Perfil de IL-6 e TNF na Formação de Células Espumosas: Um Método Aprimorado Usando a Sonda de Isotiocianato de Fluoresceína (FITC) / Profile of IL-6 and TNF in Foam Cell Formation: An Improved Method Using Fluorescein Isothiocyanate (FITC) Probe

Resumo Fundamento A formação de células espumosas ocorre devido ao aumento em lipoproteína plasmática de baixa densidade (LDL) e desregulação da inflamação, sendo importante para o desenvolvimento da aterosclerose. Objetivo Avaliar o perfil do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e da interleucina-6 (IL-6) no método de formação da célula espumosa existente, otimizando esse protocolo. Métodos A LDL foi isolada, oxidada e marcada com sonda de isotiocianato de fluoresceína (FITC). As células espumosas foram geradas de célula derivada de monócitos humanos THP-1 e incubadas na ausência (controle) ou presença de FITC-ox-LDL (10, 50, 100, 150 ou 200 μg/mL), por 12, 24, 48 ou 72 horas. A FITC-ox-LDL na célula foi quantificada por microscopia. O ensaio de imunoabsorção enzimática foi avaliado para quantificar a IL-6 e o TNF-α, com um p <0,05 considerado significativo. Resultados Todas as concentrações de FITC-ox-LDL testadas apresentaram fluorescência mais alta em comparação com o controle, demonstrando maior acúmulo de lipoproteínas nas células. Quanto mais alta a concentração de FITC-ox-LDL, maior a produção de TNF-α e IL-6. A produção de IL-6 pelas células espumosas foi detectada até o valor de 150 µg/mL da LDL máxima de estímulo. Concentrações acima de 50 μg/mL de LDL estimularam maior liberação de TNF-α comparado ao controle. Conclusões Nosso modelo contribui para o entendimento da liberação de IL-6 e TNF-α em resposta a várias concentrações de ox-LDL usando o método otimizado para a formação de células espumosas.

Abstract Background The formation of foam cells occurs due to the increase in low-density plasma lipoprotein (LDL) and dysregulation of inflammation, which is important for the development of atherosclerosis. Objective To evaluate the profile of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and Interleukin-6 (IL-6) in the existing foam cell formation method, optimizing this protocol. Methods The LDL was isolated, oxidized, and labeled with a Fluorescein isothiocyanate (FITC) probe. Foam cells were generated from THP-1 human monocyte-derived cells and incubated in the absence (control) or presence of FITC-ox-LDL (10, 50, 100, 150, or 200 μg/mL), for 12, 24, 48, or 72 hours. The accumulated FITC-ox-LDL in the cell was quantified by microscopy. The enzyme-linked immunosorbent assay was evaluated to quantify the IL-6 and TNF-α, with p < 0.05 considered significant. Results All the FITC-ox-LDL concentrations tested showed a higher fluorescence when compared to the control, showing a greater accumulation of lipoprotein in cells. The higher the concentration of FITC-ox-LDL, the greater the production of TNF-α and IL-6. The production of IL-6 by foam cells was detected up to the value of 150 µg/mL of the maximum stimulus for LDL. Concentrations above 50 μg/mL LDL stimulated greater release of TNF-α compared to control. Conclusions Our model contributes to the understanding of the release of IL-6 and TNF-α in response to different concentrations of ox-LDL, using an optimized method for the formation of foam cells.

Microcirugía mínimamente invasiva para aneurisma de la arteria comunicante anterior: abordaje supraorbitario lateral más angiografía con fluoresceína intraoperatoria / Minimally invasive micro surgery for aneurysm of the anterior communicating artery: supra-orbitary lateral approach with intraoperative Fluorescein Angiography

RESUMEN Los aneurismas de la arteria comunicante anterior son complejos y requieren de tratamiento endovascular o microquirúrgico según sus características. El uso de enfoques mínimamente invasivos en microcirugía continúa evolucionando. Presentamos el caso de un paciente de 34 años con un aneurisma cerebral no roto de AcoA de cuello ancho, con escala de Glasgow de 15 puntos. Se realizó un abordaje supraorbitario lateral más "clipaje" total del aneurisma usando angio fluoresceína intraoperatoria. Se logró el objetivo con seguridad y eficacia; al mismo tiempo se optimizó el tiempo quirúrgico y hospitalario, maximizando la comodidad del paciente, estética y reanudación a sus actividades tempranas. (AU)

SUMMARY Anterior communicating artery aneurisms (ACAA) are complex and require endovascular or microsurgery approaches. The use of minimally invasive microsurgery techniques is evolving. We present the case of a 34-yearold patient with a broad neck, non-broken, ACAA with a Glasgow coma scale of 15 points. A lateral supra-orbitary approach with total clipping of the ACAA using intra-operatory fluorescein angiography was performed. The objective was accomplished successfully and safe, optimizing both intra-operative and hospitalization times, thus,maximizing patient comfort, esthetic and prompt return to normal duties. (AU)

Evaluation of microbial contamination in multi-dose fluorescein eyedrops in a reference eye center / Avaliação da contaminação microbiana em colírios multi-dose de fluoresceína em um centro oftalmológico de referência

ABSTRACT Purpose: To analyze the presence of microorganisms in fluorescein eyedrops used in a reference eye center in Recife-PE. Methods: This real-life and masked study evaluated fluorescein eyedrops used at the Altino Ventura Foundation in May 2019. Cultures were performed according to exposure times; I) three eyedrop bottles were analyzed after one day of use, II) three eyedrop bottles after 4 d of use, III) three eyedrop bottles after 8 d of use, and IV) three unopened bottles used as control. Samples were collected from the bottle's tip, instilled drop, and residual fluid. After incubation, all colonies were analyzed and identified through biochemical tests. Results: The contamination rate of the fluorescein eyedrop bottles in this study was 55.5% (5/9 vials). There was no contamination in the control group. The highest contamination was seen in one day exposed eyedrops, in 100% of the bottles. The bottle's tip had a higher rate of contamination compared to the drop and residual fluid. Gram-positive bacteria were isolated in 7/27 (25.9%) samples. Growth of fungi or gram-negative bacteria was not observed. Conclusion: The identification of gram-positive bacteria predominantly on the tip of the fluorescein eyedrop bottles suggests inadequate handling as the main cause of contamination.

