Genotipificación del gen RHD en ADN fetal libre en plasma de embarazadas RhD negativo / Genotyping of the RHD gene in free fetal DNA in plasma of RhD negative pregnant women

Objetivo: Determinar el grupo RhD fetal a través del estudio del gen RHD en ADN fetal que se encuentra libre en plasma de embarazadas RhD negativo. Método: Se analizó la presencia de los genes RHD, SRY y BGLO en ADNfl obtenido de plasma de 51 embarazadas RhD negativo no sensibilizadas, utilizando una qPCR. Los resultados del estudio genético del gen RHD se compararon con el estudio del grupo sanguíneo RhD realizado por método serológico en muestras de sangre de cordón, y los resultados del estudio del gen SRY fueron cotejados con el sexo fetal determinado por ecografía. Se calcularon la sensibilidad, la especificidad, los valores predictivos y la capacidad discriminativa del método estandarizado. Resultados: El gen RHD estaba presente en el 72,5% de las muestras y el gen SRY en el 55,5%, coincidiendo en un 100% con los resultados del grupo RhD detectado en sangre de cordón y con el sexo fetal confirmado por ecografía, respectivamente. Conclusiones: Fue posible deducir el grupo sanguíneo RhD del feto mediante el estudio del ADN fetal que se encuentra libre en el plasma de embarazadas con un método molecular no invasivo desarrollado y validado para este fin. Este test no invasivo puede ser utilizado para tomar la decisión de administrar inmunoglobulina anti-D solo a embarazadas RhD negativo que portan un feto RhD positivo.

Objective: To determine the fetal RhD group through the study of the RHD gene in fetal DNA found free in plasma of RhD negative pregnant women. Method: The presence of the RHD, SRY and BGLO genes in fetal DNA obtained from plasma of 51 non-sensitized RhD negative pregnant women was analyzed using qPCR. The results of the genetic study of the RHD gene were compared with the RhD blood group study performed by serological method in cord blood samples, and the results of the SRY gene study were compared with the fetal sex determined by ultrasound. Sensitivity, specificity, predictive values and discriminative capacity of the standardized method were calculated. Results: The RHD gene was present in 72.5% of the samples and the SRY gene in 55.5%, coinciding 100% with the results of the RhD group detected in cord blood, and with the fetal sex confirmed by ultrasound, respectively. Conclusions: It was possible to deduce the RhD blood group of the fetus through the study of fetal DNA found free in the plasma of pregnant women with a non-invasive molecular method developed and validated for this purpose. This non-invasive test can be used to make the decision to administer anti-D immunoglobulin only to RhD-negative pregnant women carrying an RhD-positive fetus.

Enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido por aloanticuerpos contra el antígeno M / Hemolytic disease in fetuses and newborns due to antibodies against the M-antigen

Resumen | Hay pocos reportes de enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido causada por aloanticuerpos contra el sistema de antígenos MNS, especialmente, porque los anticuerpos que se generan contra estos antígenos son del tipo IgM, los cuales tienen reactividad a temperaturas inferiores a los 37 °C, y, por lo tanto, no son de importancia clínica. A pesar de ello, se han reportado casos con presencia de anticuerpos anti-M de tipo IgG causantes de la enfermedad hemolítica del recién nacido e, incluso, casos de muerte intrauterina por incompatibilidad materno-fetal en el sistema MNS. El proceso hemolítico se asemeja al causado por los anticuerpos anti-Kell, con anemia progresiva por supresión hematopoyética que induce la destrucción de precursores hematopoyéticos en la médula ósea y ausencia de reticulocitos en la periferia. Se reporta el caso de una mujer con 38,5 semanas de gestación, que presentó discrepancia en la hemoclasificación directa y en la inversa. Como resultado, el recién nacido fue positivo en la prueba de Coombs directa sin que existiera incompatibilidad ABO con la madre. La correlación de estos resultados llevó a la detección de un anticuerpo anti-M en el suero materno. El diagnóstico definitivo fue posible gracias a la discrepancia en la hemoclasificación de la sangre materna. A pesar de que los anticuerpos anti-M usualmente no desempeñan un papel importante en la enfermedad hemolítica perinatal, este caso resalta la importancia de determinar la presencia de diferentes anticuerpos que pueden ser de vital interés a la hora de prevenir resultados graves asociados con dicha condición. Además, abre la puerta a nuevas recomendaciones relacionadas con la tamización y el tratamiento temprano de la hemólisis en los recién nacidos.

