Atividade antiviral e virucida de extratos hidroalcoólicos de própolis marrom, verde e de abelhas Jataí (Tetragonisca angustula) frente ao herpersvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e ao vírus da diarreia viral bovina (BVDV) / Antiviral and virucidal activity of hydroalcoholic extracts of propolis brown, green and jataí bees (Tetragonisca angustula) against Bovine Herpesvirus Type-1 (BoHV-1) and Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)

Dentre as propriedades biológicas da própolis, a atividade antimicrobiana tem merecido destacada atenção. No presente trabalho, descreve-se a ação antiviral e virucida de três extratos hidroalcoólicos de própolis (marrom, verde e de abelhas jataí (Tetragonisca angustula), frente ao Herpesvírus Bovino tipo (BoHV-1) e ao Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV). Os três extratos hidroalcoólicos foram obtidos de extração etanólica e são oriundos do sul do Brasil. A composição química dos extratos de própolis foi determinada pela cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrômetro de massas (UFLC-PDA-ESI-TOF/MS) que identificou e quantificou compostos como: ácido cafeico e ácido p-cumárico, ácido clorogênico, ácido ferúlico, além de flavonoides como a rutina. A toxicidade celular bem como a atividade antiviral dos extratos de própolis em monocamadas de células MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney) foi avaliada através de observação microscópica e quantificada pelo teste de MTT (3-(4,5 dimetiltiazol-2yl)-2-5-difenil-2H tetrazolato de bromo). O extrato de própolis de abelhas jataí demonstrou ser menos citotóxico (1,57µg/mL), quando comparado aos extratos verde (0,78µg/mL) e marrom (0,39µg/mL). Quanto a atividade antiviral, a própolis verde demostrou maior eficácia em ambos os tratamentos celulares (pós e pré-exposição) frente ao BoHV-1 em relação aos outros extratos, ou seja, houve maior viabilidade celular quando comparada aos controles de células e vírus. Já a de jataí apresentou atividade frente aos dois vírus (BoHV-1 e BVDV) no método pré-infecção, enquanto a própolis marrom demonstrou ação apenas frente ao BoHV-1 também no método pré-infecção. Para determinação da atividade virucida foram utilizadas diferentes diluições dos vírus, bem como temperaturas e tempos distintos de incubação. A própolis verde a 37°C propiciou a maior redução no título viral (4,33log) em relação a marrom (log = 3,5log) e de jataí (log = 3,24log). No entanto, frente ao BVDV a própolis jataí apresentou os melhores resultados em ambas as temperaturas (22oC e 37oC). Portanto, os extratos avaliados apresentaram atividade antiviral e virucida frente ao BoHV-1 e BVDV, o que os torna alvo para o desenvolvimento de novos biofármacos como alternativa ao uso de antivirais comerciais em Medicina Veterinária.(AU)

Among the biological properties of propolis, the antimicrobial activity has received prominent attention. In this paper, we describe the antiviral and virucidal effect of three hydroalcoholic extracts of propolis (brown, green and jataí bees (Tetragonisca angustula), against bovine herpesvirus type-1 (BoHV-1) and bovine viral diarrhea Virus (BVDV). All hydroalcoholic extracts were obtained from ethanol extraction. The chemical composition of propolis extracts was determined by high-performance liquid chromatography coupled to mass spectrometer (UFLC-PDA-ESI-TOF/MS) to identify and quantify compounds such as caffeic acid and p-coumaric acid, chlorogenic acid, ferulic, and flavonoids such as rutin. Cell toxicity and antiviral activity of propolis extracts in monolayers of MDBK cells (Madin-Darby Bovine Kidney) were assessed by microscopic observation and quantified by the MTT assay (3- (4.5 dimethylthiazol-2yl) -2- 5-diphenyl-2H-tetrazolato bromine). Propolis extract from Jataí bees proved to be less cytotoxic (1.57mg / ml) when compared to green extracts (0.78mg / ml) and brown (0.39mg/mL). Regarding antiviral activity, propolis has shown greater efficacy in both cellular treatments (post and pre-exposure) against BoHV-1 when compared to other extracts, ie, there was increased cell viability compared to cell and virus controls. Extracts from Jataí showed activity against both viruses (BoHV-1 and BVDV) infection in the pre-test, whereas brown propolis demonstrated action only against the BoHV-1 in the pre-infection method. To determine the virucidal activity, it were used different dilutions of virus, as well as different temperatures and incubation times. The green propolis at 37°C led to a greater reduction in viral titer (4.33log) compared to brown (3.5log) and jataí (3.24log). Jataí propolis showed the best results in both temperatures (22oC and 37oC) when tested against BVDV. In summary, the evaluated extracts showed antiviral and virucidal activity against BoHV-1 and BVDV, and may be important targets for the development of new compounds as an alternative to commercial antivirals.(AU)

