Uso da miltefosina no tratamento clínico de cães com leishmaniose visceral: revisão de literatura / Use of miltefosin in the clinical treatment of dogs with visceral leishmaniosis / Uso de miltefosina en el tratamiento clínico de perros con leishmaniosis visceral: revisión de la literatura

A leishmaniose visceral canina é uma doença de caráter zoonótico, acometendo os seres humanos e diversas espécies de animais silvestres e domésticos. Objetivou-se com o presente estudo realizar uma revisão de literatura sobre o uso da miltefosina no tratamento clínico de cães com leishmaniose visceral. Trata- se de uma revisão de literatura, a qual foi realizada por meio de consultas à periódicos e livros presentes na biblioteca do Cesmac. Foram utilizadas bases de dados como: portal Capes, SCIELO, Google Acadêmico; pesquisa em monografias, teses e dissertações. Causada pelo protozoário Leishmania chagasi, sendo o cão doméstico o principal reservatório desse protozoário. Por representar um problema grave de saúde pública e ser considerada uma doença potencialmente fatal (quando não tratada precocemente e adequadamente), faz- se importante que o clínico esteja familiarizado com os sinais clínicos, exames complementares e principais protocolos terapêuticos, em especial a utilização da miltefosina no tratamento da leishmaniose visceral em cães. Por ser uma zoonose que causa graves problemas de saúde pública e que vem crescendo cada vez mais no Brasil, cabe aos médicos veterinários assumirem o compromisso na conscientização sobre a importância do diagnóstico precoce além de promoverem o bem-estar animal e a saúde pública.(AU)

Canine visceral leishmaniasis is a zoonotic disease, affecting humans and several species of wild and domestic animals. The objective of the present study was to carry out a literature review on the use of miltefosine in the clinical treatment of dogs with visceral leishmaniasis. This is a literature review, which was carried out through consultations with periodicals and books present in the Cesmac library. Databases such as: Capes portal, SCIELO, Google Scholar; research in monographs, theses and dissertations. Caused by the protozoan Leishmania chagasi, with the domestic dog being the main reservoir of this protozoan. As it represents a serious public health problem and is considered a potentially fatal disease (when not treated early and properly), it is important that the clinician is familiar with the clinical signs, complementary exams and main therapeutic protocols, especially the use of miltefosine in the treatment of visceral leishmaniasis in dogs. As it is a zoonosis that causes serious public health problems and that has been growing more and more in Brazil, it is up to veterinarians to make a commitment to raise awareness of the importance of early diagnosis in addition to promoting animal welfare and public health.(AU)

La leishmaniosis visceral canina es una enfermedad zoonótica que afecta a los seres humanos y a varias especies de animales salvajes y domésticos. El objetivo de este estudio fue realizar una revisión bibliográfica sobre el uso de la miltefosina en el tratamiento clínico de perros con leishmaniosis visceral. Se trata de una revisión bibliográfica, que se realizó mediante consultas a publicaciones periódicas y libros presentes en la biblioteca del Cesmac. Se utilizaron bases de datos como: portal Capes, SCIELO, Google Académico; investigación en monografías, tesis y disertaciones. Causada por el protozoo Leishmania chagasi, siendo el perro doméstico el principal reservorio de este protozoo. Dado que representa un grave problema de salud pública y se considera una enfermedad potencialmente mortal (cuando no se trata de forma temprana y adecuada), es importante que el clínico esté familiarizado con los signos clínicos, las pruebas adicionales y los principales protocolos terapéuticos, especialmente el uso de miltefosina en el tratamiento de la leishmaniosis visceral en perros. Siendo una zoonosis que causa graves problemas de salud pública y que viene creciendo cada vez más en Brasil, corresponde a los veterinarios asumir el compromiso de concienciar sobre la importancia del diagnóstico precoz y promover el bienestar animal y la salud pública.(AU)

Efeito leishmanicida in vitro do látex de Croton lechleri (Euphorbiaceae) / In vitro leishmanicidal effect of Croton lechleri latex

