Sensibilidad de la prueba ELISA para detectar los anticuerpos IgG contra el Strongyloides stercoralis en pacientes inmunocomprometidos

Objetivo: la sensibilidad subóptima de las pruebas coproparasitológicas dificulta el diagnóstico de la estrongiloidiasis. Los métodos serológicos son más sensibles, pero los estudios en pacientes inmunodeprimidos son escasos. El objetivo del estudio fue de evaluar la sensibilidad de una prueba ELISA comercial en pacientes inmunodeprimidos. Métodos: se realizó en Bolivia un estudio multicéntrico en pacientes con cáncer, VIH, enfermedades reumatológicas y hematológicas. 88 pacientes con larvas de S.stercoralis en heces identificadas mediante técnicas coproparasitológicas tuvieron una prueba serológica ELISA (Bordier Affinity Products). Resultados: la sensibilidad de la técnica ELISA fue de 77,3% (61/88) (CI95%: 67,7-85,1). La sensibilidad de este test serológico fue identificada más baja en pacientes HIV+ con CD4300 o una serología VIH desconocida (84,2%) (p=0,035). Conclusiones: la sensibilidad del ELISA es inversamente proporcional al grado de inmunosupresión. Este resultado refuerza la recomendación de diagnosticar la estrongiloidiasis mediante una combinación de técnicas serológicas y coproparasitológicas.

Objectives: the sensitivity of coproparasitological tests for the diagnosis of strongyloidiasis are suboptimal. Serological methods are more sensitive, but studies among immunocompromised patients are scarce. The aim of this study was to evaluate the sensitivity of a commercial ELISA test among immunocompromised patients. Methods: a multicenter study was conducted in Bolivia among patients with cancer, HIV, rheumatologic or hematologic diseases. 88 patients with S. stercoralis larvae in stool identified by coproparasitological techniques had an ELISA serological test (Bordier Affinity Products). Results: the sensitivity of the ELISA technique was 77,3% (61/88) (CI95%: 67,7-85,1), and was identified lower among HIV+ patients with CD4300 or unknown HIV serology (84,2%) (p=0,035). Conclusions: the sensitivity of ELISA is inversely proportional to the degree of immunosuppression. This result reinforces the recommendation to diagnose strongyloidiasis by a combination of serological and coproparasitological techniques.

Frequency of anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in patients with systemic lupus erythematosus / Frecuencia de los anticuerpos anticitoplasma de neutrófilo en pacientes con lupus eritematoso sistémico

ABSTRACT Introduction: Systemic lupus erythematosus (SLE) is a multisystem autoimmune disease. Patients with SLE exhibit multiple serum autoantibodies, including anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCAs). There are two main techniques to detect ANCAs: indirect immunofluorescence (IIF) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In this study, an attempt was made to determine the frequency and clinical associations of ANCAs in patients with SLE. Methods: A cross-sectional study was conducted in a tertiary care hospital in Colombia that included 74 patients with SLE. The presence of ANCAs was assessed using IIF with ethanol-fixed slides, and ELISA was used to detect antibody specificities for myeloperoxidase (MPO)-ANCA and proteinase 3 (PR3)-ANCA. Results: Of the 74 patients with SLE evaluated, 60 (81.1%) of them were ANCA-positive by IIF. By contrast, only one patient showed specificity for PR3-ANCA by ELISA. The relevance of ANCA positivity by IIF and clinical and serological features was significant for renal involvement (p = .0174), and Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index (SLEDAI) (p = .0308). Conclusion: ANCAs are common in the serum of patients with SLE, as detected by ethanol-fixed slides with IIF staining. However, detection of specificity to PR3 and/or MPO is rare, thus highlighting the importance of detecting these autoantibodies by different techniques.

RESUMEN Introducción: El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad autoinmune sistémica. Los pacientes con LES muestran múltiples autoanticuerpos séricos, incluyendo los anticuerpos anticitoplasma de neutrófilo (ANCA, por sus siglas en inglés). Existen 2 técnicas principales para la detección de ANCA: inmunofluorescencia indirecta (IFI) y ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas (ELISA). En este estudio nuestro objetivo fue determinar la frecuencia y las asociaciones clínicas de los ANCA en pacientes con LES. Métodos: Realizamos un estudio transversal de 74 pacientes con LES en un hospital de alta complejidad de Colombia. La presencia de ANCA se evaluó por IFI, utilizando láminas con fijación de etanol, y con ELISA para determinar las especificidades para mieloperoxidasa (MPO)-ANCA y proteinasa 3 (PR3)-ANCA. Resultados: Fueron evaluados 74 pacientes con LES, 60 (81,1%) de ellos fueron positivos para ANCA. Por el contrario, solo un paciente mostró especificidad para PR3-ANCA por ELISA. La relación entre la positividad para ANCA por IFI y las características clínicas y serológicas fue estadísticamente significativa para compromiso renal (p = 0,0174) y para el índice de actividad de la enfermedad (Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index [SLEDAI]) (p = 0,0308). Conclusiones: Los ANCA detectados mediante fijación con etanol por técnicas de IFI, son comunes en pacientes con LES. Sin embargo, la detección de especificidades para PR3 o MPO es rara; se destaca la importancia de la evaluación de estos autoanticuerpos mediante diferentes técnicas.

Relación entre condición nutricional, deterioro neurocognitivo, dependencia funcional y depresión en adultos mayores, Ilama, Honduras / Relationship between nutritional condition, neurocognitive impairment, functional dependence, and depression in elderly people, Ilama, Honduras

l virus SARS-CoV-2, es responsable de la enfermedad COVID-19; para su detección indirecta se utilizan inmunoensayos que cuantifican anticuerpos séricos contra algunas de sus proteínas. Objetivo: documentar resultados de la técnica ELISA, para la identificación cualitativa de anticuerpos contra SARS-CoV-2 en sujetos de Tegucigalpa y Comayagüela y la determinación de relevancia epidemiológica y clínica que presenta esta prueba. Material y Métodos: estudio correlacional transversal de 596 sujetos, a quienes se les practicó ELISA para la determinación de anticuerpos contra el SARS-CoV-2. Se recolectó datos epidemiológicos y clínicos del 13 de mayo al 31 de agosto 2020. Resultados: se analizó datos de 492 sujetos, 271 mujeres y 221 hombres, 313 de Tegucigalpa y 179 de Comayagüela. La edad media fue de 42.1 años; 253 tuvieron nexo epidemiológico negativo y 239 fueron positivos, se identificaron 88 profesiones, con base en la clasificación del Departamento de Trabajo de Estados Unidos y se categorizaron en grupos de riesgo bajo, medio y alto. Se encontraron 12 síntomas clínicos y 2 enfermedades concomitantes. De acuerdo al resultado de la prueba ELISA, los resultados se estructuraron en cuatro grupos: IgM e IgG negativos, IgM positivos, IgM e IgG positivos e IgG positivos, los que se asociaron con las variables epidemiológicas y clínicas. Los habitantes de Comayagüela presentaron mayor número de casos de ELISA positiva en comparación con los de Tegucigalpa. 1Facultad de Ciencias Médicas, UNAH. 2 Laboratorios Molina, Tegucigalpa, Honduras. 3 Western International School, San Pedro Sula. 4 Grupo de Investigación Historia. 5 Dirección General de Documentos Normativos, SESAL. 6 Grupo de Investigación Historia. 7 Departamento de Ciencias Fisiológicas, UNAH. Autor corresponsal: Mayra Gabriela Handal Lorenzana. mayr_gt@hotmail.com Recibido: 15/04/2021 Aceptado: 28/06/2021 Conclusiones: no hubo difer encia entr e edad (p=0.528) y sexo (p=0.245) en cuanto a los resultados del ELISA. Un tercio de los sujetos a los que se detectó algún anticuerpo no refirieron nexo epidemiológico. Las profesiones u ocupaciones más afectadas fueron las de riesgo medio y los síntomas identificados más frecuentes fueron fiebre, cefalea y odinofagia...(AU)