Abstract | There are few case reports of hemolytic disease in fetuses and newborns (HDFN) caused by alloantibodies against the MNS blood group system. The reason for this dearth is that antibodies toward these antigens are usually IgM, which not only cannot cross the placental circulation but also react at temperatures below 37°C. They are, therefore, of minimal clinical importance. Nevertheless, cases have been reported in which the presence of anti-M IgG antibodies caused severe HDFN and even intrauterine death in the presence of maternal-fetal MNS incompatibility indicating that they could have a high clinical impact. The hemolytic pattern observed in these cases is similar to that caused by anti-Kell antibodies. Progressive anemia is mediated and developed through hematopoietic suppression inducing the destruction of bone marrow precursor cells with the resulting absence of reticulocytes in peripheral blood. This occurred in the case of a woman at 38.5 weeks of gestation who showed a discrepancy between direct and reverse blood type determination. A direct Coombs test was performed on the newborn's blood, which was positive in the absence of maternal-fetal ABO incompatibility. Further tests were performed and anti-M antibodies were found in the maternal serum screening. Our final diagnosis was largely due to discrepancy issues in maternal blood. Although anti-M antibodies do not usually play a significant role in HDFN, this case stresses the importance of identifying the presence of antibodies that can be crucial in preventing HDFN and lead to new recommendations for the screening and prompt treatment of hemolysis in newborns.

Guía de manejo obstétrico y del recién nacido en madre aloinmunizada / Guidelines for the obstetric management of an alloimmune mother and her newborn / Guia de manejo obstétrico e neonatal em mães aloimunizadas

Resumen: La aloinmunización es una respuesta biológica frente a la exposición de antígenos no propios. La gestación, las transfusiones de hemocomponentes, los trasplantes de órganos sólidos y células hematopoyéticas, así como el consumo de drogas intravenosas exponen a las pacientes al desarrollo de aloanticuerpos antieritrocitarios. El hallazgo de los mismos debe cumplir con las instancias diagnósticas para identificar la probabilidad de estar asociados a enfermedad hemolítica feto neonatal (EHFN) y su oportuna derivación a policlínica de alto riesgo obstétrico (ARO) para su correcto seguimiento. Es fundamental que sean los laboratorios de inmunohematología de los servicios de hemoterapia y medicina transfusional los encargados de los estudios diagnósticos de aloinmunización eritrocitaria(1). En este sentido hemos elaborado esta guía con el objetivo de protocolizar de manera multidisciplinaria el manejo de las embarazadas aloinmunizadas y sus recién nacidos.

Abstract: Alloimmunization is the biological response to exposure to non-HLA antigens. Pregnancy, transfusion of blood components, solid organ and hematopoietic cell transplantation, as well as intravenous drug use expose patients to the development of anti-erythrocyte antibodies. When the latter are found, they must match diagnostic criteria to identify the potential association to hemolytic disease of the fetus and newborn (HDFN) and its timely referral to the high-risk obstetric risk polyclinic for due follow-up. It is of the essence for erythrocyte alloimmunization diagnostic tests to be carried out by the immunohematology laboratories of the Hemotherapy and Transfusional Medicine services. To that end, we have prepared these guidelines with the purpose of providing a multidisciplinary protocol for the handling of maternal alloimmunization and alloimmunization of the newborn.

Resumo: A aloimunização é uma resposta biológica à exposição a antígenos não próprios. A gravidez, as transfusões de hemocomponentes, os transplantes de órgãos sólidos e células hematopoiéticas, bem como o uso de drogas intravenosas expõem os pacientes ao desenvolvimento de anticorpos antieritrocitários. O achado destes deve obedecer a critérios diagnósticos para identificar a doença e a probabilidade de estarem associados a doença hemolítica feto neonatal (DHPN) e seu encaminhamento oportuno para uma unidade de alto risco obstétrico para acompanhamento adequado. É fundamental que os laboratórios de imuno-hematologia dos serviços de Hemoterapia e Medicina Transfusional se encarreguem dos estudos diagnósticos da aloimunização eritrocitária. Elaboramos este guia com o objetivo de estabelecer um protocolo multidisciplinar para o manejo de gestantes aloimunizadas e seus recém-nascidos.

Prevención de enfermedad hemolítica perinatal severa con inmunoglobulina intravenosa en paciente altamente sensibilizada / Prevention of severe perinatal hemolytic disease with intravenous immunoglobulin in a highly sensitized patient

RESUMEN La enfermedad hemolítica perinatal es infrecuente hoy por la prevención que de ella se hace. Sin embargo, existen casos de madres altamente sensibilizadas que desean tener un hijo, lo que obliga a que ese embarazo deseado sea controlado de manera especial y sometido a procedimientos invasivos no exentos de morbimortalidad fetal. El uso prenatal de inmunoglobulina humana en la madre puede representar una alternativa terapéutica. Se presenta un caso en que su uso impidió el desarrollo de enfermedad intrauterina y favoreció la buena evolución neonatal a pesar de que el pronóstico inicial era muy adverso.