A Leishmaniose Tegumentar Americana é uma infecção causada por uma variedade de espécies de Leishmania, é transmitida ao homem por flebotomíneos. Os antimoniais pentavalentes são utilizados na quimioterapia dessa doença; no entanto, esses fármacos provocam uma série de efeitos colaterais, além de apresentar altos índices de toxicidade. Na busca por novos agentes leishmanicidas, avaliamos in vitro o extrato do látex de Croton lechleri (Sangue de dragão) frente a formas promastigotas de Leishmania amazonensis e Leishmania guyanensis. O extrato foi obtido através da desidratação do látex de C. lechleri e diluído em solução 10% de etanol em salina tamponada com fosfato. As promastigotas de Leishmania foram cultivadas juntamente com o extrato nas concentrações de 6,25; 12,5 e 25µg/ mL por 72 horas. O extrato apresentou eficácia em todas as concentrações testadas apresentando um IC50 (concentração inibitória) de 5,04µg/mL para L. amazonensis e IC50 de 9,05µg/mL para L. guyanensis. Foi realizada a avaliação citotóxica em células J774 nas mesmas concentrações usadas no ensaio leishmanicida, porém a concentração de 25µg/mL apresentou índice de toxicidade de aproximadamente 50% para a célula hospedeira. Os testes realizados mostraram-se promissores, pois o extrato testado também foi capaz de inibir o crescimento de promastigotas de L. amazonensis após ensaio de infecção com células J774.

Cutaneous Leishmaniasis is an infection caused by a several species of Leishmania, is transmitted to humans by phlebotomine sandflies. Pentavalent antimonial compounds are used in the chemotherapy of this disease; however, these drugs cause several collateral effects, besides presenting high levels of toxicity. The search for new antiLeishmanial agents, we assessed in vitro the extract of Croton lechleri latex (Blood Dragon) against the promastigote forms of Leishmania amazonensis and Leishmania guyanensis. The extract was obtained by dehydration C. lechleri latex mass and the solution was diluted with 10% ethanol in phosphate buffered saline solution. The Leishmania promastigotes were grown with the extract following concentrations 6.25; 12.5 and 25µg/mL for 72 hours. The extract showed efficacy in all concentrations tested showing an IC50 (inhibitory concentration) of 5.04 µg/mL for L. amazonensis and IC50 of 9.05 µg/mL for L. guyanensis. Cytotoxic evaluation was performed in J774 cells at the same concentrations used in the leishmanicidal assay, but the concentration of 25µg/mL showed toxicity index of approximately 50% for the host cell. Tests carried out proved promising, since the extracts tested was also able to inhibit the L. amazonensis promastigotes growth after infection assay with J774 cells.

Estudo fitoquímico e atividades leishmanicida, anticolinestarásica e antioxidante de extratos de Annona glabra L. (araticum panã) / Phytochemical study and leishmanicidal, anticholinesterase and antioxidant activities of Annona glabra L. (araticum panã) extracts

O objetivo deste estudo foi investigar as principais classes de compostos químicos presentes em Annona grabra L. (Araticum panã), e avaliar o seu potencial biológico analisando suas atividades antioxidante, antiacetilcolinesterase e leishmanicida. Para tanto, a entrecasca e sementes foram submetidas à extração em aparelho de soxhlet com os solventes orgânicos hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol, obtendo-se os respectivos extratos. Com os extratos foram realizados testes de prospecção fitoquímica, determinação da atividade antioxidante pelo método de inibição do radical livre DPPH e inibição da acetilcolinesterase em ensaio de cromatografia em camada delgada. Os testes de atividade leishmanicida in vitro em formas promastigotas de Leishmania infantum chagasi foram realizados em placa de 96 poços em aparelho ELISA. Os extratos foram testados a 100 ?g/ mL. Os testes fitoquímicos revelaram a presença de esteroides, triterpenos, alcaloides, compostos fenólicos e saponinas. Todos os extratos apresentaram inibição da acetilcolinesterase e os extratos hexânicos de ambas partes mostraram maior percentual de inibição de L. infantum chagasi. Nestes extratos, compostos apolares como esteroides e triterpenos podem contribuir para a atividade leishmanicida. Os extratos de melhor atividade antioxidante foram o acetato de etila e metanólico da entrecasca e metanólico das sementes que correspondem aos que contem compostos fenólicos. Conclui-se que A. glabra constitui uma fonte potencial de agentes leishmanicida com possível mecanismo de ação pela inibição da enzima acetilcolinesterase das membranas da L. infantum chagasi, causador da leishmaniose visceral.(AU)

