'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' and tick-borne pathogens screening in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from Curitiba and Foz do Iguaçu Cities, Paraná State, southern Brazil / 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' e triagem para patógenos transmitidos por carrapatos em gambás de orelha branca (Didelphis albiventris) das cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, Estado do Paraná, sul do Brasil

Abstract Hemoplasmas are epierythrocytic bacteria that infect mammals. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' was detected in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from southern and central-western Brazil. The present study aimed at: i) screening opossums for tick-borne (TBP) pathogens (Piroplasmida and Anaplasmataceae) and ii) detecting and characterizing hemoplasma species infecting opossums from Curitiba and Foz do Iguaçu cities in the Paraná State, southern Brazil. Thirty blood samples from white-eared opossums were evaluated by PCR assays. Animals were not infested by ectoparasites. The mammalian endogenous gapdh gene was consistently amplified in all samples. All opossums tested negative for Theileria/Babesia spp. and Ehrlichia/Anaplasma spp. by PCR based on 18S rRNA and 16S rRNA genes, respectively. A genus-specific PCR assay based on the 16S rRNA gene of hemoplasmas showed that three/13 (23.08%; CI 95%: 8.18-50.26%) opossums from Foz do Iguaçu were positive for hemotropic Mycoplasma sp. All opossums from Curitiba tested negative for hemoplasmas. Sequencing of both the 16S and 23S rRNA genes revealed that the animals were infected by 'Ca. M. haemoalbiventris'. Although 'Ca. M. haemoalbiventris' is prevalent in opossums in Brazil, clinical signs associated with its infection and its putative vectors remain unknown.

Resumo Hemoplasmas são bactérias epieritrocíticas que infectam mamíferos. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' foi detectado previamente em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) das regiões sul e centro-oeste do Brasil. O presente estudo objetivou: i) triar os gambás para as doenças transmitidas por carrapatos (Piroplasmida e Anaplasmataceae); e ii) detectar e caracterizar as espécies de hemoplasma que infectam gambás nas cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Trinta amostras de sangue de gambás-de-orelha-branca foram analisadas por PCR. Os animais não estavam infestados por ectoparasitos. O gene endógeno de mamífero gapdh foi amplificado em todas as amostras. Todos os gambás testaram negativos para Theileria/Babesia spp. e Ehrlichia/Anaplasma spp. por PCR, respectivamente, para os genes 18S rRNA e 16S rRNA. Uma PCR gene-específica, baseada no gene 16S rRNA de hemoplasmas, mostrou que três/13 (23,08%; CI 95%: 8,18-50,26%) gambás de Foz do Iguaçu foram positivos para Mycoplasma sp. hemotrópico. Todos os gambás de Curitiba testaram negativos para hemoplasmas. O sequenciamento de fragmentos dos genes 16S e 23S rRNA revelou que os animais estavam infectados pelo 'Ca. M. haemoalbiventris'. Embora 'Ca. M. haemoalbiventris' seja prevalente em gambás no Brasil, os sinais clínicos associados à infecção e os prováveis vetores permanecem desconhecidos.

Hemoplasma infection in wild captive carnivores / Infecção por hemoplasmas em carnívoros selvagens cativos

Hemoplasmas are bacteria able to adhere themselves loosely to the plasma membrane of erythrocytes and may parasitize several species of mammals. There are three known species of hemoplasmas that parasitize domestic and wild cats: Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus Mycoplasma haemominutum' and 'Candidatus Mycoplasma turicensis'. Dogs are infected by at least two species of hemoplasmas: 'Candidatus Mycoplasma haematoparvum' and Mycoplasma haemocanis. The hemoplasmoses are very important in veterinary clinics, either because of its worldwide distribution and severity of clinical signs, depending on parasite species and host immune competence, or due to its zoonotic potential and capability of infecting endangered species. This study set out to investigate which hemoplasmas species parasitize different captive wild carnivores in order to clarify the epidemiology of hemoplasmoses in wild animals. Furthermore, the research intended to characterize the hematological changes caused by different species of hemotropic mycoplasmas infection in order to establish their clinical importance to wild species and the capacity of these species to become a reservoir of studied agents. Samples of 33 wild felids and 18 wild canids were investigated using polymerase chain reaction (PCR) to detect hemoplasmas DNA and it was observed that the occurrence of infection in these species is 45.5% and 83.3%, respectively. Factors such as age, gender or anaemia are not more frequent in animals positive for the infection. Therefore, it is concluded that infection caused by hemoplasmas in wild carnivores has high prevalence, and either agent pathogenicity is low, or chronic stage is more frequent, resulting in a low rate of diagnosis.(AU)