ABSTRACT Perinatal Hemolytic Disease is uncommon today due to its prevention. However, there are cases of highly sensitized mothers who wish to have a child, that forces this desired pregnancy to be controlled in a special way and be subjected to invasive procedures not exempt from fetal morbidity and mortality. Prenatal use of human inmunoglobulin in the mother may represent a therapeutic alternative. We present a case in which its use prevented the development of intrauterine disease and favored a good neonatal evolution despite the fact that the initial prognosis was very adverse.

Procedencia y fenotipo del sistema Rh en donantes negativos en un Hemocentro colombiano / Origin and phenotype of the Rh system in negative donors in a Colombian hemocenter

percentIntroducción: El sistema Rh está compuesto por más de 56 antígenos capaces de producir enfermedad hemolítica, definidos por métodos serológicos. Los más importantes y, por ello denominados antígenos mayores del sistema, son los antígenos D, C, c, E y e. Estos antígenos se ubican sobre dos proteínas que se expresan en la membrana de los eritrocitos Rh D y RhCE. Objetivo: Determinar la frecuencia de los antígenos C, c, E y e del sistema Rh en donantes de sangre Rh negativos del Hemocentro Centro Oriente Colombiano. Métodos: Estudio descriptivo de corte transversal que incluyó 193 donantes voluntarios de sangre del Hemocentro Centro Oriente Colombiano, la fenotipificación de los antígenos del sistema Rh se realizó utilizando la técnica en tarjeta gel. Se calculó la frecuencia fenotípica de los antígenos del sistema Rh, en porcentajes y para el procesamiento de la información se utilizó el paquete estadístico SPSS versión 21.0 donde se realizó el análisis de los datos de la población. Como criterios de inclusión ser donante voluntario de sangre y de exclusión, estar hemoclasificado como antígeno DEL, D débil y D parcial. Resultados: Las muestras analizadas fueron obtenidas de la tubuladura central de la unidad fraccionada de glóbulos rojos, identificándose tres fenotipos con la siguiente frecuencia: cde/cde (95,86 por ciento), cde/cdE (3,10 por ciento) y cde/Cde (1,04 por ciento). Los participantes del estudio provenían de diversos municipios del departamento de Boyacá y otras regiones del país como llanos Orientales, Santander y Cundinamarca. Los antígenos del sistema Rh son altamente polimórficos a nivel de poblaciones, dada la importancia inmunológica de los antígenos del sistema Rh, los cuales se ven directamente relacionados con el desarrollo de anemia hemolítica postransfusional y perinatal, la fenotipificación ampliada brinda mayor seguridad transfusional y seguimiento al estado del feto o neonato(AU)

Introduction: The Rh system is composed of more than 56 antigens capable of producing hemolytic disease, defined by serological methods; being the most important and therefore the largest antigens of the system, the antigens D, C, c, E and e. These antigens are located on two proteins that are expressed in the membrane of erythrocytes Rh D and RhCE. Objective: To determine the frequency of the C, c, E and e antigens of the Rh system in Rh negative blood donors of Hemocentro Centro Oriente Colombiano. Methods: A cross-sectional descriptive study that included 193 blood donors from the Hemocentro Centro Oriente Colombiano, phenotyping the antigens of the Rh system, using the gel card technique. The phenotypic frequency of the Rh antigen was calculated, in percentages and for the processing of the information, the statistical package SPSS version 21.0 was used in Spanish where all the analysis of the population data was performed. With inclusion criteria to be a voluntary blood donor and exclusion, be hemoclasified as DEL antigen, weak D and partial D. Results: The analyzed samples were obtained from the central tubulant of the fractionated unit of red blood cells, three phenotypes were identified with a frequency of :cde / cde95.86 percent, cde / cdE 3.10 percent and cde / Cde 1, 04 percent; it was evidenced that the participants come from diverse municipalities of the department of Boyacá and other regions of the country like Eastern Plains, Santander and Cundinamarca. The Rh factor and the antigens of the Rh system are highly polymorphic at the population level, given the immunological importance of the antigens of the Rh system, which are directly related to the development of post transfusion hemolytic anemia and perinatal hemolytic disease, the extended phenotyping provides greater transfusional safety and follow-up to the status of the fetus or neonate(AU)