The aim of this study was to investigate the main types of chemical constituents present in Annona grabra L. (araticum panã) and evaluate its biological potential by analyzing the antioxidant, antiacetylcholinesterase and antiLeishmanial activities. For this, the sapwood and seeds were subjected to extraction in soxhlet apparatus using the following organic solvents: hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol for obtaining the respective extracts. These extracts were submitted to phytochemical prospection, antioxidant tests by scavenging the free radical DPPH, acetylcholinesterase inhibition assay on TLC plates. The in vitro antiLeishmanial assay in Leishmania infantum chagasi promastigotes were performed in a 96 well plate in an ELISA instrument. The extracts were tested at 100 ?g/ mL. Phytochemical investigation revealed the presence of sterols, triterpenes, alkaloids, phenolic compounds and saponins. All extracts showed inhibition of acetylcholinesterase, and hexane extracts of both parts presented more action in L. infantum chagasi. The extracts with better antioxidant action were ethyl acetate and methanol extracts of the sapwood and methanol extract of seeds, which correspond to those, which contains phenolic compounds. In conclusion, A. glabra constitutes a potential source of antiLeishmanial agents with possible mechanism of action by inhibiting the acetylcholinesterase in the membranes of L. infantum chagasi responsible for visceral Leishmaniasis.(AU)

Avaliação da atividade citotóxica e potencial antiparasitário in vitro do a-pineno e carvacrol / Cytotoxic and antiparasitic in vitro activities of a-pinene and carvacrol

A leishmaniose e a doença de Chagas tem sido um grande desafio, no que diz respeito à sua terapêutica. Devido à grande dificuldade de encontrar fármacos que garantam uma ação terapêutica eficiente e menos agressora à espécie humana, diferentes produtos naturais vêm sendo testados. Muitas espécies vegetais foram investigadas quanto à sua ação leishmanicida e tripanocida na expectativa de que seus compostos metabólicos possuam atividade antiparasitária e ausência ou baixa citotoxicidade. Neste estudo sobre bioatividade do a-pineno e carvacrol, avaliaram-se os potenciais leishmanicida e tripanocida. O carvacrol apresentou um percentual de inibição de 38,34% e 74,12% para as formas promastigotas e epimastigotas respectivamente, na concentração de 100µg/mL, apresentando uma citotoxicidade de 21,62%. O a-pineno apresentou 100% e 5,30% de inibição para as formas epimastigota e promastigota na concentração de 100 µg/mL, com citotoxicidade de 87,88%.

Leishmaniasis and Chagas Disease represent a great challenge against the modern therapeutics. Due the high difficult to find new drugs with therapeutic efficacy and low toxicity, several natural products had been screened. Many species of plants were investigated about their leishmanicidal and trypanocidal activities. Some phytocompounds are the a-pinene and carvacrol. In this work, we evaluated the bioactivities of a-pinene and carvacrol against Trypanosoma cruzi and Leishmania braziliensis cell lines. The carvacrol inhibited 38,34% and 74,12% of the promatigote and epimastigote forms, respectively at 100 µg/mL, showing a low cytotoxic activity (21,62%). The O a-pinene inhibited 100% and 5,30% against the epimastigote and promastigote forms respectively, at 100 µg/mL, showing a higher cytotoxic activity (87,88%).