RESUMO Objetivo: Analisar a presença de microrganismos nos colírios de fluoresceína utilizados em um centro oftalmológico de referência em Recife-PE. Métodos: Este estudo de vida real e mascarado avaliou colírios de fluoresceína utilizados na Fundação Altino Ventura em maio/2019. As culturas foram realizadas de acordo com os diferentes tempos de exposição: I - três frascos de colírio foram analisados após 1 dia de uso; II - três frascos de colírio após 4 dias de uso; III - três frascos de colírio após 8 dias de uso; IV - três garrafas fechadas foram usadas como grupo controle. As amostras foram coletadas da ponta do frasco, da gota instilada e do líquido residual interior. Após incubação, todas as colônias foram analisadas e identificadas através de testes bioquímicos. Resultados: A taxa de contaminação dos frascos de colírio de fluoresceína neste estudo foi de 55,5% (5/9 frascos). Não houve contaminação no grupo controle. A maior contaminação foi observada os colírios expostos de um dia - 100% dos frascos. A ponta da garrafa teve uma maior taxa de contaminação em comparação com as culturas de gota e de fluido residual inferior. Bactérias gram-positivas foram isoladas em 7/27 amostras (25,9%). Não houve crescimento de fungos ou bactérias Gram-negativas. Conclusão: A identificação de bactérias Gram-positivas predominantemente na ponta dos frascos de colírio de fluoresceína sugere manuseio inadequado como a principal causa de contaminação de colírios multidose.

Síndrome de Susac: reporte del primer caso en Honduras / Susac Syndrome: Report of the first case in Honduras

El síndrome de Susac es una entidad rara, descrito como una tríada clínica de encefalopatía, sordera neurosensorial y trastorno visual por oclusión de ramas de arteria retiniana, aunque no siempre se presenta como tríada, se carac- teriza por evolución prolongada y no necesariamente secuencial ni correlacionada con la presentación clínica, que es variable, por lo que el diagnóstico puede ser tardío e influenciar el pronóstico. Es más frecuente en mujeres. La patogénesis se considera como una enfermedad microangiopática autoinmune a nivel cerebral, retiniana y coclear. Descripción del caso clínico: Se presenta caso de paciente masculino de 36 años, con cuadro de cefalea, cambios conductuales, déficit motor y sensitivo de hemicuerpo derecho, seguido por alteraciones visuales y disminución de per- cepción auditiva. Se realiza diagnóstico con imagen de resonancia magnética cerebral con lesiones redondeadas hiperintensas en cuerpo calloso y regiones cortico-subcorticales; audiometría con sordera neurosensorial; y angiografía con fluoresceína de retina con obstrucción de arteria retiniana, confirmando este último recur- so el diagnóstico de síndrome de Susac. Conclusiones: Esta es una enfermedad probablemente subdiagnosticada que debe ser contemplada en el diagnóstico diferencial de enfermedades vas- culares cerebrales o desmielinizantes e implica importantes com- plicaciones y secuela sobre el paciente, el diagnóstico temprano influencia el pronóstico, por lo que debe establecerse tratamiento agresivo y temprano a fin de minimizar daños...(AU)

Wide-field angiography for diagnosis and follow-up of Eales disease: a case series / Angiografia de amplo campo para diagnóstico e monitoramento da doença de Eales: série de casos

ABSTRACT Wide-field angiography enables assessing peripheral areas with better quality and gives greater deep focus, which improves the image periphery. Some studies have proposed the usefulness of these angiographic systems in inflammatory diseases of the retina. However, few studies have evaluated this technique in Eales disease. We present a case series in which 5 eyes of 3 patients with Eales disease were evaluated by using retinal fluorescein angiography with 30º, 50º, and 150º lenses in a laser-scanning ophthalmoscope. These cases highlight the usefulness of wide-field fluorescein angiography in the diagnosis and follow-up of peripheral ischemic retinal areas in Eales disease, which enables better follow-up than possible with conventional fluorescein angiography images.

RESUMO A angiografia de campo amplo permite avaliar áreas periféricas com melhor qualidade e proporciona maior foco profundo, melhorando a imagem da periferia. Alguns estudos têm proposto a utilidade desses sistemas angiográficos nas doenças inflamatórias da retina. No entanto, poucos estudos avaliaram esta técnica na doença de Eales. Apresentamos uma série de casos em que 5 olhos de 3 pacientes com doença de Eales foram avaliados usando angiografia de fluoresceína da retina com lentes de 30º, 50º e 150º em um oftalmoscópio de varredura a laser. Esses casos destacam a utilidade da angiografia com fluoresceína de campo amplo no diagnóstico e no acompanhamento das áreas isquêmicas periféricas da retina na doença de Eales, permitindo um melhor acompanhamento do o possível com imagens por angiofluoresceinografia convencional.

Manifestaciones oculares de la enfermedad de Gaucher: presentación de un caso y revisión del tema / Ocular manifestations of Gaucher disease: case report and literature review / Manifestações oculares da doença de Gaucher: apresentação de um caso e revisão do assunto

RESUMEN Se informa el caso de una paciente con enfermedad de Gaucher (EG) tipo 3b con mutación homocigota en el gen GBA (c.1448T>C p.L483P) (L444P). Se describen los hallazgos oculares característicos de esta mutación, que incluyen condensaciones vítreas y edema macular. Hasta donde sabemos, es el primer caso informado en Colombia con estas características. Se presenta además una revisión sobre las manifestaciones oculares de esta enfermedad.

SUMMARY We report the case of a patient with Gaucher disease (GD) type 3b, with a homozygous GBA gene mutation (c.1448T > C p.L483P) (L444P). Ocular findings characteristic of this mutation are described, including vitreous condensation and macular edema. To our knowledge this is the first case reported in Colombia with these characteristics. A review of the ocular manifestations of this disease is also presented.

