Experiencia con el uso de plasma rico en plaquetas autólogo en el tratamiento de las úlceras del pie diabético / Use of platelet rich plasma in the treatment of diabetic foot ulcers. Report of the experience / Experiência com o uso de plasma autólogo rico em plaquetas no tratamento de úlceras do pé diabético

Resumen: Las úlceras de pie diabético (UPD) generan un alto costo para el paciente y el sistema de salud. Una deficiente vascularización, la inhibición de la generación de factores de crecimiento y la migración celular, entre otros factores, influyen en su cronicidad. Los factores de crecimiento derivados de las plaquetas (PDGF) estimulan la quimiotaxis, la neovascularización y la regeneración tisular. Objetivo: evaluar la efectividad de una formulación de plasma rico en plaquetas autólogo (PRP) como una modalidad complementaria para el tratamiento de UPD, valorando su seguridad y efectos adversos. Materiales: estudio observacional. Se aplicó PRP a seis pacientes con UPD crónicas, Wagner II, III, con una media en el retraso de la cicatrización de 94 semanas. Se administró mediante punción y como gel sobre la lesión una vez por semana hasta el cierre de la úlcera o durante12 semanas. Las UPD se analizaron con respecto al área y su progresión mediante Mobile Wound Analyzer (MOWA), software de análisis de imágenes de úlceras. El porcentaje de reducción del área se calculó entre la medición inicial y la semana 12. Como criterio de mejoría se eligió una reducción >70% de la lesión. Resultados: predominó el sexo masculino con una media de edad de 53 años ± 7,3. Luego de 12 semanas de tratamiento, se reportó una reducción media del tamaño de la úlcera de 78%, con dos cicatrizaciones completas y dos en 99%. Un paciente recibió una amputación luego de presentar infección no controlada. Conclusión: la aplicación del PRP mejoró la regeneración de tejidos, acortando la duración de la úlcera, promoviendo su curación sin efectos adversos, al tiempo que eliminó la necesidad de procedimientos de manejo en una úlcera crónica.

Summary: Diabetic foot ulcers imply high expenditure for both patients and the health system. Vascular impairment, growth factor inhibition and cell migration, among other factors, affect the chronicity of the condition. Platelet-derived growth factors (PDGFs) stimulate chemotaxis, neovascularization and tissue regeneration. Objective: to evaluate effectiveness of a formulation of autologous platelet-rich plasma to complement the treatment of diabetic foot ulcer, assessing safety and adverse effects. Material: observational study. Platelet rich plasma was applied to six patients with chronic diabetic foot ulcer Wagner II, III, with an average delayed healing of 94 weeks. PRP gel was administered by puncture technique on the lesion, once a week until the ulcer healed or for 12 weeks. Diabetic foot ulcers were analysed in regards to surface area and progression through the Mobile Wound Analyzer (MOWA) software to analyse ulcer images. The area reduction percentage was calculated comparing the initial measurement and that of week 12. The improvement criteria was defined in a reduction that is >70% of the lesion. Results: men prevailed with an average age of 53 years ± 7.3. After 12 weeks of treatment an average reduction of 78% of the size of the ulcer was reported, two complete healings and two 99% healed. One patient required amputation because of uncontrolled infection. Conclusion: the application of PRP improved tissue regeneration and shortened the duration of the ulcer, promoting healing with no adverse effects, and it likewise eliminated the need for procedures to handle chronic ulcers.