Relevancia epidemiológica y clínica de la técnica elisa para SARS-COV-2 en Tegucigalpa y Comayaguela, Honduras / Epidemiological and clinical relevance of the ELISA Technique for SARS-COV-2 in Tegucigalpa and Comayagüela, Honduras

El virus SARS-CoV-2, es responsable de la enfermedad COVID-19; para su detección indirecta se utilizan inmunoensayos que cuantifican anticuerpos séricos contra algunas de sus proteínas. Objetivo: documentar resultados de la técnica ELISA, para la identificación cualitativa de anticuerpos contra SARS-CoV-2 en sujetos de Tegucigalpa y Comayagüela y la determinación de relevancia epidemiológica y clínica que presenta esta prueba. Material y Métodos: estudio correlacional transversal de 596 sujetos, a quienes se les practicó ELISA para la determinación de anticuerpos contra el SARS-CoV-2. Se recolectó datos epidemiológicos y clínicos del 13 de mayo al 31 de agosto 2020. Resultados: se analizó datos de 492 sujetos, 271 mujeres y 221 hombres, 313 de Tegucigalpa y 179 de Comayagüela. La edad media fue de 42.1 años; 253 tuvieron nexo epidemiológico negativo y 239 fueron positivos, se identificaron 88 profesiones, con base en la clasificación del Departamento de Trabajo de Estados Unidos y se categorizaron en grupos de riesgo bajo, medio y alto. Se encontraron 12 síntomas clínicos y 2 enfermedades concomitantes. De acuerdo al resultado de la prueba ELISA, los resultados se estructuraron en cuatro grupos: IgM e IgG negativos, IgM positivos, IgM e IgG positivos e IgG positivos, los que se asociaron con las variables epidemiológicas y clínicas. Los habitantes de Comayagüela presentaron mayor número de casos de ELISA positiva en comparación con los de Tegucigalpa. 1Facultad de Ciencias Médicas, UNAH. 2 Laboratorios Molina, Tegucigalpa, Honduras. 3 Western International School, San Pedro Sula. 4 Grupo de Investigación Historia. 5 Dirección General de Documentos Normativos, SESAL. 6 Grupo de Investigación Historia. 7 Departamento de Ciencias Fisiológicas, UNAH. Autor corresponsal: Mayra Gabriela Handal Lorenzana. mayr_gt@hotmail.com Recibido: 15/04/2021 Aceptado: 28/06/2021 Conclusiones: no hubo difer encia entr e edad (p=0.528) y sexo (p=0.245) en cuanto a los resultados del ELISA. Un tercio de los sujetos a los que se detectó algún anticuerpo no refirieron nexo epidemiológico. Las profesiones u ocupaciones más afectadas fueron las de riesgo medio y los síntomas identificados más frecuentes fueron fiebre, cefalea y odinofagia.

Phase II validation study of the rK39 ELISA prototype for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis in Brazil / Estudo de validação da fase II do teste ELISA rK39 para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina no Brasil / Estudio de validación de la fase II del test ELISA rK39 para el diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina en Brasil

Abstract: Dogs are the main reservoirs in the domestic transmission cycle of visceral leishmaniasis, and the diagnosis is essential for the effectiveness of the control measures recommended by the Brazilian Ministry of Health. We assessed the diagnostic performance of the ELISA-Vetlisa/BIOCLIN prototype with serum samples from 200 dogs, in triplicate, including symptomatic, oligosymptomatic, asymptomatic, and healthy dogs, originated by two distinct panels (A and B) characterized by parasitological tests as the reference standard. In this study, the prototype kit showed a 99% sensitivity (95%CI: 94.5-100.0) and a 100% specificity (95%CI: 96.4-100.0). The sensitivity of the prototype kit did not vary significantly with the clinical status of the dogs. Considering the final result classification (positive or negative), agreement between the results of repeated tests was almost perfect (kappa = 0.99; 95%CI: 0.98-1.00). ELISA-Vetlisa/BIOCLIN is a promising option for the serological diagnosis of canine visceral leishmaniasis in Brazil.

Resumo: Os cães são os principais reservatórios do ciclo de transmissão domiciliar da leishmaniose visceral, e o diagnóstico é essencial para a efetividade das medidas de controle recomendadas pelo Ministério da Saúde. Os autores avaliam o desempenho diagnóstico do protótipo da ELISA-Vetlisa/BIOCLIN em amostras sorológicas de 200 cães, em triplicata, incluindo cães sintomáticos, oligossintomáticos e saudáveis, com dois painéis distintos (A e B) caracterizados por testes parasitológicos enquanto referência. No estudo, o kit-protótipo mostrou sensibilidade de 99% (IC95%: 94,5-100,0) e especificidade de 100% (IC95%: 96,4-100,0). A sensibilidade do kit-protótipo não variou de maneira significativa de acordo com o estado clínico dos cães. Considerando a classificação final dos resultados (positivo ou negativo), a concordância entre os resultados dos testes em triplicata foi quase perfeita (kappa = 0,99; IC95%: 0,98-1,00). O protótipo ELISA-Vetlisa/BIOCLIN tem o potencial de ser utilizada para o diagnóstico sorológico da leishmaniose visceral canina no Brasil.

Resumen: Los perros son los principales reservorios en el ciclo de transmisión doméstica de la leishmaniasis visceral, por ello el diagnóstico es esencial para la efectividad de las medidas de control recomendadas por el Ministerio de Salud de Brasil. Evaluamos el desempeño diagnóstico de ELISA-Vetlisa/BIOCLIN prototipo con muestras de sérum de 200 perros, en triplicado, incluyendo sintomático, oligosintomático, asintomático y perros sanos, originadas por dos paneles distintos (A y B), caracterizados por test parasitológicos como referencia estándar. En este estudio, el kit prototipo mostró un 99% de sensibilidad (IC95%: 94,5-100,0) y un 100% de especificidad (IC95%: 96,4-100,0). La sensibilidad del kit prototipo no varió significativamente con el estatus clínico de los perros. Considerando la clasificación final del resultado (positiva o negativa), el acuerdo entre los resultados de los tests repetidos fue casi perfecto (kappa = 0,99; IC95%: 0,98-1,00). ELISA-Vetlisa/BIOCLIN tiene potencial para ser usado para el diagnóstico serológico de la leishmaniasis visceral canina en Brasil.

