Molecular confirmation of twinning in the West Indian Manatee (Trichechus manatus) / Confirmação molecular de gemelaridade em peixes-boi marinho (Trichechus manatus)

Abstract: Few twinning events have been recorded in the West Indian manatee (Trichechus manatus, Sirenia: Trichechidae) and no previous published study has provided confirmation of this phenomenon based in molecular tools. Here we investigate a possible case of twinning in an endangered Brazilian population of T. manatus using molecular tools. We analyzed two male neonates found stranded in Ceará State, on the northeastern coast of Brazil. The DNA of both individuals was isolated, and 10 microsatellite loci were amplified and genotyped. Following the identification of the alleles, the probabilities of identity by descent (∆7 and ∆8) and relatedness (rxy) were calculated using estimators that evaluate inbreeding. The two individuals shared most of the alleles, with differences in the genotypes being identified in only two loci. All the estimators identified a level of relatedness compatible with that found between siblings (selfed or outbred), indicating they were dizygotic twins. This is the first confirmed case of fraternal twins in free-ranging West Indian manatees in South America. The recognition of this type of twinning provides elements to improve actions for the rehabilitation of stranded animals and their subsequent release to the environment.

Resumo: Poucos eventos de gemelaridade foram registrados para o peixe-boi marinho (Trichechus manatus, Sirenia: Trichechidae) e nenhum estudo previamente publicado confirmou esse fenômeno com base em ferramentas moleculares. Aqui investigamos um possível caso de gemelaridade em uma ameaçada população brasileira de T. manatus utilizando ferramentas moleculares. Foram analisados dois neonatos machos encontrados encalhados no Ceará, costa nordeste do Brasil. O DNA dos indivíduos foi isolado e 10 loci microsatélites foram amplificados e genotipados. Após a identificação dos alelos, as probabilidades de identidade por descendência (∆7 e ∆8) e relação (rxy) foram calculadas usando estimadores que avaliam endogamia. Os dois indivíduos partilharam a maioria dos alelos, com diferenças nos genótipos sendo identificadas em apenas dois loci. Todos os estimadores identificaram um nível de parentesco compatível com o encontrado entre irmãos (com e sem endogamia), o que aponta para o fato de serem gêmeos dizigóticos. Este é o primeiro caso confirmado de gêmeos fraternais em peixes-boi marinho de vida livre na América do Sul. O reconhecimento deste tipo de gemelaridade fornece elementos para aprimorar ações que visem a reabilitação de animais encalhados e sua posterior soltura ao ambiente.

Fatal pulmonary parafilaroidiasis in a free-ranging subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) coinfected with two gammaherpesviruses and Sarcocystis sp / Parafilaroidose pulmonar fatal em um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) de vida livre coinfectado com dois gammaherpesvírus e Sarcocystis sp

Abstract A juvenile subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) found dead in Santa Catarina state, southern Brazil, presented with disseminated verminous pneumonia due to Parafilaroides sp. A concomitant infection with two different gammaherpesviruses was identified by PCR in different tissues; one of them possibly a novel species (tentatively named Otariid herpesvirus 7). Sarcocystis sp. DNA was identified molecularly in skeletal muscle samples with intrasarcoplasmic bradyzoites and no apparent tissue response. All analyzed samples (mandibular, laryngeal, tracheal, and mesenteric lymph nodes, and lung) were PCR-negative for Brucella spp. The most likely cause of death was severe pulmonary parafilaroidiasis. The pathogenic role of the gammaherpesviruses in several of the tissues was not evident. This study describes the pathogenicity of Parafilaroides sp. in a subantarctic fur seal, widens the host range of herpesvirus in pinnipeds, and reports the first molecular identification of Sarcocystis sp. in this species.

Resumo Um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) juvenil foi achado morto no Estado de Santa Catarina, sul do Brasil, apresentando pneumonia parasitária disseminada por Parafilaroides sp. Infecção concomitante por dois gammaherpesvírus diferentes foi identificada pela PCR em diversos tecidos, um desses herpesvírus possivelmente uma nova espécie (denominada provisoriamente Otariid herpesvirus 7). DNA de Sarcocystis sp. foi identificado molecularmente em amostras de músculo esquelético que apresentavam bradizoítos intra-sarcoplasmáticos sem aparente resposta tecidual. Todas as amostras analisadas (linfonodo mandibular, laríngeo, traqueal e mesentérico, e pulmão) pela PCR para Brucella spp. foram negativas. A causa mais provável da morte do animal foi parafilaroidose pulmonar severa. O papel patogénico dos gammaherpesvírus em vários tecidos não foi evidente. Este estudo descreve a patogenicidade de Parafilaroides sp. em um lobo-marinho-subantártico, amplia a variedade de hospedeiros de herpesvírus em pinípedes e reporta a primeira identificação molecular de Sarcocystis sp. para essa espécie.

