Evaluating the effectiveness of an inactivated vaccine from Anaplasma marginale derived from tick cell culture / Avaliação da eficácia de uma vacina inativada de Anaplasma marginale derivada de cultura de células de carrapato

The protective efficacy of an inactivated vaccine from Anaplasma marginale that was cultured in tick cells (IDE8) for use against bovine anaplasmosis was evaluated. Five calves (Group 1) were inoculated subcutaneously, at 21-day intervals, with three doses of vaccine containing 3 × 10(9) A. marginale initial bodies. Five control calves received saline solution alone (Group 2). Thirty-two days after the final inoculation, all the calves were challenged with approximately 3 × 10(5) erythrocytes infected with A. marginale high-virulence isolate (UFMG2). The Group 1 calves seroconverted 14 days after the second dose of vaccine. After the challenge, all the animals showed patent rickettsemia. There was no significant difference (p > 0.05) between the Group 1 and 2 calves during the incubation period, patency period or convalescence period. All the animals required treatment to prevent death. The results suggest that the inactivated vaccine from A. marginale produced in IDE8 induced seroconversion in calves, but was not effective for preventing anaplasmosis induced by the UFMG2 isolate under the conditions of this experiment.

Foi avaliada a eficácia de uma vacina protetora para Anaplasma marginale cultivada em células de carrapato (IDE8) para uso contra a anaplasmose bovina. Cinco bezerros (Grupo 1) foram inoculados por via subcutânea com três doses, intervalados de 21 dias, de vacina contendo 3 × 10(9) corpúsculos iniciais de A. marginale inicial. Cinco bezerros do grupo controle receberam apenas solução salina (Grupo 2). Trinta e dois dias após a inoculação final, todos os bezerros foram desafiados com aproximadamente 3 × 10(5) eritrócitos infectados com isolado de A. marginale alta virulência (UFMG2). Os bezerros do Grupo 1 soroconverteram-se 14 dias após a segunda dose da vacina. Após o desafio, todos os animais mostraram riquestsemia patente. Não houve diferença significativa (p > 0,05) entre bezerros do Grupo 1 e 2 em período de incubação, período de patência, ou período de convalescença. Todos os animais necessitaram de tratamento para prevenir a morte. Os resultados sugerem que uma vacina inativada de A. marginale, produzida em IDE8, induz soroconversão em bezerros, mas não é eficaz na prevenção de anaplasmose induzida pelo isolado UFMG2 nas condições deste experimento.

In vitro establishment and propagation of a Brazilian strain ofAnaplasma marginale with appendage in IDE8 (Ixodes scapularis) cells / Estabelecimento e propagação in vitro de uma amostra brasileira de Anaplasma marginale com apêndice em células IDE8 (Ixodes scapularis)

A Brazilian isolate of Anaplasma marginale with appendage was successfully established and maintained in vitro in a tick cell line (IDE8). Infection was confirmed by optical and transmission electron microscopy. In addition, primers MSP1aNF2 and MSP1aNR2 amplified products from DNA extracted from infected IDE8 cells. Comparisons with partial sequences of the msp1α gene and the complete genome of A. marginale confirmed that the sequences of amplified fragments were from the A. marginale genome. This is the first establishment of a Brazilian A. marginale isolate in tick cells, representing a new system for biological and molecular studies and also a new source of material for diagnosis and development of vaccines.

Uma amostra brasileira de Anaplasma marginale com apêndice foi estabelecida e mantida in vitro em uma linhagem de células de carrapatos (IDE8). A infecção foi confirmada através de microscopia ótica e eletrônica de transmissão. Além disso, os primers MSP1aNF2 e MSP1aNR2 amplificaram produtos do DNA extraído das células infectadas. Comparações de sequências parciais do gene msp1α e do genoma completo de A. marginale confirmaram que as sequências dos fragmentos amplificados pertenciam ao genoma de A. marginale. Este é o primeiro estabelecimento in vitro de uma amostra brasileira de A. marginale em células de carrapatos, representando um novo sistema para estudos biológicos e moleculares, além de ser uma nova fonte de material para o desenvolvimento de testes diagnósticos e de vacinas.