Efetividade da máquina de perfusão hipotérmica versus armazenamento estático para preservação do rim de doador falecido: revisão rápida / Effectiveness of hypothermic machine perfusion versus cold static storage for deceased donor kidney preservation: rapid review

Tecnologia: máquina de perfusão hipotérmica. Indicação: Transplante renal de doador falecido. Pergunta: Qual a efetividade da máquina de perfusão hipotérmica (HMP) para a preservação do rim de doador falecido, quando comparada ao armazenamento estático a frio (SCS)? Objetivo. Avaliar a efetividade da máquina de perfusão hipotérmica na preservação do rim de doador falecido, em comparação com o armazenamento estático a frio. Métodos: Revisão de revisões sistemáticas (overview) do tipo revisão rápida. Foi realizado um levantamento bibliográfico nas bases de dados: PubMed, Embase, BVS, Epistemonikos, Cochrane Library e em bases de registro de protocolos de revisões sistemáticas e ensaios clínicos, utilizando descritores e estratégias de busca predefinidas. A avaliação da qualidade metodológica dos estudos incluídos foi feita através da ferramenta AMSTAR-2 (Assessing the Methodological Quality of Systematic Reviews Version 2). Resultados: Duas revisões sistemáticas atenderam aos critérios de elegibilidade e foram incluídas na análise. Uma delas apresentou alto nível de qualidade metodológica. Conclusão: O uso da HMP para a preservação de rins de doadores falecidos foi associado a melhores desfechos clínicos relacionados à função retardada e à sobrevida do enxerto e foi considerado custo-efetivo, quando comparado ao SCS. Faz-se necessária a geração de evidências mais robustas acerca dos custos e benefícios do uso desta tecnologia no âmbito do SUS

Technology: hypothermic machine perfusion. Indication: Deceased donor kidney transplantation. Question: How effective is hypothermic machine perfusion (HMP) for preserving deceased donor kidneys compared to static cold storage (SCS)? Objective: To evaluate the effectiveness of the hypothermic machine perfusion in preserving the deceased donor kidney, compared to static cold storage. Methods: Rapid review of systematic reviews (overview). A bibliographic survey was carried out in the databases: PubMed, Embase, VHL, Epistemonikos, Cochrane Library and in databases of systematic review protocols and clinical trials, using predefined descriptors and search strategies. The assessment of the methodological quality of the included studies was performed using the AMSTAR-2 tool (Assessing the Methodological Quality of Systematic Reviews Version 2). Results: Two systematic reviews met the eligibility criteria and were included in the analysis. One of them performed a high level of methodological quality. Conclusion: The use of HMP for the preservation of deceased donor kidneys was associated with better clinical outcomes related to delayed graft function and graft survival and was considered cost-effective. It is necessary to generate more evidence about the costs and benefits of using this technology within the Brazilian Unified System of Healthcare (SUS)

¿Puede el Líquıdo Amnıótıco Ser una Solucıón Alternatıva de Conservacıón de Órganos para el Almacenamıento Renal en Frío? / Can Amniotic Fluid Be an Alternative Organ Preservation Solution for Cold Renal Storage?

