Low-dose cisplatin exposure and SNAIL, Vimentin, E-cadherin expression in HEPG2 cell line / Exposición a dosis bajas de cisplatino y expresión de SNAIL, Vimentina, E-cadherina en línea celular HEPG2

Cisplatin, the first platinum compound approved for cancer treatment, is widely used in the treatment of various cancers including hepatocellular carcinoma (HCC). HCC incidence rates rise globally. Epithelial mesenchymal transition (EMT) is implicated in cancer invasion and metastasis, which are associated with increased mortality. Cisplatin dose might influence cancer invasion and metastatic behavior of the cells. The aim of the study was to investigate the effect of low-dose cisplatin treatment on EMT- related changes in HepG2 cells. Following treatment with 4 µM cisplatin, HepG2 cells were evaluated morphologically. Gene expression of E-cadherin, Vimentin, Snail1 was assessed by quantitative PCR. Immunofluorescence analyses of NA-K ATPase were performed. Although the low-dose cisplatin treated cells exhibited a more stretched morphology, no statistical difference was detected in gene expression of E-cadherin, Vimentin, Snail1 and immunofluorescence of NA-K ATPase. Findings on low-dose cisplatin effects in HepG2 might contribute to the knowledge of antineoplastic inefficacy by further understanding the molecular mechanisms of drug action.

El cisplatino, el primer compuesto de platino aprobado para el tratamiento del cáncer, es ampliamente utilizado en el tratamiento de varios tipos de cáncer, incluido el carcinoma hepatocelular (CHC). Las tasas de incidencia de CHC aumentan a nivel mundial. La transición mesenquimal epitelial (EMT) está implicada en la invasión del cáncer y la metástasis, que se asocian con un aumento de la mortalidad. La dosis de cisplatino podría influir en la invasión del cáncer y el comportamiento metastásico de las células. El objetivo del estudio fue investigar el efecto del tratamiento con dosis bajas de cisplatino en los cambios relacionados con la EMT en las células HepG2. Tras el tratamiento con cisplatino de 4 µM, se evaluaron morfológicamente las células HepG2. La expresión génica de E-cadherina, vimentina, caracol1 se evaluó mediante PCR cuantitativa. Se realizaron análisis de inmunofluorescencia de NA-K ATPasa . Aunque las células tratadas con cisplatino en dosis bajas exhibieron una morfología más estirada, no se detectaron diferencias estadísticas en la expresión génica de E-cadherina, vimentina, Snail1 e inmunofluorescencia de NA-K ATPasa. Los hallazgos sobre los efectos del cisplatino en dosis bajas en HepG2 podrían contribuir al conocimiento de la ineficacia antineoplásica al comprender mejor los mecanismos moleculares de la acción del fármaco.

Histological investigation of experimentally induced diabetes effects on the distribution of transforming growth factor (TGF beta), nuclear factor kappa b (Nf-KB), heat schock 90 beta (Hsp beta) and E-cadherin proteins in testicular tissue / Investigación histológica de los efectos de la diabetes inducida experimentalmente en la distribución del factor de crecimiento transformante (TGFß), nuclear factor kappa b (Nf-KB), y proteinas heat schock 90ß (Hsp90ß) y E-cadherina en tejido testicular

SUMMARY: Diabetes is a metabolic disorder characterized by high blood sugar levels and it causes complications in many systems, including the reproductive system. As a result of diabetic conditions, one of the mechanisms that can cause repression of reproductive activity is testicular oxidant stress. The identification of diabetes on the cell signaling molecules axis is still under discussion. The aim of this study was to determine the effect of Transforming Growth Factor (TGFβ), Nuclear Factor kappa B (NF-kB), Heat-schock 90β (HSP90β) signal pathways and E-cadherin cell adhesion molecule on infertility in diabetic rat testicular tissue. In our study, includes histological, molecular and biochemical analysis of testicular tissue removed at the end of the 2 weeks experiment period. A total of 14 adult male rats were divided as control and diabetes. No intervention was given to 7 male rats in the control group. For the diabetic group, 7 male rats were injected by intraperitoneal with a single dose of 55 mg/kg streptozotocin (STZ). TGFβ, NF-kB, HSP90β and E-cadherin proteins were immunohistochemically studied to investigate possible tissue damage, inflammatory process, cell stabilization and integrity due to diabetes. In order to determine oxidant stress, lipid peroxidation product malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH) and glutathione peroxidase (GPx) analyzes were performed. Fibrosis, inflammatory changes and loss of spermatogenetic series are prominent findings in the diabetic group. On analysis of all the samples with immunostaining, in the diabetic group, TGFβ and NF-kB immunoexpression significantly increased, while Hsp90β and E-cadherin immunoexpression significantly decreased compared with control groups. Experimental diabetes was found to cause fibrosis, inflammation, disrupting cell adhesion and stabilization in testicular tissue. These results suggest that cellular therapy studies are needed for possible damage.

