Phytochemistry and fungitoxic potential of extract and fractions of pouteria ramiflora on fusarium solani f. sp. phaseoli / Fitoquímica e potencial fungitóxico de extrato e frações de Pouteria ramiflora SOBRE Fusarium solani f. sp. phaseoli

Among the fungus that attack the common bean crop there is Fusarium solani f.sp. phaseoli (Fsp), causing major losses. Taking into account its importance, the objective of this work was to determine the secondary metabolites class and the potential fungicide of the Pouteria ramiflora leaves on Fsp. The ethanol extract was dissolved in methanol/water and partitioned successively with hexane, dichloromethane, chloroform, ethyl acetate and butanol, subjected to the chemical profile. The solutions were prepared in concentrations of 800, 1200, 1600, 2000 and 2400 µ g/mL and poured into Petri dishes; then, 0.5 cm disc of diameter with spores and mycelia of Fsp was deposited. These dishes were incubated in temperature of 25 ± 2 °C and the evaluations, performed by measuring the colonies diameter (five replications) until reaching the dishes border (three days) with a completely randomized experimental design. Through the Mycelial Index Growth Speed (MIGS) data, analysis of variance was performed and when significant, applied the regression analysis. The results indicated that all fractions and the extract have the phenolic compounds and/or derivatives as one of the major constituents except the hydroethanolic fraction. The extract and its fractions decreased the Fsp MIGS, in the same proportion in which concentrations were increased; the greatest reduction occurred in the butanol fraction at the concentration of 2400 µg/mL, with growth close to zero, indicating its potential use for the Fsp control, probably due to the presence of anthraquinones.

Entre os fungos que acometem a cultura do feijão está Fusarium solani f.sp. phaseoli, causando perdas na produtividade. Levando-se em consideração sua importância, o objetivo deste trabalho foi determinar a classe de metabólitos secundários e o potencial fungicida das folhas de curriola (Pouteria ramiflora) sobre F. solani, em condições de laboratório. O extrato etanólico foi dissolvido em metanol/água e particionado sucessivamente com hexâno, diclorometano, clorofórmio, acetato de etila e butanol, submetidos ao perfil químico. As soluções foram preparadas nas concentrações de 800, 1200, 1600, 2000 e 2400 µ g/mL evertidas em placas de petri (10 mL); em seguida, foi depositado um disco de 0,5 cm de diâmetro com esporos e micélio de F. solani. As placas foram incubadas a temperatura de 25 ± 2 °C e as avaliações, realizadas por meio da medição do diâmetro das colônias (cinco repetições) até atingir a borda da placa (três dias), com delineamento experimental inteiramente casualizado. Através dos dados do Índice de Velocidade de Crescimento Micelial (IVCM), foi realizada a análise de variância e quando significativa, aplicada a análise de regressão. Os resultados indicaram que todos as frações e o extrato possuem os compostos fenólicos e/ou derivados como um dos constituintes majoritários, exceto a fração hidrometanólica. O extrato e suas frações diminuíram o IVCM de F. solani, à medida que se aumentava as concentrações; a maior redução ocorreu na fração butanolica para a concentração de 2400 µ g/mL, com crescimento próximo a zero, indicando seu potencial de uso para controle de F. solani, provavelmente devido a presença de antraquinonas em sua composição.

Controle do tombamento de plântulas de algodoeiro, causado por Rhizoctonia solani, através do tratamento de sementes / Control damping off on cotton seedlings caused by Rhizoctonia solani through seed treatment