Impacto en el diagnóstico temprano de la enfermedad hemolítica del recién nacido en neonatos mayores de 2kg mediante el tamizaje de la bilirrubinas por método transcutáneo / Impact in the early diagnosis of hemolytic disease of the newborn in neonates greater than 2kg by screening bilirubins by transcutaneous method

Introducción: La enfermedad hemolítica del recién nacido es una afección inmunológica autoinmunitaria en la cual la vida del hematíe es acortada como resultado por la acción de anticuerpos maternos. La gravedad de la enfermedad se asocia a anemia, trombocitopenia, muerte fetal intraútero, kernicterus, defectos en la coagulación, hipoglicemia, ascitis e hydrps. El objetivo de este estudio fue comparar el impacto de la implementación de intervenciones para el diagnóstico de esta patología en el servicio de neonatología del Hospital del Niño. Materiales y métodos: Se evaluó recién nacidos de la maternidad del Hospital Santo Tomás> 2 kg con diagnóstico de isoinmunización (ABO o Rh) en dos períodos, antes y después de la implementación del tamizaje de las bilirrubinas por método transcutáneo desde 1 enero 2015 a 31 diciembre 2016; se tomó en cuenta el tipo de isoinmunización, la edad al momento del diagnóstico, días de fototerapia que recibe, días intrahospitalarios, uso de inmunoglobulinas y complicaciones, se obtiene valor de P para comparar un período con otro y evaluar su significancia . Resultados: Se obtienen 460 pacientes; 230 para cada período. Cumplen con los criterios de inclusión un total de 422 pacientes (203 para el primer periodo y 219 para el segundo). Entre los resultados se observó que un 95.6% la incompatibilidad de grupo ABO predominó sobre la isoinmunización Rh en ambos períodos; con leve prevalencia de la isoinmunización OA. La bilirrubinas séricas al momento del ingreso a sala de neonatología 2 disminuyó> 5 mg/dl en el segundo periodo (13.27 y 8.05 respectivamente) y en cuanto a los días de fototerapia se encontró disminución de 4.2 días para el primer período y 2.6 días en el segundo período, lo mismo que la estancia intrahospitalaria de 5.2 a 2.8 días. La edad al momento del diagnóstico disminuyó de 33.8horas a 15.4 horas en el segundo periodo y la frecuencia de exanguino-transfusiones disminuyó de 6.9% a 2.3% en el segundo periodo. Conclusión: Se observó la captación temprana de pacientes con enfermedad hemolítica del recién nacido, disminuyendo la duración de estancia intrahospitalaria.

Introduction: The hemolytic disease of the newborn is an autoimmune immunological condition in which the life of the erythrocyte is shortened as a result of the action of maternal antibodies. The severity of the disease is associated with anemia, thrombocytopenia, intrauterine fetal death, kernicterus, coagulation defects, hypoglycemia, ascites and hydrps. The objective of this study was to compare the impact of the implementation of interventions for the diagnosis of this pathology in the neonatology service of the Hospital del Niño. Materials and methods: Newborn infants from Santo Tomás Hospital> 2 kg were evaluated with diagnosis of isoimmunization (ABO or Rh) in two periods, before and after the implementation of bilirubin screening by transcutaneous method from January 1, 2015 to December 31, 2016; the type of isoimmunization, age at diagnosis, days of phototherapy received, hospital days, use of immunoglobulins and complications were taken into account, P value is obtained to compare one period with another and evaluate its significance. Results: 460 patients are obtained; 230 for each period. A total of 422 patients met the inclusion criteria (203 for the first period and 219 for the second). Among the results, it was observed that 95.6% of ABO group incompatibility predominated over Rh isoimmunization in both periods; with mild prevalence of OA isoimmunization. Serum bilirubins at the time of admission to neonatal ward 2 decreased> 5 mg / dl in the second period (13.27 and 8.05 respectively) and in terms of the days of phototherapy a decrease of 4.2 days was found for the first period and 2.6 days in the second period, as well as the inpatient stay from 5.2 to 2.8 days. The age at the time of diagnosis decreased from 33.8 hours to 15.4 hours in the second period and the frequency of exanguine-transfusions decreased from 6.9% to 2.3% in the second period. Conclusion: Early uptake of born with hemolytic disease was observed, decreasing the duration of in-hospital stay.