RESUMEN: La diabetes es una enfermedad metabólica caracterizada por niveles altos de azúcar en sangre y causa complicaciones en muchos sistemas, incluido el sistema reproductivo. Como resultado de las condiciones diabéticas, uno de los mecanismos que puede causar alteraciones en la actividad reproductiva es el estrés oxidativo testicular. La identificación de la diabetes en el eje de las moléculas de señalización celular aún está en discusión. El objetivo de este estudio fue determinar el efecto del factor de crecimiento transformante (TGFβ), el factor nuclear kappa B (NF-kB), las vías de señalización de Heat-Schock 90b (HSP90β) y la molécula de adhesión celular de E-cadherina sobre la infertilidad en testículo de rata diabética. Al término de dos semanas se realizaron análisis histológico, molecular y bioquímico del tejido testicular extraído. Las 7 ratas macho del grupo control no fueron intervenidas. Para el grupo de diabéticos, 7 ratas macho fueron inyectadas por vía intraperitoneal con una dosis única de 55 mg / kg de estreptozotocina (STZ). Se estudiaron inmunohistoquímicamente las proteínas TGFβ, NF-kB, HSP90β y E-cadherina para investigar el posible daño tisular, el proceso inflamatorio, la estabilización celular y la integridad debido a la diabetes. Para determinar el estrés oxidativo, se realizaron análisis del producto de peroxidación lipídica malondialdehído (MDA), glutatión (GSH) y glutatión peroxidasa (GPx). La fibrosis, los cambios inflamatorios y la pérdida de series espermatogenéticas son hallazgos destacados en el grupo de ratas diabéticas. En el análisis de todas las muestras con inmunotinción, en el grupo diabético, la inmunoexpresión de TGFβ y NF-kB aumentó significativamente, mientras que la inmunoexpresión de Hsp90β y e-cadherina disminuyó significativamente en comparación con los grupos control. Se encontró que la diabetes experimental causa fibrosis, inflamación, alteración de la adhesión celular y estabilización en el tejido testicular. Estos resultados sugieren que son necesarios estudios de terapia celular para verificar posibles daños.

Expresión de E-cadherina y células de Langerhans en verruga vulgar y papiloma bucal / Expression of E-cadherin and Langerhans cells in verruca vulgaris and oral papilloma

Introducción: la verruga vulgar y el papiloma bucal son lesiones provocadas por el virus papiloma humano se pueden encontrar presentes en la mayoría de las superfi cies cutáneas y mucosas, su comportamiento biológico es benigno. Las proteínas de adhesión como la E-cadherina, se encargan de mantener la organización y morfología celular, disminuyen su expresión epitelial en ciertas lesiones potencialmente cancerizables, y favorecen la migración e invasión celular ocasionando posiblesmetástasis. Las células de Langerhans, son células presentadoras deantígeno que activan el sistema inmunológico para proteger al organismocontra patógenos o sustancias extrañas. Objetivo: Determinar el grado de expresión de E-cadherina y de células de Langerhans en verruga vulgar y papiloma bucal. Material y métodos: Se realizó un estudio descriptivo y retrospectivo, en el cual se incluyeron 16 bloques con tejido incluido en parafi na con diagnóstico de verruga vulgar, ycuatro diagnosticados como papiloma bucal, todos los casos fueron corroborados con la tinción de hematoxilina y eosina. La determinacióndel grado de expresión de las células de Langerhans y E-cadherina se realizó por medio de la técnica de inmunohistoquímica, la valoraciónse llevó a cabo de manera semicuantitativa, y se realizó estadísticadescriptiva. Resultados: La expresión de E-cadherina en verruga vulgar fue intensa tanto en cantidad como intensidad, mientras que en papiloma bucal fue moderada también en ambos casos; las células de Langerhans mostraron una inmunotinción moderada en las lesiones de verruga vulgar en intensidad y cantidad; en el caso de papiloma bucal esta inmunotinción en intensidad y cantidad fue leve. . Conclusiones:Los resultados mostraron que las proteínas de adhesión E-cadherinano pierden su expresión en la verruga vulgar y papiloma bucal, lo cualconfi rma su benignidad...