Resumo: As úlceras do pé diabético (UPD) geram alto custo para o paciente e para o sistema de saúde. A vascularização deficiente, a inibição da geração de fatores de crescimento e migração celular, entre outros fatores, influenciam sua cronicidade. Os fatores de crescimento derivados de plaquetas (PDGF) estimulam a quimiotaxia, a neovascularização e a regeneração de tecidos. Objetivo: avaliar a eficácia de uma formulação autóloga de plasma rico em plaquetas (PRP) como modalidade complementar para o tratamento da UPD, avaliando sua segurança e efeitos adversos. Materiais: estudo observacional. O PRP foi aplicado a 6 pacientes com UPD crônica, Wagner II, III, com um atraso médio na cicatrização de 94 semanas. Foi administrado por punção e como gel sobre a lesão uma vez por semana até o fechamento da úlcera ou por 12 semanas. As UPD foram analisadas em relação à área e sua progressão, utilizando o software de análise de imagem de úlcera Mobile Wound Analyzer (MOWA). A redução percentual da área foi calculada entre a medição inicial e a semana 12. Como critério de melhora, optou-se pela redução > 70% da lesão. Resultados: predominou o sexo masculino com média de idade de 53 ± 7,3 anos. Após 12 semanas de tratamento, foi relatada uma redução média no tamanho da úlcera de 78%, sendo 2 com cicatrização completa e 2 em 99%. Um paciente foi amputado após desenvolver infecção descontrolada. Conclusão: a aplicação do PRP melhorou a regeneração tecidual, encurtando o tempo de duração da úlcera, promovendo sua cicatrização sem efeitos adversos, ao mesmo tempo que eliminava a necessidade de procedimentos de manejo na úlcera crônica.

O plasma rico em fatores de crescimento no tratamento de pacientes com úlceras venosas / Plasma rich in growth factors in the treatment of patients with venous ulcers

Objetivo geral: Analisar as propriedades do plasma rico em fatores de crescimento (PRGF) autólogo, para tratar pacientes com úlceras venosas. Método: Trata-se de um estudo quase- experimental realizado em um Hospital Universitário, cuja coleta de dados ocorreu no período de maio de 2016 a dezembro de 2017. Amostra composta por 18 pacientes com úlcera venosa, que atenderam aos critérios de inclusão. Os participantes compareceram por 12 semanas consecutivas, ao ambulatório para consulta de enfermagem e troca do curativo, com aplicação do PRGF a cada 15 dias. O preparo do PRGF utilizou a técnica de uma centrifugação e o gluconato de cálcio como ativador plaquetário. Realização da contagem de plaquetas e identificação dos fatores de crescimento no PRGF usado no tratamento. Resultados: Amostra homogênea quanto às variáveis socioeconômicas e clínicas, com predomínio de idosos, sexo masculino, ensino fundamental incompleto e renda entre um e dois salários mínimos. Obtenção de um PRGF com contagem baixa de plaquetas, mediana de 122 x 103 mm3 plaquetas, mas com principais fatores de crescimento plaquetários envolvidos na cicatrização (PDGF-AB, PDGF-BB, TGF-ß, VEGF, EGF e FGF2). Houve alta variabilidade na contagem de plaquetas e na concentração de fatores de crescimento, com correlação forte e significativa entre a quantidade de plaquetas e os fatores de crescimento PDGF-AB e PDGF-BB. As médias de cada fator de crescimento foram 1,52 ng/ml para o PDGF-AB, 1,38 ng/ml para o PDGF-BB, 1,40 ng/ml para o TGF-ß, 0,99 ng/ml para VEGF, 1,57 ng/ml para o EGF e 1.04 ng/ml para o FGF2. O tamanho inicial médio das úlceras neste estudo foi de 29,6 ± 23,9 /cm2 e o percentual médio de redução da área após 12 semanas de tratamento foi de 46,2%. O tamanho das úlceras após tratamento era significativamente menor do que o tamanho inicial das úlceras (p-valor do teste de Wilcoxon igual a 0,001). Entretanto, a redução da área das úlceras, no período das 12 semanas, não apresentou correlação com as concentrações dos fatores de crescimento no PRGF. A percentagem de tecido de epitalização apresentou crescimento em todo período do estudo com aumento significativo ao final de 12 tratamento (média = 58,1%) e o tecido desvitalizado apresentou decrescimento durante todo o período do estudo com redução significativa ao final de 12 semanas (média = 11%). Ao final de 12 semanas observou-se uma melhora significativa do tipo de exsudato nas úlceras e uma diminuição significativa da quantidade de exsudato nas úlceras. Conclusão: Neste estudo, foi confirmada a hipótese nula em que a concentração dos fatores de crescimento presentes no PRGF não apresentou relação estatisticamente significativa com a redução da área das úlceras venosas.