RESUMO Se informa o caso de uma paciente com doença de Gaucher (EG) tipo 3b com mutação homozigoto no gene GBA (c.1448T>C p.L483P) (L444P). Se descrevem as descobertas oculares características desta mutação, que incluem condensações vítreas e edema macular. Até onde sabemos, é o primeiro caso informado na Colômbia com estas características. Se apresenta ademais uma revisão sobre as manifestações oculares desta doença.

Endoscopic repair of cerebrospinal fluid rhinorrhea / Reparo endoscópico de fístulas liquóricas nasais

Abstract Introduction: Nasal liquorrhea indicates a cerebrospinal fluid fistula, an open communication between the intracranial cerebrospinal fluid and the nasal cavity. It can be traumatic and spontaneous. Objective: The aim of this study was to assess the outcome of endoscopic repair of cerebrospinal fluid fistula using fluorescein. Methods: This retrospective study included 30 patients of both sexes, with a mean age of 48.7 years, treated in the period from 2007 to 2015. All patients underwent lumbar administration of 5% sodium fluorescein solution preoperatively. Fistula was closed using three-layer graft and fibrin glue. Results: Cerebrospinal fluid fistulas were commonly located in the ethmoid (37%) and sphenoid sinus (33%). Most patients presented with traumatic cerebrospinal fluid fistulas (2/3 of patients). The reported success rate for the first repair attempt was 97%. Complications occurred in three patients: one patient presented with acute hydrocephalus, one with reversible encephalopathy syndrome on the fifth postoperative day with bilateral loss of vision, and one patient was diagnosed with hydrocephalus two years after the repair of cerebrospinal fluid fistula. Conclusion: Endoscopic diagnosis and repair of cerebrospinal fluid fistulas using fluorescein intrathecally has high success rate and low complication rate.

Resumo Introdução: A liquorreia nasal indica uma fístula liquórica (FL), uma comunicação aberta entre o líquido cerebrospinal intracraniano e a cavidade nasal. Pode ser traumática e espontânea. Objetivo: Avaliar o desfecho do reparo endoscópico da fístula liquórica nasal com o uso de fluoresceína. Método: Este estudo retrospectivo incluiu 30 pacientes de ambos os sexos, com idade média de 48,7 anos, tratados de 2007 a 2015. Todos os pacientes foram submetidos à administração lombar de solução de fluoresceína de sódio a 5% no pré-operatório. A fístula foi fechada com enxerto de três camadas e cola de fibrina. Resultados: As fístulas de líquido cerebrospinal foram comumente localizadas no seio etmoidal (37%) e esfenoidal (33%). A maioria dos pacientes apresentou fístulas liquóricas traumáticas (2/3). A taxa de sucesso relatada para a primeira tentativa de reparo foi de 97%. Complicações ocorreram em três pacientes: um apresentou hidrocefalia aguda; um, síndrome reversível de encefalopatia no quinto dia de pós-operatório com perda bilateral da visão; e um foi diagnosticado com hidrocefalia dois anos após o reparo de fístula liquórica. Conclusão: O diagnóstico endoscópico e o reparo de fístulas liquóricas nasais com uso de fluoresceína intratecal têm alta taxa de sucesso e baixo índice de complicações.

Efeito de adição de rodamina B e fluoresceína sódica a sistemas adesivos não simplificados: aspectos fotofísicos e físico-químicos / Effect of addition of rhodamine B and fluorescein to conventional etch-and-rinse and self-etching adhesive systems: photophysical and physical-chemical aspects

A adição de corantes fluorescentes a adesivos odontológicos possibilita a investigação da distribuição espacial desses materiais na interface dente-restauração, utilizando-se a microscopia confocal de varredura a laser (MCVL). A literatura indica falta de padronização na aplicação de agentes fluorescentes com tal finalidade. Esse estudo sistematizou estratégias para a adição de rodamina B (RB) e fluoresceína sódica (FS) a um sistema adesivo convencional de três passos, Adper Scotchbond Multi-Purpose (MP), e um autocondicionante de dois passos, Clearfil SE Bond (SE), considerados "padrão-ouro" na Odontologia. Os objetivos principais foram (a) determinar a menor faixa de concentrações de RB e FS necessária para produzir imagens satisfatórias da interface dentina-adesivo e (b) avaliar o efeito da adição desses corantes sobre algumas propriedades das resinas. Os adesivos foram marcados com RB ou FS em concentrações decrescentes (0,5, 0,1, 0,02 e 0,004 mg/mL) por meio de um método de dispersão semidireto. O comportamento fotofísico/ fluorescente dos adesivos marcados foi investigado por espectroscopia de fotoluminescência e MCVL. Paralelamente, avaliaram-se os adesivos quanto ao grau de conversão (GC) e ao ângulo de contato (AC). Tanto os resultados de GC como os de AC foram submetidos à análise de variância com dois fatores (adesivo e tratamento) com α = 0,05, seguida de teste post-hoc de Tukey. Os máximos comprimentos de onda de emissão e de excitação da RB e da FS foram influenciados pelo meio polimérico e pela concentração de corante de modo geral. A MCVL preliminar de amostras de adesivo polimerizado, realizada sob condições experimentais padronizadas, mostrou que o comportamento fluorescente da RB em MP e SE foi muito semelhante na mesma concentração de corante, mas o mesmo não pôde ser dito do comportamento da FS, que foi notavelmente inferior no adesivo autocondicionante, SE, na concentração mais alta. Em dentina, os adesivos preparados com RB nas concentrações-alvo de 0,1 e 0,02 mg/mL apresentaram fluorescência ótima; já aqueles preparados com 0,004 mg/mL produziram fraco sinal. Adesivos preparados com FS a 0,5 mg/mL apresentaram ótima fluorescência na interface de adesão, enquanto que concentração menor desse corante não produziu sinal suficiente. Padrões morfológicos aparentemente atípicos foram observados na interface de adesão, quando da associação do adesivo SE com o corante FS. A adição de RB e FS nas quatro concentrações indicadas aos adesivos MP e SE não afetou o GC nem o AC em comparação com os grupos de controle correspondentes. Em suma, a RB mostra-se um corante mais versátil que a FS na avaliação morfológica das interfaces dentina-MP e dentina-SE via MCVL. A menor faixa de concentrações de RB nos adesivos MP e SE, na qual é possível produzir imagens satisfatórias das interfaces, situa-se entre 0,1­0,02 mg/mL. Já o corante FS deve ser adicionado a esses adesivos a pelo menos 0,5 mg/mL para produzir níveis de fluorescência satisfatórios na interface de adesão. A não ocorrência de efeitos deletérios sobre a polimerização e a molhabilidade das resinas estabelece uma margem de segurança para a incorporação desses agentes fluorescentes (em concentração ≤ 0,5 mg/mL) nesses sistemas monoméricos.(AU)