Manejo de la embarazada con isoinmunización por anticuerpos irregulares / Pregnant management by isoimmunized irregular antibodies

La isoinmunización eritrocitaria feto-materna se define como la presencia de anticuerpos maternos dirigidos contra antígenos presentes en los glóbulos rojos fetales. Los anticuerpos maternos pueden atravesar la barrera placentaria y provocar hemólisis de los glóbulos rojos fetales produciendo anemia hemolítica e hiperbilirrubinemia, características de la enfermedad hemolítica perinatal (EHP). La principal causa de EHP es la incompatibilidad ABO, seguida de la isoinmunización por RhD; esta última ha disminuido su incidencia dado el amplio uso de inmunoglobulina anti D. Sin embargo, el glóbulo rojo tiene más de 400 antígenos, muchos de ellos (>50) capaces de producir isoinmunización y EHP. En este artículo, revisamos la evidencia y proponemos un algoritmo de manejo y seguimiento de las embarazadas con isoinmunización por anticuerpos irregulares. En la isoinmunización por anticuerpos irregulares, los títulos de anticuerpos maternos no se correlacionan con la gravedad de la enfermedad. La anemia en la EHP por anticuerpos anti-Kell es secundaria a una supresión de la eritroblastosis fetal a diferencia del resto de los sistemas que producen anemia hemolítica. Recomendamos efectuar tamizaje de todas las pacientes en el control prenatal, solicitando grupo sanguíneo, Rh y test de Coombs indirecto. En las pacientes Rh (+) con test de Coombs indirecto positivo es necesario identificar los anticuerpos irregulares. En caso de tener isoinmunización por anticuerpos irregulares con riesgo de EHP, derivar a una unidad de alto riesgo obstétrico para realizar seguimiento de la aparición de anemia fetal midiendo de modo seriado el peak sistólico de la arteria cerebral media. Si se detecta anemia fetal, debemos planificar una cordocentesis para confirmar el diagnóstico y tratar la anemia.

The fetomaternal erythrocyte isoimmunization is defined as the presence of maternal antibodies directed against antigens present in fetal red blood cells. Maternal antibodies can cross the placenta and cause hemolysis of fetal red blood cells causing hyperbilirubinemia and hemolytic anemia, known as perinatal hemolytic disease (PHD). The main cause of PHD is ABO incompatibility, followed by RhD isoimmunization. The latter has decreased its incidence since the widespread use of anti-D immunoglobulin. However, the red cell has more than 400 antigens; many of them (>50) can lead to isoimmunization and PHD. In this article, we review the evidence and propose an algorithm for the management and monitoring of pregnant women with irregular antibodies isoimmunization. In the isoimmunization by irregular antibodies, maternal antibody titers do not correlate with the severity of the disease. Anemia in PHD by anti-Kell is secondary to suppression of fetal erythroblastosis unlike other systems that produce hemolytic anemia. We suggest the screening of all patients in the prenatal control with blood group, Rh and indirect Coombs test. In the Rh (+) patients with positive indirect Coombs test, irregular antibodies should be identified. In case of immunization by irregular antibodies in risk of PHD, the women should be referred to a high-risk obstetrics where the appearance of fetal anemia should be seek by measuring systolic peak of middle cerebral artery. If anemia is detected full confirmation of diagnosis and treatment should be effected by cordocentesis.

Caso inusual de enfermedad hemolítica neonatal / Unusual case of neonatal hemolytic disease

La enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido es una afección inmunológica isoinmune, frecuente en casos de incompatibilidad a grupos ABO, menos frecuente en casos de incompatibilidad a grupo Rh y aún menos frecuente en casos de incompatibilidad a grupos menores. Presentamos el caso de un neonato de 20 días de vida del sexo masculino con grupo y Rh similares a la madre, transferido a nuestro hospital por presentar ictericia con niveles séricos de bilirrubina elevada y anemia severa. Previo a estudios hematológicos se inició fototerapia y transfusiones sanguíneas. Estudios posteriores confirmaron que la anemia hemolítica e ictericia del paciente fueron debidas a la presencia de anticuerpos irregulares Anti C y anti Cw. La hemolisis cedió paulatinamente, la evolución del neonato fue favorable y el paciente fue externado con una biometría hemática normal y sin problemas posteriores. El presente caso nos recuerda y llama la atención que con la declinación de la anemia hemolítica por incompatibilidad Rh, se debe tener en cuenta ictericia y hemolisis secundaria a grupos inusuales o menores.

Hemolytic disease of the fetus and newborn is an autoimmune disease, frequently seen in cases of ABO incompatibility, less frequent in Rh disease and very rare in cases on incompatibility to minor blood groups. We report the case of a 20 days old newborn with compatible blood group and Rh, transferred to our hospital because jaundice and severe anemia. After a lab work up, he received blood transfusions and phototherapy. The lab results were positive for anti-bodies anti C and anti Cw. The jaundice and anemia resolved and the patient was discharge without any further problems.