Objective: To analyze the properties of autologous plasma rich in growth factors (PRGF), to treat patients with venous ulcers. Method: It is a quasi-experimental clinical study performed in a University Hospital, the data collection occurred from May 2016 to December 2017. Sample of 18 patients with venous ulcer, who met the inclusion criteria. The participants attended weekly for 12 weeks to the outpatient clinic for nursing consultation and dressing change, with application of the plasma rich in growth factors (PRGF) for each 15 days. The PRGF preparation used the single- centrifugation technique and calcium gluconate as a platelet activator. Realization of platelet count and identification of growth factors in PRGF used in treatment. Platelet counting and identification of growth factors in the PRGF used in the treatment. Results: Homogeneous sample regarding socioeconomic and clinical variables, with predominance of the elderly, male gender, incomplete primary education and income between 1 and 2 minimum wages. A PRGF with a low platelet count, median of 122 x 103 mm3 platelets, but with the main platelet growth factors involved in the healing (PDGF-AB, PDGF-BB, TGF-ß, VEGF, EGF and FGF2). There was a high variability in platelet counts and in the concentration of growth factors, with a strong and significant correlation between the amount of platelets and the growth factors PDGF-AB and PDGF-BB. The means of each growth factor were 1.52 ng / ml for PDGF-AB, 1.38 ng / ml for PDGF-BB, 1.40 ng / ml for TGF-ß, 0.99 ng / ml for VEGF, 1.57 ng / ml for EGF and 1.04 ng / ml for FGF2. The initial mean size of the ulcers in this study was 29.6 ± 23.9 / cm2 and the percentage mean reduction in area after 12 weeks of treatment was 46.2%. The ulcer size after treatment was significantly smaller than the initial ulcer size (Wilcoxon p-value = 0.001). However, the area of ulcer reduction over the 12-week period did not correlate with growth factor concentrations in PRGF. The percentage of epitalization tissue increased throughout the study period with a significant increase at the end of 12 treatments (mean = 58.1%) and devitalized tissue decreased throughout the study period with a significant reduction at the end of 12 weeks (mean = 11%). At the end of 12 weeks there was a significant improvement in the type of exudate in the ulcers and a significant decrease in the amount of exudate in the ulcers. Conclusion: In this study, the null hypothesis was confirmed that the concentration of growth factors present in PRGF did not present statistically significant relationship with the reduction of venous ulcers area.