The addition of fluorescent dyes to dental adhesives makes it possible to investigate the spatial distribution of such resin-based materials in the tooth-restoration interface, using confocal laser scanning microscopy (CLSM). Literature indicates a lack of standardization on the application of fluorescent agents for this purpose. This work presents strategies for adding rhodamine B (RB) and fluorescein sodium salt (FS) to a three-step etch-and-rinse adhesive system, Adper Scotchbond Multi-Purpose (MP), and a two-step self-etching one, Clearfil SE Bond (SE), both regarded as "gold standard" in restorative dentistry. The main objectives were (a) to determine the lowest range of RB and FS concentrations required to produce suitable images of the dentin-adhesive interface via CLSM and (b) to investigate potential effects of addition of these dyes on some resin properties. The adhesives were labeled with RB or FS at decreasing concentrations (0.5, 0.1, 0.02 and 0.004 mg/mL) by means of a semi-direct dispersion method. The photophysical/fluorescent behavior of the labeled resins was investigated by photoluminescence spectroscopy and by CLSM. The adhesives were also investigated with regards to the degree of conversion (DC) and contact angle (CA). A two-way ANOVA of "adhesive" and "treatment" was conducted on DC and CA separately, followed by Tukey's test. The maximum emission and excitation wavelengths of RB and FS were influenced by the host polymer and the dye concentration in general. The preliminary CLSM of cured adhesive samples, performed with standardized settings, showed that the fluorescent behavior of RB in MP and SE was very similar in the same dye concentration, unlike the behavior of FS, which was lower in the self-etching adhesive for the highest dye concentration. In dentin, the adhesives prepared with RB at the target concentrations of 0.1 and 0.02 mg/mL presented optimal fluorescence; those with 0.004 mg/mL produced poor signal. Adhesives prepared with FS at 0.5 mg/mL presented optimal fluorescence at the bonding interface, whereas lower concentrations of FS did not produce sufficient signal. Atypical morphological features were observed at the bonding interface, when adhesive SE was used with FS. The addition of RB and FS at the four decreasing concentrations to adhesives MP and SE did not affect DC or CA compared to the corresponding controls. In short, RB is more versatile than FS for the morphological characterization of dentin-MP and dentin-SE interfaces via MCVL. The lowest range of RB concentrations in adhesives MP and SE that can produce suitable images of the bonding interface lies between 0.1­0.02 mg/mL. The dye FS should be added to these adhesives at 0.5 mg/mL at least to produce satisfactory fluorescence levels at the bonding interface. Since negative effects on polymerization and wettability of the resins were not observed, the use of RB and FS (in concentration ≤ 0.5 mg/mL) together with MP and SE should be reliable in terms of resin properties.(AU)

Chemical and cytological analysis of cerebral spinal fluid after intrathecal injection of hypodense fluorescein / Análise química e citológica do líquor após injeção intratecal de solução hipodensa de fluoresceína

ABSTRACT INTRODUCTION: Intrathecal fluorescein has been effective for topographic diagnosis of rhinoliquorrhea. Nonetheless, there are no reports on the study of cerebral spinal fluid (CSF) after use of intrathecal fluorescein. OBJECTIVE: A prospective study attempting to evaluate CSF through chemical and cytological analysis, after injection of fluorescein. METHODS: Prospective analysis of 24 samples of CSF after intrathecal injection of fluorescein for topographic diagnosis of CSF fistulae, collected at the time of puncture and after 24 and 48 h, divided by cellularity: Group 1, up to five cells, and Group 2, with more than five cells. RESULTS: The yellow-greenish color of CSF remained after 48 h in 36%, evidencing permanence of fluorescein. No changes in protein and glucose levels were observed between 0-24 h and 0-48 h. In group 2, an increase in cell count was observed between 24 h and 48 h (p = 0.019). In both groups, there was an increase of neutrophils between 0 and 48 h (p = 0.048) and a decrease between 24 and 48 h (p = 0.05). CONCLUSION: Intrathecal fluorescein provoked discreet meningeal reactions, such as an increase of cells between 24 and 48 h and an increase of neutrophils at 24 h, with a subsequent decrease at 48 h with no correlation with symptomatology.

RESUMO Introdução: A fluoresceína intratecal tem sido efetiva no diagnóstico topográfico da rinoliquorréia. Entretanto, não há estudos no líquor após o uso de fluoresceína intratecal. Objetivo: Estudo prospectivo visando avaliar o líquor, através de análise química e citológica, após injeção de fluoresceína. Método: Análise prospectiva de 24 punções após injeção intratecal de fluoresceína para diagnóstico topográfico de fístula liquórica, coletado no momento da punção, 24 e 48 horas, divididos pela celularidade: grupo 1, com até 5 células e grupo 2 com mais de 5 células. Resultado: A coloração amarelo-esverdeada do líquor permaneceu após 48 horas em 36%, evidenciando permanência de fluoresceína. Observou-se ausência de mudanças no nível de proteína e glicose entre 0-24 horas e 0-48 horas. No grupo 2, um aumento na contagem celular foi observado entre 24 e 48 horas (p = 0,019). No dois grupos juntos, observou-se um aumento de neutrófilos entre 0 e 48 horas (p = 0,048) e uma diminuição entre 24 e 28 horas (p = 0,05). Conclusão: Fluoresceína intratecal provocou discretas reações meníngeas, como o aumento de células entre 24 e 48 horas e aumento dos dos neutrófilos em 24 horas com uma subsequente dimi nuição em 48 horas sem correlação com sintomas.