O tombamento de plântulas, causado por Rhizoctonia solani, é considerado uma das mais importantes doenças do algodoeiro. Esse patógeno habitante do solo, sobrevive na matéria orgânica ou restos vegetais e pode ser transmitido para as sementes. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do tratamento de sementes com fungicidas no controle do tombamento de plantas causado por R. solani. Os tratamentos utilizados foram: 1) testemunha não inoculada; 2) testemunha inoculada; 3) fluazinam + tiofanato metílico (115,5 + 17,33 g 100 kg-1 sementes); 4) fluazinam + tiofanato metílico (150,5 + 22,58 g 100 kg-1 sem.); 5) fluazinam + tiofanato metílico (185,5 + 27,83 g 100 kg-1 sem.); 6) pencicurom (75 g 100 kg-1 sem.); 7) tolifluanida (100 g 100 kg-1 sem.): 8) carbendazim + tiram (90 + 120 g 100 kg-1 sem.) e 9) fludioxonil (5 g 100 kg-1 sem.). Foi avaliada a emergência de plântulas aos 07 e 26 DAS, a porcentagem de incidência de sintomas, a severidade, a altura de plântulas, o comprimento de raiz e a massa de matéria seca aos 26 DAS. O fungicida fluazinam + tiofanato metílico nas doses de 115,5 + 17,33 g i.a. 100-1 kg de sementes, 150,5 + 22,58 g i.a. 100-1 kg de sementes e o fungicida tolifluanida na dose de 100 g i.a. 100-1 kg de sementes, mostram-se eficientes no controle de tombamento do algodoeiro causado por Rhizoctonia solani, podendo a mistura de fluazinam + tiofanato metílico ser recomendada para o controle deste patógeno. Plântulas do tratamento testemunha inoculada apresentaram menor altura, caracterizando menor desenvolvimento inicial da cultura, sendo então adequado o tratamento de sementes com fungicidas.

Damping off, caused by Rhizoctonia solani, is one of the most important cotton diseases. This soil pathogen, survives in organic matter and can be transmitted by seeds. The objective of this study was evaluate the effect of seeds treatment with a fungicides for control of damping off, caused by R. solani. The evaluated treatments were as follows: 1) untreated check without inoculation; 2) untreated check with inoculation; 3) fluazinam + thiophanate-methyl (115,5 + 17,33 g.100 kg-1 seeds); 4) fluazinam + thiophanate-methyl (150,5 + 22,58 g.100 kg-1 seeds); 5) fluazinam + thiophanate-methyl (185,5 + 27,83 g.100 kg-1 seeds); 6) pencycuron (75 g.100 kg-1 seeds); 7) tolylflouanid (100 g.100 kg-1 seeds): 8) carbendazin + thiram (90 + 120 g.100 kg-1 seeds) and 9) fludioxonil (5 g.100 kg-1 seeds). It was evaluated the plant population at 7 and 26 days after sowing; incidence and severity of the disease; seedling height; root length and dry weight at 26 days afeter sowing. The fungicide fluazinam + thiophanate methyl doses 115,5 + 17,33 g i.a. 100-1 kg seeds, 150,5 + 22,58 g i.a. 100-1 kg seeds and the fungicide tolylfluanid doses 100 g i.a. 100-1 kg seeds, showed control efficiency of cotton dumping off caused by Rhizoctonia solani, can be recommended to this pathogen control. Seedlings of untreated check with inoculation showed short height, characterizing less start development of the culture, been recommended the seed treatment with fungicides.

Variabilidade genética na região its do rDNA de isolados de trichoderma spp. (Biocontrolador) e Fusarium oxysporum f. sp. Chrysanthemi / Genetic variability in rDNA ITS region of Trichoderma spp. (biocontrole agent) and Fusarium oxysporum f. sp. chrysanthemi isolates

A análise de características morfológicas e culturais podem não ser suficientes para uma caracterização precisa das espécies de Trichoderma e Fusarium. Objetivou-se, neste trabalho, caracterizar a região do Espaço Interno Transcrito (ITS) do rDNA dos isolados UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17 de Trichoderma spp. utilizados no biocontrole de Fusarium oxysporum f. sp. chrysanthemi (isolado) UFSMF6. A extração de DNA de cada isolado foi realizada a partir de micélio produzido em meio líquido Batata-Dextrose. As amostras de DNA genômico foram submetidas à Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) com os oligonucleotídeos iniciadores universais ITS1 e ITS4 e o produto gerado foi sequenciado. Os fragmentos gerados pela amplificação da PCR foram tratados com as enzimas de restrição HaeIII, HinfI e MboI. As regiões ITS1, ITS2 e 5.8S do rDNA desses isolados fúngicos foram amplificadas com sucesso. A região ITS dos isolados UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17 de Trichoderma e o isolado UFSMF6 de Fusarium apresentaram uma banda simples com um fragmento de aproximadamente 600 pares de base (pb). As enzimas de restrição HaeIII, HinfI e MboI geraram polimorfismo de bandas entre os isolados. Com base nas análises da sequência de DNA, os isolados UFSMT15.1, UFSMT16, UFSMT17 e UFSMF6 apresentaram maior similaridade com as espécies Trichoderma koningiopsis, Hypocrea virens, Hypocrea lixii e Fusarium oxysporum, respectivamente.