Objetivo general: Analizar las propiedades del plasma rico en factor de crecimiento autólogo (PRGF) para tratar pacientes con úlcera venosa. Método: Estudio cuasi experimental realizado en un hospital universitario. Datos recolectados entre mayo de 2016 y diciembre de 2017. Muestra compuesta por 18 pacientes con úlcera venosa que cumplieron los criterios de inclusión. Los participantes asistieron semanalmente, durante 12 semanas, a la clínica ambulatoria para consulta de enfermería y cambio de apósito, con aplicación de plasma rico en factor de crecimiento (PRGF) en frecuencia bisemanal. La preparación de PRGF utilizó la técnica de centrifugación; se empleó gluconato de calcio como activador plaquetario. Se efectuó recuento de plaquetas e identificación de los factores de crecimiento en el PRGF utilizado en el tratamiento. Resultados: Muestra homogénea en sus variables socioeconómicas y clínicas, con predominio de ancianos, varones, estudios primarios incompletos, con ingresos de entre 1 y 2 salarios mínimos. Se obtuvo un PRGF con bajo recuento de plaquetas, con mediana de 122 x 103 mm3 de plaquetas, aunque con importantes factores de crecimiento plaquetario involucrados en la curación (PDGF-AB, PDGF-BB, TGF-ß, VEGF, EGF y FGF2). Existió marcada variabilidad en el recuento plaquetario y en la concentración del factor de crecimiento, con marcada y significativa correlación entre la cantidad de plaquetas y factores de crecimiento PDGF-AB y PDGF-BB. Los promedios de cada factor de crecimiento fueron 1.52 ng / ml para PDGF-AB, 1.38 ng / ml para PDGF-BB, 1.40 ng / ml para TGF-ß, 0.99 ng / ml para VEGF, 1,57 ng / ml para EGF y 1,04 ng / ml para FGF2. El tamaño inicial promedio de las úlceras observadas en este estudio fue de 29,6 ± 23,9 / cm2, y la reducción porcentual media en el área luego de 12 semanas de tratamiento fue del 46,2%. El tamaño de las úlceras luego del tratamiento resultó ser significativamente inferior a su tamaño inicial (p-valor del test de Wilcoxon igual a 0,001). Sin embargo, la reducción del área de las úlceras, durante el período de 12 semanas, no se correlacionó con las concentraciones de los factores de crecimiento en el PRGF. El porcentaje de tejido epitelial aumentó durante todo el período del estudio, con un aumento significativo final en 12 tratamientos (media = 58,1%). El tejido desvitalizado disminuyó a lo largo del estudio, con reducción significativa luego de 12 semanas (promedio = 11%). Finalizadas las 12 semanas, hubo mejora significativa en el tipo de exudado de las úlceras y disminución significativa de la cantidad de exudado de las úlceras. Conclusión: En este estudio, se confirmó la hipótesis nula en que la concentración de los factores de crecimiento presentes en el PRGF no presentaba una relación estadísticamente significativa con la reducción del área de las úlceras venosas.

Identificación de una deleción causante de tumor del estroma gastrointestinal (Gist) por el análisis de los genes KIT y PDGFRA / Identification of a causative deletion of gastrointestinal stromal tumor (gist) by the analysis of the KIT and PDGFRA genes

Optimizar la detección de mutaciones en los genes KIT y PDGFRA en una muestra de tumor del estroma gastrointestinal (GIST). Material y Métodos: Se analizó una muestra de tumor GIST fijada y embebida en parafina. Mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se amplificaron los exones 9, 11, 13 y 17 del gen KIT y los exones 12 y 18 del gen PDGFR que contienen las mutaciones causales de GIST. Se confirmó la amplificación mediante electroforesis en gel de agarosa al 2%. Los fragmentos amplificados, fueron purificados y secuenciados en un analizador genético. Se detectó una sobreposición de bases propio de una deleción por lo que se tuvo que clonar los productos del exón 11 para identificar el alelo mutado. Resultados: Se determinó la presencia de una mutación patogénica en el exón 11 del gen KIT. Dicha mutación es una deleción de 15 pares de bases que genera la pérdida de 5 aminoácidos en el receptor tirosina kinasa KIT. Se encontraron polimorfismos neutrales en los exones 11 del gen KIT y en el exón 18 del gen PDGFRA. Conclusión: El análisis molecular mediante secuenciación automática, permitió identificar una mutación en el gen KIT en una muestra de tumor GIST. Esta técnica puede ser aplicada para caracterizar las mutaciones genéticas de casos peruanos de GIST y así poder establecer un tratamiento adecuado según su perfil mutacional...

Objective: To optimize the detection of mutations in the genes KIT and PDGFRA in a sample of gastrointestinal stromal tumor (GIST). Material and Methods: We analyzed a GIST tumor sample fixed and embedded in paraffin. Using the technique of the polymerase chain reaction (PCR) we amplified exons 9, 11, 13 and 17 of the KIT gene and exons 12 and 18 PDGFR gene which contain tha causal mutations of GIST. PCR amplification was confirmed by gel electrophoresis on 2% agarose. The amplified fragments were purified and cloned for subsequent sequencing. An overlap of baeses, characteristic of a deletion was detected, so we had to clone the exon 11 products to identify mutated allele. Results: We determined the presence of a pathogenic mutation in exon 11 of KIT gene. The mutation is a deletion of 15 base pairs and generates a loss of 5 amino acids in the KIT receptor tyrosine kinase. Neutral polymorphisms were also found in exon 11 of KIT gene and exon 18 of PDGFRA gene. Conclusion: Molecular analysis by automatic sequencing identified a mutation in the KIT gene in a tumor sample GIST. This technique can be applied to characterize genetic mutations Peruvian cases of GIST and thus establish adequate treatment by mutational profile...