Impact of wildfire smoke in Buenos Aires, Argentina, on ocular surface / Efeitos da fumaça de incêndios na superfície ocular em Buenos Aires, Argentina

Purpose: To evaluate the acute impact of the wildfire smoke episode in 2008 on the ocular surface of subjects living in the Metropolitan Area of Buenos Aires (MABA). Methods: A total of 86 subjects were evaluated: Group 1 comprised patients from a public ophthalmology hospital (N=35) and Group 2 comprised healthy volunteers (N=51). All subjects answered a questionnaire on ocular symptoms and underwent ophthalmologic examination [bulbar conjunctival hyperemia, corneal fluorescein staining, rose bengal vital staining, tear break-up time (TBUT), Schirmer I test, tear lysozyme, and impression cytology] during and after the acute episode. Concentrations of carbon monoxide (CO), nitrogen dioxide (NO2), and particulate matter (PM) were measured before, during, and after the acute episode. Results: Both groups showed a statically significant increase in ocular symptoms and bulbar conjunctival hyperemia and a statically significant decrease in tear break-up time during the acute episode. Group 1 showed more severe symptoms and a statistically significant increase in fluorescein and rose bengal staining intensities during the acute episode. We found a significant negative correlation between ocular symptoms and tear break-up time. During the episode, the levels of CO, NO2, and particulate matter in MABA were four times higher than the usual average levels for the same period in 2007 and 2009. Conclusions: Increased air pollution from the burning of biomass is associated with a decrease in the stability of the tear film (TBUT), generating areas of ocular surface exposure that may be the cause of the increased feeling of irritation. Group 1 was more affected by not having a healthy ocular surface, and thus consulted an ophthalmologist. Cytological changes in the conjunctiva were not observed, which could be due to the short duration of the episode. .

Objetivo: Avaliar os efeitos agudos da fumaça do episódio de incêndio violento ocorrido em 2008, sobre a superfície ocular de sujeitos que vivem na Região Metropolitana de Buenos Aires (MABA). Métodos: Um total de 86 indivíduos foram avaliados: Grupo 1: pacientes de um hospital público de oftalmologia (N=35) e Grupo 2: voluntários saudáveis (N=51). Todos os participantes responderam a um questionário sobre os sintomas oculares e foram submetidos a exame oftalmológico (hiperemia conjuntival bulbar, teste de fluoresceína, corante rosa bengala, tempo de ruptura do filme lacrimal (TBUT), teste de Schirmer I, lisozima lacrimal e citologia de impressão) durante e após o episódio agudo. As concentrações de monóxido de carbono, dióxido de nitrogênio e partículas (PM) foram medidas antes, durante e após o episódio agudo. Resultados: Ambos os grupos apresentaram aumento estatisticamente significativo dos sintomas oculares, hiperemia conjuntival bulbar, e diminuição estatisticamente significativa no tempo de ruptura do filme lacrimal durante o episódio agudo. Grupo 1 apresentou maior intensidade dos sintomas e aumento estatisticamente significativo no teste de fluoresceína e rosa bengala durante o episódio agudo. Encontramos uma correlação negativa significativa entre os sintomas oculares e tempo de ruptura do filme lacrimal. Durante o episódio agudo de 2008, os níveis de CO, NO2 e PM na Região Metropolitana de Buenos Aires foram 4 vezes maiores do que os níveis médios habituais para o mesmo período de 2007 e 2009. Conclusões: O aumento da poluição do ar a partir da queima de biomassa está associado a uma diminuição da estabilidade do filme lacrimal (TBUT) gerando zonas da exposição da superfície ocular, que podem ser a causa do aumento da sensação de irritação. Grupo 1 foi mais afetado por não ter superfície ocular saudável e, portanto, consultaram um oftalmologista. Mudanças citológicas da conjuntiva não foram observadas e isso poderia ser devido ...

Abordaje endoscópico endonasal de fístulas de líquido cefalorraquídeo: nuestra experiencia / Endonasal endoscopic approach of cerebrospinal fluid leak: our experience

La fístula de líquido cefalorraquídeo (FLCR) es la comunicación entre el espacio subaracnoídeo y la vía aérea superior. Las podemos clasificar según su etiología en quirúrgicas, traumáticas, congénitas y espontáneas. El tratamiento de las fistulas de LCR puede ser conservador o quirúrgico. OBJETIVO: Describir la experiencia en el manejo de fístulas de líquido cefalorraquídeo y analizar las técnicas quirúrgicas endoscópicas intranasales y los resultados quirúrgicos obtenidos en nuestro servicio. MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio descriptivo, retrospectivo de corte transversal. Se incluyeron pacientes con diagnóstico de FLCR que recibieron tratamiento en el Servicio de Otorrinolaringología y Cirugía de Cabeza y Cuello del Hospital de Clínicas de la Universidad Nacional de Asunción entre marzo de 2008 y diciembre de 2012. RESULTADOS: Se revisaron 17 historias clínicas de pacientescon diagnóstico de FLCR. El tratamiento fue conservador en 2 pacientes. En los 15 restantes se realizó reparación endoscópica del defecto. Sólo un paciente presentó recidiva. CONCLUSIÓN: La experiencia en nuestro servicio demuestra que el abordaje endoscópico se ha ganado su espacio en el tratamiento de las fístulas de LCR. Los resultados obtenidos para la corrección de fistulas son favorables, con buena tasa de éxito y pocas complicaciones.

