ABSTRACT
ABSTRACT Background: Helicobacter pylori (H. pylori) is a gram-negative bacterium associated with the etiology of several gastrointestinal tract pathologies, and cagA-positive (cagA+) strains are found in populations with gastric ulcers and precancerous lesions, inducing pro-inflammatory responses. The development of neoplasms is related to microRNA (miRNA) dysregulation, indicating highly expressed miRNA-629. The article aims to correlate the expression level of miRNA-629 with the presence of H. pylori and the pathogenicity marker cagA. Methods: 203 gastric biopsy samples were evaluated from individuals with normal gastric tissue (n=60), gastritis (n=96), and gastric cancer (n=47) of both genders and over 18 years old. The samples were subdivided according to the presence or absence of H. pylori, detected by polymerase chain reaction (PCR). RNA was extracted using a commercial kit and quantified. Complementary DNA (cDNA) was synthesized using commercial kits, and the relative expression was calculated using the 2-ΔΔCt method. Results: Individuals infected with H. pylori are nine times more likely to develop gastric cancer. Cancer patients appeared to have decreased expression of miRNA-629; however, the presence of the bacterium would not influence this reduction. Individuals in the cancer group showed lower miRNA-629 expression when cagA+; however, in the control group, the expression was higher when cagA+. Conclusion: H. pylori is a factor involved in the etiology and progression of gastric diseases. Reduction in miRNA-629 expression in cancer patients occurs independent of the presence of the bacterium, but when the cagA pathogenicity marker is present, it induces changes in the gene expression of the respective miRNA.
RESUMO Contexto: Helicobacter pylori (H. pylori) é uma bactéria gram-negativa associada à etiologia de várias patologias do trato gastrointestinal, e cepas positivas para cagA (cagA+) são encontradas em populações com úlceras gástricas e lesões pré-cancerígenas, induzindo respostas pró-inflamatórias. O desenvolvimento de neoplasias está relacionado à desregulação do microRNA (miRNA), indicando miRNA-629 altamente expresso. O artigo tem como objetivo correlacionar o nível de expressão do miRNA-629 com a presença de H. pylori e o marcador de patogenicidade cagA. Métodos: Foram avaliadas 203 amostras de biópsia gástrica de indivíduos com tecido gástrico normal (n=60), gastrite (n=96) e câncer gástrico (n=47) de ambos os sexos e com mais de 18 anos. As amostras foram subdivididas de acordo com a presença ou ausência de H. pylori, detectado por reação em cadeia da polimerase (PCR). O RNA foi extraído usando um kit comercial e quantificado. O DNA complementar (cDNA) foi sintetizado usando kits comerciais, e a expressão relativa foi calculada usando o método 2-ΔΔCt. Resultados: Indivíduos infectados com H. pylori têm nove vezes mais chances de desenvolver câncer gástrico. Pacientes com câncer parecem ter diminuição da expressão do miRNA-629; no entanto, a presença da bactéria não influenciaria essa redução. Indivíduos no grupo do câncer apresentaram menor expressão do miRNA-629 quando cagA+; no entanto, no grupo controle, a expressão foi maior quando cagA+. Conclusão: H. pylori é um fator envolvido na etiologia e progressão das doenças gástricas. A redução na expressão do miRNA-629 em pacientes com câncer ocorre independentemente da presença da bactéria, mas quando o marcador de patogenicidade cagA está presente, induz mudanças na expressão gênica do respectivo miRNA.