Hemoplasmas são bactérias capazes de aderir frouxamente à membrana plasmática de eritrócitos e que podem parasitar diversas espécies de mamíferos. São conhecidas três espécies de hemoplasmas que parasitam felídeos domésticos e selvagens: Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus Mycoplasma haemominutum' and 'Candidatus Mycoplasma turicensis'. Cães são infectados por ao menos duas espécies de hemoplasmas: Candidatus Mycoplasma haematoparvum' and Mycoplasma haemocanis. As hemoplasmoses são de grande importância na clínica veterinária, tanto pela sua distribuição ubíqua e severidade dos sinais clínicos, a depender da espécie do parasita e imunocompetência do hospedeiro, quanto pelo seu potencial zoonótico e capacidade de infectar espécies ameaçadas. Este estudo visa investigar quais espécies de hemoplasmas parasitam diferentes carnívoros selvagens de cativeiro, a fim de esclarecer a epidemiologia das hemoplasmoses em animais selvagens. Além disso, o trabalho objetivou caracterizar as alterações hematológicas causadas pela infecção por diferentes espécies de micoplasmas hemotrópicos visando estabelecer sua importância clínica para espécies selvagens e a capacidade destas espécies de se tornar reservatórios dos agentes estudados. Amostras de 33 felídeos selvagens e de 18 canídeos selvagens foram investigadas por meio da reação em cadeia da polimerase (RCP) para detectar o DNA dos agentes e foi observado que a ocorrência da infecção por hemoplasmas nestas espécies é de 45,5% e 83,3%, respectivamente. Fatores como idade, sexo ou anemia não são mais frequentes em animais positivos para a infecção. Dessa forma, conclui-se que a infecção causada por hemoplasmas em carnívoros selvagens possui alta prevalência, no entanto ou a patogenicidade dos agentes é baixa ou o estágio crônico da infecção é mais frequente, resultando em uma baixa frequência diagnóstica.(AU)

Detection of Hemotropic Mycoplasma sp. in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from Southern Brazil / Detecção de Mycoplasma sp. hemotrópico em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) no Sul do Brasil

Abstract Opossums are marsupials from the New World of the genus Didelphis and known as synanthropic animals due to their proximity with human beings. To date, 'Candidatus Mycoplasma haemodidelphis' has been solely found infecting the North American opossum (Didelphis virginiana). Accordingly, the aim of this study was to screen eight white-eared opossums (Didelphis albiventris) from a public park in Maringa city, Paraná State, southern Brazil, for hemoplasma infection. Blood samples were taken from caudal venipuncture, and DNA was extracted and further screened by a pan-hemoplasma PCR assay. Seven out of eight (87.50%; CI 95%: 47.35-99.68%) white-eared opossums were positive for Mycoplasma spp. Sequencing of the 16S rRNA fragment showed 98,97% identity with 'Ca. M. haemodidelphis' detected in the USA. Three out of eight (37.50%; CI 95%: 8.52-75.51%) white-eared opossums were infested by Amblyomma dubitatum ticks. This is the first report on detection of a potentially novel hemotropic Mycoplasma sp. infecting opossums from South America.