Citotocixidade e atividade antiparasitária de Lygodium venustum SW / Cytotoxic and antiparasitic activity of Lygodium venustum SW

. Doenças parasitárias infecciosas como leishmaniose e doença de Chagas tem se difundido nas últimas décadas a locais onde antes não se observava sua ocorrência. São consideradas negligenciadas por assolarem países pobres e serem marginalizadas farmacologicamente. O tratamento não apresenta muitas opções de fármacos e estes demonstram relevante toxicidade contribuindo para o aparecimento de diversos efeitos colaterais. A pesquisa com produtos naturais tem se mostrado uma interessante alternativa para a procura por novos fármacos. Lygodium venustum é uma samambaia cosmopolita de hábito lianescente encontrada na encosta na Chapada do Araripe, considerada por algumas populações americanas como planta medicinal para o tratamento de dermatoses, infecções, micoses e tricomoníases. Neste estudo foi avaliada sua atividade anti-parasitária contra Leishmania brasiliensis e Trypanosoma cruzi, bem como sua citotoxicidade através de ensaios n vitro. Foram testadas a fração hexânica e o extrato etanólico obtido das folhas de Lygodium venustum em diferentes concentrações. Para os testes in vitro de T. cruzi, foi utilizado o clone CL-B5 e para Leishmania brasiliensis foram utilizadas formas promastigotas. O ensaio de citotoxicidade foi realizado com linhagens de fbroblastos. L. venustum não apresentou atividade antiparasitária clinicamente relevante na forma de extrato etanólico bruto nem como fração hexânica contra Leishmania. A fração hexânica apresentou uma atividade intermediária contra T. cruzi, porém a concentração de efeito moderado possui citotoxicidade máxima tornando-se inviável para aplicação clínica. Entretanto, a citoxicicidade apresentada poderá ser útil em pesquisas sobre atividade antineoplásica em células tumorais.

Infectious and parasitic diseases like leishmaniasis and Chagas disease have spreading recent decades to places not observed before. They are considered neglected by desolating poor countries and marginalized pharmacologically. There are not many options for the treatment and these drugs have shown signifcant toxicity contributing to the appearance of several side effects. Research on natural products has been shown to be an interesting alternative to the search for new drugs. Lygodium venustum is a cosmopolitan fern with latescence habit found on the Chapada do Araripe, considered by some American popula-tions as a medicinal plant for the treatment of skin diseases, infections, fungal infections and trichomoniasis. This study evaluated its antiparasitic activity against Trypanosoma cruzi and Leishmania brasiliensis, as well as its cytotoxicity through trials in vitro. We tested the ethanolic extract and hexane fraction obtained from the leaves of L. venustum at different concentrations. For in vitro tests of T. cruzi, we used the clone CL-B5 and for L. brasiliensis we used promastigotes. The cytotoxicity assay was performed with strains of fbroblasts. L.venustum showed no antiparasitic activity clinically relevant in the form of crude ethanolic extractor as the hexane fraction against Leishmania. The hexane fraction showed an intermediate activity against T.cruzi, but the concentration of moderate effect has maximum cytotoxicity becoming unfeasible for clinical application. However, the cytotoxicity presented may be useful in research on antineoplastic activity in tumor cells.

Fitoquímica y evaluación biológica de croton caracasana Pittier. Hemisintesis y evaluación biológica de derivados del ácido de caracasina / Phytochemistry and biological evaluation of croton caracasana Pittier. Hemisynthesis and biological evaluation of caracasin acid derivatives