Frecuencia del antígeno Dia en donantes y de anticuerpos anti-Dia en pacientes de Hospitales Públicos y del Instituto Guatemalteco de Seguridad Social / Frequency of Dia antigen among blood donors and anti-Dia of patients from public hospitals and the Guatemalan Security Social Institute

Introducción: es muy raro encontrar al antígeno Dia en caucásicos, negros, polinesios y esquimales, pero se encuentra presente en alta frecuencia en etnias autóctonas de Latinoamérica y población en Asia. El anticuerpo anti-Dia es clínicamente significativo porque se ha asociado con reacciones hemolíticas pos­transfusionales y la Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido. Objetivos: Establecer la importancia de investigar el antígeno Dia en donantes y anticuerpos anti-Dia en pacientes transfundidos en los bancos de sangre de hospitales públicos y hospitales del Instituto Guatemalteco de Seguridad Social. Metodología: La detección del antígeno Dia se realizó utilizando la prueba de antiglobulina indirecta. A los donantes se dividieron en dos grupos étnicos indígenas y mestizos. Las diferencias en las prevalencias se analizaron me­diante la prueba X2 (chi cuadrado) y valor de p<0,05 para mostrar si hay diferencia significativa. Las muestras para la detección de anticuerpos se realizó en un equipo Wadiana-Grifols utilizando células pantalla Serascan 1, 2, 3 y Serascan Diego. Resultados: Se encontró que el antígeno Dia posee una frecuen­cia de 7.5%. Al ser estratificado la muestra por etnia, la población indígena posee una frecuencia de 12.99% y la población mestiza de 3.90%, encontrándose una di­ferencia significativa (p<0.005). La frecuencia de anticuerpos anti-Dia fue de 3.50%. Conclusiones: La frecuencia de antígeno Dia en la población bajo estudio fue de 7.32%. La frecuencia de Dia en la población indígena fue de 12.99% y en la población mestiza fue de 3.9%, con una diferencia significativa entre po­blaciones (p= 0.03120). La frecuencia de anti-Dia en 227 pacientes politranfundidos fue de 3.5%.

Enfermedad hemolítica perinatal: manejo de la embarazada RhD negativo / Perinatal hemolytic disease: management of RhD immunization in pregnancy

En solo 50 años la enfermedad hemolítica perinatal por isoinmunización anti D pasó de ser una enfermedad sin etiología conocida, incurable y no prevenible, a la situación actual en que por las técnicas de prevención, diagnóstico oportuno y tratamiento especializado tiene baja incidencia y altas expectativas de sobrevida, incluso en los casos más severos. Se describe la historia, las técnicas de prevención, diagnóstico, manejo y tratamiento de la enfermedad.

In just 50 years the perinatal hemolytic disease due to RhD isoimmunization went from being a disease without known etiology, untreatable and not preventable to the current situation in which the prevention techniques, opportune diagnosis and specialized treatment has low its incidence and has an expected high survival even in the more severe cases. This article describes the history, prevention techniques, diagnosis, management and treatment of the disease.

Score Delphos 1: estimación del grado de afectación fetal en enfermedad hemolítica del recién nacido / Delphos I Score: estimation of the degree of fetal affectation in haemolytic disease of the newborn

Objetivos: Realizar un modelo de score de riesgo en pacientes sensibilizadas. Predecir el comportamiento futuro e identificar la población con mayor probabilidad de complicaciones feto-neonatales. Métodos: Se realizó un modelo de score de riesgo, DELPHOS l. Se analizaron las fichas inmunohematológicas de 91 pacientes embarazadas sensibilizadas en el período 1999-2008. Se incluyeron: pacientes puérperas, sensibilizadas a anticuerpos anti D solo o asociado a otro productor de enfermedad hemolítica (EH), parto o cesárea con recién nacido en este hospital. Se excluyeron: pacientes embarazadas, sensibilizadas a anticuerpos no productores de EH, pacientes con recién nacido derivado a otro nosocomio. Para su construcción se confeccionó una tabla valorando: antecedentes obstétricos, edad gestacional, titulo, tipo, número de anticuerpos y causas de incremento del título de anticuerpos. Se dio a cada punto citado un puntaje mínimo y máximo. Se procedió al ensayo del mismo comparando la puntuación obtenida con la evolución del feto/neonato en cada caso. Resultados: El 66% de las pacientes consultaron antes de la semana 25 de embarazo presentando score más alto respecto a las que consultaron a las 25 semanas o más. El número de recién nacidos Rh positivos no afectados fue mayor hasta el score 5; a partir de este, aumentó el número y la gravedad de la afectación. Las pacientes sometidas a transfusión intrauterina (TIU) fueron aquellas con score igual o mayor a 6. Por lo tanto el score 6 resultó ser punto de corte a partir del cual se incrementó la afectación feto-neonatal. Conclusión: Un modelo de score permitiría simplificar y mejorar la elección de la conducta a tomar frente a pacientes sensibilizadas.