Abstract Introduction: Kidney-transplantation is a life-saving treatment option for patients with chronic renal failure. Preserving the viability of the organ from the removal of the organ until transplantation into the recipient is one of the most essential factors affecting postransplant success. Kidney tissue is exposed to ischemia following removal of the organ from the donor, initiating some cellular events. Amniotic fluid (AF) was previously reported as a preservation solution for the liver, but not for the kidney yet. The aim of this study is to investigate the effectiveness of AF as a preserving solution for rat kidneys compared with the University of Wisconsin (UW) and Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate (HTK), which are reported to be the most commonly used and preferred preserving solutions. Methods: Forty male Wistar albino rats were used in this study in four experimental groups. Group 1: Ringer Lactate (RL, Control) group, Group 2: HTK group, Group 3: UW group, and Group 4: AF group. A midline incision was performed, and the renal artery was isolated under ketamine and xylazine anesthesia. Solutions relevant for groups (cooled to + 4°C) were used for kidney perfusion. Nephrectomy was applied, and the removed kidneys were placed into + 4°C standard organ storage solution and stored at + 4° C for 12 hours. After 12 hours of storage, samples from the kidney tissues were fixed in 10% neutral buffered formalin. Histopathological, immunohistochemistry evaluation and apoptosis detection via TUNEL method were performed. Results: The results of the AF group were close to those of the UW and HTK groups. Tubular necrosis and vacuolization were high in the RL solution group when compared to the other ‎experimental groups. Immunohistochemistry staining for all three markers (TNF-alpha, IL-18, and iNOS) was decreased in the amniotic fluid group, similar to the UW and HTK groups. Also, the number of apoptotic cells was decreased in the AF group compared to control. Conclusions: UW, HTK, and AF had similar and higher protective effects compared to the RL solution. Thus, AF may be used as an inexpensive and readily available alternative natural tissue preservation solution.

Resumen Introducción: El trasplante de riñón es una opción de tratamiento que puede salvar la vida de pacientes con insuficiencia renal crónica. Preservar la viabilidad del órgano desde su extracción hasta el momento del trasplante en el receptor es uno de los factores principales que influyen en el éxito postrasplante. El tejido renal está expuesto a la isquemia después de la extracción del órgano del donante, lo cual da inicio a algunos eventos celulares. Existen estudios que indican que el líquido amniótico (LA) funciona como una solución de conservación para el hígado, pero aún se desconoce si sucede lo mismo con el riñón. El objetivo de este estudio es investigar la efectividad del LA como solución conservadora para los riñones de ratas, en comparación con la solución de Wisconsin (UW) y la solución de histidina-triptófano-cetoglutarato (HTK), que son los conservantes más utilizados y preferidos. Material y métodos: Se emplearon cuarenta ratas albinas macho de la cepa Wistar en este estudio, en cuatro grupos experimentales. Grupo 1: grupo solución de lactato sódico compuesta (LSC, Control); Grupo 2: grupo HTK; Grupo 3: grupo UW y Grupo 4: grupo LA. Habiendo aplicado anestesia con ketamina y xilazina, se realizó una incisión en la línea media y se aisló la arteria renal. Se utilizaron soluciones relevantes para grupos (enfriadas a + 4° C) para perfusión renal. Se realizó una nefrectomía, y los riñones extraídos fueron colocaron en una solución estándar de almacenamiento de órganos a + 4° C y se conservaron así durante 12 horas. Después de dicho periodo de almacenamiento, las muestras de los tejidos renales se fijaron en formalina tamponada neutra al 10%. Se llevaron a cabo una evaluación histopatológica e inmunohistoquímica y una detección de apoptosis mediante el método TUNEL. Resultados: Los resultados del grupo LA fueron cercanos a los de los grupos UW y HTK. La necrosis tubular y la vacuolización fueron más altas en el grupo de la solución LSC que en los otros grupos experimentales. La tinción inmunohistoquímica para los tres marcadores (TNF-alfa, IL-18 e iNOS) disminuyó en el grupo de líquido amniótico, similar a los grupos UW y HTK. Además, el número de células apoptóticas menguó en el grupo LA, en comparación con el de control. Conclusiones: UW, HTK y LA tuvieron efectos protectores similares y superiores en comparación con la solución LSC. Por lo tanto, el LA puede usarse como una solución alternativa de bajo costo para la preservación de tejidos naturales.