En este trabajo de investigación se presenta los resultados del estudio fitoquímico de la planta Croton caracasana Pittier (Euphorbiaceae) colectada en Venezuela. De los tallos y hojas de la planta, se aislaron y caracterizaron siete compuestos identificados como 5-hidroxi-3, 7, 8, 3', 4'-pentametoxiflavona (I), lupeol (II), crotofolin E (III), crotocarasin A (IV), crotocarasin B (V), crotocarasin C (VI) y crotocarasin D (VII). Los compuestos IV, V, VI y VII se reportan por primera vez en la literatura de productos naturales. Se evaluó la actividad citotóxica de estos compuestos a través del método del MTT sobre las líneas celulares MCF-7 y SKBR3 (carcinoma mamario). Se encontró que los compuestos IV, V, VI y VII presentaron actividad citotóxica sobre las líneas MCF-7 y SKBR3, mientras que el compuesto III solo mostró actividad sobre la línea SKBR3. Adicionalmente, se realizó la hemisíntesis de diversos derivados del ácido de caracasina aislado de Croton micans. Estos derivados se obtuvieron a través de reacciones de formación de ésteres y amidas, reducción con H2 Pd/C y con NaBH4, reacciones con mm-CPBA y adiciones nucleofílicas 1,4. Se evaluó la actividad citotóxica, antibacteriana, leishmanicida y tripanocida de estos compuestos y se realizó un análisis preliminar de la relación estructura química-actividad biológica con los resultados obtenidos.

Estudio químico biodirigido in vitro sobre formas parasitarias de Leishmania spp. y Plasmodium falciparum de los extractos y fracciones de las especies de Piper callosum (guayusa) y Unonopsis stipitata (vara caspi) / Biodirected in vitro chemical study on parasitic forms of Leishmania spp. and Plasmodium falciparum of the extracts and fractions of the species of Piper callosum (guayusa) and Unonopsis stipitata (vara caspi)

Las enfermedades parasitarias endémicas como la leishmaniosis y la malaria, son responsables de la mayor morbilidad y mortalidad en el ámbito mundial, las plantas medicinales representan una alternativa interesante para el hallazgo de nuevas drogas antiparasitarias. En este estudio se determinó la actividad antiparasitaria in vitro de las fracciones orgánicas y acuosas de las hojas de Piper callosum y Unonopsis stipitata. La fracción orgánica de Éter de Petróleo de Piper callosum, presentó actividad selectiva medianamente activa contra L. braziliensis con un IC50 de 47.18 ug/ml., a diferencia de la fracción orgánica diclorometánica de Unonopsis stipitata que presentó actividad contra las dos cepas de Leishmania: L.amazonensis , y L. braziliensis con un IC50 de 30.8 ug/ml. y 23.8 ug/ml. respectivamente, y que según el rango de la actividad leishmanicida son considerados como activas. De las 5 fracciones orgánicas, la fracción orgánica diclorometánica de Unonopsis stipitata presentó actividad biológica in vitro sobre Plasmodium falciparum FCR3-resistente a cloroquina con un IC50= 9 ug/ml, y un porcentaje de inhibición del 52%. De las dos especies vegetales estudiadas, la fracción orgánica diclorometánica obtenida de la especie Unonopsis stipitata fue la que presento mayor actividad antimalárica y leishmanicida.

Evaluación de la actividad leishmanicida in vitro de extractos de Annona cherimolioides / Assessment of the in vitro leishmanicide activity of Annona cherimolioides extracts

INTRODUCCIÓN: la utilización de nuestra flora permite un acercamiento en la búsqueda de nuevas sustancias con alto nivel de bioactividad característico de la familia Annonaceae, en donde se reportan una serie de metabolitos secundarios muy promisorios para combatir estos patógenos. OBJETIVO: evaluar la actividad leishmanicida sobre amastigotes intracelulares de Leishmania (V.) panamensis y la actividad tóxica en macrófagos humanos y Artemia salina. MÉTODOS: se aplicó cromatografía de columna y cromatografía en capa preparativa para la extracción y el aislamiento de los alcaloides presentes en la corteza de tallo de Annona cherimolioides Triana & Planch. Extractos y fracciones alcaloidales se evaluaron para determinar la actividad leishmanicida por medio de citometría de flujo, además de la actividad citotóxica sobre la línea celular U937 y sobre macrófagos peritoneales de hámster. La actividad citotóxica in vivo fue evaluada sobre Artemia salina. RESULTADOS: se obtuvo un compuesto depurado, en el cual se determinó la presencia de un núcleo aporfínico según resonancia magnética nuclear 1-H y espectrofotometría. No se encontró actividad contra los parásitos de Leishmania. El extracto crudo mostró mayor toxicidad sobre Artemia salina, mientras que el compuesto depurado mostró una citotoxicidad moderada sobre la línea celular U937. CONCLUSIONES: se encontró una actividad citotóxica selectiva contra las células tumorales (línea celular U937), en comparación con la toxicidad observada en células en cultivo primario (no tumorales). Debido a la citotoxicidad mostrada sobre la línea celular U937, no se pudo determinar la concentración efectiva de los extractos contra amastigotes intracelulares, por lo que se hace necesario continuar las evaluaciones en los sistemas in vitro utilizando células no tumorales.