Serodiagnóstico de Paratuberculosis en bovinos del municipio de Sogamoso, Boyacá (Colombia) / Serodiagnosis of Paratuberculosis in cattle of the municipality of Sogamoso, Boyacá (Colombia) / Serodiagnóstico da paratuberculose no gado do municipio de Sogamoso, Boyacá (Colômbia)

RESUMEN La Paratuberculosis Bovina (PTB) o Enfermedad de Johne, es una infección del tracto gastrointestinal causada por Mycobacterium avium, subespecie paratuberculosis (Map), que se caracteriza por generar enteritis granulomatosa crónica y linfadenitis en rumiantes. La preocupación más relevante en relación con la importancia de la PTB es su posible vínculo con la Enfermedad de Crohn (EC) en humanos, sin embargo, esta asociación aún está bajo investigación. Se determinó la seroprevalencia de PTB en el municipio de Sogamoso (Boyacá), donde se recolectaron 604 muestras de sangre, cuyo suero fue procesado mediante la técnica de ELISA indirecta con el kit comercial PARACHEK® 2 KIT (Prionics, Suiza). La seroprevalencia fue de 10,9% (66/604), donde el grupo etario de 2 a 3 años y la raza Jersey fueron los de mayor seroprevalencia. Se encontró asociación estadística significativa (p≤0,05) entre la edad de los individuos evaluados y el suministro de concentrado. La seroprevalencia encontrada indica que se está produciendo una transmisión activa de la enfermedad y que las medidas de control disponibles no están siendo llevadas a cabo o no son lo suficientemente efectivas.

ABSTRACT Bovine Paratuberculosis (BPT), or Johne's Disease, is an infection of the gastrointestinal tract caused by Mycobacterium avium, subspecies paratuberculosis (Map), which is characterized by chronic granulomatous enteritis and lymphadenitis in ruminants. The most relevant concern regarding the importance of BPT is its possible link to Crohn's disease (CD) in humans, however this association is still under investigation. The seroprevalence of BPT was determined in the municipality of Sogamoso (Boyacá), where 604 blood samples were collected, their serum was processed by the indirect ELISA technique with the commercial PARACHEK® 2 KIT (Prionics, Switzerland), following the manufacturer's instructions. The seroprevalence was 10,9% (66/604), with the 2 to 3 years age group and the Jersey breed having the highest seroprevalence. A significant statistical association was found (p≤0,05) with the age of the individuals tested and the supply of concentrate. The seroprevalence found indicates that active transmission of the disease is taking place, and that the available control measures are not being carried out or are not effective enough.

RESUMO A Paratuberculose Bovina (PTB) ou Doença de Johne é uma infecção do trato gastrointestinal causada pela Mycobacterium avium subespécie paratuberculosis (Map), caracterizada por gerar enterite granulomatosa crónica e linfadenite em ruminantes. A preocupação mais relevante em relação à importância do PTB é seu possível vínculo com a Doença de Crohn (DC) em seres humanos, no entanto, essa associação ainda está sob investigação. A soroprevalência do PTB foi determinada no município de Sogamoso (Boyacá), onde foram coletadas 604 amostras de sangue, cujo soro foi processado pela técnica ELISA indireta com o kit comercial PARACHEK® 2 KIT (Prionics, Suíça). A soroprevalência foi de 10,9% (66/604), onde a faixa etária de 2 a 3 anos e a raça Jersey foram as que apresentaram maior soroprevalência. Foi encontrada associação estatisticamente significante (p≤0,05) com a idade dos indivíduos avaliados e o suprimento de concentrado. A soroprevalência encontrada indica que a transmissão ativa da doença está ocorrendo e que as medidas de controle disponíveis não estão sendo realizadas ou não são eficazes o suficiente.

Lymphocyte B and Th17 chemotactic cytokine levels in peri-implant crevicular fluid of patients with healthy, peri-mucositis, and peri-implantitis implants / Niveles de citoquinas quimiotácticas de linfocitos B y Th17 en el fluido crevicular periimplantario de pacientes con implantes sanos, perimucositis y periimplantitis

Peri-implantitis is one of the leading causes of implant failure and loss, and its early diagnosis is not currently feasible due to the low sensitivity of currents methods. In the current exploratory cross-sectional study, we explored the diagnostic potential of lymphocyte B and Th17-chemotactic cytokine levels in peri-implant crevicular fluid (PICF) in 54 patients with healthy, peri-mucositis, or peri-implantitis implants. Peri-implant crevicular fluid was collected, and the levels of the molecules under study were quantified by Luminex assay. The concentrations of CCL-20 MIP-3 alpha, BAFF/BLYS, RANKL and OPG concentration in PICF were analyzed in the context of patient and clinical variables (smoking status, history of periodontitis, periodontal diagnosis, implant survival, suppuration, bleeding on probing, periodontal probing depth, clinical attachment level, mean of implant probing depth, and plaque index). Patients with peri-implantitis, appear to have an overregulation of the RANKL/BAFF-BLyS axis. This phenomenon needs to be investigated in depth in further studies with a larger sample size.

La periimplantitis es una de las principales causas de falla y pérdida del implante, y su diagnóstico temprano no es factible debido a la baja sensibilidad de los métodos actuales. En este estudio transversal exploratorio, se estudió el potencial diagnóstico de los niveles de citocinas quimiotácticas de linfocitos B y Th17 en el líquido crevicular periimplantario (LCPI) en 54 pacientes con implantes sanos, peri-mucositis o periimplantitis. Se recogió líquido crevicular periimplantario y se cuantificaron los niveles de las moléculas estudiadas mediante Luminex assay. Las concentraciones de CCL-20 MIP-3 alfa, BAFF/BLYS, RANKL y la concentración de OPG en LCPI se analizaron en el contexto de las variables clínicas y del paciente (tabaquismo, antecedentes de periodontitis, diagnóstico periodontal, supervivencia del implante, supuración, sangrado al sondaje, profundidad de sondeo periodontal, nivel de inserción clínica, media de la profundidad de sondeo del implante e índice de placa). Los pacientes con periimplantitis parecen tener una sobrerregulación del eje RANKL/BAFF-BLyS. Este fenómeno debe investigarse en profundidad en futuros estudios con un tamaño de muestra mayor.

Detección de trazas de soja y de leche en productos libres de gluten: desarrollo de dos enzimoinmunoensayos competitivos / Detection of traces of soy and milk in gluten-free products: development of two competitive enzyme immunoassays / Detecção de vestígios de soja e leite em produtos livres de glúten: desenvolvimento de dois enzimoimunoensaios competitivos

Resumen El objetivo del presente trabajo fue el desarrollo de dos enzimoinmunoensayos competitivos (EIC) para la detección de trazas de soja y de leche en productos libres de gluten. Como anticuerpos primarios se utilizaron antisueros policlonales de conejo específicos contra proteínas de soja o de leche. Se determinaron las concentraciones óptimas de antígenos a inmovilizar en la placa y las concentraciones de anticuerpos primarios a utilizar en la competencia. Las curvas de calibración se ajustaron utilizando concentraciones crecientes de un extracto de producto de soja y de un extracto de leche descremada en polvo. El producto de soja y la leche descremada se extrajeron con buffer Tris-HCl 0,0625 M con dodecilsulfato de sodio al 3% y sulfito de sodio 0,1 M al 2%. Se evaluaron los parámetros de validación: linealidad, límites de detección y de cuantificación, recuperación y precisión en el día y entre días, los cuales resultaron adecuados. Se analizaron 9 productos libres de gluten con los EIC desarrollados y con kits de ELISA comerciales. Ambos EIC se comportaron de manera similar con respecto a los kits comerciales. Los EIC permitieron confirmar la presencia de leche en las muestras que la declaraban. En algunas muestras que no declaraban ni leche ni soja, ambos EIC detectaron su presencia (resultados confirmados con los kits comerciales). Los EIC desarrollados poseen menor costo que los kits y, por lo tanto, éstos podrían utilizarse como métodos de screening. Cuando esta metodología resulte negativa, debe confirmarse con un método más sensible (comercial) para garantizar la ausencia de proteínas de soja o de leche.

