Avaliação das alterações hemostáticas e do risco tromboembólico em cães com AHIM / Evaluation of hemostatic abnormalities and thromboembolic risk in dogs with IMHA

A anemia hemolítica imuno-mediada (AHIM) é a causa mais comum dentre as anemias hemolíticas e a doença imuno-mediada de maior prevalência em cães, incluindo causas primárias e secundárias. As AHIM tem sido associadas a estados de hipercoagulabilidade, sendo o tromboembolismo a complicação mais comum. Este estudo teve como objetivo correlacionar as possíveis alterações hemostáticas e o risco tromboembólico nas AHIM e nas anemias por outras etiologias. Para tanto, foram selecionados 76 cães anêmicos (hematócrito ≤ 20%) somados ao menos um sinal clínico comumente associado à AHIM ou possuir pré-disposição racial. Foram realizados os seguintes testes para os animais selecionados: teste de citometria de fluxo e avaliação do perfil hemostático (contagem de plaquetas, TP, TTPA, TT, AT, PDF e Dímeros D); além de hemograma com contagem de reticulócitos, pesquisa de hematozoários em sangue periférico, PCR para Ehrlichia sp. e sorologia para leptospirose. 59 cães foram positivos para AHIM. O estado tromboembólico foi caracterizado pela presença de alteração em três ou mais testes do perfil hemostático. 74,6% casos de AHIM foram atribuídos às doenças infecciosas, sendo em sua maioria associados à Ehrlichia sp. (88,6%). 72,1% apresentaram trombocitopenia e 57,6% apresentaram anemia regenerativa com valores significativamente maiores de metarrubrícitos e contagem de reticulócitos. Não houve diferença estatística entre os grupos de cães anêmicos (positivos e negativos para AHIM). Os cães anêmicos apresentaram valores médios maiores de TTPA e menores de AT e contagem de plaquetas quando comparados aos cães saudáveis (p < 0,05). 25 cães positivos e sete negativos apresentaram estado tromboembólico. A especificidade de PDF foi menor (30,2%) quando comparada outros estudos. A escolha da classe de Ig não interfere no diagnóstico de AHIM...

Immune-mediated hemolytic anemia (IMHA) is the most common cause of hemolytic anemia and the most prevalent immune-mediated disease in dogs, which is classified in primary or secondary. IMHA has been associated with hypercoagulability state and thromboembolism has been referred as the most common complication. The purpose of this study was to correlate the possibility of hemostatic abnormalities and the thromboembolic risk in IMHA and in anemias of other etiologies. 76 dogs were selected, all exhibiting hematocrit lower than 20% and at least one clinical sign commonly associated with IMHA or breed predisposition. These dogs were tested for IMHA by flow cytometry. Hemostatic tests (platelet count, PT, APTT, TT, AT, PDF and D-dimer) as well as CBC, reticulocyte count, blood parasite search in peripheral blood smear, Ehrlichia sp. and leptospirosis tests were performed in all dogs. 59 dogs were positive for IMHA. The thromboembolic risk was characterized by the presence of three or more changes in the tests of the hemostatic profile. 74.6% cases of IMHA were attributed to infectious diseases and was mostly associated with Ehrlichia sp. (88.6%). 72.1% of dogs had thrombocytopenia and 57.6% had regenerative anemia with significantly higher values of metarubricyte and reticulocyte count. There were no significant changes between two anemic groups (positive and negative for IMHA). Anemic dogs had higher APTT mean value and lower AT and platelet counts mean values than the control group (p<0.05). 25 dogs with IMHA and seven dogs without IHMA had thromboembolic state. The specificity of PDF was lower (30.2%) than previous studies. The choice of the Ig class does not affect the diagnosis of IMHA...

Molecular and serological detection of Ehrlichia spp. in cats on São Luís Island, Maranhão, Brazil / Detecção molecular e sorológica de Ehrlichia spp. em gatos da ilha de São Luís, Maranhão, Brasil

Ehrlichiosis is a tick-borne disease that affects both humans and animals. The few existing reports on ehrlichiosis in Brazilian cats have been based on observation of morulae in leukocytes and, more recently, on molecular detection of Ehrlichia sp. In this study, we assessed occurrences of Ehrlichia sp. in the blood of 200 domestic cats in São Luís, Maranhão. Of the 200 animals tested, 11 (5.5%) were seropositive for Ehrlichia sp. and two (1%) were positive for Ehrlichia sp. in PCR. We also performed DNA sequence alignment to establish the identity of the parasite species infecting these animals, using the gene 16S rRNA. One cat presented infection with Ehrlichia sp. with 98% identity with E. canis, and another cat infected with Ehrlichia sp. showed 97% identity with E. chaffeensis. This is the first study on molecular detection of Ehrlichia sp. among domestic cats in São Luís, Maranhão.