INTRODUCTION: the use of our flora allows a approach to search of new substances with a high level of bioactivity characteristic of the Annonaceae family where it is reported a series of secondary metabolites very promissory to attack these pathogens. OBJECTIVE: to assess the leishmanicidal activity on intracellular amastigotes of Leishmania (V) panamensis and the toxic activity on human macrophages and Artemia salina. METHODS: it was applied the column chromatography and the preparative layer chromatography for extraction and isolation of alkaloids present in the stem bark of Annona cherimolioides Triana & Planch. Alkaloid extracts and fractions were assessed to determine the leishmanicidal activity by flow cytometry as well as cytotoxic activity on the U937 cellular line and on the peritoneal macrophages of hamster. The in vivo cytotoxic activity was assessed on Artemia salina. RESULTS: a purifying compound was obtained in which the presence of an aporphine nucleus was determined by 1-H nuclear magnetic resonance and spectrophotometry. There wasn't activity against the Leishmania parasites. The crude extract showed the highest toxicity on Artemia salina whereas the purifying compound showed a moderate toxicity on the U937 cell line. DISCUSSION: there was a selective cytotoxic activity against tumoral cells (U397 cell line) compared to toxicity seen in the primary culture (non-tumoral). Due to the cytotoxicity showed on the above cell line, it was impossible to determine the effective concentration of extracts against intracellular amastigotes, thus it is necessary to continue the assessments of in vitro systems using non-tumoral cells.

Antileishmanial activity of 3-(3,4,5-trimethoxyphenyl) propanoic acid purified from Amazonian Piper tuberculatum Jacq., Piperaceae, fruits / Atividade antileishmania do 3,4,5-trimetoxi-dihidrocinâmico purificado das frutas de Piper tuberculatum Jacq., Piperaceae, amazônica

Leishmanicidal activity of the 3-(3,4,5-trimethoxyphenyl) propanoic acid (TMPP) isolated from EtOH extracts of the Amazonian Piper turbeculatum Jacq. fruits was evaluated in vitro using Leishmania amazonensis promastigotes. The TMPP was assayed at concentrations of 1600 to 6.25 µg/mL for 24, 48, 72 and 96 h. Promastigotes viability was analyzed and the IC50 of TMPP was 145 µg/mL.

A atividade leishmanicida do ácido 3,4,5-trimetoxi-dihidrocinâmico (TMPP) isolado do extrato hidroalcoólico de frutos de Piper turbeculatum Jacq. amazônica foi testado em ensaios in vitro utilizando formas promastigotas de Leishmania amazonensis. O TMPP foi utilizado em culturas de L. amazonensis nas concentrações de 1600 a 6,25 µg/mL. A viabilidade celular das formas promastigotas foi observada em 24, 48, 72 e 96 h para cálculo da CI50. O TMPP apresentou efeito leishmanicida dose dependente para as formas promastigotas de L. amazonensis apresentando CI50 de 145 µg/mL.

