Tratamento com inibidor da Rho quinase em cobais com inflamação pulmonar alérgica crônica: modulação da inflamação eosinofílica, da expressão de citocinas inflamatórias, da matriz extracelular e do estresse oxidativo no parênquima pulmonar / Treatment with Rho-kinase inhibitor in guinea pigs with chronic allergic inflammation: modulation of eosinophilic inflammation, expression of inflammatory cytokines, extracellular matrix and oxidative stress in lung tissue

INTRODUÇÃO: A relevância do parênquima pulmonar distal na fisiopatologia da asma tem sido intensamente enfatizada. Vários estudos sugerem a inibição da Rho quinase como uma intervenção benéfica e promissora na asma. Entretanto, não há estudos anteriores que avaliaram os efeitos destes inibidores na modulação da mecânica do parênquima pulmonar e suas alterações histopatológicas em um modelo animal de inflamação pulmonar alérgica crônica. OBJETIVO: Avaliar a inibição da Rho quinase (Y-27632) na modulação da responsividade, inflamação, remodelamento da matriz extracelular e ativação do estresse oxidativo no parênquima pulmonar de cobaias com inflamação pulmonar alérgica crônica. MÉTODOS: As cobaias receberam sete inalações de ovalbumina (1-5 mg / ml; grupo OVA) ou salina (grupo SAL) ao longo de quatro semanas. A partir da quinta inalação, os animais do grupo Rho quinase foram submetidos a inalação com Y-27632, 10 minutos antes de cada inalação com OVA ou SAL. Setenta e duas horas após a sétima inalação, os animais foram anestesiados e exanguinados, e das tiras do tecido pulmonar foram realizadas a mecânica oscilatória, sob condições basais e após o desafio de ovalbumina (0,1%). Após a mecânica, as fatias de pulmão foram submetidas a análise histológica por meio da morfometria. RESULTADOS: A inibição de Rho quinase nos animais expostos à ovalbumina atenuou a elastância e a resistência tecidual, o número de eosinófilos, a expressão de IL-2, IL-4, IL-5, IL-13, TIMP-1, MMP-9, TGF-, IFN-g, NF-kB e iNOS e o conteúdo de 8-iso-PGF2, fibras elásticas, fibras colágenas e actina em comparação com o grupo OVA (P<0,05). CONCLUSÃO: A inibição da Rho quinase contribui para o controle da capacidade de responsividade do parênquima pulmonar, da inflamação eosinofílica, das respostas Th1/Th2, ao controle do remodelamento da matriz extracelular em um modelo animal de inflamação pulmonar alérgica crônica...

RATIONALE: Previous studies with Rho-kinase inhibitors suggest a beneficial influence of these drugs in asthma. The relevance of distal lung tissue in functional asthmatic impairment has been intensely emphasized. There have not been any previous studies evaluating the effects of these inhibitors on the modulation of distal lung mechanics and histopathological alterations in an animal model of chronic pulmonary inflammation. OBJECTIVE: To evaluate if Rho-kinase inhibition (Y- 27632) modulates distal lung responsiveness, inflammation, extracellular matrix remodeling and oxidative stress activation in guinea pigs with chronic allergic inflammation. METHODS: Guinea pigs received seven inhalations of ovalbumin (1-5 mg/ml; OVA group) or saline (SAL group) over 4 wk. From the 5th inhalation, the Rho-kinase group animals were submitted to Y-27632 inhalation 10 min before each inhalation with OVA or SAL. Seventy-two hours after the seventh inhalation, the animals were anesthetized and exsanguinated, and oscillatory mechanics of the lung tissue strips were performed under the baseline condition and after the ovalbumin challenge (0.1%). Afterwards, the lung slices were submitted to morphometry. RESULTS: The Rho-kinase inhibition in the ovalbumin-exposed animals attenuated the tissue elastance and resistance, eosinophils, the IL-2, IL-4, IL-5, IL-13, TIMP-1, MMP-9, TGF-, IFN-g, NF-kB, iNOS-positive cells and the 8-iso-PGF2, elastic, collagen and actin content compared with the OVA group (P<0.05). CONCLUSION: Rho-kinase inhibition contributes to the control of distal lung responsiveness and the eosinophilic and Th1/Th2 responses to the control of extracellular matrix remodeling in an animal model of chronic allergic inflammation. It may be considered a future pharmacological tool for the treatment of chronic pulmonary diseases.