Objectives: Create a score model to assess risk in sensitized patients. Predict future behaviour and identify the population with higher probability of fetal and neonatal complications. Methods: A risk score model was created, DELPHOS l. The immunohematological record cards of 91 sensitized pregnant patients (1999 through 2008) were surveyed. The following were included: sensitized puerperal patients with anti-D as sole causing antibody or associated to another Haemolytic Disease (HD)-producing antibody, vaginal birth or Caesarean section, with their newborn still in this hospital. The following were excluded: pregnant patients, sensitization by non HD­-producing antibodies, patients with newborn sent to other healthcare facilities. For its construction, a chart was designed evaluating: obstetric medical records, gestational age, titre, type, number of antibodies and causes for antibody increase. A minimum and maximum number of points was assigned to each of the mentioned criteria. A test run was carried out, comparing the obtained number of points with the clinical status of the fetus/newborn in each case. Results: 66% of the patients consulted before 25 weeks pregnancy exhibiting higher scores; as opposed to those that consulted at 25 or more weeks pregnancy. The number of non-affected Rh-positive newborns was higher, up until score 5; from that point on, the number and severeness of affectation increased. The patients to undergo intra-uterine transfusion, were those with score 6 or higher. Therefore score 6 turned out to be the breaking-point starting from which, the fetal/neonatal affectation increased. Conclusion: A score model would allow to simplify and improve the course of action in the management of sensitized patients.

Utilidad de la prueba directa de Coombs en el tamiz neonatal / Usefulness of direct antiglobulin test in neonatal screening

Introducción. La ictericia es un evento clínico frecuente que se presenta en los recién nacidos; las causas más frecuentes involucradas en la enfermedad hemolítica del recién nacido (EHRN) continúan siendo la incompatibilidad al sistema ABO y la isoinmunización a RhD. La prueba directa de Coombs (PDC) permite identificar la presencia de anticuerpos antieritrocitarios del isotipo IgG, provenientes del suero materno en la superficie de los eritrocitos del feto o neonato. Objetivo: presentar los resultados y especificidad de la prueba directa de Coombs (PDC) como prueba en el tamiz neonatal. Métodos. Consecutivamente se incluyeron a recién nacidos no seleccionados. En las primeras horas de vida se determinó el grupo sanguíneo ABO/RhD y la PDC con suero poliespecífico y monoespecíficos (anti-IgG y C3b/C3d). Resultados. Se incluyeron 5 007 recién nacidos, la PDC positiva se documentó en 181 neonatos (3.6%). Los casos del grupo sanguíneo A, B o AB, mostraron mayor riesgo de tener PDC positiva que los del grupo O (razón de momios 2.3, intervalo de confianza 95% 1.7-3.1). La PDC positiva se presentó en 3.5% de los neonatos RhD positivo y en 1.9% de los RhD negativo; 72.9% de los neonatos con PDC positiva tuvieron titulaciones de 1:2, 1 ;4 y 1:8, con el 33.1, 19.9 y 19.9%, respectivamente. En los neonatos con PDC positiva se pudo establecer el isotipo anti-IgG en 117 casos (64.6%), complemento sólo en 6 casos (3.3%), la combinación de ambas en 6 casos (3.3%) y en 52 neonatos (28.8%), con PDC poliespecífico positivo, no se pudo identificar la especificidad de la reacción. Conclusión. La prevalencia elevada (3.6 %) de PDC positiva en la detección neonatal rutinaria, apoya la indicación de incorporar dicha prueba al tamiz neonatal, independientemente del grupo ABO y Rh materno. Queda por establecer su beneficio en la detección temprana de la ictericia neonatal.

Background. Neonatal jaundice is a clinical event frequently present in newborns. The causes most frequently involved in hemolytic disease of newborn (HDN) are still the incompatibilities to the ABO/Rh blood system. Direct Coombs test (or direct antiglobulin test, DAT) allows identification of the presence of red blood cell antibodies (IgG isotype) coming from the maternal serum on the surface of the fetus erythrocytes. The purpose of this study is to show the results and specificity of DAT as screening in newborn infants. Methods. We studied unselected neonates in a cross-sectional design. During the early hours of life, we determined ABO/Rh and DAT with poly- and monospecific reagents (anti-IgG and C3b/C3d). Results. We included 5 007 newborns; 181 cases (3.6%) were DAT positive. Newborns with A, B or AB blood groups showed an increased association of being DAT positive than group O (OR 2.3, 95% Cl 1.7-3.1). DAT was positive in 3.5% of RhD-positive infants and 1.9% of RhD-negative infants. In six DAT-positive cases, 117 cases (64.6%) had anti-IgG bound to red cell membrane, complement in six cases (3.3%), and 52 newborns (28.8%) were polyspecific DAT positive and monospecific DAT negative. Conclusions. The high prevalence (3.6%) of DAT-positive cases in routine neonatal detection supports the indication to incorporate DAT into neonatal screening, regardless of the mother's blood group. The benefit of early intervention in neonatal jaundice remains to be established.