The analysis of morphological and cultural characteristics may not enough for the characterization of the species of Trichoderma and Fusarium. The aim of this work was to characterize the Internal Transcribed Spacer (ITS) region of the rDNA of UFSMT15.1, UFSMT16 and UFSMT17 isolates of Trichoderma spp. used in the biocontrol of Fusarium oxysporum f. sp. chrysanthemi UFSMF6. DNA extraction of each isolate was accomplished starting from hyphae produced in liquid medium Potato-Dextrose-Agar. The samples of genomic DNA were submitted to the Polymerase Chain Reaction (PCR) with the primers ITS1 and ITS4, and the product was sequenced. The fragments generated from PCR amplification were digested with the restriction enzymes HaeIII, HinfI and MboI. The ITS region of the Trichoderma's isolates UFSMT15.1, UFSMT16 and UFSMT17 and the Fusarium UFSMF6 isolate showed a simple band with a fragment with 600 base pairs (bp) approximately. The restriction enzymes HaeIII, HinfI and MboI generated band polymorphism among the isolates. The isolates UFSMT15.1, UFSMT16, UFSMT17 and UFSMF6 showed high similarity whit Trichoderma koningiopsis, Hypocrea virens, Hypocrea lixii and Fusarium oxysporum species, respectively.

Seleção de antagonistas fúngicos a Fusarium solani e Fusarium oxysporum em substrato comercial para mudas / Selection of fungi antagonistic to Fusarium solani and Fusarium oxysporum in commercial substrate for seedlings

Testes in vitro são geralmente utilizados para a seleção inicial de agentes de biocontrole contra fungos de solo, faltando metodologias que utilizem solo e/ou substrato. O objetivo deste trabalho foi realizar a seleção massal de isolados fúngicos antagônicos a F. solani e F. oxysporum em substrato comercial para mudas. Foram realizados dois experimentos com os patógenos F. solani e F. oxysporum e com 98 possíveis antagonistas fúngicos, dos gêneros Penicillium claviforme, Penicillium, Aspergillus e Cladosporium. A suspensão dos patógenos foi inserida no substrato, em copos plásticos, sendo acrescentada, cinco dias depois, a suspensão dos demais fungos. Avaliou-se o número de unidades formadoras de colônia de F. solani e F. oxysporum por grama de substrato após nove dias. Dos 98 isolados utilizados contra F. solani, 43 por cento não diferiram da testemunha e 57 por cento reduziram o seu desenvolvimento em substrato, sendo que os três melhores isolados fúngicos foram do gênero Penicillium claviforme. Os três isolados de Penicillium claviforme selecionados para F. solani também foram eficientes para F. oxysporum.

Tests in vitro are usually used for the initial selection of biocontrol agents against soil fungi, lacking methodologies using soil and/or substrate. The objective of this research was to accomplish the mass selection of fungi isolates antagonistic to F. solani and F. oxysporum in commercial substrate for seedlings. Two experiments were conducted, with the pathogens F. solani and F. oxysporum, and 98 possible antagonistic fungi of the genera Penicillium claviforme, Penicillium, Aspergillus and Cladosporium. The suspension of the pathogens was inoculated in the substrate, in plastic cups, and the suspension of the other fungi was added five days later. The number of colony-forming unit of F. solani and F. oxysporum/g of substrate was counted after nine days. Of the 98 isolates used against F. solani, 43 percent did not differ from the control, and 57 percent reduced its development in the substrate, with the three best isolates belonging to the genus Penicillium claviforme. The three isolates of Penicillium claviforme selected for F. solani were also efficient against F. oxysporum.