Terapia com laser 670nm no tratamento da DPOC experimental em ratos / 670nm laser therapy in treatment of COPD in experimental rats

Introdução: DPOC é uma enfermidade respiratória com manifestações sistêmicas que se caracteriza pela presença de obstrução crônica do fluxo aéreo, associada a uma resposta inflamatória. Objetivo: Verificar o efeito da laserterapia de laser 670nm, no tratamento da inflamação pulmonar induzida em ratos. Metodologia: 30 ratos foram divididos em três grupos, dos quais dois foram expostos à fumaça de cigarro durante 45 dias e um deles tratados com laser 670nm. Para análise dos resultados foram realizados LBA e ELISA. Resultados: Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA), seguida do teste Newman- Keuls para amostras não pareadas. A análise do LBA demonstrou um aumento altamente significativo no número de neutrófilos no grupo DPOC. O grupo tratado, quando comparado ao grupo DPOC, evidenciou uma diminuição significativa no número de neutrófilos. Para o resultado do ELISA, houve queda altamente significativa de TNF-?, quando tratado com laser 670nm, e significativa de MIP-2 e IL-1?. Conclusão: Verifica-se que a ação do laser de 670nm pode atenuar o processo inflamatório induzido.

Introduction: COPD is a respiratory illness with systemic manifestations, characterized by the presence of chronic airflow obstruction associated with an inflammatory response. Objective: To investigate the effect of laser 670nm laser in the treatment of pulmonary inflammation induced in mice. Methods: 30 rats were divided into three groups, two of which were exposed to cigarette smoke for 45 days and one treated with 670 nm laser. For data analysis and ELISA were performed BAL. Results: Results were subjected to analysis of variance (ANOVA) followed by Newman-Keuls test for unpaired samples. BAL analysis showed a highly significant increase in neutrophils in the COPD group. The treated group compared with the COPD group showed a significant decrease in neutrophils. For the result of the ELISA results were highly significant decrease of TNF-? when treated with 670 nm laser, and the significant MIP-2 and IL-1?. Conclusion: It appears that the action of the 670nm laser can attenuate the inflammatory process induced.

Efeito da laserterapia de baixa potência na inflamação pulmonar em rattus novergicus / Effect of low level laser therapy on lung inflammation in rattus norvegicus

Introdução. A doença pulmonar obstrutiva crônica é uma enfermidade respiratória caracterizada pela presença de obstrução crônica do fluxo aéreo e manifestação inflamatória. Objetivo. Verificar o efeito da laserterapia de baixa potência no tratamento da inflamação pulmonar. Metodologia. Utilizou-se 30 ratos, divididos em três grupos de dez animais: grupo controle (recebeu apenas ar ambiente); grupo DPOC e grupo DPOC+laser (expostos à fumaça de cigarro durante 45 dias, sendo o grupo DPOC+laser tratado durante 12 dias com laser 904nm). Para análise dos resultados foi realizada histopatologia. Resultados. O grupo controle apresentou espaços aéreos normais com distorção arquitetural periférica do pulmão, o grupo DPOC demonstrou um enfisema acentuado, áreas de atelectasias e destruição das paredes alveolares. O grupo tratado houve uma regressão de enfisema acentuado para discreto. Conclusão. Na análise realizada, a inflamação pulmonar induzida pelo cigarro pode ser comprovada e a laserterapia de baixa potência mostrou-se eficaz na atenuação da inflamação.