Utilización de factores de crecimiento plaquetarios autólogos en artrodesis lumbares posterolaterales / Utilização de fatores de crescimento plaquetários autólogos em artrodese lombar póstero-lateral / Use of autologous platelet growth factors in posterolateral lumbar spinal fusions

OBJETIVO: Evaluar calidad e índice de pseudoartrosis en la formación del callo óseo en artrodesis instrumentadas lumbares posteriores con injerto óseo autólogo enriquecido con factores de crecimiento plaquetarios (FCP). MÉTODOS: Estudio clínico analítico experimental simple ciego entre Junio de 2007 y Junio de 2009 comparando dos grupos, uno en el que se utilizó FCP en artrodesis lumbares posteriores y otro en el que no se aplicó el factor, evaluando las siguientes variables: índice de pseudoartrosis, formación del callo óseo y complicaciones postoperatorias. RESULTADOS: Se evaluaron 26 pacientes, edad promedio 61,23 años, divididos en dos grupos de 13 pacientes. El grupo en el que se utilizó FCP presentó fusiones radiográficamente sólidas en el 61,54 %, sin registro de pseudoartrosis pero con incidencia de infección y sangrado postoperatorios de 15.39%, mientras que en el grupo sin FCP el 69.23% alcanzó fusiones sólidas con 7.69% de pseudoartrosis sin otras complicaciones relacionadas con la intervención. CONCLUSIÓN: Si bien el grupo con FCP no presentó pseudoartrosis, registró mayor incidencia de complicaciones postoperatorias y menor número de fusiones radiográficamente sólidas. Aunque la cantidad de pacientes no permite obtener resultados estadísticamente significativos el presente puede ser el inicio de un estudio mayor.

OBJETIVO: Avaliar a qualidade e taxa de pseudoartrose em formação de calos em instrumentado fusão lombar com enxerto ósseo autólogo depois enriquecido com fatores de crescimento plaquetário (FCP). MÉTODOS: Analytical experimental tipo cego única clínica entre junho de 2007 e junho de 2009 comparando dois grupos, um que foi usado no FCP após artrodese lombar e outro que não se aplicam, avaliar as seguintes variáveis : taxa de pseudoartrose de formação de calos e as complicações pós-operatórias. RESULTADOS: Foram avaliados 26 pacientes, com idade média de 61,23 anos, divididos em dois grupos de 13 pacientes. O grupo que foi usado FCP apresentou fusões radiograficamente sólidos em 61,54%, sem registro, mas com incidência não-união de infecção e sangramento pós-operatório 15,39%, enquanto que no grupo sem o FCP% 69,23 alcançado fusões sólidas com 7,69% de pseudoartrose sem outras complicações relacionadas com a intervenção. CONCLUSÃO: Apesar de o grupo não se apresentar com FCP não sindicalizados, maior incidência de complicações pós-operatórias e menos fusões radiograficamente sólidos. Embora o número de pacientes que não é possível obter resultados estatisticamente significativos isso pode ser o início de um estudo maior.

OBJECTIVE: To evaluate quality and rate of pseudoarthrosis in callus formation in instrumented posterolateral lumbar fusion with the use of autologous bone graft enriched with platelet growth factors (PGFs). METHODS: A clinical analytical experimental single blind trial was carried out between June 2007 and June 2009 comparing two groups, one in which PGFs were used in lumbar spinal fusions while in the other the PGFs were not applied, to analyze the following variables: rate of pseudoarthrosis, callus formation and postoperative complications. RESULTS: We evaluated 26 patients, mean age 61.23 years, divided in two groups of 13 patients each. The group in which PGFs were used presented radiographically solid fusions at 61.54% with no record of pseudoarthrosis, although with incidence of infection and postoperative bleeding of 15.39%, while in the group without PGFs 69.23% achieved solid fusions presenting a rate of pseudoarthrosis of 7.69% with no other complications related to the intervention. CONCLUSION: Even though the group without PGFs did not present pseudoarthrosis, a higher incidence of postoperative complications and fewer radiographically solid fusions could be observed. Even though the number of patients is not sufficient to obtain statistically significant results, the present analysis may be the beginning of further study.