Máquina de perfusão versus armazenamento estático na preservação renal de doadores com morte encefálica: revisão sistemática e metanálise / Machine perfusion versus cold storage in renal preservation of deceased donors with brain death: systematic review and meta-analysis

RESUMO Com a utilização crescente da máquina de perfusão no transplante renal, tem sido constatado que a isquemia dinâmica correlaciona-se à melhora da preservação orgânica. Nesse contexto, realizamos uma revisão sistemática que procurou avaliar a eficácia do uso de máquina de perfusão portátil (LifePort Kidney Transporter Machine®), utilizada no Brasil, comparada ao armazenamento estático, no que tange à função retardada do transplante renal de doadores com morte encefálica. Foi efetuada pesquisa bibliográfica, nas bases LILACS, MEDLINE via PubMed, Scopus, Clarivate Analytics, Cochrane Library, Embase, SciELO, além de busca manual no Google acadêmico. A revisão sistemática, finalizada em abril 2017, foi constituída somente por ensaios clínicos randomizados. Para metanálise, foram avaliadas Razão de Risco e Razão de Chance. Foram identificados 86 documentos e selecionados, ao final, dois artigos com critérios de elegibilidade para metanálise, de grupos europeus e brasileiros. Nestes, 374 rins foram alocados para a máquina de perfusão, e igual número para o armazenamento estático. A função retardada do enxerto foi constatada em 84 e 110 pacientes, respectivamente. Na metanálise, foram obtidas uma Razão de Risco de 0,7568 (p=0,0151) e uma Razão de Chance de 0,6665 (p=0,0225), ambas com intervalo de confiança de 95%. A máquina de perfusão reduziu a incidência de função retardada do enxerto de doadores com morte encefálica.

ABSTRACT With the increasing use of machine perfusion in kidney transplantation, it has been observed that dynamic ischemia correlates with the improvement of organ preservation. In this context, we performed a systematic review that aimed to evaluate the efficacy of the portable machine perfusion (LifePort Kidney Transporter Machine®), used in Brazil, compared to cold storage, regarding the delayed graft function of deceased donors with brain death. Literature search was carried out in LILACS, MEDLINE via PubMed, Scopus, Clarivate Analytics, Cochrane Library, Embase, and SciELO, as well as in Google Scholar manually. The systematic review consisted only of randomized clinical trials. For meta-analysis, relative risk and odds ratio were evaluated. Eighty-six documents were identified and two papers from European and Brazilian groups were selected at the end, with eligibility criteria for meta-analysis. In these, 374 kidneys were assigned to machine perfusion and 374 kidneys were assigned to cold storage. Delayed graft function was observed in 84 and 110 patients, respectively. In meta-analysis, a risk ratio of 0.7568 (p=0.0151) and an odds ratio of 0.6665 (p=0.0225) were obtained, both with a 95% confidence interval. Machine perfusion reduced the incidence of delayed graft function of deceased donors with brain death.

Effects of cold ischemia time on hepatic allograft function / Efeitos do tempo de isquemia fria sobre os enxertos hepáticos

ABSTRACT Background : Cold ischemia time is related to success of liver transplantation. Aim : To compare the impact of cold ischemia time on allografts locally collected to those collected distantly. Methods : Were evaluated 83 transplantations. The patients were divided in two groups: those who received liver grafts collected from cities out of Curitiba (n=42) and locally (n=41). From the donors were compared: cause of death, days at ICU, cardiac arrest, vasoactive drugs, lab exams, gender, age, and BMI. Were compared the subsequent information of receptors: cold ischemia time, warm ischemia time, length of surgery, lab exams, etiology of cirrhosis, MELD score, age, gender, histology of graft, use of vasoactive drugs, and blood components transfusion. Were evaluated the correlation between cold ischemia time and lab results. Results : The liver grafts collected from other cities were submitted to a longer cold ischemia time (500±145 min) compared to those locally collected (317,85±105 min). Donors from other cities showed a higher serum sodium level at donation (154±16 mEq/dl) compared to those from Curitiba (144±10 mEq/dl). The length of cold ischemia time was related to serum levels of ALT and total bilirubin. Conclusion : Liver grafts distantly collected underwent longer cold ischemia times, although it caused neither histologic injuries nor higher transfusion demands. There is a correlation between cold ischemia time and hepatic injury, translated by elevation of serum ALT and total bilirubin levels.