Introduction. The chronic obstructive pulmonary disease is a respiratory disease characterized by chronic airflow obstruction and inflammatory manifestation. Objective. To investigate the effect of low level laser therapy in the treatment of pulmonary inflammation. Methodology. We used 30 rats divided into three groups of ten animals: control group (received only room air), group COPD and COPD + laser (exposed to cigarette smoke for 45 days with group COPD + laser treated for 12 days with 904nm laser). For data analysis was performed histopathology. Results. The control group had normal air spaces with architectural distortion of the peripheral lung, COPD group showed a marked emphysema, areas of atelectasis and destruction of alveolar walls in the treated group there was a regression from mild to severe emphysema. Conclusion. Through the analysis performed pulmonary inflammation induced by cigarette can be proved, and the low level laser therapy was effective in reducing inflammation.

Exposição a hidroquinona e ao fenol sobre a resposta inflamatória pulmonar induzida por bactéria / Hydroquinone and phenol exposure on pulmonary inflammatory response induced by bacteria

A gravidade dos efeitos causados pela exposição ambiental e ocupacional ao benzeno determinou o controle de sua utilização. No entanto, mesmo nestas condições, toxicidade ao sistema imune e nervoso tem sido descrita. A toxicidade do benzeno é determinada pelos seus produtos de biotransformação, em que fenol (FE) e hidroquinona (HQ) têm papel relevante na imunotoxicidade. Neste contexto, o presente trabalho mostra que a exposição de ratos Wistar, machos, a doses de 5 ou 10 mg/kg de HQ (via i.p., uma vez ao dia, 13 doses consecutivas, com intervalos de 2 dias a cada 5 doses) provocou reduções acentuadas no influxo de leucócitos polimorfonucleares (PMN) e mononucleares (MN) para o pulmão 24 horas após inalação de Lipopolissacarídeo (LPS) de Salmonella abortus. Diferentemente, a migração de leucócitos em animais expostos ao FE não foi alterada. A exposição a ambos os agentes químicos simultaneamente (dose de 5 mg/kg cada) manteve a redução na migração de MN detectada em animais expostos à HQ e potencializou o efeito inibitório da HQ sobre a migração de leucócitos PMN. Os prejuízos nas migrações de leucócitos não foram decorrentes de modificações no número destas células na circulação. É importante ressaltar que os efeitos foram induzidos por doses dos agentes químicos que não causaram prejuízo à função hepática ou renal, determinados pela atividade das transaminases hepáticas e a concentração de creatinina no soro. Em conjunto, os dados obtidos mostram a exposição a baixas doses de HQ não provoca alterações nos parâmetros empregados como indicadores de toxicidade. No entanto, os efeitos tóxicos são manifestados resposta do organismo ao trauma.

The high toxicity induced by occupational and environmental benzene exposure lead to its use restriction. However, at these conditions, neuronal and immune toxicity has been described. It is well known that benzene metabolites, such as hydroxyl compounds phenol (PHE) and hydroquinone (HQ), are responsible for immunotoxicity. In this context, it has shown herein that male Wistar rats exposed to HQ (doses of 5 or 10 mg/kg/day; 13 days with 2-day intervals every 5 doses) presented marked reduction in the number of mononuclear (MN) and polymorphonuclear (PMN) leukocytes in the bronchoalveolar fluid 24 hours after inhalation of Lipopolyssacaride of Salmonella abortus (LPS; 100 µg/mL). On the other hand, leukocyte migration into inflamed lungs was not altered in FE exposed rats, since values obtained were similar to those detected in control animals. Simultaneous exposure to HQ and PHE (5 mg/kg each compound) maintained the decreased number of MN cells observed in HQ exposed rats and potentiated the reduction of PMN cells induced by HQ exposure. The impaired leukocyte migration into inflamed lung did not reflect alterations on number of circulating cells. Moreover, it is important to emphasize that schedule of intoxication did not alter the functional ability of liver and kidney, as detected by normal activity of transaminases and creatinine concentration in the serum. Therefore, it is shown herein that in vivo exposures to lower doses of HQ do not alter end points used as biological indicators of toxicity, nevertheless toxic effects are evident after a host defense.