Erliquiose é uma enfermidade transmitida por carrapatos que afeta seres humanos e animais. Os poucos relatos de erliquiose em gatos, no Brasil, são baseados na observação de mórulas em leucócitos e, mais recentemente, na detecção molecular de Ehrlichia sp. Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de Ehrlichia sp. no sangue de 200 gatos de São Luís, Maranhão. Dos 200 animais testados, 11 (5,5%) foram soropositivos para Ehrlichia sp. e dois (1%) foram positivos na PCR para Ehrlichia spp. O alinhamento de sequências de DNA baseado no gene 16S rRNA foi conduzido para estabelecer a identidade da espécie de parasito que infectou estes animais. Um gato apresentou infecção por uma espécie de Ehrlichia sp. com 98% de identidade com E. canis; e outro mostrou-se infectado por Ehrlichia sp. com 97% de identidade com E. chaffeensis. Este estudo traz a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gatos de São Luís, Maranhão.

Investigação molecular de Ehrlichia spp. e Anaplasma platys em felinos domésticos: alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas / Molecular investigation of Ehrlichia spp. and Anaplasma platys in domestic cats: clinical signs, hematological and biochemical alterations

Ehrlichia sp. e Anaplasma platys são micro-organismos Gram negativos, parasitos intracelulares obrigatórios, residindo em vacúolos citoplasmáticos de leucócitos e plaquetas, encontrados no sangue periférico ou em tecidos. Poucos relatos têm sido feitos sobre erliquiose e anaplasmose em gatos no Brasil, os quais são baseados na presença de mórulas em leucócitos e plaquetas, ou pela detecção de anticorpos. O objetivo deste trabalho foi investigar a infecção natural por Ehrlichia sp. e A.platys em gatos no Município de Campos dos Goytacazes-RJ, através da hematoscopia e pela detecção do DNA desses agentes. Foram utilizadas amostras de sangue total e de soro de 91 gatos, independente de raça, sexo e idade. Realizaram-se hemograma, bioquímica sérica e PCR, utilizando oligonucleotídes para Ehrlichia sp. e A.platys. Os dados de hematoscopia mostraram que 9,89 por cento dos gatos apresentaram mórulas em macroplaquetas. O DNA de A.platys foi detectado em 13,18 por cento dos 91 animais e em 44,44 por cento das amostras positivas à hematoscopia. O DNA de Ehrlichia sp. não foi detectado em nenhuma amostra. Nenhuma alteração foi observada nos sinais clínicos nem nos resultados laboratoriais nos animais estudados. Os dados sugerem que os felinos domésticos podem atuar como potenciais reservatórios para A. platys, como forma não sintomática das enfermidades relacionadas.

Ehrlichia sp. and Anaplasma platys are Gram-negative micro-organisms, obligate intracellular parasites, residing in cytoplasmic vacuoles of leukocytes and platelets, found in peripheral blood or tissue. Few reports have been made about ehrlichiosis and anaplasmosis in cats in Brazil, which are based on the presence of morulae in leukocytes and platelets, or by detecting antibodies. The objective of this study was to investigate the natural infection with Ehrlichia sp. and A. platys in cats in Campos dos Goytacazes-RJ, by hematoscopia and DNA detection of these agents. Samples of whole blood and serum from 91 cats, regardless of race, gender and age. Blood count, serum biochemistry and PCR using primers for Ehrlichia sp. and A. platys were perfomed. Data from hematoscopia showed 9.89 percent of morulae only in platelets. The DNA of A. platys was detected in 13.18 percent of the 91 samples and 44.44 percent of the positive at hematoscopia. The DNA of Ehrlichia sp. was not detected in any sample. All animals studied did not show clinical signs neither positive laboratory results. The data suggest that domestic cats can serve as potential reservoirs for A. platys as asymptomatic form of related diseases.