Introduction: verruca vulgaris and oral papilloma are lesions causedby the human papillomavirus. They can be found on most skin and mucosalsurfaces, and their biological behavior is benign. Adhesion proteinssuch as E-cadherins are responsible for maintaining cell morphologyand organization; they decrease the expression in certain potentiallycancerous epithelial lesions and promote cell migration and invasion,causing possible metastasis. Langerhans cells are antigen-presentingcells that activate the immune system to protect the body againstpathogens or foreign substances. Objective: To determine the degreeof expression of E-cadherin and Langerhans cells in verruca vulgarisand oral papilloma. Material and methods: We performed a descriptiveand retrospective study involving 16 paraffi n-embedded tissue blocksof diagnosed cases of verruca vulgaris and 4 paraffi n-embedded tissueblocks identifi ed as oral papilloma. The diagnosis was previouslyconfi rmed by hematoxylin and eosin staining. The degree of expressionof Langerhans cells and E-Cadherin was determined by immunohistochemistry,while the evaluation was carried out semiquantitatively,with descriptive statistics being performed. Results: The expression ofE-cadherin in verruca vulgaris was strong in terms of both quantityand intensity, whereas in the case of oral papilloma it was moderatefor both. Langerhans cells showed moderate immunostaining for bothintensity and quantity in verruca vulgaris-type lesions, while for oralpapilloma, the immunostaining was also mild in both cases. Conclusions:The results suggest that the expression of E-cadherin adhesionproteins does not diminish in verruca vulgaris and oral papilloma,which confi rms their benignity...

Effects of xylene on respiratory mucosa in rats / Efectos del xileno sobre la mucosa respiratoria de ratas

In this study we examined the effects histopathologic and immunohistochemical of xylene inhalation in rats by using light microscopy. Adult wistar albino rats were used in this study. Eight rats were in control group and 8 rats were in the experimental group. The experimental group was exposed to 300 ppm formaldehyde 3­5 min/day, 5 days/week for 8 weeks. The lining epithelium of respiratory mucosa showed a loss of ciliated cells with metaplasia of goblet cells, hyperplasia of squamous cells and edema, inflamation in sub epithelial area). In the group treated xylene. Disruption of cell-cell contact was observed. Weak expression of E-cadherin was observed between cells. The vascular endothelium of capillaries and venoles showed intense immunostaining for VEGF.

Se examinó el efecto histopatológico e inmunohistoquímico de la inhalación de xileno en ratas mediante el uso de microscopía de luz. Se utilizaron ratas albinas Wistar adultas. Ocho ratas formaron parte del grupo control y 8 del grupo experimental. El grupo experimental fue expuesto a 300 ppm de formaldehído, 3­5 min/día, 5 días/semana, durante 8 semanas. El epitelio de revestimiento de la mucosa respiratoria mostró una pérdida de células ciliadas con metaplasia de células caliciformes, hiperplasia de células escamosas y edema, con inflamación en la zona subepitelial. En el grupo tratado con xileno se observó una interrupción del contacto célula-célula. Se observó una débil expresión de E-cadherina entre las células. El endotelio vascular de los capilares y vénulas mostraron intensa inmunotinción de VEGF.

Expression of PECAM-1 and E-Cadherin in the Umblical Cords of Gestational Diabetic Mothers / Expresión de PECAM-1 y E-cadherina en los Cordones Umbilicales de Madres con Diabetes Gestacional

The purpose of this study is to examine the changes in the umbilical cord in women diagnosed with gestational diabetes mellitus In this study, as a control group human placental tissues from normotensive pregnancies was collected from diabetic women at 28­35 weeks of gestation. Gestational diabetes (n= 20) and normal umbilical cord (n= 20) for a total of 40 units were received.GDM groups compared to the control group was significantly higher values was detected (p<0.01). In GDM group, light microscopy showed erosion of the endothelium and complete rupture of theumbilicalvessels resulting in extravasation of blood within Wharton's jelly. it was observed that the cytoplasmic fragments and cell infiltration of the spill to the subepithelial layer of apoptotic cell PECAM-1 positive reaction showed. E-Cadherin in endothelial side surface of diabetes group showed weak expression in the nucleus and showed positive reaction in smooth muscle.

El objetivo fue examinar los cambios que presenta el cordón umbilical de mujeres con diagnóstico de diabetes mellitus gestacional (DMG). Se incluyeron en el grupo control muestras de tejidos placentarios humanos de embarazos normotensos y de mujeres diabéticas de entre 28­35 semanas de gestación. Las muestras se divieron en cordones umbilicales con cambios de DMG (n= 20) y cordones umbilicales normales (n= 20), constituyendo un total de 40 muestras. El grupo de DMG, en comparación con el grupo control, presentó valores significativamente más elevados (p<0,01). En el grupo de DMG, la microscopía óptica demostró la erosión del endotelio y la ruptura completa de los vasos umbilicales, resultando en la extravasación de sangre dentro de la gelatina . Se observaron fragmentos citoplasmáticos e infiltración celular de la capa subepitelial de células apoptóticas mostró una reacción positiva a PECAM-1. En el grupo de DMG, la E-cadherina de la superficie lateral endotelial mostró una expresión débil en el núcleo y una reacción positiva en el músculo liso.