Enfermedad hemolítica perinatal por dos aloanticuerpos: presentación de un caso / Alloantibody linked perinatal hemolytic disease: case report

La etiopatogenia de la enfermedad hemolítica del recién nacido está basada en la incompatibilidad de grupo sanguíneo entre la madre y el recién nacido. Los neonatos con enfermedad hemolítica por incompatibilidad ABO usualmente tienen madres de grupo O porque la IgG anti-A y anti-B puede atravesar la placenta y sensibilizar los eritrocitos neonatales. Otros anticuerpos además de los ABO han sido reportados como causa de enfermedad hemolítica del recién nacido, ejemplo: anti-D, anti-C, anti-K, anti-Jk, anti-Fy, anti-S, etc. Presentamos el caso de una mujer de 33 años de edad, que en el segundo trimestre de su segunda gestación presentó una hemorragia que motivó la transfusión de una unidad de concentrado de eritrocitos. No se reportó reacción transfusional. El producto de dicha gestación fue un neonato masculino de 2,5 Kg de peso y apgar 6-8 que presentó íctero a las 24 horas después del parto. El fenotipaje ABO de los eritrocitos maternos y del neonato arrojó que la madre era de grupo O y el neonato de grupo B. La prueba de Coombs directa fue positiva 2+ en el neonato y la prueba de Coombs indirecta resultó positiva 3+ en la madre. Dos aloanticuerpos fueron detectados en el suero materno como causa del íctero neonatal, un anti-A y un anti-Jk b. Los eritrocitos maternos fueron fenotipados como Jk b negativos. El tratamiento con fototerapia al neonato se inició a las 40 horas de edad y se prolongó hasta los 10 días de nacido. Una transfusión simple de concentrado de eritrocitos fenotipados fue administrada al neonato a los 8 días de edad.

Intacglobin en la enfermedad hemolítica por incompatibilidad Abo y rh / ntacglobin in the haemolytic disease by Abo and rh incompatibility

La enfermedad hemolítica del recién nacido por Rh y ABO tiene una morbilidad importante en todas las unidades de atención neonatal, por lo que se ha recurrido a la búsqueda de formas terapéuticas más eficaces y menos agresivas. Las gammaglobulinas tienen un efecto muy completo. El intacglobin es una gammaglobulina de producción nacional con estas propiedades. Se realizó un ensayo clínico fase cuatro donde se utilizó el intacglobin a altas dosis (0,5–1gr/Kg) en 29 recién nacidos en los Hospitales Ginecobstétrico Ana Betancourt de Mora de Camaguey y Hospital Provincial Docente Dr Antonio Luaces Iraola de Ciego de Ávila, de enero a diciembre de 2002, comparando con un grupo control histórico de 31 recién nacidos donde no se utilizó el medicamento. En el grupo de estudio se encontró una disminución del tiempo de estabilización de las cifras de Hb y bilirrubina, menor uso de exanguinotransfusión y del tiempo de exposición a la fototerapia. Concluimos que el uso de intacglobin asociado a fototerapia puede ser beneficioso en el tratamiento de la enfermedad hemolítica por Rh y ABO.

The haemolytic disease of newborn by Rh and ABO has an important morbidity in all units of neonatal attention, that´s why we have looked for more effective and less agresives therapeutic ways. The gamma globulin has a more completed effect. The intacglobin is a gamma globulin of national production with these properties. There has been done a clinical essay 4 phase where there were used the intacglobin in high doses (0.5-1gr/kg), in 29 neonates in Gineco-obstetric Hospital Ana Betancourt de Mora of Camaguey and General Hospital Dr Antonio Luaces Iraola of Ciego de Avila. From january to december 2002, comparing with a group of historical control of 31neonate where there were not used any medicament. In the group of study it was found a dicrease of the stabilization time of the figures of Hb and bilirubin, less use of transfusion and of the exposition time to phototherapy. We arrived to the conclusion that the use of intacglobin associated to phototherapy can be beneficial in the treatment of haemolytic disease by Rh and ABO.