Resumo Gambás são marsupiais do Novo Mundo, pertencentes ao gênero Didelphis, e considerados animais sinantrópicos devido à sua proximidade com seres humanos. Atualmente, a espécie 'Candidatus Mycoplasma haemodidelphis' só foi encontrada infectando gambá norte americano (Didelphis virginiana). O objetivo do presente estudo foi detectar a infecção por hemoplasmas em oito gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) capturados em um parque público da cidade de Maringá, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Amostras de sangue foram coletadas por venopunção caudal para a extração do DNA e posterior análise pela PCR para espécies de hemoplasmas. Sete de oito animais (87,50%; CI 95%: 47,35-99,68%) foram considerados positivos para Mycoplasma spp. O sequenciamento do fragmento do gene 16S rRNA obtido apresentou 98.97% de similaridade com sequências de 'Ca. M. haemodidelphis' detectadas nos Estados Unidos. Três gambás (37,50%; CI 95%: 8,52-75,51%) estavam infestados por carrapatos da espécie Amblyomma dubitatum. Esse é o primeiro relato de detecção de uma potencial nova espécie de Mycoplasma hemotrópico infectando gambás na América do Sul.

Distribución geográfica de la casuística clínica bovina del servicio ambulatorio de grandes animales de la Universidad de Córdoba (Colombia) / Geographic distribution of bovine clinical casuistry in the outpatient service for large animals at the Universidad de Córdoba (Colombia) / Distribuição geográfica da casuística clínica bovina do serviço ambulatório de grandes animais da Universidade de Córdoba (Colômbia)

Resumen En este estudio se realizó la distribución geográfica de la casuística clínica bovina del servicio ambulatorio de grandes animales de la Universidad de Córdoba (Colombia). Fueron consideradas dentro del estudio solo aquellas historias clínicas completas que presentaran un diagnóstico definitivo. Los casos atendidos fueron clasificados según el sistema afectado, el diagnóstico definitivo, el tipo de tratamiento (médico o quirúrgico) y la ubicación geográfica en Córdoba. Se analizaron 6356 historias clínicas de casos presentados entre 2005 y 2016, de las cuales el 77,09 % fueron en la especie bovina, y el sistema más afectado fue el hematopoyético con 79,29 % de la casuística, seguido del sistema tegumentario (11,18 %) y el sistema digestivo (2,86 %). Se atendió el 73 % de los municipios del departamento, donde se observó un alto predominio de alteraciones en el sistema hematopoyético (79,29 %), seguido por el sistema tegumentario (11,18 %) y el sistema digestivo (2,86 %). Se estableció que el sistema hematopoyético fue afectado por hematrópicos endoglobulares como Babesia spp. y Anaplasma spp., mientras que el sistema tegumentario fue afectado principalmente por infestaciones con Rhabditis spp. (41 %), seguido de infecciones por dermatofitosis (19 %) y papilomavirus (16 %). Se puede concluir que el servicio ambulatorio de la Clínica Médico-Quirúrgica de Grandes Animales de la Universidad de Córdoba posee una amplia y variada casuística, lo que se demuestra variedad en las frecuencias de las patologías que afectan a los grandes animales de Córdoba. El conocimiento geoespacial de las enfermedades es una herramienta esencial en el adecuado desempeño profesional.

Abstract This study examined the geographical distribution of bovine clinical casuistry in the outpatient service for large animals at the Universidad de Córdoba (Colombia). Only those complete clinical histories were considered for the study that presented a definitive diagnosis. The cases treated were classified according to the affected system, definitive diagnosis, type of treatment (medical or surgical), and geographical location in Córdoba. The study included 6356 clinical histories of cases presented between 2005 and 2016; 77.09% of them in the bovine species, and the most affected system was the hematopoietic system with 79.29% of casuistry, followed by the integumentary system (11.18%), and the digestive system (2.86%). 73% of the municipalities of the department were included, where a high prevalence of. It was established that the hematopoietic system was affected by endoglobular hemotropic parasites such as Babesia spp. and Anaplasma spp., while the integumentary system was mainly affected by infestations caused by Rhabditis spp. (41%), followed by dermatophytosis (19%) and papillomavirus infections (16%). It can be concluded that the outpatient service of the Medical-Surgical Clinic of Large Animals at the Universidad de Córdoba has a wide and varied casuistry, which is demonstrated in the frequency of pathologies that affect large animals in Córdoba. The geospatial knowledge of diseases is an essential tool for proper professional performance.