Abstract The aim of this study was to develop two competitive enzyme immunoassays (CEI) to detect the presence of traces of soy and milk in gluten-free products. Specific rabbit polyclonal antiserums against soy protein and other against elemilk protein were used as primary antibodies. Optimal antigen concentrations to be immobilized on the plate and primary antibody concentrations to be used in competition were determined. The calibration curves were fitted using increasing concentrations of an extract of soy product and of defatted milk powder. The soy product and the defatted milk were extracted with Tris-HCl buffer 0,0625 M with 3% sodium dodecyl sulfate and 2% sodium sulfite 0.1 M. The validation parameters were evaluated: linearity, limit of detection and quantification, recovery and precision on the day and in between days. They were appropriate. Nine commercial samples of gluten-free products were analyzed with these developed CEI and commercial ELISA kits. It was observed that both CEI behaved similarly with respect to the commercial kits. The enzyme immunoassays confirmed the presence of milk in samples that declared it. In some samples that did not declare the presence of milk or soy, both enzyme immunoassays detected their presence -these results were confirmed using commercial kits. The developed CEI have a lower cost than the commercial kits, so these could be used as screening methods. When this methodology is negative, it should be confirmed with a more sensitive (commercial) method to ensure the absence of soy or milk protein.

Resumo O objetivo do presente trabalho foi o desenvolvimento de dois enzimoimunoensaios competitivos (EIC), para a detecção de vestígios de soja e leite em produtos livres de glúten. Antissoros policlonais de coelho específicos contra proteínas de soja ou de leite foram utilizados como anticorpos primários. Foram determinadas as concentrações ótimas de antígenos a serem imobilizados na placa e as concentrações de anticorpos primários a serem utilizadas na competição. As curvas de calibração foram ajustadas usando concentrações crescentes de um extrato de produto de soja e de um extrato de leite em pó desnatado. O produto de soja e o leite desnatado foram extraídos com tampão Tris-HCl 0,0625 M com dodecil sulfato de sódio a 3% e sulfito de sódio 0,1 M a 2%. Os parâmetros de validação foram avaliados: linearidade, limite de detecção e quantificação, recuperação e precisão no dia e entre os dias, os quais resultaram adequados. Nove produtos livres de glúten foram analisados com os EIC desenvolvidos e com kits de ELISA comerciais. Os dois EICs se comportaram de maneira semelhante em relação aos kits comerciais. Os EIC permitiram confirmar a presença de leite nas amostras que o declararam. Em algumas amostras que declaravam nem leite nem soja, ambos os EIC detectaram sua presença (resultados confirmados usando kits comerciais). Os EIC desenvolvidos têm um custo menor que os kits, portanto, eles poderiam ser utilizados como métodos de triagem. Quando esta metodologia é negativa, deve ser confirmada com um método mais sensível (comercial) para garantir a ausência de proteínasda soja ou do leite.

Infección por Trypanosoma cruzi en mujeres puérperas y sus neonatos en Barcelona, estado Anzoátegui, Venezuela / Trypanosoma cruzi infection in puerperal women and their neonates at Barcelona, Anzoategui State, Venezuela

Introducción. Trypanosoma cruzi se transmite principalmente por vía vectorial, sin embargo, las rutas oral y congénita han tomado relevancia. Objetivo. Evaluar la infección por T. cruzi en mujeres puérperas y sus neonatos en el Hospital Universitario Dr. Luis Razetti de Barcelona, estado Anzoátegui, Venezuela. Materiales y métodos. Se hizo un estudio prospectivo de corte transversal, de mayo de 2015 a agosto de 2016, en el que se evaluaron 1.200 mujeres para determinar la infección mediante las pruebas ELISA, MABA e IFI. Los neonatos de las madres seropositivas se evaluaron con la prueba de PCR y por serología a los nueve meses de edad. Se estimó la prevalencia de la infección por T. cruzi en mujeres puérperas y sus neonatos. Para establecer los factores de riesgo asociados a la infección, se usó la prueba de ji al cuadrado (c2) y la razón de probabilidad (OR). Resultados. En total, 78 (6,50 %) mujeres resultaron positivas (IC95% 5,10-7,89 %). En seis (9,09 %) recién nacidos de madres seropositivas, se detectó ADN parasitario. Tras nueve meses de nacidos, once lactantes evaluados resultaron serológicamente negativos. La infección estuvo asociada con la duración del embarazo (OR=0,36; IC95% 0,15-0,84), origen del domicilio actual (OR=0,34; IC95% 0,24-0,62) o previo (OR=2,50; IC95% 1,38-4,52) y el tener familiares con la enfermedad de Chagas (OR=1,75; IC95% 1,02-3,01). Conclusiones. La seroprevalencia para la infección por T. cruzi en mujeres puérperas del medio rural, fue elevada. La detección de ADN parasitario al momento del nacimiento no es indicativa de enfermedad de Chagas congénita.

Introduction. Trypanosoma cruzi is mainly transmitted by vectors. Other pathways such as oral and congenital transmission have become increasingly relevant. Objective. To evaluate T. cruzi infections in post-partum women and their newborns who attended the Hospital Universitario Dr. Luis Razetti (Barcelona, Anzoátegui state, Venezuela). Materials and methods. A prospective cross-sectional study was undertaken from May, 2015, to August, 2016. ELISA, MABA and IFI assays were used to determine the infection in 1,200 post-partum women. The newborns of seropositive women were then examined for T. cruzi by PCR amplification and serological tests at nine months old. The prevalence of the parasitic infection in post-partum women and their newborns was then estimated. To establish the relationship between risk factors and infection, the chi-square test (c2) and the probability ratio (OR) was applied. Results. A total of 78 women were identified as seropositive (6.50 %) (CI 95%: 5.10-7.89%), and parasitic DNA was detected in six of their newborns (9.09%). Nine months after birth eleven infants were examined, and all were found to be serologically negative. Risk factors detected were pregnancy duration (OR: 0,36; CI95%: 0,15-0,84), where the patients lived at present (OR: 0,34; CI95%: 0,24-0,62) or previously (OR: 2,50; CI95%: 1,38-4,52) and having relatives with Chagas disease (OR: 1,75; CI95%: 1,02-3,01). Conclusions. Seroprevalence for T. cruzi infection in young post-partum women in rural areas was high. The detection of parasite DNA at birth was not indicative of congenital Chagas disease.

False-positive fourth-generation hiv test associated with autoimmune hemolytic anemia. case report

ABSTRACT Introduction: The fourth-generation ELISA human immunodeficiency virus (HIV) screening test has a high sensitivity and specificity >99% to detect both antigens and antibodies. Estimates are that only 0.5% yield false positive results. Case description: 61-year-old female patient with a clinical picture consisting of malaise, unqualified fever, asthenia and adynamia. Laboratory tests revealed anemia, so a Coombs test was performed, obtaining a positive result along with other findings of mixed autoimmune hemolytic anemia. Two fourth-generation ELISA HIV screening tests were performed obtaining positive results. Given the national recommendations on the diagnosis of HIV infection, a viral load was performed, which turned out to be negative, so the result was considered a false positive. Discussion: Clinical and biological factors are related to false positive results. There are descriptions about autoimmunity phenomena, such as systemic lupus erythematosus or autoimmune hemolytic anemia, with few cases in older adults. Conclusions: Rapid tests have changed the diagnosis of HIV infection worldwide; however, like any other diagnostic test, they may yield false positive results with differential diagnoses, including autoimmune hemolytic anemia.

