ABSTRACT
El objetivo de este estudio fue identificar los genes blaTEM, blaSHV y blaCTX-M en aislados clínicos de enterobacterias productoras de b-lactamasas de espectro extendido (BLEE), recolectadas entre septiembre y noviembre de 2005. Además de la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación, los aislados también mostraron resistencia a cloranfenicol (59,2%) amikacina (37,0%) y gentamicina (40,7%) y se mostraron sensibles a imipenem y meropenem. Nueve cepas lograron transferir la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación, así como la producción de BLEE. En los aislados clínicos se detectaron los genes blaSHV, blaTEM y blaCTX-M, donde los tipos blaTEM-1, blaSHV-1, blaSHV-5 blaSHV-5-2a y blaCTX-M-1 fueron los prevalentes; mientras que en las transconjugantes sólo se detectaron blaTEM-1, blaSHV-5 y blaSHV-5-2a. Se identificaron en total siete tipos de genes, de los cuales cinco eran codificantes de enzimas tipo BLEE, lo que demuestra que en el centro hospitalario la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación es debida a diversas enzimas.
The objective of the present investigation was to identify the blaTEM, blaSHV and blaCTX-M genes on extended-spectrum b-lactamases (ESBL) producing Enterobacteriaceae from clinical isolates, collected between September and November 2005. In addition to third-generation cephalosporin resistance, the isolates also showed resistance to chloramphenicol (59.2%), amikacin (37.0%) and gentamicin (40.7%), and demonstrated sensitivity to imipenem and meropenem. Nine strains were capable of transferring third-generation cephalosporin resistance, as well as the production of ESBL. In the clinical isolates, the genes blaSHV, blaTEM and blaCTX-M were detected, being more prevalent the types blaTEM-1, blaSHV-1, blaSHV-5 blaSHV-5-2a and blaCTX-M-1; while in the trans-conjugated only blaTEM-1, blaSHV-5 y blaSHV-5-2a were found. In total, seven types of genes were identified, five of which were codifying genes for ESBL-type enzymes. This demonstrates that in the hospital center, resistance to third-generation cephalosporin is mediated by several enzymes.
Subject(s)
Humans , Bacterial Proteins/genetics , Cross Infection/microbiology , Drug Resistance, Multiple, Bacterial/genetics , Enterobacteriaceae Infections/microbiology , Enterobacteriaceae/genetics , Genes, Bacterial , beta-Lactamases/genetics , Bacterial Proteins/physiology , Cross Infection/genetics , DNA, Bacterial/genetics , Enterobacter/drug effects , Enterobacter/enzymology , Enterobacter/genetics , Enterobacteriaceae Infections/genetics , Enterobacteriaceae/drug effects , Enterobacteriaceae/enzymology , Enterobacteriaceae/isolation & purification , Escherichia coli/drug effects , Escherichia coli/enzymology , Escherichia coli/genetics , Klebsiella pneumoniae/drug effects , Klebsiella pneumoniae/enzymology , Klebsiella pneumoniae/genetics , Substrate Specificity , beta-Lactamases/physiologyABSTRACT
En Colombia se han detectado genes del grupo CTX-M-1 con alta frecuencia en aislamientos de Klebsiella pneumoniae causantes de infección intrahospitalaria. El conocimiento de los factores genéticos que pueden favorecer la diseminación de estos genes entre especies bacterianas es un aspecto importante para el control de la resistencia. En este estudio se identificaron los plásmidos portadores del gen blaCTX-M-12 en 21 aislamientos clínicos de K. pneumoniae. Se evaluó por conjugación la transferencia de resistencia a antibióticos. Integrones, secuencias de inserción y otros elementos genéticos fueron detectados por amplificación del ADN plasmídico con la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Mediante análisis por PCR se determinó la relación entre el gen blaCTX-M-12 y los elementos genéticos detectados. En todos los aislamientos, el gen blaCTX-M-12 se encontró en plásmidos conjugativos de tamaños entre 65 y 106 kpb. La transferencia por conjugación de estos elementos móviles puede explicar la amplia diseminación de este gen entre enterobacterias causantes de infección nosocomial en hospitales de Bogotá, Colombia. El gen blaCTX-M-12 se encontró corriente abajo de ISEcp1, secuencia de inserción que se ha asociado con la movilización de determinantes genéticos de resistencia. Los promotores de ISEcp1, detectados por análisis de secuencia, pueden facilitar la expresión de la cefotaximasa codificada por este gen.
Genes from CTX-M-1 group have been detected with great frequency in Colombia in intrahospital infection-causing Klebsiella pneumoniae isolates. Knowledge regarding the genetic factors favouring such genesâ dissemination amongst bacterial species is an important issue for resistance control blaCTX-M-12 gene-carrying plasmids were identified in this study in 21 clinical K. pneumoniae isolates. Antibiotic resistance transfer was evaluated by mating. Integrons, insertion sequences and other genetic elements were detected by plasmid DNA amplification using polymerase chain reaction (PCR). The relationship between the blaCTX-M-12 gene and other genetic elements was determined by PCR analysis. The blaCTX-M-12 gene was disemifound on 52 to 106 Kpb conjugative plasmids in all isolates. These mobile elementsâ transfer by mating may explain their wide dissemination amongst nosocomial infection-causing enterobacteria in hospitals in Bogota, Colombia. The blaCTX-M-12 gene was found downstream from ISEcp1, this being an insertion sequence which has been associated with resistance genetic determinantsâ mobilisation. ISEcp1 promoters (detected by sequence analysis) may increase the expression of cefotaximase encoded by this gene.