Influência do erro de micropipetas na dosagem espectrofotométrica do ensaio de endotoxina bacteriana (LAL cromogênico) aplicável a produtos sujeitos à Vigilância Sanitária / Effect of micropipette inaccuracy on performance of spectrophotometric assay for bacteria endotoxin dosage (chromogenic LAL) employed in products subjected to sanitary surveillance

Segundo a norma ISO 17.025, os instrumentos usados em experimento devem ser calibrados. No caso de micropipetas não há limite máximo de erro definido, sendo difícil estipular até que ponto uma micropipeta pode continuar a ser usada. O objetivo do trabalho foi o de determinar a porcentagem de erro no volume da micropipeta que não interfira nos resultados das diferentes etapas do ensaio toxicológico Lisado de Amebócitos de Limulus (LAL). Os percentuais de erro foram obtidos do levantamento de 44 certificados de micropipetas. Foram utilizados uma pipeta monocanal calibrada, de volume variável e kit LAL Cromogênio QCL-1000 (Lonza). A curva de endotoxina foi construída com as concentrações de 0,1; 0,25; 0,5 e 1 UE/mL. Os percentuais de erro de ±2%, ±4% e±10% foram comparados com a concentração de referência (0,5 UE/mL), e analisados pelo Student t-test (p<0,05). A análise estatística mostrou que, para a endotoxina padrão e para o substrato do LAL, erro acima de 2% interferenos resultados, cuja correção deve ser feita pelo ajuste do volume na pipeta. Nenhum erro testado causou interferência estatisticamente significativa na reação da cor do substrato. Micropipetas com erro superior a ±2% devem ser corrigidas.

Estandarización de metodologías analíticas en el laboratorio de salud pública / Standardization of analytical methodologies in the public health laboratory

Objetivo Planear, diseñar y ejecutar la estandarización de las metodologías analíticas cuyo montaje se ha realizado con anterioridad. Métodos Una vez establecido el método de ensayo se realiza un análisis preliminar de reproducibilidad y un análisis de interferencia por matriz, para luego realizar la validación y calcular los atributos del método. Resultados En el Laboratorio de Salud Pública se estandarizaron trece métodos analíticos a los cuales se les calcularon los atributos de: límite de detección, límite de cuantificación, exactitud, precisión, sensibilidad y rango útil. Conclusiones Se determinó la alta confiabilidad de las pruebas analíticas del Laboratorio de Salud Pública para la generación de intervenciones sanitarias.

Objective To plan, design and execute the standardization of analytical methodologies that have been previously assembled. Methods Once the test method has been established, a preliminary reproducibility analysis and a matrix interference analysis are performed, and then the validation and calculation of the method attributes are carried out. Results Thirteen analytical methods were standardized in the Public Health Laboratory and the following attributes were calculated: limit of detection, limit of quantification, accuracy, precision, sensitivity and useful range. Conclusions The high reliability of the analytical tests of the Public Health Laboratory for the generation of health interventions was determined.