RESUMO Racional : O tempo de isquemia fria está relacionado ao sucesso do transplante hepático. Objetivo : Comparar o impacto do tempo dela sobre enxertos captados localmente com os distantes. Métodos : Avaliaram-se 83 transplantes. Os pacientes foram divididos em dois grupos: enxertos captados fora de Curitiba (n=42) e captados localmente (n=41). Dos doadores compararam-se causa do óbito, dias de UTI, parada cardíaca, drogas vasoativas, exames laboratoriais, gênero, idade e IMC. Dos receptores seguintes dados: tempos de isquemia fria e morna, tempo operatório, exames laboratoriais, causa da cirrose, MELD, idade na operação, gênero, biópsia do enxerto, uso de drogas vasoativas e necessidade de transfusões. Foi realizada avaliação de correlação entre o tempo de isquemia fria e os exames laboratoriais. Resultados : Os enxertos captados à distância foram submetidos a maior tempo de isquemia fria (500,3±145 min) quando comparados aos captados localmente (317,85±105 min). Os doadores de fora apresentaram níveis mais elevados de sódio no momento da doação (154±16 mEq/dl) comparados aos doadores de Curitiba (144±10 mEq/dl). Houve correlação entre o tempo de isquemia fria e os níveis de ALT e de bilirrubina total. Não houve diferenças ao comparar-se os demais dados. Conclusão : Enxertos captados à distância sofreram maior tempo de isquemia fria. Isso não refletiu nos prejuízos histológicos nem na demanda transfusional durante o pós-operatório. Houve correlação entre o tempo de isquemia fria e o grau de lesão hepática avaliada pela ALT e pela bilirrubina total.

Pediatric and congenital heart transplant: twenty-year experience in a tertiary Brazilian Hospital / Experiência de 20 anos com transplante cardíaco pediátrico e em portadores de cardiopatias congênitas

Introduction: Cardiac transplantation remains the gold standard for end-stage cardiomyopathies and congenital heart defects in pediatric patients. Objective: This study aims to report on 20 years of experience since the first case and evaluate our results. Methods: We conducted a retrospective analysis of the database and outpatient follow-up. Between October 1992 and April 2012, 109 patients underwent 114 transplants. 51.8% of them being female. The age of patients ranged from 12 days to 21 years with a mean of 8.8±5.7 years and a median of 5.2 years. The underlying diagnosis was dilated cardiomyopathy in 61.5%, congenital heart disease in 26.6% and restrictive cardiomyopathy in 11.9%. All patients above 17 years old had congenital heart disease. Results: Survival rate at 30 days, 1, 5, 10, 15, and 20 years were 90.4%, 81.3%, 70.9%, 60.5%, 44.4% and 26.7%, respectively. Mean cold ischemic time was 187.9 minutes and it did not correlate with mortality (P>0.05). Infectious complications and rejection episodes were the most common complications (P<0.0001), occurring, respectively, in 66% and 57.4% of the survivors after 10 years. There was no incidence of graft vascular disease and lymphoproliferative disease at year one, but they affected, respectively, 7.4% and 11% of patients within 10 years. Conclusion: Twenty-year pediatric heart transplant results at our institution were quite satisfactory and complication rates were acceptable. .

Introdução: O transplante cardíaco tem sido o tratamento de escolha para pacientes pediátricos portadores de miocardiopatias e portadores de cardiopatias congênitas em fase final da doença. Objetivo: Relatar a experiência de 20 anos do serviço e avaliar seus resultados. Métodos: Estudo retrospectivo por meio de análise do banco de dados. Entre outubro de 1992 e abril de 2012, 109 pacientes foram submetidos a 114 transplantes. 51,8% eram do sexo feminino. A idade dos pacientes variou de 12 dias a 21 anos, com média de 8,8±5,7 anos e mediana de 5,2 anos. O diagnóstico de base dos pacientes foi de miocardiopatia dilatada em 61,5%, cardiopatias congênitas em 26,6% e miocardiopatia restritiva em 11,9%. Todos os pacientes entre 17 e 21 anos eram portadores de cardiopatias congênitas. Resultados: A sobrevida em 30 dias, 1, 5, 10, 15 e 20 anos foi de 90,4%, 81,3%, 70,9%, 60,5%, 44,4 e 26,7%, respectivamente. O tempo médio de isquemia do órgão transplantado foi de 187,9 minutos e não teve correlação com a mortalidade (P>0,05). Intercorrências infecciosas e rejeição foram as complicações mais incidentes (P<0,0001), atingindo 66 e 57,4% dos sobreviventes após 10 anos. A incidência de doença vascular do enxerto e doença linfoproliferativa foi zero no primeiro ano e atingiu, respectivamente, 7,4 e 11% dos pacientes em 10 anos. Conclusão: O Transplante Cardíaco neste grupo de pacientes pediátricos e portadores de cardiopatias congênitas pôde oferecer resultados satisfatórios, com uma taxa de complicações aceitável ao longo do seguimento. .