Resumo Neste estudo se realizou a distribuição geográfica da casuística clínica bovina do serviço ambulatório de Grandes Animais da Universidade de Córdoba (Colômbia). Foram consideradas dentro do estudo somente aquelas histórias clínicas completas que apresentaram um diagnóstico definitivo. Os casos atendidos foram classificados de acordo com o sistema afetado, o diagnóstico definitivo, o tipo de tratamento (médico ou cirúrgico) e a localização geográfica em Córdoba. Analisaram-se 6356 histórias clínicas de casos apresentados entre 2005 e 2016, das quais o 77,09 % foram na espécie bovina, e o sistema mais afetado foi o hematopoiético com 79,29 % da casuística, seguido do sistema tegumentário (11,18 %) e o sistema digestivo (2,86 %). Se atendeu o 73 % dos municípios do estado, donde se observou um alto predomínio de alterações no sistema hematopoiético (79,29 %), seguido pelo sistema tegumentário (11,18 %) e o sistema digestivo (2,86 %). Se estabeleceu que o sistema hematopoiético foi afetado por hemotrópicos endo globulares como Babesia spp. e Anaplasma spp., em quanto que o sistema tegumentário foi afetado principalmente por infestações com Rhabditis spp. (41 %), seguido de infecções por dermatofitose (19 %) e papiloma vírus (16 %). Se pode concluir que o serviço ambulatório da Clínica Médico-Cirúrgica de Grandes Animais da Universidade de Córdoba possui uma ampla e variada casuística, o que se demonstra nas frequências das patologias que afetam aos Grandes Animais de Córdoba. O conhecimento geoespacial das doenças é uma ferramenta essencial no adequado desempenho profissional.

High occurrence of Mycoplasma suis infection in swine herds from non-technified farms in Mossoró, state of Rio Grande do Norte, Northeastern Brazil / Alta ocorrência de infecção por Mycoplasma suis em suínos de criações não tecnificadas de Mossoró, estado do Rio Grande do Norte, Nordeste brasileiro

Abstract Mycoplasma suis, the etiological agent of swine hemoplasmosis, has been neglected in swine herds around the world. Swine hemoplasmosis is frequently associated with hemolytic anemia, disgalacty, infertility and immunosuppression, and it results in significant economic losses. This study investigates the occurrence of M. suis in non-technified swine herds in the northeastern region of Brazil using quantitative PCR (qPCR) based on the 16S rRNA gene. Between March and August 2013, blood samples from 147 swine were collected during slaughter in the city of Mossoró, state of Rio Grande do Norte, northeastern Brazil. One hundred and twelve samples (76.19%) were positive for M. suis by qPCR assays. The range of Cqs and quantification (copies of a M. suis-16S rRNA gene fragment/µL) was 20.86–37.89 and 1.64×101–6.64×107, respectively. One can conclude that M. suis infection have high occurrence (76,19%) in non-technified swine-rearing systems in Mossoró in the state of Rio Grande do Norte, Brazil.

Resumo Mycoplasma suis, agente etiológico da hemoplasmose suína, tem sido negligenciado nas criações de suínos ao redor do mundo. A hemoplasmose suína é frequentemente associada à anemia hemolítica, disgalactia, infertilidade e imunossupressão, acarretando em perdas econômicas. O objetivo do presente trabalho foi investigar, por meio da PCR quantitativa (qPCR) baseada no gene rRNA 16S, a ocorrência de M. suis em amostras de sangue de suínos de criações não tecnificadas na cidade de Mossoró, Estado do Rio Grande do Norte. Entre março a agosto de 2013, foram colhidas amostras de sangue de 147 suínos de criações não tecnificadas da referida região. Cento e doze amostras (76,19%) amostras mostraram-se positivas na qPCR para M. suis. A média dos Cqs e da quantificação (número de cópias do gene 16S rRNA de M. suis por microlitro) foi de 20,86 – 37,89 e 1,64 x 101 a 6,64 x 107, respectivamente. Conclui-se que a infecção por M. suis apresenta alta ocorrência (76,19%) em criações de suínos não tecnificadas na cidade de Mossoró, estado do Rio Grande do Norte.