Efecto del plasma rico en plaquetas en celulas del ligamento periodontal in vitro / In vitro effect of platelet rich plasma on periodontal ligament cells

Introducción: La Gingivitis y la Periodontitis son entidades inflamatorias crónicas frecuentes en nuestra población. La respuesta de los tejidos periodontales ante estas entidades, son el resultado de la respuesta del huésped frente a la biopelícula formada sobre la superficie dental, adyancente al tejido gingival. La severidad con la que puedan presentarse, es producto de la composición del biofilm, junto a la presencia de factores que puedan modificar la respuesta del hospedero, factores locales que predispongan la colonización bacteriana, hábitos, y stres entre otros. La interacción entre mecanismos de defensa del huésped y la liberación de factores de virulencia y mecanismos de evasión por parte de periodontopáticos, provocan una destrucción no controlada de hueso alveolar y migración del epitelio de unión; por lo tanto es importante dirigir estrategias terapéuticas a nivel celular y molecular para obtener la regeneración de los tejidos perdidos. La terapia periodontal se ha enfocado en detener la progresión de la enfermedad; Recientemente se busca mayor éxito en regeneración periodontal, al usar PRP, el cual tiene factores de crecimiento.Objetivo: Este estudio determinó el efectosobre la proliferación en FP, al ser expuestos a diferentes concentraciones de PRP obtenido de un Banco de Sangre.Metodología: Se trabajó con cultivos celulares (FP) de la Asociación Banco y Centro para la Investigación de Cultivos Celulares In Vitro, Facultad de Salud, de la Universidad del Valle, y con el apoyo del Hemocentro de la Cruz Roja para obtener PRP. Se utilizó el Kit XTT®. para determinar la actividad metabólica de los FP, frente al PRP a concentraciones de 10, 15 y 20%. Resultados: La actividad celular en todas las concentraciones fue significativa hasta las 72 horas, mayor que los controles SFB y FGF. Conclusión: El PRP obtenido en banco de sangre local tiene efectos positivos en FP in vitro.

Introduction: Gingivitis and Periodontitis are the common inflammatory diseases in our community. The reaction of the periodontal tissues results of the interaction of the hosp defense at the biofilm formed around the teeth and the gingival tissue. The severity of this entity depend of the composition of biofilm and local or systemic factors can promote the bacterial colonization or behavioral components like tobacco and stress can be modified the individual response. Interaction between defense response by hosp and evasion mechanism by periodontopathogens plays an important role in the pathological process of alveolar bone destroy and migration the junction epithelium. The periodontal therapy purpose is arrest the disease progression. Recently in an attempt to increase the succes rate in regenerative procedures, it has incorporated the use of platelet-rich plasma. It involves the growth factors that are proposed as enhancers of tissue regeneration of the periodontal tissues. Purpose: The purpose of the study was to evaluate the response of periodontal fibroblasts (PF) at different concentration of platelet rich plasma in vitro. Metodology: Cellular cultures of PF were obtained from In Vitro Research Center and PRP was get from the Hemocentro of the Red Cross, and dilutions were made to obtain concentrations to 10, 15 and 20%. They were compared with 2 controls of 5% bovine fetal serum (BFS) and fibroblastic growth factor (FGF). In order to determine the metabolic activity of the FP stimulated by PRP, Kit XTT® was used. Results: Findings suggest that a higher concentration of PRP results in positive effects on cellular growth and significantly increase in proliferation of FP at concentration of 20%. Conclusions: PRP resulted in positive effects on periodontal fibroblasts.