Fluoxetine effects on mitochondrial ultrastructure of right ventricle in rats exposed to cold stress / Efeitos da fluoxetina sobre a ultraestrutura mitocondrial no ventrículo direito de ratos expostos ao estresse pelo frio

OBJECTIVE: To assess fluoxetine effects on mitochondrial structure of the right ventricle in rats exposed to cold stress. METHODS: The experimental study procedures were performed in 250-300g male EPM-Wistar rats. Rats (n=40) were divided into four groups: 1) Control group (CON); 2) Fluoxetine (FLU); 3) Induced hypothermia (IH) and; 4) Induced hypothermia treated with fluoxetine (IHF). Animals of FLU group were treated by the administration of gavages containing 0.75 mg/kg/day fluoxetine during 40 days. The induced hypothermia was obtained by maintaining the groups 3 and 4 in a freezer at -8ºC for 4 hours. The animals were sacrificed and fragments of the right ventricle (RV) were removed and processed prior to performing electron microscopic analysis. RESULTS: The ultrastructural changes in cardiomyocytes were quantified through the number of mitochondrial cristae pattern (cristolysis). The CON (3.85 percent), FLU (4.47 percent) and IHF (8.4 percent) groups showed a normal cellular structure aspect with preserved cardiomyocytes cytoarchitecture and continuous sarcoplasmic membrane integrity. On the other hand, the IH (34.4 percent) group showed mitochondrial edema and lysis in cristae. CONCLUSION: The ultrastructural analysis revealed that fluoxetine strongly prevents mitochondrial cristolysis in rat heart, suggesting a protector effect under cold stress condition.

OBJETIVO: Analisar os efeitos da fluoxetina sobre a estrutura mitocondrial do ventrículo direito de ratos expostos ao estresse pelo frio. MÉTODOS: Os procedimentos do estudo foram realizados em ratos Wistar-EPM (250-300g) machos. Os ratos (n=40) foram divididos em quatro grupos: 1) Controle (CON); 2) Fluoxetina (FLU); 3) Induzidos à hipotermia (IH) e; 4) Induzidos à hipotermia tratados com fluoxetina (IHF). O grupo FLU foi tratado com gavagem contendo 0,75 mg/kg/dia de fluoxetina durante 40 dias. O estresse induzido pelo frio foi realizado mantendo os grupos 3 e 4 em um freezer (-8ºC) por quatro horas. Os animais foram sacrificados e fragmentos do ventrículo direito (VD) foram removidos e processados antes de serem conduzidos para a microscopia eletrônica. RESULTADOS: As alterações ultraestruturais dos cardiomiócitos foram quantificadas pelo número padrão de cristas mitocondriais (cristólises). Os grupos CON (3,85 por cento), FLU (4,47 por cento) e IHF (8,4 por cento) mostraram aspecto normal de suas estruturas celulares com a citoarquitetura dos cardiomiócitos preservada com integridade sarcoplasmática contínua. Por outro lado, o grupo IH (34,4 por cento) apresentou edema mitocondrial e lise nas cristas. CONCLUSÃO: A análise ultraestrutural revelou que a fluoxetina previne fortemente cristólises mitocondriais em miocárdio de ratos, sugerindo possível efeito protetor na condição de estresse induzido pelo frio.