Prevalencia de parásitos hematrópicos endoglobulares en bovinos gyr puros en Córdoba,Colombia / Prevalence of Endoglobular Hemotropic Parasites in Pure Gyr Cattle in Córdoba, Colombia / Prevalência de parasitas hemotrópicos endo globulares em bovinos gyr puros em Córdoba, na Colômbia

La tristeza parasitaria bovina produce importantes pérdidas en Colombia y está asociada con la presencia de garrapatas. Es causada por parásitos hematrópicos endoglobulares microscópicos como Anaplasma spp. y Babesia spp. En el presente estudio se muestrearon 131 bovinos gyr puros de cuatro explotaciones ganaderas en Córdoba, Colombia. Se tomó una muestra de sangre de 5 ml de la vena coccígea para la determinación de hematocrito y para realizar el extendido sanguíneo y coloreado con tinción de Wright para evaluar formas parasitarias intracelulares morfológicamente compatibles con Anaplasma spp. y Babesia spp. Se usó Chi cuadrado, con el objeto de determinar si las variables condición corporal, color de mucosas, sexo y sistemas de producción (pastoreo, semiconfinamiento y confinamiento) eran independientes de la frecuencia de parásitos hematrópicos endoglobulares. En el presente estudio se encontró que el 24,43 % de los animales muestreados fue positivo a parásitos hematrópicos endoglobulares, de los cuales el 20,61 % (27/131) fue positivo a Anaplasma spp.; el 3,05 % (4/131), a Babesia spp., y el 0,76 % (1/131), a Anaplasma spp. y Babesia spp. conjuntamente. No existen diferencias significativas (p > 0,05) para las variables color de mucosas, sexo y sistemas de producción (pastoreo, semiconfinamiento y confinamiento). Esto permite registrar por primera vez la prevalencia de infección por parásitos hematrópicos endoglobulares en bovinos Bos indicus de la raza gyr, específicamente.

Bovine parasitic sadness produces significant losses in Colombia and it is associated with the presence of ticks. It is caused by microscopic endoglobular hemotropic parasites such as Anaplasma spp. and Babesia spp. In this study, 131 pure Gyr cows were studied from four cattle farms in Córdoba, Colombia. A blood sample of 5 ml was collected from the coccygeal vein for hematocrit determination and for blood smears stained with Wright's stain, in order to assess intracellular parasitic forms morphologically compatible with Anaplasma spp. and Babesia spp. Chi-square test was used to determine whether the variables of body condition, mucous color, sex and production system (grazing, semi-confinement, and confinement) were independent from the frequency of endoglobular hemotropic parasites. The study found that 24.43% of the sampled animals were positive for endoglobular hemotropic parasites; 20.61% (27/131) of them were positive for Anaplasma spp.; 3.05% (4/131) for Babesia spp., and 0.76% (1/131) for both Anaplasma spp. and Babesia spp. No significant differences (p > 0.05) were found for variables of mucous color, sex and production system (grazing, semi-confinement, and confinement). This allowed to register for the first time the prevalence of infection by endoglobular hemotropic parasites in Bos indicus cattle, of the Gyr breed specifically.