RESUMEN Introducción. La prueba de tamizaje para virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) con ELISA de cuarta generación tiene gran sensibilidad y una especificidad >99% para detectar tanto antígenos como anticuerpos. Se estima que solo el 0.5% son falsos positivos. Presentación del caso. Paciente femenino de 61 años con cuadro clínico consistente en malestar general, fiebre no cuantificada, astenia y adinamia. En los paraclínicos se evidenció anemia, por lo que se realizó prueba de Coombs, la cual resultó positiva junto con otros hallazgos de anemia hemolítica autoinmune mixta. Se realizaron dos pruebas de tamizaje para VIH con técnica ELISA de cuarta generación que fueron positivas. Dadas las recomendaciones nacionales sobre el diagnóstico de la infección por VIH, se realizó una carga viral que resultó ser negativa, por lo que se consideró el resultado como un falso positivo. Discusión. Factores clínicos y biológicos se relacionan con resultados falsos positivos. Existen descripciones sobre fenómenos de autoinmunidad, como el lupus eritematoso sistémico o la anemia hemolítica autoinmune, con pocos casos en adultos mayores. Conclusiones. Las pruebas rápidas han cambiado el diagnóstico de la infección por VIH en el mundo; sin embargo, como toda prueba diagnóstica, tienen falsos positivos con diagnósticos diferenciales, incluidos la anemia hemolítica autoinmune.

Clinical, laboratorial diagnosis and prophylaxis of measles in Brazil / Diagnóstico clínico, laboratorial e profilático do sarampo no Brasil

ABSTRACT Measles is an acute febrile exanthematic disease of viral etiology, highly contagious, being the cause of morbidity and mortality of children in developing countries, whereas it has become rarer in developed countries due to vaccination. Its differential diagnosis should be made with other childhood viral respiratory diseases such as influenza, rhinovirus and adenovirus, and exanthematic febrile diseases such as rubella, roseola and varicella. In tropical regions, it should be performed with dengue, zika and chikungunya. Its clinical picture presents the following phases: incubation, usually asymptomatic; a prodrome, in which fever, malaise, coryza can occur, besides Koplik's signs; exanthematic, with presence of maculopapular exanthema after the fever condition that progresses to a craniocaudal evolution, with clinical improvement in uncomplicated cases. Common complications are pneumonia, otitis media, keratitis; the rarest are acute disseminated encephalomyelitis and subacute sclerosing panencephalitis. Nonspecific laboratory alterations are seen in the blood count. The specific laboratory diagnosis is based on the detection of viral ribonucleic acid (RNA) [polymerase chain reaction (PCR) of nasal swab samples, oral mucosa or urine]. Immunoglobulin class M (IgM) can be detected during the exanthematous period by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and immunoglobulin class G (IgG) throughout the convalescence period, and the detection of specific IgG by the plaque reduction neutralization test may also be performed. The prophylaxis of the disease is based on vaccination in children from 15 months in order to reach about 85% to 95% of the population, what confers herd immunity. Thus, vaccination is the most effective measure in combating measles, since the treatment consists only of clinical and symptomatic support.

RESUMEN El sarampión es una enfermedad exantemática febril aguda de etiología viral altamente contagiosa. Causa morbilidad y mortalidad de niños en países en desarrollo, mientras que se hizo más raro en países desarrollados gracias a la vacunación. El diagnóstico diferencial se hace con otras enfermedades infantiles, como influenza, rinovirus, adenovirus, rubéola, roséola y varicela. En regiones tropicales, incluye dengue, zika y chikungunya. Su cuadro clínico presenta las siguientes fases: incubación - en general asintomática; pródromo - en la cual pueden ocurrir fiebre, malestar y coriza, además de manchas de Koplik; y la exantemática - con presencia de exantema máculo-papular después del cuadro febril, que se disemina desde la cara a tronco y extremidades, con mejora clínica en casos no complicados. Complicaciones comunes son neumonía, otitis media y queratoconjuntivitis; las más raras, encefalomielitis aguda diseminada y panencefalitis esclerosante subaguda. Alteraciones inespecíficas de laboratorio son vistas en el hemograma. El diagnóstico específico de laboratorio se basa en el aislamiento del ácido ribonucleico (ARN) viral (PCR de muestras nasales, mucosa oral u orina). La inmunoglobulina M (IgM) pude ser detectada durante el período exantemático por ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas (ELISA); la inmunoglobulina G (IgG), a lo largo del período de convalecencia, y la detección de IgG específica por la prueba de neutralización por reducción de placa. La profilaxis de la enfermedad se basa en vacunación en niños desde los 15 meses de edad, buscando alcanzar 85%-95% de la población, lo que confiere inmunidad de grupo. La vacunación es la medida más eficaz en el combate al sarampión, puesto que el tratamiento consiste sólo en soporte clínico.

RESUMO O sarampo é uma doença exantemática febril aguda de etiologia viral altamente contagiosa. É causa de morbidade e mortalidade de crianças em países em desenvolvimento, ao passo que se tornou mais rara em países desenvolvidos devido à vacinação. O diagnóstico diferencial deve ser realizado em relação a outras doenças da infância, como influenza, rinovírus, adenoviroses, rubéola, roséola e varicela. Já em regiões tropicais, inclui dengue, vírus da zika e chikungunya. Seu quadro clínico apresenta as seguintes fases: a de incubação - em geral assintomática; a prodrômica - na qual podem ocorrer febre, mal-estar e coriza, além de sinais de Koplik; e a exantemática - com presença de exantema maculopapular após o quadro febril, que progride de forma craniocaudal, com melhora clínica em casos não complicados. Complicações comuns são pneumonia, otite média e ceratoconjuntivite; as mais raras, encefalomielite disseminada aguda e panencefalite esclerosante subaguda. Alterações laboratoriais inespecíficas são vistas no hemograma. O diagnóstico laboratorial específico baseia-se na detecção do ácido ribonucleico (RNA) viral [reação em cadeia da polimerase (PCR) de amostras de swab nasal, mucosa oral ou urina]. Imunoglobulina da classe M (IgM) pode ser detectada durante o período exantemático por ensaio de imunoadsorção enzimática (ELISA) e imunoglobulina da classe G (IgG), ao longo do período de convalescença, podendo também ser realizada a detecção de IgG específica pelo teste de neutralização por redução de placas. A profilaxia da doença é baseada na vacinação em crianças a partir dos 15 meses de idade, visando atingir cerca de 85% a 95% da população, o que confere imunidade de rebanho. A vacinação é a medida mais eficaz no combate ao sarampo, visto que o tratamento consiste apenas em suporte clínico.