The effects of systemic use of nicotine on the rat nasal mucosa: a histopathologic and immunohistochemical study / Efectos del uso sistémico de nicotina sobre la mucosa nasal de la rata: un estudio histopatológico e inmunohistoquímico

The objective of this study was to evaluate the histopathologic effects of systemic use of nicotine on the rat nasal mucosa. Twelve adult Sprague-Dawley rats weighing 180-220 g, were used as experimental animals. The rats were divided into Nicotine and control groups. The rats of Nicotine groups (n=6) were administered 2mg/kg Nicotine sulphate for 28 days. The rats of control group (n=6) were only administered 1,5 ml physiologic saline solution subcutaneously for 28 days. All animals were sacrified at the end of the study and nasal tissue samples were removed and prepared for histologic examination. The sections were stained with Hematoxylin and Eosin (H-E) and Periodic acid-Schiff (PAS) and Trichrome-Masson were observed under light microscope. E-cadherin immunreactivity of pseudostrafied epithelial cells of nasal mucosa was assessed by immunohistochemical staining. There were significant differences in average histopathological score between the groups treated and non-treated to nicotine. In nicotine group, degenerative change of epithelial cells and hypertrophy of goblet cells were observed. Leukocytes infiltration was observed in significant areas of connective tissue. E-cadherin expression was significantly decreased in epithelial cells of the nasal mucosa of Nicotine group...

El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos histopatológicos del uso sistémico de nicotina sobre la mucosa nasal de la rata. Se utilizaron como animales de experimentación 12 ratas Sprague-Dawley adultas, entre 180-220 g, divididas en grupos de nicotina y control. Al grupo de nicotina (n = 6) se le administró sulfato de nicotina 2mg/kg durante 28 días. Al grupo control (n = 6) se les administró sólo 1,5 ml de solución salina fisiológica por vía subcutánea durante 28 días. Todos los animales fueron sacrificados al final del estudio. Se tomaron muestras del tejido nasal y se examinaron histológicamente. Las secciones fueron teñidas con H-E, ácido periódico de Schiff (PAS) y tricrómico de Masson, observándose bajo microscopía de luz. Además, se evaluó la inmunoreactividad a E-cadherina de las células del epitelio pseudoestraficado de la mucosa nasal. Hubo diferencias significativas en la puntuación histopatológica media entre los grupos tratados y no tratados con nicotina. En el grupo de nicotina, se observaron cambios degenerativos de las células epiteliales e hipertrofia de las células caliciformes. Se observó una infiltración significativa de leucocitos en diferentes áreas del tejido conectivo. La E-cadherina se redujo significativamente en las células epiteliales de la mucosa nasal del grupo nicotina...

Inmunodetección de FHIT y E-cadherina en fibroadenomas y cáncer ductal y lobulillar de mama / Inmunodetection of FHIT and E-cadherin in fibroadenomas and ductal and lobular human breast cancer

En Chile, el cáncer es la segunda causa de muerte después de las enfermedades cardiovasculares. Los principales cánceres asociados a muerte en mujeres fueron mama, estómago, vesícula biliar, broncopulmonar y cérvico uterino. Alteraciones de las E-cadherinas han sido relacionadas con varios tipos de cáncer, ya que uno de los principales eventos involucrados con su disfunción es el gatillar la invasión y metástasis del tumor. La inactivación del gen CDH1 ha sido demostrada en el cáncer gástrico difuso y el cáncer de mama lobulillar. Asimismo, la inactivación del gen FHIT parece estar asociado con la progresión a neoplasias más agresivas. Se realizaron determinaciones inmunohistoquímicas (IHQ) en fibroadenomas mamarios y cánceres previamente diagnosticados por RE, RPg y Her2, mostrando positividad en todos los casos. La detección (IHQ) de la expresión de FHIT y E-cadherina en tejidos con patologías benignas y malignizados, puede aportar una importante información diagnóstica y pronóstica en el cáncer de mama.

In Chile, cancer is the second leading cause of death after cardiovascular diseases. The major death-related cancers in women were breast, stomach, gallbladder, lung and cervical cancer. Alterations of E-cadherin have been linked to various cancers, as one of the main events involved in its dysfunction is the trigger of tumor invasion and metastasis. CDH1 gene inactivation has been demonstrated in diffuse gastric cancer and lobular breast cancer. Furthermore, inactivation of the FHIT gene to be associated with progression to more aggressive tumors. Immunohistochemistry (IHC) determinations were performed in fibroadenomas and breast cancers previously diagnosed by ER, PgR and Her2, showing positivity in all cases. Immunohistochemical detection of FHIT and E-cadherin expression in tissues with benign disease and malignant, may provide an important diagnostic and prognostic information in breast cancer.