The cerebrospinal fluid leak (CSF leak) is defined as the communication between the subarachnoid space and the upper airway. Can be classified according to their etiology: surgical, traumatic, congenital and spontaneous. The treatment of CSF fistulas can be conservative or surgical. OBJECTIVE: To describe the experience in the management of cerebrospinal fluid leaks and analyze intranasal endoscopic surgical techniques and surgical results obtained in our service. MATERIALS AND METHODS: A descriptive, cross-sectional, retrospective study. We included patients with a diagnosis of CSF leak who were treated at the Department of Otolarhinoryngology and Head and Neck Surgery of the Hospital de Clinicas of the Universidad Nacional de Asuncion between March 2008 and December 2012. RESULTS: We reviewed 17 medical records of patients diagnosed with CSF leak between March 2008 and December 2012. The most frequent reason for consultation was watery rhinorrhea in 16 cases. There was a case that consulted form metallic foreign body in the nasal cavity roof. Treatment was conservative in 2 patients. In the remaining 15 was performed endoscopic repair of the defect. Only one patient had recurrence. CONCLUSION: The experience in our service demonstrates that the endoscopic approach has earned its place in the treatment of CSF leakage. The results for the corrections are favorable, with good success rate and few complications.

Reacción de hipersensibilidad tras la administración de indocianina y fluoresceína con fines diagnósticos / Hypersensitivity reaction after administration of fluorescein and indocyanine with diagnostic purposes

Resumen:

La utilización de indocianina verde y fluoresceína en pruebas diagnósticas en las consultas de oftalmología es muy frecuente y se está extendido a nivel mundial. Estos colorantes aunque son altamente inocuos, en algunas personas puede causar algún tipo de reacción alérgica desde leve hasta grave e, incluso, puede llevar al paciente a la muerte en cuestión de minutos. Por todo esto, los enfermeros/as deben estar preparados y actuar inmediatamente cuando la sospechen desde el primer momento en el que se manifieste.

Ojo seco en pacientes con artritis reumatoidea / Dry eye in patientes with rheumatoid arthritis

Objetivo: evaluar la prevalencia de ojo seco en una población de pacientes con artritis reumatoidea. Métodos: estudio observacional descriptivo de corte transversal en 153 pacientes. Se evaluó la prevalencia de ojo seco mediante el test de Schirmer, tinción con rosa de bengala, tinción con fluoresceína y test de ruptura de la película lagrimal. La severidad del ojo seco se determinó mediante el Ocular Surface Disease Index (OSDI). Resultados: 92.8 por ciento de los pacientes eran mujeres. La prevalencia de ojo seco fue del 26.3 por ciento con el Test de Schirmer I, 23.7 por ciento con la Tinción de Rosa de Bengala (TRB), 52.9 por ciento con la tinción de fluoresceína (TF) y 63.5 por ciento con el test de ruptura de la película lagrimal (TRPL). En cuanto a la función visual, entre el 63 por ciento y el 75 por ciento de los pacientes con ojo seco presentaban una limitación leve de la agudeza visual (AV). Conclusiones: el ojo seco es la complicación más frecuente en pacientes con artritis reumatoidea, por lo que es importante su detección temprana y su manejo multidisciplinario. El OSDI es un complemento valioso en la evaluación de estos pacientes. Éste tiene excelente confiabilidad, validez, sensibilidad y especificidad.

Objective: to evaluate the prevalence of dry eye in a rheumatoid arthritis patient’s population. Methods: observational,descriptive and transversal study in 153 rheumatoid arthritis patients. Were assessed the prevalence of dry eye by Schirmer test, rose bengal staining, fluorescein staining and tear break up time. The severity of dry eye was evaluated by the Ocular Surface Disease Index (OSDI). Results: 92.8% of patients were female. Dry eye prevalence evaluated by Schirmer test type I was 26.3%, rose bengal staining 23.7%, fluorescein staining 52.9% and tear break up time 63.5%. In the assesment of visual function, we found mildvisual impairment between 63% and 75% of dry eye patients.Conclusions: dry eye is the most frecuent complication in rheumatoid arthritis patients; hence, it is important early detection and multidisciplinary approach. The OSDI is a valuable complement in the valoration of these patients. It has excellent reliability,validity, sensitivity and specificity.

Intravenous sodium fluorescein enhances the visibility of vitreous during vitrectomy surgery for diabetic retinopathy / Fluoresceína sódica intravenosa aumenta a visibilidade do vítreo durante a cirurgia de vitrectomia para retinopatia diabética

OBJECTIVE: To observe the effectiveness of intravenous sodium fluorescein visibility in the vitreous during vitrectomy surgery in patients with diabetic retinopathy. METHODS: Fourteen consecutive cases of vitreoretinal surgery for vitreous hemorrhage and tractional retinal detachment secondary to diabetic retinopathy underwent intravenous injection of sodium fluorescein to 20 percent 1 hour before the surgery. The images of the steps of the surgeries were recorded. RESULTS: The sodium fluorescein stained green from the vitreous peripheral, vitreous base, posterior hyaloid, further improving visibility to a complete and more secure vitrectomy. The sodium fluorescein also stained fibrous points (sites of neovascularization) with high intensity making it easier its visibility. No complications associated with the dye injection were observed in all cases. CONCLUSION: Intravenous sodium fluorescein can be used safely for facilitating the observation of the vitreous, vitreous base, posterior hyaloid and sites of neovascularization. This technique can facilitate the process of vitrectomy in patients with diabetic retinopathy.

OBJETIVO: Observar a eficácia da fluoresceína sódica intravenosa, na visibilidade do vítreo, durante a cirurgia de vitrectomia nos pacientes com retinopatia diabética. MÉTODOS: Quatorze casos consecutivos de cirurgia vitreorretiniana para hemorragia vítrea e descolamento tracional da retina secundário à retinopatia diabética, foram submetidos à injeção de fluoresceína intravenosa a 20 por cento, 1 hora antes da cirurgia.As imagens de todos os passos das cirurgias foram gravadas. RESULTADOS: A fluoresceína corou de verde o vítreo periférico, base vítrea, hialóide posterior melhorando a visibilidade para uma vitrectomia completa e mais segura. A fluoresceína também corou pontos fibrosos (sítios de neovascularização) com alta intensidade tornando mais fácil sua observação. Nenhuma complicação associada com a injeção do contraste foi observada. CONCLUSÃO: Fluoresceína sódica intravenosa pode ser usada de forma segura para facilitar a observação do vítreo, base vítrea, hialóide posterior e sítios de neovascularização. Esta técnica pode facilitar o procedimento de vitrectomia em pacientes com retinopatia diabética.