Salivary rheumatoid factor in primary and secondary Sjögren's syndrome / Factor reumatoide salival en síndrome de Sjögren primario y secundario

Sjögren's syndrome is a chronic autoimmune disease, characterized by the presence of hyposalivation and xerophthalmia, which in addition to other factors is diagnosed by the presence of rheumatoid factor in blood. The objective of the present study is to evaluate the presence of rheumatoid factor (IgG-IgM) in the saliva of patients with primary and secondary Sjögren's syndrome. Materials and methods: Forty samples from patients with primary and secondary Sjögren's syndrome previously diagnosed by the Arthritis and Rheumatism Specialist Center of the Autonomous University of Nuevo Leon were analyzed. Samples were taken from the saliva using the Carlson-Crittenden device to evaluate the IgG-IgM immunocomplex using the ELISA method. Results: No significant difference was found between the presence of IgM in primary (0.099±0.016) and secondary Sjögren syndrome (0.098±0.017), however, a high presence of IgG was found in the group of patients with secondary Sjögren's syndrome (0.134±0.054). Conclusion: The search for diagnostic tools using salivary biomarkers has come with economic and clinical advantages, however, in the present study no significant changes were found in salivary rheumatoid factor between both groups.

El síndrome de Sjögren es una enfermedad autoinmune crónica, caracterizada por la presencia de hiposalivación y xeroftalmia, la cual además de otros factores es diagnosticada por la presencia del factor reumatoide en sangre. El objetivo del presente estudio es evaluar la presencia del factor reumatoide (IgG-IgM) en saliva parotídea de pacientes con síndrome de Sjögren primario y secundario. Materiales y métodos: Se analizaron 40 muestras de pacientes con síndrome de Sjögren primario y secundario previamente diagnosticados por el Centro de Especialistas en Artritis y Reumatismo de la Universidad Autónoma de Nuevo León, a los cuales se les tomó una muestra de saliva parotídea mediante el dispositivo Carlson-Crittenden para evaluar mediante el método ELISA el inmunocomplejo IgG-IgM. Resultados: No se encontró diferencia significativa entre la presencia de IgM en el síndrome de Sjögren primario (0.099±0.016) y secundario (0,098±0,017), sin embargo en cuanto a la presencia de la IgG se encontró elevada en el grupo de pacientes con síndrome de Sjögren secundario (0,134±0,054). Conclusión: La búsqueda de herramientas diagnósticas mediante biomarcadores salivales ha traído consigo ventajas económicas y clínicas, sin embargo en el presente estudio no se encontró un cambio significativo en el factor reumatoide salival entre ambos grupos.

Chlamydia trachomatis en mujeres en etapa reproductiva con actividad sexual / Chlamydia trachomatis in women in reproductive stage with sexual activity

Objetivo: Determinar la prevalencia de Chlamydia trachomatis y sus factores condicionantes en mujeres en etapa reproductiva con actividad sexual. Materiales y métodos: Después de ser instruidas acerca del estudio, las pacientes acordaron su participación voluntaria y brindaron la información para el llenado de la ficha de recolección de datos. Se estimó un mínimo de 90 pacientes a incluir en el estudio que fueron seleccionadas por un muestreo por conveniencia. Se extrajo una muestra sanguínea y se utilizó el método de ELISA para determinar la presencia de anticuerpos IgG anti-Ch. trachomatis. Resultados: Se evidenció una prevalencia de infección del 10%. La frecuencia de infección se asoció a ser soltera, al cambio de pareja y la ausencia de leucorrea inespecífica. La edad, el grado de instrucción y la procedencia no tuvieron significancia estadística. Conclusiones: Se debe descartar el diagnóstico presuntivo de infección por Ch. trachomatis. Asimismo, su detección debería ser incluida dentro de los análisis requeridos por los consultorios de ginecología para lograr un diagnóstico que permita un tratamiento oportuno. (AU)

Objective: To determine the prevalence of Chlamydia trachomatis and its conditioning factors in reproductive stage women with sexual activity. Materials and methods: After being instructed about the study, the patients agreed to their voluntary participation and provided the information for filling out the data collection form. We estimated a minimum of 90 patients to be included in the study who were selected by a convenience sampling. A blood sample was taken and the ELISA method was used to determine the presence of anti-Ch trachomatis IgG antibodies. Results: An infection prevalence of 10% was evidenced. The frequency of infection was associated with being single, changing partners and the absence of nonspecific leucorrhoea. The age, the level of education and the origin did not have statistical significance. Conclusions: The presumptive diagnosis of Ch. trachomatis infection should be ruled out. Likewise, its detection should be included in the analyzes required by the gynecology offices to achieve a diagnosis that allows timely treatment. (AU)

A quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of anti-double-stranded DNA IgG antibodies / Reação imunoenzimática (ELISA) quantitativa para detecção de anticorpos IgG anti-DNA de dupla hélice

ABSTRACT Introduction: The detection of anti-double-stranded (ds) deoxyribonucleic acid (DNA) antibodies is one of the classification criteria for diagnosing systemic lupus erythematosus (SLE). Objective: To describe a quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting anti-dsDNA immunoglobulin class G (IgG) antibodies. Methods: The performance of ELISA was evaluated using the Crithidia luciliae indirect immunofluorescence test (CLIFT) as a reference. Anti-dsDNA IgG antibodies were screened by ELISA and CLIFT in serum samples from 127 patients with SLE, 56 patients with other diseases and 37 healthy persons. The Cochran Q test was used to compare the sensitivity and specificity of the reactions, with differences among the results being considered significant when p ≤ 0.05. Results: ELISA had a sensitivity of 92.9% and a specificity of 94.6%, whereas the sensitivity and specificity of CLIFT were 85.8% and 100%, respectively. ELISA was significantly more sensitive than CLIFT (p = 0.0027), whereas CLIFT was significantly more specific than ELISA (p = 0.0253). Conclusion: ELISA showed excellent results in terms of sensitivity and specificity, with a potential use in research and routine diagnostics.

RESUMEN Introducción: La detección de anticuerpos contra el ácido desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena (dc) es uno de los criterios de clasificación para el diagnóstico de lupus eritematoso sistémico (LES). Objetivo: Describir una técnica inmunoenzimática (ELISA) cuantitativa para detección de anticuerpos de inmunoglobulina de clase G (IgG) anti-ADNdc. Métodos: Se evaluó el desempeño de la técnica ELISA mediante el test inmunofluorescencia indirecta con Crithidia luciliae (IFI-CL) como referencia. Anticuerpos IgG anti-ADNdc fueron analizados por ELISA y IFI-CL en muestras de sueros de 127 pacientes con LES, 56 pacientes con otras enfermedades y 37 personas sanas. La prueba Q de Cochran fue utilizada para comparar la sensibilidad y la especificidad de las reacciones considerando diferencias significantes entre los tests cuando p ≤ 0,05. Resultados: La técnica ELISA mostró sensibilidad del 92,9% y especificidad del 94,6%, mientras la sensibilidad y la especificidad de la técnica IFI-CL fueron del 85,8% y 100%, respectivamente. La técnica ELISA mostró sensibilidad significativamente mayor que la obtenida con IFI-CL (p = 0,0027); esta mostró especificidad significativamente mayor que la obtenida con ELISA (p = 0,0253). Conclusión: La técnica ELISA presentó resultados excelentes de sensibilidad y especificidad, con el potencial de ser utilizada en investigación y rutina diagnóstica.

