tecido dentário foi descalcificado e um em que a polpa foi removida dos tecidos duros, não necessitando do processo de descalcificação. Dez pré-molares foram fixados em formalina tamponada a 10% por 24 horas. Após, estes dentes foram divididos em três grupos: 4 dentes foram submetidos a processo de descalcificação por meio de solução de Morse, 3 por meio de solução de EDTA a 10% e; os 3 dentes restantes tiveram sua polpa separada dos tecidos duros dentários por meio da técnica de clivagem. Na seqüência, os três grupos foram processados por meio da técnica histológica de rotina e foram corados com H/E. Os resultados desta análise demonstraram que houve uma melhor conservação tanto da matriz extracelular, quanto das estruturas celulares no grupo da clivagem, seguido do grupo Morse e por fim, com a menor conservação das estruturas pelo grupo EDTA.

The rapid advances of the knowledge of repair and regeneration tissues had proved to be an exciting time for pulp biology. However, to study the dynamic of pulp tissue, it is necessary, initially, that the tooth be submitted to histological fixation and decalcification processing. Decalcification may affect the degree of staining and it may cause denaturation of proteins. Furthermore, it is a slow process, demanding long demineralization times for a tooth. Thus, the purpose of the present study was to compare, qualitatively, the pulp extracellular matrix and the pulp cells, submitted to different techniques: EDTA solution decalcification, Anna Morse solution decalcification and a last group which pulp was removed from tooth without decalcification. Ten premolar teeth were fixed in 10% buffered formalin for 24 hours. After this, the teeth were divided in three groups: 4 teeth underwent decalcification with Morse solution; 3, decalcification with 10% EDTA solution and; 3, were sectioned and their pulps were gently removed. Subsequently, the groups followed the routine histological technique and staining with H/E. The results demonstrated that both conservation of pulp cells and extracellular matrix were better in the group without decalcification, followed by the Morse group and, the last, with the worst structures conservation for the EDTA group.