Toxoplasma gondii in cetaceans of Brazil: a histopathological and immunohistochemical survey / Toxoplasma gondii em cetáceos do Brasil: estudo histopatológico e imuno-histoquímico

Abstract Toxoplasmosis is a parasitic disease caused by the protozoan Toxoplasma gondii. In cetaceans, T. gondii infection is a significant cause of morbidity and mortality. Despite the worldwide range and broad cetacean host record of T. gondii infection, there is limited information on toxoplasmosis in cetaceans from the Southern hemisphere. We investigated the occurrence of T. gondii by histopathology and immunohistochemistry in tissue samples of 185 animals comprising 20 different cetacean species from Brazil. Three out of 185 (1.6%) animals presented T. gondii-associated lesions: a captive killer whale Orcinus orca, a free-ranging common bottlenose dolphin Tursiops truncatus and a free-ranging Guiana dolphin Sotalia guianensis. The main lesions observed in these animals were necrotizing hepatitis, adrenalitis and lymphadenitis associated with protozoal cysts or extracellular tachyzoites presenting immunolabeling with anti-T. gondii antibodies. This study widens the spectrum of species and the geographic range of this agent in Brazil, and provides the first reports of T. gondii infection in a captive killer whale and in a free-ranging common bottlenose dolphin in South America.

Resumo Toxoplasmose é uma doença parasitária causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. A infecção por T. gondii é uma causa significativa de morbidade e mortalidade, nos cetáceos. Apesar da abrangência mundial e amplo registro de espécies de cetáceos infectadas por T. gondii, informações sobre toxoplasmose em cetáceos do hemisfério sul são limitadas. Neste estudo pesquisou-se por meio de histopatologia e imuno-histoquímica a ocorrência de T. gondii em amostras de tecido de 185 animais, compreendendo 20 diferentes espécies de cetáceos que ocorrem no Brasil. Três dos 185 (1,6%) animais apresentaram lesões associadas a T. gondii: uma orca Orcinus orca mantida em cativeiro, um golfinho-nariz-de-garrafa Tursiops truncatus e um boto-cinza Sotalia guianensis de vida livre. As principais lesões observadas nesses animais foram hepatite, adrenalite e linfadenite necrotizantes associadas a cistos protozoários ou taquizoítos extracelulares, marcados com anticorpos anti-T. gondii. O presente estudo amplia o espectro de espécies susceptíveis a esse agente e o seu alcance geográfico no Brasil, fornecendo o primeiro relato da infecção por T. gondii em uma orca mantida em cativeiro e em um golfinho-nariz-de-garrafa de vida livre na América do Sul.

Causes of mortality of seabirds stranded at the Northeastern coast of Brazil / Causas de mortalidade de aves marinhas encalhadas na costa do Nordeste do Brasil

The aim of this work was to determine the main species of stranded seabirds at the Northeastern coast of Brazil in addition to the most frequent causes of stranding and mortality. The study was conducted in a monitored area for three years (2012-2014), from the coastline of south Alagoas through north coast of Bahia encompassing 254km of coast. The seabirds found alive during the monitoring were sent to rehabilitation, clinically examined and the carcasses were removed, necropsied and histopathologically analyzed. A total of 1.347 seabirds were found stranded. Of these, 378 were found alive and sent to rehabilitation. From the 969 dead seabirds 806 were unsuitable for necropsy, being only 163 submitted to necropsy and histopathological analysis. Calonectris borealis, Puffinus gravis and Puffinus puffinus were the main seabirds stranded in the studied area. Most stranding occurred from March to June with an increase during April and May for the most species of seabirds. The main clinical signs of stranded seabirds consisted of inappetence, apathy, low body score, hypothermia, flying or movement difficulty and prolonged recumbency. Natural causes followed by infectious diseases and anthropogenic environmental factors were the main causes of death of seabirds stranded on the Northeastern coast of Brazil.(AU)

O objetivo deste trabalho foi determinar as principais espécies de aves marinhas encalhadas na costa do Nordeste do Brasil, bem como as mais frequentes causas de encalhe e mortalidade. O estudo foi desenvolvido em área monitorada durante três anos (2012-2014), entre o litoral sul de Alagoas e o litoral norte da Bahia, perfazendo um total de 254km de extensão da costa. As aves encontradas vivas foram encaminhadas para reabilitação e examinadas clinicamente; as carcaças foram removidas, necropsiadas e os órgãos foram analisados por meio da histopatologia. Um total de 1.347 aves foi encontrado, encalhadas. Dessas, 378 estavam vivas e foram encaminhadas para a reabilitação. Das 969 aves marinhas mortas, 806 estavam impróprias para realização de necropsia, sendo apenas 163 submetidas à necropsia e análise histopatológica. Calonectris borealis, Puffinus gravis e Puffinus puffinus foram as principais espécies encontradas na área estudada. A maioria dos encalhes para grande parte das aves marinhas ocorreram de março a junho, com um aumento durante abril e maio. Os principais sinais clínicos das aves marinhas consistiram em inapetência, apatia, baixo escore corporal, hipotermia, dificuldade de voo ou movimento e decúbito prolongado. Causas naturais, seguidas de doenças infecciosas e fatores antropogênicos, foram as principais causas de mortes de aves marinhas encalhadas na costa do Nordeste do Brasil.(AU)