RESUMO Introdução: A detecção de anticorpos contra o ácido desoxirribonucleico (DNA) nativo (ds) é um dos critérios de classificação para o diagnóstico do lúpus eritematoso sistêmico (LES). Objetivo: Descrever uma técnica imunoenzimática enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) quantitativa para a detecção de anticorpos imunoglobulina da classe G (IgG) anti-DNAds. Métodos: O desempenho da técnica ELISA foi avaliado utilizando o teste de imunofluorescência indireta com Crithidia luciliae (CLIFT) como referência. Anticorpos IgG anti-DNAds foram pesquisados por ELISA e CLIFT em amostras de soros de 127 pacientes com LES, 56 pacientes com outras doenças e 37 indivíduos sadios. O teste Q de Cochran foi utilizado para comparar as sensibilidades e as especificidades das reações, considerando diferenças significantes entre os testes quando p ≤ 0,05. Resultados: A técnica ELISA apresentou sensibilidade de 92,9% e especificidade de 94,6%, enquanto a sensibilidade e a especificidade da técnica CLIFT foram de 85,8% e 100%, respectivamente. A técnica ELISA apresentou sensibilidade significativamente maior do que a obtida com a técnica CLIFT (p = 0,0027); esta apresentou especificidade significativamente maior do que a obtida com a técnica ELISA (p = 0,0253). Conclusão: A técnica ELISA apresentou excelentes resultados em termos de sensibilidade e especificidade, podendo ser útil em pesquisa e rotina diagnóstica.

Serological status of IBR, BVD, leucosis, Leptospira and Neospora caninum in bovine females of the department of Santander, Colombia / Estado serológico a IBR, DVB, Leucosis, Leptospira y Neospora caninum en hembras bovinas del Departamento de Santander, Colombia

Abstract Objective. To determine the serological status of bovine females for infectious bovine rhinotracheitis (IBR), bovine viral diarrhea (BVD), leucosis, Leptospira and Neospora caninum in the department of Santander, Colombia. Materials and methods. Convenience sampling was conducted on 460 cattle farms in 23 municipalities of Santander (Colombia). The collected sera were analyzed using different commercial ELISA kits following the manufacturer's instructions. Results. Seroreactive animals were found for all diseases studied, with general prevalence rates of 21.8% for leucosis, 26.1% for Leptospira, 29.7% for BVD, 48.2% for IBR and 63% for Neospora. Conclusions. The prevalence rates of the diseases analyzed in the department of Santander among the bovine population fluctuate from medium to high and thus require official control measures.

Resumen Objetivo. Conocer el estado serológico de hembras bovinas a IBR, DVB, leucosis, leptospira y Neospora caninum en el departamento de Santander, Colombia. Materiales y métodos. Se realizó un muestreo por conveniencia en 460 fincas ganaderas de 23 municipios de Santander (Colombia), los sueros colectados fueron analizados mediante diferentes kits comerciales de ELISA siguiendo las instrucciones del fabricante. Resultados. En todas las enfermedades estudiadas se encontraron animales seroreactores, correspondiendo la prevalencia general a Leucosis 21.8%, Leptospira 26.1%, DVB 29.7%, IBR 48.2% y Neospora 63%. Conclusiones. En el departamento de Santander las enfermedades analizadas se encuentran en la población bovina con prevalencias que fluctúan entre medio a alto, lo cual requiere medidas de control oficial.

Anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi en migrantes latinoamericanos en tránsito por el cruce fronterizo entre México y los Estados Unidos / Anti-Trypanosoma cruzi antibodies in Latin American migrants in transit through the México-USA border

Resumen Introducción. En los últimos años, la tripanosomiasis americana se ha convertido en un problema de salud pública emergente en países receptores de poblaciones migrantes, como México, Estados Unidos, Canadá y los países europeos. Objetivo. Analizar la prevalencia de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi mediante técnicas serológicas, en los migrantes latinos en su paso hacia Estados Unidos y Canadá. Materiales y métodos. Se hicieron análisis serológicos mediante ELISA y la prueba de hemaglutinación indirecta (HAI) para detectar anticuerpos anti-T. cruzi, y encuestas socioeconómicas para determinar los factores asociados a los casos seropositivos que favorecieron la transmisión en el país de origen de los migrantes. Resultados. La seroprevalencia total en la población estudiada fue del 20 % (24/120). La prevalencia más alta se encontró en migrantes de Guatemala, con 37,5 % (6/16), seguidos de los de Honduras (22,6 %; 12/53), El Salvador (16 %; 4/25) y México (8,7 %; 3/23). De los 120 migrantes encuestados, 105 (87,5 %) reconocieron el vector y 62 (59 %) afirmaron haber sido picados por este. La asociación de la infección con los materiales de construcción de las paredes de las viviendas, así como con la presencia de mascotas (perros) en los hogares, fue muy significativa (p≤0,01). La asociación con el material de construcción del patio, los servicios básicos precarios, así como la cría de animales dentro de corrales en la periferia de los hogares, también fue significativa (p≤0,05). Conclusión. Los países no endémicos que reciben migrantes de zonas endémicas deben mejorar o desarrollar políticas de salud para prevenir la transmisión del parásito por transfusión o por vía congénita.

Abstract Introduction: In recent years, American trypanosomiasis has become an emergent public health problem in countries receiving migrant populations such as México, USA, Canada or those in Europe. Objective: To analyze the prevalence of anti-Trypanosoma cruzi antibodies in Latin American migrants on their way to USA and Canada by means of serological techniques. Material and methods: ELISA and IHA were performed to detect anti-T. cruzi antibodies. Also, each participant filled out a socioeconomic questionnaire to determine the associated factors with seropositive cases, which could facilitate the transmission in the migrants' country of origin. Results: Total seroprevalence among the studied population was 20% (24/120). The highest prevalence was found in migrants from Guatemala with 37.5% (6/16), followed by Honduras (22.6%; 12/53), El Salvador (16%; 4/25), and México (8.7%, 3/23). From the total 120 surveyed migrants, 105 (87.5%) recognized the vector of Chagas' disease, and 62 (59%) assured having been bitten by it. Highly significant statistical associations were found between infection and the construction materials for walls and the presence of pets (dogs) inside houses (p≤0.01), as well as with the building materials for backyards, inadequate basic services, and animal breeding inside corrals built around dwellings (p≤0.05). Conclusion: Non-endemic countries receiving migrants from endemic areas should enhance or develop better health policies to prevent transfusion-transmitted Chagas or congenital parasite transmission.

El caseinato de sodio incrementa número de linfocitos B en ratones / Sodium caseinate increases the number of B lymphocytes in mouse

Introducción. El caseinato de sodio, una sal de la caseína utilizada como agente proinflamatorio en ratones, es capaz de inducir granulopoyesis en vivo e incrementar la producción de citocinas esenciales en dicho evento. Objetivo. Evaluar si el caseinato de sodio es capaz de inducir un efecto biológico en células de origen linfoide y la producción de citocinas involucradas con este linaje. Materiales y métodos: Se utilizaron ratones hembra BALB/c de 8 a 12 semanas de edad. Los animales se inyectaron cuatro veces, con intervalos de 48 horas, por vía intraperitoneal con 1 ml de caseinato de sodio (10 % de SFB p/v). La población de linfocitos B y la incorporación de bromodesoxiuridina (BrdU) se analizaron mediante citometría de flujo. La detección de la interleucina 7 se evaluó mediante la técnica de ELISA. Resultados. Tras la inyección por vía intraperitoneal, el número de linfocitos B 220+ provenientes del bazo de ratones tratados con caseinato de sodio aumentó comparados con los que solo recibieron el vehículo como tratamiento (89,01±1,03 Vs. 75,66±2,08), así como la incorporación de BrdU en células B220+ (38,59±4,48 Vs. 11,82±1,04). Se evidenció, asimismo, el incremento en la concentración de la interleucina 7 (IL-7) en el suero de los ratones tratados con caseinato de sodio, comparados con los que solo recibieron el vehículo (62,1±17,5 Vs. 26,9±4,4 pg/ml). Conclusión. El caseinato de sodio fue capaz de aumentar el número de linfocitos B en bazo de ratones, así como inducir la producción de IL-7, citocina clave para la linfopoyesis B.