ABSTRACT
O Helicobacter pylori (H. pylori) é o responsável pela mais prevalente infecção dos seres humanos. Aproximadamente metade da população mundial é portadora dessa bactéria e, no Brasil, a prevalência da infecção é de aproximadamente 60%. Apesar disso, os meios de transmissão do H. pylori ainda não estão totalmente estabelecidos. A infecção está claramente associada com diversas doenças, como úlcera péptica, adenocarcinoma gástrico e linfoma gástrico tipo MALT (mucosal associated lymphoid tissue). Parte da literatura aceita que o H. pylori seja uma das causas da dispepsia funcional, pelo menos em subgrupo dos pacientes com essa doença. Existem evidências de que o H. pylori esteja associado a manifestações extradigestivas. A identificação da infecção pode ser feita com procedimentos não invasivos e invasivos (usando a endoscopia). Embora nenhum consenso preconize o tratamento indiscriminado de todos os portadores do H. pylori, visto que a maioria é assintomática e não irá apresentar problemas em decorrência da infecção, a erradicação está inquestionavelmente indicada em algumas situações clínicas, como no tratamento das úlceras pépticas associadas ao H. pylori. A erradicação da infecção não é simples e os esquemas terapêuticos necessitam associação de múltiplos agentes farmacológicos. Mesmo com a utilização de complexas associações de antibióticos com bloqueadores da secreção gástrica, significativa parcela dos pacientes não consegue eliminar a bactéria e necessita retratamento com diferentes esquemas terapêuticos. Esta revisão aborda aspectos da infecção pelo H. pylori, do seu diagnóstico, das indicações para o tratamento e quais os esquemas terapêuticos mais indicados para a erradicação da bactéria.
ABSTRACT
estudo realizado com enfoque no envolvimento do polimorfismo da Il-8 (-251 A/T) na gênese e progressão de doenças inflamatórias. Método: revisão Bibliográfica por meio de dados Medline, Pubmed enfocando os resultados obtidos a cerca deste polimorfismo como um fator genético do hospedeiro no desenvolvimento de diversas patologias. Considerações finais: visto que diversos relatos tem mostrado relação entre este polimofismo gênico e doenças humanas é importante o conhecimento de fatores genéticos do hospedeiro e suas relações na etiologia de doenças inflamatórias.
study to focus on the involvement of polymorphism of IL-8 (-251 A / T) in the genesis and progression of inflammatory diseases. Methods: bibliographic review by Medline database, focusing on Pubmed about the results of this polymorphism as a genetic factor of the host in the development of various diseases. Final considerations: since several reports have shown polimofismo relationship between this gene and human diseases is important to know the host's genetic factors and their relationships in the etiology of inflammatory diseases
ABSTRACT
Introdução: Helicobacter pylori uma bactéria que coloniza mucosa gástrica, associada fortemente com doenças gástricas e adenocarcinoma gástrico. Interações que envolvemfatores ambientais, do hospedeiro e da bactéria têm sido associadas com a progressão da doença gástrica e fatores de virulência, como a citotoxina vacualizante (vacA), e cito toxina associada (cagA), têm sido associados como fatores de virulência da bactéria. Objetivo: padronização do Diagnóstico Molecular da Infecção pelo Helicobacter pylori no Laboratório de Biologia Molecular das Faculdades Integradas de Durinhos. Método: extração de DNA de biópsia gástrica, através do Kit Wizarg SV Genomic DNA Purification e Reação em Cadeia da Polimerase utilizando primers que amplificam genes específicos do Helicobacter pylori. Resultados: todas as amplificações foram padronizadas de acordo com as condições utilizadas com os primers específicos para amplificação gênica do H. pylori. Considerações Finais: o estudo proposto alcançou seus objetivos que foi a padronização molecular da infecção pela bactéria H. pylori em mucosa gástrica de indivíduos infectados, fornecendo desta forma uma nova ferramenta e técnica extremamente sensível para detecção da infecção pelo bactéria de maneira rápida e precisa.
lntroduction: Helicobacter pylori a bacterium to colonize human gastric mucosa, hás been strongly associated with gastric diseases and gastric cancer. lnteractions involving environmental, host and bacterial factors seem to associated with gastric diseases progression and virulences factors like vacuolating cytotoxin (vacA), and Associated Cytotoxin (cagA),has been associated like virulencefactors from bacterium. Objective: standardization of Molecular Diagnostics of infection by Helicobacter pylori in the Laboratory of Molecular Biology of the Faculty of lntegrated Ourinhos. Methods: DNA extraction from gastric biopses through the kit Wizarg SV Genomic DNA Purification and Polymerase Chain Reaction. using primers that ampliefied especif genes from Helicobacter pylori. Results: ali amplifications were standardized in accordance with the terms used with specific primersfor amplification of the gene H. pylori. Final Considerations: the proposed study has achieved its objectives which was the standardization of molecular infection by the bacteria H. pylori in gastric mucosa of infected individuais, thus providing a new tool and extremely sensitive technique to detect infection by the bacteria quickly and accurately.