Evaluación de la coloración diferencial de fluorescencia modificada en Pseudomonas spp. aisladas de suelo / Evaluation of the modified flourescence staining differential on Pseudomonas spp. isolated from soil

Se evaluó la coloración diferencial de fluorescencia modificada en Pseudomonas spp. aisladas de suelos de cultivos agrícolas del estado Sucre, a fin de observar eventos microscópicos relacionados con el ciclo celular. Cada especie de Pseudomonas identificada bioquímicamente se sembró en caldos incubados a temperatura ambiente, aerobiosis, durante 15, 20, 30 y 45 minutos, y 1, 24, 48 y 72 horas; luego, se elaboraron y colorearon los extendidos. En las 24 cepas de Pseudomonas identificadas, P. mendocina (41,67 por ciento), P. aeruginosa (37,50 por ciento) y P. putida (20,83 por ciento), se observaron variaciones de tinción en los diferentes tiempos de incubación como verde, amarilla y anaranjada, fluorescentes y de baja fluorescencia. La coloración emplea naranja de acridina que se intercala al ADN, provocando fluorescencia verde, e interactúa con el ARN provocando fluorescencia anaranjada; el decolorante remueve el naranja de acridina no unido al material genético y la fluoresceína de sodio produce color amarillo en bacterias que retienen suficiente cantidad de naranja de acridina. Las variaciones de tinción citoplasmática en Pseudomonas spp., están asociadas a la cantidad de ARN y ADN presente en la célula de acuerdo a la fase de su ciclo celular.

The modified fluorescence staining differential was evaluated using Pseudomonas spp. isolated from cultivated agricultural soils in the State of Sucre, in order to observe microscopic events related to the cellular cycle. Each species of biochemically identified Pseudomonas was inoculated into a broth and incubated at room temperature, aerobiosis, for 15, 20, 30 and 45 minutes and 1, 24, 48 and 72 hours; then, slides were made and stained. For the 24 identified strains of Pseudomonas, P. mendocina (41.67 percent), P. aeruginosa (37.50 percent) and P. putida (20.83 percent), staining variations such as green, yellow and orange, fluorescent and low fluorescence were observed for the different incubation times. The stain uses acridine orange that interacts with DNA by intercalation, causing green fluorescence; it interacts with RNA by electrostatic attraction causing orange fluorescence; the alcohol-acetone decolorant removes the acridine orange not united with the genetic material and sodium fluorescein produces a yellow color in bacteria that retain a sufficient amount of acridine orange. Cytoplasmatic staining variations in Pseudomonas spp., are associated with the amount of RNA and DNA present in the cells according to the phase of their cellular cycle.

Conjugação e validação de controle isotípico IgG1-FITC para uso em citometria de fluxo / Conjugation and validation of IgG1-FITC isotype control to be used in flow cytometry

Em meados da década de 50 iniciou-se o desenvolvimento da citometria de fluxo, tecnologia que permite verificar características físico-químicas de células ou partículas suspensas em meio fluido. Esta tecnologia utiliza anticorpos monoclonais marcados com fluorocromos como ferramenta de investigação em diversas análises e necessita de controles isotípicos para definição da região negativa (background). Estes controles são constituídos por imunoglobulinas de mesmo isotipo e fluorocromo dos anticorpos testes, sendo o isotiocianato de fluoresceína (FITC) o marcador fluorescente mais utilizado na conjugação de anticorpos. Os controles isotípicos têm como função definir a fluorescência inespecífica (células negativas) e as regiões fluorescentes (células positivas). No presente estudo foi selecionado anticorpo monoclonal murino (AcMm) dirigido contra antígeno eritrocitário canino, produzido no Laboratório de Anticorpos Monoclonais do Hemocentro de Botucatu, o qual reage positivamente com hemácias de cães, mas nunca com leucócitos humanos, tendo, portanto, potencial utilidade como controle negativo em citometria de fluxo. A purificação do AcMm da subclasse IgG1 foi feita por cromatografia de afinidade em Proteína-A Sepharose, e o controle da purificação realizado por eletroforese em géis de ágarose e poliacrilamida (SDS-PAGE). A imunoglobulina purificada foi conjugada ao FITC e filtrado em coluna de Sephadex G-25 para separação das proteínas marcadas e não-marcadas. O AcMm conjugado foi testado contra hemácias de cães, e o êxito da conjugação comprovado por testes de fluorescência, sendo a mediana de positividade de 94,70. Frente a leucócitos humanos a mediana de positividade foi 0,03 contra 0,50 dos reagentes comerciais. Os testes estatísticos não-paramétricos de Wilcoxon e correlação de Spearman comprovaram a eficiência e validam o controle isotípico produzido em comparação aos reagentes comerciais testados.

It was during the 1950's that the development of flow cytometry started, technology that allow to measure physiochemical characteristics of cells or suspended particles in fluid. This technology uses monoclonal antibodies labeled by fluorochromes as investigation tool in several analysis and needs isotype controls to define the negative region (background). These controls are constituted by immunoglobulins of the same isotype and fluorochrome from test antibodies, being fluorescein isothiocyanate (FITC) the most fluorescent marker used in antibody conjugations. The isotype controls have the function to define the unspecific fluorescence (negative cells) and the fluorescent regions (positive cells). In this study was selected monoclonal antibody (mAb) against canine erythrocyte antigen, produced in the Monoclonal Antibodies Laboratory - Blood Center of Botucatu, which reacts positively with dog red blood cells, but never with human leukocytes, having therefore, utility potential as negative control in flow cytometry. The purification mAb of IgG1 subclass was made by affinity chromatography in Sepharose Protein-A and the purification control was performed by electrophoresis in ágarose and polyacrylamide gels (SDS-PAGE). The purified immunoglobulin was conjugated to FITC and after was filtered in Sephadex G25 column to separation of labeled and unlabeled proteins. The conjugated mAb was tested against dog red blood cells and the conjugation success was verified by fluorescence tests, being the median positivity of 94.70. To the human leucocytes the positivity median was 0.03 against 0.50 of the commercial reagents. The nonparametric statistical tests of Wilcoxon and the correlation Spearman showed the efficiency and validate the isotype control produced in relation to the tested commercial reagents.