Introduction: Sodium caseinate, a casein salt, is a proinflammatory agent in mice, and it is able to induce granulopoiesis in vivo and to increase the production of cytokines, which is key for this biological process. Objective: To assess whether sodium caseinate is able to induce a biological effect on cells from lymphoid origin and the production of cytokines involved in this lineage in vivo. Materials and methods: We used female BALB /c mice from 8 to 12 weeks old. The animals were injected intraperitoneally (IP) with 1 ml of sodium caseinate (10% PBS w/v) four times every 48 hours. The B cell populations and the incorporation of BrdU were analyzed by flow cytometry. Detection of interleukin-7 was assessed by ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay). Results: We established that after intraperitoneal injection, the number of B lymphocytes 220+ from the spleen of mice treated with sodium caseinate increased compared to those that only received the vehicle (89.01±1.03 vs 75.66 ± 2.08), and the same was observed with the incorporation of BrdU in B220 + cells (38.59±4.48 vs 11.82±1.04 respectively). We also established that the concentration of interleukin-7 (IL-7) in the serum of mice treated with sodium caseinate increased compared to those that only received the vehicle (62.1 ± 17.5 vs 26.9 ± 4.4 pg/ml). Conclusion: Sodium caseinate was able to increase the number of B lymphocytes in the spleen; it also induced IL-7 production, a cytokine that is key for the B cell lymphopoiesis.

Estandarización de ELISA para el diagnóstico de fasciolosis bovina, ovina y humana / Standardization of ELISA for the diagnosis of bovine, ovine and human fasciolosis

RESUMEN Introducción: La fasciolosis representa un grave problema para el sector pecuario y la salud humana en muchos países. En Colombia, afecta principalmente al ganado bovino y ovino, con escasos reportes en humanos. Objetivo: Estandarizar un Ensayo de Inmunoadsorción Enzimática para bovinos, ovinos y humanos como herramienta de tamizaje de fasciolosis. Metodología: Se utilizaron 50 muestras de bovinos, 50 de ovinos y 39 de humanos con diagnóstico de fasciolosis confirmado por serología y examen de materia fecal. Se utilizaron cuatro presentaciones del antígeno excretor-secretor de Fasciola hepatica. Se calcularon la sensibilidad, la especificidad y la concordancia. Resultados: La sensibilidad del ELISA en humanos, ovinos y bovinos fue de 100% y la especificidad fue de 97%, 85,2% y 96,2%, respectivamente. El coeficiente Kappa de Cohen fue superior a 0,8 en las tres especies. Conclusiones: La prueba de ELISA estandarizada para el diagnóstico de la fasciolosis humana, ovina y bovina demostró una excelente sensibilidad y buena especificidad. Se propone realizar la validación a mayor escala para su posterior uso como herramienta en el tamizaje de esta parasitosis.

ABSTRACT Introduction: Fascioliasis represents a serious problem for livestock production and human health in the world. In Colombia, it mainly affects bovine and ovine cattle, with few cases reported in humans. Objective: To standardize an Enzyme-Linked ImmunoSorbent test (ELISA) in bovine, ovine, and human individuals as a screening tool of fascioliasis. Methods: 50 bovine, 50 ovine and 39 human samples with fascioliasis confirmed by serology and stool test were used. Sensitivity, specificity and concordance were calculated. Results: Sensitivity of the ELISA in humans, bovine and ovine cattle was 100 % and specificity was 97%, 85.2% and 96.2%, respectively. Cohen´s Kappa coefficient was >0.8 in all groups. Conclusions: Standardized ELISA test for bovine, ovine and human fascioliasis exhibited an excellent sensitivity and good specificity. It is proposed to carry out a large-scale validation for its ulterior use as a screening tool for the diagnosis of this parasitic infection.

Determinación de Leucosis Enzoótica Bovina Mediante las Claves Hematológicas de Göttingen y Elisa en Boyacá, Colombia / Enzootic Bovine Leukosis Assessment by Hematology Gottingen Keys and ELISA in Boyacá, Colombia

La Leucosis Enzootica Bovina (LEB) es una enfermedad de distribución mundial que genera grandes pérdidas económicas. Esta enfermedad, afecta principalmente la ganadería de las zonas lecheras y en Colombia no se tienen datos exactos del estado sanitario, ni se han estimado las pérdidas generadas a causa de esta patología. El objetivo fue determinar la presencia de LEB utilizando las claves hematológicas de Göttingen en Toca, Boyacá (Colombia). Se tomaron 243 muestras serológicas a 81 hembras de razas lecheras, seleccionadas al azar en intervalos de dos meses. Posteriormente, las muestras positivas y sospechosas a las claves, fueron procesadas mediante la técnica de ELISA, con el fin de corroborar su seropositividad. Las claves de Göttingen permitieron clasificar, de los 81 ejemplares, cinco muestras positivas y 18 sospechosas, de las cuales las cinco positivas resultaron también positivas a la técnica de ELISA. De los 18 ejemplares sospechosos, cinco resultaron seropositivos. La prevalencia total fue del 13.5 %; para los ejemplares entre 3 y 6 años de edad fue de 25% y para mayores de seis años fue del 6%. Se pudo concluir que el recuento de leucocitos fue de relevancia para el diagnóstico de la LEB. Sin embargo, las técnicas de Göttingen resultan no ser tan específicas para la detección de la enfermedad, por lo cual se recomienda la aplicación de técnicas con una especificidad y una sensibilidad mayor como ELISA y PCR.

Bovine Leukemia Virus (BLV) is an internationally prevalent disease that causes great economic losses. It mainly affects livestock in dairy production areas. Colombia lacks accurate data on the prevalence of BLV and its economic effect. This study aimed to determine the presence of BLV using Göttingen Hematological Keys in Toca, Boyacá (Colombia). A total of 243 serological samples were taken from 81 females of randomly selected dairy breeds at two-month intervals. Subsequently, the positive and suspect samples to the keys were processed by the ELISA technique in order to corroborate their seropositivity. The Göttingen keys allowed researchers to classify, from the 81 specimens, five positive samples and 18 suspicious ones, of which the five positive samples were also positive for the ELISA technique. Of the 18 suspected specimens, five were also seropositive. The total prevalence was 13.5%; for individuals between 3 and 6 years of age the prevalence was 25% and for individuals over 6 years the prevalence was 6%. Researchers concluded that the leukocyte count was relevant for the diagnosis of LEB. However, the Göttingen techniques are unspecific for the detection of the disease, so techniques with greater specificity and sensitivity such as ELISA and PCR yield more accurate results.