Gastric lesions associated with the presence of Anisakis spp. Dujardin, 1845 (Nematoda: Anisakidae) in Cetaceans stranded on the coast of Ceara, Brazil / Lesões gástricas associadas à presença de Anisakis spp. Dujardin, 1845 (Nematoda: Anisakidae) em Cetáceos encalhados no litoral do Ceará, Brasil

The gastric compartments of ten cetaceans stranded on the coast of Ceará State, Northeast Brazil were analyzed in this study. Gastric Anisakis spp. was diagnosed in all individuals involved in this study. Parasites and tissue samples were collected during necropsy. The presence of Anisakis parasites showed similar distribution across the three gastric compartments and the majority was free within the gastric lumen. Macroscopically, the lesions were predominantly characterized by the presence of ulcers (60 percent, 6/10) within the gastric mucosa, occasionally associated with edema and hemorrhage (30 percent, 3/10). Eight cetaceans (8/10 - 80 percent) presented gastric microscopic alterations and in 75 percent (6/8) of these animals, chronic lymphoplasmocytic gastritis was observed with varying degrees of distribution and severity. Additionally, eosinophilic and granulomatous inflammation with giant cells, hemosiderosis, fibrosis and areas of necrosis were associated with location of parasites within the gastric mucosa. In this study, it was shown that the majority of cetaceans with the presence of Anisakis parasites presented macro and microscopic gastric alterations. These nematodes are probably associated with the development of these alterations; however, more pathological approaches are still required.

Neste estudo, foram analisados os compartimentos gástricos de dez cetáceos encalhados na costa do Ceará, região nordeste do Brasil. Parasitos do gênero Anisakis foram diagnosticados em todos os indivíduos estudados. As amostras parasitárias e teciduais foram coletadas durante o procedimento de necropsia. A presença de Anisakis demonstrou distribuição similar nos três compartimentos gástricos, estando a maior parte dos parasitos livre na mucosa gástrica. Macroscopicamente, as lesões se caracterizaram principalmente pela presença de úlceras (60 por cento, 6/10) gástricas, associadas ocasionalmente a edema e hemorragia (30 por cento, 3/10). Oito cetáceos (8/10 - 80 por cento) apresentaram alterações gástricas microscópicas e em 75 por cento (6/8) destes animais, foi observada uma gastrite crônica linfoplasmocitária com vários graus de distribuição e severidade. Foram constatados ainda, focos de inflamação granulomatosa com a presença de eosinófilos, células gigantes e a formação de hemossiderose, fibrose e de necrose em torno dos parasitos. Neste estudo, a maioria dos cetáceos com a presença de parasitos do gênero Anisakis apresentaram alterações gástricas macro e microscópicas. Estes nematóides estão provavelmente associados ao desenvolvimento destas alterações, entretanto, mais estudos são ainda necessários.

First confirmed record of Feresa attenuata (Delphinidae) for the Northern Brazilian Coast / Primeiro registro confirmado de Feresa attenuata (Delphinidae) para o litoral norte do Brasil

In Brazil only one confirmed stranding is known from an emaciated specimen collected along the southeastern coast. The aim of this work is to report a recent record of a pygmy killer whale from the coast of Maranhão State, northern Brazil. On 22 October 2005, through regular surveys conducted by Projeto Cetáceos do Maranhão team, a beach-worn skull of a pygmy killer whale was found on the Mangue Seco beach, at Caju Island, Maranhão State. The specimen was identified through peculiar features, such as a short beak, 11 teeth per row in the maxile and the distance between the anterorbital notch and the end of the toothrow. This stranding suggests that pygmy killer whales may use oceanic waters close to Maranhão continental shelf. This is the second confirmed stranding of F. attenuata for the Brazilian Coast and the first along the northern coast. The present record increases our poor knowledge on the cetacean fauna of the northern Brazilian coast.

No Brasil somente um exemplar de Feresa attenuata foi coletado ao longo da costa sudeste. O objetivo deste trabalho é registrar o recente encalhe da orca-pigméia para a costa do Maranhão, litoral norte do Brasil. Em 22 de outubro de 2005, através de monitoramentos regulares conduzidos pelo Projeto Cetáceos do Maranhão, um crânio do exemplar de F. attenuata foi encontrado na praia do Mangue Seco, na Ilha do Caju, Estado do Maranhão, Brasil. O espécime foi identificado através de características peculiares, como o rostro curto, 11 pares de dentes na maxila e pela distancia entre o anterorbital e o término dos alvéolos dentares. Este encalhe sugere que a orca-pigméia pode usar águas oceânicas próximas à plataforma continental do Maranhão. Este é o segundo registro de encalhe confirmado para F. attenuata para a costa brasileira e o primeiro para a costa norte. O presente estudo contribui com o pouco conhecimento sobre os cetáceos na costa norte do Brasil.