Buffer zone use by mammals in a Cerrado protected area / Uso da zona de amortecimento de uma Unidade de Conservação de Cerrado por mamíferos

Habitat loss and degradation is threatening mammals worldwide. Therefore, Protected Areas (PA) are of utmost importance to preserve biodiversity. Their effectiveness, however, depends on some management strategies such as buffer zones, which prevent/mitigate the impact of external threats and might increase the amount of available habitat for wildlife existing within reserves. Nevertheless, how intensively terrestrial mammals use buffer zones remains little studied, particularly in the Neotropical region. Aiming to analyse the use of a buffer zone (5 km wide) by medium and large-sized mammals, we modelled the occupancy probabilities of five species of conservation concern including local (interior and buffer zone) as a site covariate, simultaneously controlling for imperfect detection. Data collection was made with camera traps from April to September 2013 in a 9000 ha Cerrado PA ("interior") and in its surrounding area (39721.41 ha; "buffer zone"). This PA (Jataí Ecological Station) is immersed in a landscape where sugarcane plantations predominate in the northeastern of the state of São Paulo. We also conducted an inventory to compare the number and composition of species between interior and buffer zone. A total of 31 mammal species (26 natives) was recorded via camera traps and active search for sightings, vocalizations, tracks and signs. Occupancy estimates for Myrmecophaga tridactyla, Leopardus pardalis and Pecari tajacu were numerically higher in interior. On the other hand, Chrysocyon brachyurus had the highest occupancy in buffer zone, while the largest predator, Puma concolor, used both areas similarly. However, as the confidence intervals (95%) overlapped, the differences in occupancy probabilities between interior and buffer were weak for all these species. Additionally, regarding only the species recorded by cameras, the observed and estimated richness were similar between interior and buffer zone of the PA. Our data demonstrated that the buffer zone is indeed used by medium and large-sized mammals, including conservation-dependent ones. The lack of enforcement of current legislation regarding buffer zones is therefore a real threat for mammals, even when protection is guaranteed in the interior of protected areas.