Ehrlichiosis in Brazil / Erliquiose no Brasil

Ehrlichiosis is a disease caused by rickettsial organisms belonging to the genus Ehrlichia. In Brazil, molecular and serological studies have evaluated the occurrence of Ehrlichia species in dogs, cats, wild animals and humans. Ehrlichia canis is the main species found in dogs in Brazil, although E. ewingii infection has been recently suspected in five dogs. Ehrlichia chaffeensis DNA has been detected and characterized in mash deer, whereas E. muris and E. ruminantium have not yet been identified in Brazil. Canine monocytic ehrlichiosis caused by E. canis appears to be highly endemic in several regions of Brazil, however prevalence data are not available for several regions. Ehrlichia canis DNA also has been detected and molecularly characterized in three domestic cats, and antibodies against E. canis were detected in free-ranging Neotropical felids. There is serological evidence suggesting the occurrence of human ehrlichiosis in Brazil but its etiologic agent has not yet been established. Improved molecular diagnostic resources for laboratory testing will allow better identification and characterization of ehrlichial organisms associated with human ehrlichiosis in Brazil.

Erliquiose é uma doença causada por rickettsias pertencentes ao gênero Ehrlichia. No Brasil, estudos sorológicos e moleculares têm avaliado a ocorrência de espécies de Ehrlichia em cães, gatos, animais selvagens e seres humanos. Ehrlichia canis é a principal espécie em cães no Brasil, embora a infecção por E. ewingii tenha, recentemente, despertado suspeita em cinco cães. O DNA de E. chaffeensis foi detectado e caracterizado em cervo-do-pantanal, enquanto que E. muris e E. ruminantium ainda não foram identificadas no Brasil. A erliquiose monocítica canina causada pela E. canis parece ser altamente endêmica em muitas regiões do Brasil, embora dados de prevalência não estejam disponíveis em muitas delas. O DNA de E. canis também foi detectado e caracterizado em três gatos domésticos, enquanto anticorpos contra E. canis foram detectados em felídeos neotropicais de vida livre. Evidências sorológicas sugerem a ocorrência de erliquiose humana no Brasil, entretanto, o agente etiológico ainda não foi identificado. A melhoria do diagnóstico molecular promoverá a identificação e caracterização de espécies associadas à erliquiose humana no Brasil.

Avaliação clínica e molecular de cães com erliquiose / Clinical and molecular evaluation of dogs with ehrlichiosis

A erliquiose monocítica canina é uma doença cosmopolita causada por Ehrlichia canis e transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus, sendo frequentemente diagnosticada em cães em todo o Brasil. Este trabalho teve por objetivo investigar citológica e molecularmente a infecção por Ehrlichia em 195 cães atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso, analisando os achados clínicos e laboratoriais. Nos 48 cães atendidos com citologia positiva para Ehrlichia sp., foi possível verificar a diversidade de sinais, com predominância estatisticamente significativa de palidez de mucosas (P≤0,05), assim como variados achados hematológicos, ocorrendo tanto anemia, leucopenia e trombocitopenia, quanto normalidade ou aumento dessas células. Ocorreu aumento das proteínas plasmáticas, com hiperglobulinemia, sem, no entanto, haver diferença significativa (P≥0,05), apesar de esse achado ser frequente nessa afecção. Por meio do PCR nested, confirmou-se a infecção por E. canis em cães da cidade de Cuiabá.

The canine monocytic ehrlichiosis is a cosmopolitan disease, caused by Ehrlichia canis, transmitted by ticks Rhipicephalus sanguineus that has been frequently diagnosed in dogs throughout the country. This study aimed to investigate the cytological and molecular Ehrlichia infection in 195 dogs examined at the University Veterinary Hospital of Mato Grosso, by analyzing the clinical and laboratory findings. In 48 dogs with positive cytology for Ehrlichia sp it was possible to detect the diversity of signs, with predominance statistically significant of pallor of mucous membranes (P≤0.05) as well as several hematological findings, occurring anemia, leukopenia and thrombocytopenia, or increased as normal cells. There was increased of plasma proteins, with hyperglobulinemia, however without any significant difference (P≥0.05), although this finding is common in that infection. Through the nested PCR technique it was possible to confirm the infection by E. canis in the city of Cuiaba.