Actividad microbiana en suelos de sabanas de los Llanos Orientales de Venezuela convertidas en pasturas / Microbial activity in Eastern Venezuelan savannas turned into grasslands

We studied the effects of season and management practices on chemical properties and biochemical parameters in a typical Ultisol soil of native and introduced pastures of the Eastern savannas of Venezuela. Sseason, soil management, and their interaction, significantly affected chemical properties and biochemical parameters. The total carbon and the water soluble carbon experienced a significant decrease during the wet period. The basal respiration, the arginine ammonification (AA) and the fluoriscein diacetate hydrolysis showed a relatively low microbial activity. The transformation of native savannas to pastures systems of B. brizantha and S. capitata increased the organic matter content in soil. The AA and the basal respiration were sensible indicators to estimate changes in soil quality and also reflected the interaction of temporal changes and management practices.

Se determinó el efecto de la variabilidad temporal y de las prácticas de manejo agrícola sobre las propiedades químicas y parámetros bioquímicos en un típico suelo Ultisol de pasturas nativas e introducidas de las sabanas orientales de los Llanos de Venezuela. La variabilidad temporal, el manejo agrícola y el efecto interactivo de ambos factores, afectaron las propiedades químicas y los parámetros bioquímicos. El carbono orgánico total e hidrosoluble experimentaron una significativa disminución durante la estación lluviosa. La respiración basal, la amonificación de la arginina (AA) y la hidrólisis del diacetato de fluorisceína (DAF) mostraron que en esas sabanas existe una baja actividad microbiana. La transformación de sabanas nativas a sistemas de pasturas de B. brizantha y S. capitata, incrementaron el contenido de materia orgánica en el suelo. La AA, y la respiración basal fueron indicadores sensibles, con los cuales se pueden estimar cambios en la calidad del suelo y reflejar el efecto causado por la interacción de los cambios temporales y las prácticas de manejo.

Avaliação da viabilidade de intestino delgado com isquemia experimental pelo uso de fluoresceína sódica em eqüinos / Evaluation of the small intestine viability with experimental ischemia by the use of sodic fluorescein in horses

Com o objetivo de testar o sal sódico de fluoresceína na indicação da viabilidade intestinal em casos de processos isquêmicos do intestino delgado de eqüinos, desenvolveu-se um modelo isquêmico através de ligadura artério-venosa durante 120 minutos. Foram utilizados 10 animais, SRD, sendo seis machos, com peso e idade médios de 293kg e 11 anos. Cada animal foi submetido a duas cirurgias, uma para a realização das ligaduras e observação do desempenho da fluoresceína e outra, 24 horas após, para confirmação macroscópica das informações obtidas na primeira cirurgia. O acesso adotado foi pela linha média, sendo exteriorizado um segmento de aproximadamente 20 cm de intestino delgado. Após o período estabelecido para a isquemia, as ligaduras foram desfeitas e o segmento intestinal foi avaliado através da fluoresceína sódica, aplicada sistematicamente na dose de 100 mg/kg, quanto às condições de viabilidade tecidual. A fluoresceína sódica mostrou-se como um objetivo e seguro método de indicação da viabilidade intestinal.

The purpose of this study was to evaluate the use of fluorescein as an indicator of intestinal viability under schemic processes induced by A-V ligature during 120 minutes. Ten mixed-breed horses, 6 males and 4 females, with an average weight and age of 293kg and 11 years, respectively were submitted to two surgeries, one to make the ligatures and to observe the effects of fluorescein; the second, 24 hours later, to confirm macroscopically the information obtained during the first. The surgical approach was made through the abdominal midline and a 20cm long segment of the small intestine was exteriorized. After the ischemic period the ligatures were removed and the intestinal segment was evaluated for tissue viability by the systemic injection of 100mg/B.W. of sodic fluorescein. The results revealed that sodicfluorescein is a good and safe indicator of intestinal viability.

Uso da fluorsceína na identificação dos vasos linfáticos superficiais das glândulas mamárias em cadelas / Use of fluorescein to identify the superficial lymphatic vessels of mammary glands in bitches

Uma técnica empregando fluoresceína sódica 5 por cento e luz ultravioleta foi desenvolvida para a identificação dos trajetos dos vasos linfáticos superficiais das glândulas mamárias em dez cadelas. A fluoresceína foi injetada por via intradérmica ao redor da base de cada mamilo e cada mama foi observada após 5, 15, 30 e 60 minutos. Em cada animal, primeiramente, foram avaliadas as mamas torácica cranial, abdominal cranial e inguinal das cadeias direita e esquerda e 48 horas após as mamas torácica caudal e abdominal caudal das cadeias direita e esquerda. De um total de 97 mamas injetadas, em 8 a fluoresceína não foi captada pelos linfáticos. O tempo de 30 minutos foi o mais adequado para a visualização total dos trajetos. Mostrou ser um método simples, rápido e inócuo de verificação in vivo de vasos linfáticos.

The superficial lymphatic vessels of mammary glands were studied in ten bitches using 5 percent sodium fluorescein and ultraviolet light. Fluorescein was injected intradermally around each nipple basis and each mammary gland was observed after 5, 15, 30 and 60 minutes. In each animal, it was evaluated the cranial thoracic, cranial abdominal and inguinal mammary glands of the rigth and left chains, and after 48 hours the caudal thoracic and caudal abdominal mammary glands of the rigth and left chains. Fluorescein was not captured by the lymphatics in 8 of the 97 mammary glands injected. The best visualization of the trajectories was at 30 minutes after fluorescein injection. This is a simple, rapid and innocuous method for in vivo examination of the lymphatic vessels.