A perda e degradação de habitat têm ameaçado os mamíferos no mundo todo. Dessa forma, a criação de Unidades de Conservação (UC) faz-se cada vez mais fundamental para sua preservação. Entretanto, estratégias de manejo são necessárias para que as UCs cumpram plenamente seus objetivos, tal como o estabelecimento de uma zona de amortecimento ao seu redor, a qual aumenta a área de habitat protegido e visa servir como barreira a impactos negativos externos. Contudo, o uso das zonas de amortecimento por mamíferos terrestres permanece pouco estudado, particularmente no Neotrópico. Com o objetivo de analisar o uso de uma zona de amortecimento (5 km de extensão) por mamíferos de médio e grande porte, nós modelamos a probabilidade de ocupação de cinco espécies de interesse conservacionista, incluindo local (interior e zona de amortecimento) como uma covariável de sítio, controlando, simultaneamente, as imperfeições na detecção. Os dados foram coletados por meio de armadilhamento fotográfico de abril a setembro de 2013 em uma UC de Cerrado de 9000 ha e em 39721,41 ha do seu entorno. A área de estudo (Estação Ecológica de Jataí) está imersa em uma paisagem de matriz canavieira no nordeste do estado de São Paulo. Nós também realizamos um inventário a fim de comparar a riqueza e a composição de espécies no interior e na zona de amortecimento. Foi registrado um total de 31 espécies (26 nativas), incluindo aquelas amostradas apenas por identificação de vestígios, de vocalizações e por observação direta. As estimativas de ocupação para Myrmecophaga tridactyla, Leopardus pardalis e Pecari tajacu foram numericamente maiores no interior, enquanto Chrysocyon brachyurus obteve a maior estimativa de ocupação na zona de amortecimento. Já o maior predador, Puma concolor, utilizou ambas as áreas de forma semelhante. Entretanto, como houve sobreposição entre os intervalos de confiança (95%), as diferenças nas probabilidades de ocupação entre interior e zona de amortecimento foram fracas para as cinco espécies analisadas. Além disso, considerando apenas as espécies registradas por armadilhamento fotográfico, a riqueza observada e a estimada foram similares no interior e na zona de amortecimento da UC. Nossos dados demonstraram que a zona de amortecimento é de fato utilizada por várias espécies de mamíferos de médio e grande porte, incluindo aquelas prioritárias para a conservação. Portanto, a falta de cumprimento da legislação vigente em relação ès zonas de amortecimento é uma ameaça real para as espécies de mamíferos, mesmo quando a proteção é garantida no interior das UCs.

The Natural History of Nest Defence in a Stingless Bee, Tetragonisca angustula (Latreille) (Hymenoptera: Apidae), with Two Distinct Types of Entrance Guards

The stingless bee Tetragonsica angustula (Latreille) is the only social bee known that has two different types of nest entrance guards. As in other stingless bees and the honey bee one type stands on, in or near the nest entrance. The second type, so far only known in T. angustula, hovers near the nest entrance. In order to gain further understanding of this unique situation we studied guarding behaviour in both types of guards. Using marked bees, we found that individual worker bees guarded for a long time, up to 20 days, relative to their short, average c. 21 day, lifespan. Relatively few, 33 percent, individually marked guards were seen performing both types of guarding. The others only acted as standing guards. The bees that did perform both types did so over similar periods of their life. Hovering bouts were 57 min long, interrupted by breaks inside the hive of a few minutes (3.3 ± 1.5 min). Standing bouts were slightly longer (74 min) and also interrupted by short breaks (7.82 ± 6.45 min). Human breath, mimicking a vertebrate intruder, caused the guards to retreat into the nest rather than to attack the intruder. Some colonies protected themselves against intruders by closing the entrance during the night (32 percent and 56 percent of colonies during two nights). In summary, our results indicate that nest entrance guarding in T. angustula involves division of labour between the two types, in which most guarding individuals only act as standing guards.

Snakebites in southwestern Goiás State, Brazil

The present study evaluated snakebite cases recorded by the Southwest II Regional Health Bureau [Regional de Saúde Sudoeste II], Goiás State, Brazil. The following data were analyzed: accident period; patient's age and gender; bite site; envenomation severity; and time elapsed between the bite and medical treatment. We evaluated 211 cases recorded between January 2002 and December 2005, which resulted in an incidence coefficient of 32.4/100,000 inhabitants. Most accidents were due to the bite of snakes from the Bothrops genus (78.2 percent). The months between January and April had a larger number of accidents (93 percent-44.1 percent), although no significant differences were observed. Only one death occurred, resulting in a mortality rate of 0.5 percent. The lower limbs were the most frequently affected (66.3 percent). The majority of the victims were male (75.1 percent). The age group of most of the patients was from 21 to 30 years (20.8 percent). The accidents were classified as mild, moderate and severe, representing 44.9 percent, 47.6 percent and 7.5 percent of the cases, respectively. The time elapsed between the accident and medical treatment was less than 3h in most of the cases (80.7 percent), reflecting the high frequency of mild and moderate accidents (92.5 percent) as well as the large number of healed patients.