A tristeza parasitária bovina produz importantes perdas na Colômbia e está associada com a presença de carrapatos. É causada por parasitas hemotrópicos endoglobulares microscópicos como Anaplasma spp. e Babesia spp. Neste estudo foram amostrados 131 bovinos gyr puros de quatro explorações e gado em Córdoba, na Colômbia. Foi tomada uma amostra de sangue de 5 ml da veia coccígea para a determinação de hematócrito e para realizar o esfregaço sanguíneo estendido e corado com corante de Wright para avaliar formas parasitárias intracelulares morfologicamente compatíveis com Anaplasma spp. e Babesia spp. Usou-se chi quadrado, com o objetivo de determinar se as variáveis condição corporal, cor de mucosas, sexo e sistemas de produção (pastoreio, semi-confinamento e confinamento) eram independentes da frequência de parasitas hemotrópicos endo globulares. Neste estudo determinou-se que 24,43 % dos animais amostrados foram positivo para parasitas hemotrópicos endo globulares, dos quais o 20,61 % (27/131) foi positivo a Anaplasma spp; o 3,05 % (4/131), a Babesia spp., e o 0,76 % (1/131), a Anaplasma spp. e Babesia spp. de maneira conjunta. Não existem diferenças significativas (p > 0,05) para as variáveis cores de mucosas, sexo e sistemas de produção (pastoreio, semi-confinamento e confinamento). Isto permite registrar pela primeira vez a prevalência de infecção por parasitas hemotrópicos endo-globulares em bovinos Bos indicus da raça gyr, especificamente.

Hemoplasma prevalence and hematological abnormalities associated with infection in three different cat populations from Southern Brazil / Prevalência da infecção por hemoplasmas e alterações hematológicas associadas à infecção em três diferentes populações de gatos do sul do Brasil

Three hemoplasma species are recognized in domestic cats: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’. We report the prevalence and hematological abnormalities of hemoplasma infection in 369 domestic cats from three different populations (blood donors, hospitalized cats and shelter cats) from Southern Brazil. Complete blood counts were performed at the time of blood collection, and DNA was extracted and tested by conventional PCR for each hemoplasma species. A total of 79 samples (21.40%) were positive for at least one species. The most prevalent hemoplasma was ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’, with 50/369 (13.55%) positive cats, followed by ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’, 10/369 (2.71%), and Mycoplasma haemofelis, 8/369 (2.16%). Mycoplasma haemofelis and ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ coinfection was observed in 4/369 (1.08%), whereas ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ in 5/369 (1.35%). Three cats (0.81%) were infected with all three hemoplasmas. There was no association between infection and the different populations. Anemia was associated with Mycoplasma haemofelis and ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’, but not with ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’. Male cats and cats with outdoor access were more likely to be infected. Although ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ is believed to cause minimal or no hematological alterations, the infected cats studied herein were more likely to be anemic.

Três espécies de hemoplasmas são reconhecidas em gatos domésticos: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’. A prevalência e alterações hematológicas associadas à infecção por hemoplasmas foi estudada, em 369 gatos domésticos de três populações distintas (doadores de sangue, hospitais e gatos de abrigo) do Sul do Brasil. Foram realizados hemogramas completos no momento da coleta de sangue e as amostras tiveram seu DNA extraído e testado por PCR convencional para cada espécie de hemoplasmas. Setenta e nove amostras (21,40%) foram positivas para pelo menos uma espécie. O mais prevalente foi ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ com 50/369 (13,55%) gatos positivos, seguidos por ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ com 10/369 (2,71%) e Mycoplasma haemofelis com 8/369 (2,16%). Coinfecção por Mycoplasma haemofelis e ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ foi observada em 4/369 (1,08%), enquanto ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ coinfectaram 5/369 (1,35%) gatos. Três (0,81%) gatos apresentaram infecção pelos três hemoplasmas. Não houve associação entre a infecção e as diferentes populações. Anemia foi associada com a infecção por Mycoplasma haemofelis e ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’, mas não com ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’. Gatos machos e com acesso à rua apresentaram maior probabilidade de serem infectados. Embora se acredite que ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ possa causar alterações hematológicas mínimas ou ausentes, gatos infectados encontrados neste estudo foram mais propensos à anemia.