Notas sobre a bionomia de Tetragonisca weyrauchi schwarz, 1943 (Apidae, MeliponinI) / Notes on the bionomy of The stingless bee Tetragonisca weyrauchi Schwarz, 1943 (Apidae, Meliponini)

No Brasil, a abelha sem ferrão, Tetragonisca weyrauchi tem sua distribuição restrita à região Amazônica. Constrói ninhos aéreos freqüentemente em forquilhas inclinadas de árvores. Os ninhos, cilindróides e verticais, medem cerca de 60cm de circunferência na parte mais larga e 35cm de altura. A cobertura é de uma película fina e maleável com diferentes consistências. A maioria dos ninhos apresenta, na parte superior, um prolongamento com várias protuberâncias e aberturas, ou só aberturas, com diâmetros milimétricos variáveis ao longo do dia, denominado aqui de respiráculo. A morfologia do ninho, com a porta na parte inferior e o respiráculo na parte superior, parece estar bem adaptado ao ambiente tropical em que se encontra. As médias das temperaturas internas de um ninho habitado e outro vazio acompanharam as flutuações ambientais com alto valor de correlação (r=0,98). Os resultados sugerem que a estrutura física do ninho seria responsável por uma pequena parcela na retenção da energia calorífera. Se existe termorregulação, ela deve ser mais evidente acima dos 33ºC ambientais, temperatura onde ocorreu tendência de estabilidade. A grande quantidade de lamelas de cerume ao redor dos favos de cria horizontais, o tamanho dos potes ovóides de alimento ao redor de 1-2 cm de altura, a porcentagem de água no mel ao redor de 27.6 por cento, o aspecto do tubo de entrada com pequenos orifícios, os valores de temperatura em que ocorre a abertura desse tubo pela manhã, entre 21-23ºC, e as coletas de néctar, predominantemente em Myrtacea, fazem com que seja atribuída grande semelhança física e comportamental entre T.weyrauchi e T. angustula. Os ninhos se adaptam bem em colônias tipo Paulo Nogueira-Neto. São abelhas agressivas quando manuseadas. Estima-se que seus ninhos tenham uma população de 2000-3000 indivíduos.

In Brazil, the stingless bee Tetragonisca weyrauchi has its distribution restricted to the Amazonian region. It builts aerial nests frequently in trees branches. The nests are 60 cm wide by 35cm tall. The cover is a fine layer, flexible with different consistences. The majority of the nests present, in the upper part, a prolongation with protuberances and opennings, or only opennings, with millimetrical diameters that vary during the day. This structures are here named "respiráculo". The morphology of the nest, with the opening in the inferior part and the respiráculo in the upper part, seems well adapted to the tropical environment. The internal temperatures of the inhabited nest were compared to those of an empty nest. Both values followed the environment fluctuations with a high correlation (r =0.98). The results suggest that the physical structure of the nest would be responsible for the retention of a small parcel of the caloric energy. If termorregulation exists, it must be more evident above the air temperature of 33ºC due to a tendency of stability of these values. There are several characteristics in nest morphology and behaviour that are similar in Tetragonisca weyrauchi and T. angustula: the large amount of cerume layers around the horizontal combs, the oval food pots around 1-2 cm high and the percentage of water in the honey around 27,6 percent. The entrance tube with small openings in both species is completly open in the morning when the air temperature is 21-23ºC, and the nectar collection predominantely occurs in Myrtaceae. The bees adapt well in colonies idealized by Nogueira-Neto. They are aggressive when manipulated. Their nests have an estimated population of 2000-3000 bees.