Atividades antimicrobiana e leishmanicida das sementes de Pterodon emarginatus Vogel / Antimicrobial and leishmanicidal activities of seeds of Pterodon emarginatus

O presente trabalho investigou as atividades antimicrobiana e leishmanicida das sementes de Pterodon emarginatus Vogel. O potencial antimicrobiano do óleo essencial (OE) obtido das sementes foi avaliado através dos testes de difusão em ágar (10, 25 e 50 mg) e determinação da concentração inibitória mínima e utilizou os microorganismos-padrão: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Streptococcus mutans ATCC 25175, Pseudomonas aeruginosa ATCC 90271, Escherichia coli ATCC 10530 e Candida albicans ATCC 10231. A atividade leishmanicida do OE e frações (6,25 - 100 µg/mL) obtidas das sementes de P. emarginatus foram testadas, in vitro, sobre formas promastigotas de L. amazonensis e L. chagasi. O OE das sementes de P. emarginatus inibiu o crescimento somente de S. aureus (CIM = 2,5 mg/mL). As frações hexânica (IC50 = 50,06 µg/mL) e butanólica (IC50 = 46,65 µg/mL) apresentaram atividade frente às formas promastigotas de L. amazonensis, porém não apresentaram atividade frente a L. chagasi. Os resultados indicam que as moléculas bioativas presentes nas sementes de P. emarginatus podem ser utilizadas como protótipos para o desenvolvimento de fármacos e/ou como fonte de matérias-primas farmacêuticas.

The present work investigated the antimicrobial and leishmanicidal activities of seeds of Pterodon emarginatus. The tests of diffusion in agar (10, 25 and 50 mg) and determination of minimum inhibitory concentration (MIC) were performed using essential oil (EO) obtained from seeds using the standard microorganisms: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Streptococcus mutans ATCC 25175, Pseudomonas aeruginosa ATCC 90271, Escherichia coli ATCC 10530 and Candida albicans ATCC 10231. Leishmanicidal activity of the EO and fractions (6.25 - 100 µg/ml) obtained of seeds of P. emarginatus was evaluated in vitro using L. amazonensis and L. chagasi promastigote forms. The EO inhibited the growth of S. aureus (MIC = 2.5 mg/ml). The hexane (IC50 = 50.06 µg/ ml) and butanol (IC50 = 46.65 µg/ml) fractions showed activity against L. amazonensis promastigote forms, but did not against L. chagasi promastigote forms. The results indicate that the bioactive molecules present in the seeds of P. emarginatus can be used as prototype for the development of drug and/or as source pharmaceutical material.

Evaluation of the leishmanicide action of ethanol extracts of Crotalaria retusa L (Fabaceae) / Avaliação da ação leishmanicida do extrato etanólico da Crotalaria retusa L (Fabaceae)

The purpose of the present work is to conduct an evaluation of the cytotoxicity of ethanol extracts and the total alkaloid fraction (TAF) from Crotalaria retusa for procyclic promastigotes cells of Leishmania chagasi. The kinetic study of extraction assisted by ultrasound of the total alkaloids present in Crotalaria retusa made it possible the optimization of the extraction parameters. It was evaluated the leishmanicide action of the TAF which did not show toxic activity for cells of the parasite in high concentrations. It was observed a powerful leishmanicide action of the ethanol extracts (10 and 30 percent) after the concentration of 5.6 mg/mL of Crotalaria retusa, and the ethanol present in the extractive solution (10 and 30 percent) in the concentration from 70 and 210 x 10-4 percent, respectively. These results suggest that the cytotoxicity of the ethanol extract of Crotalaria retusa at 10 and 30 percent for cells of Leishmania chagasi, can be associated only to the concentration of the alcohol present in the extract.

O presente trabalho se propõe avaliar a atividade citotóxica do extrato etanólico bruto e da fração dos alcalóides totais (FAT) da planta Crotalaria retusa para células promastigotas metacíclicas de Leishmania chagasi. O estudo da cinética de extração por ultra-som para os alcalóides totais da Crotalaria retusa, tornou possível a otimização dos parâmetros de extração. Foi avaliada a ação leishmanicida da FAT da planta em estudo, a qual não mostrou atividade citotóxica em altas concentrações. Foi observado uma potente ação leishmanicida para os extratos etanólicos (10 e 30 por cento) após a concentração de 5,6 mg/mL de Crotalaria retusa e do etanol presente na solução extrativa (10 e 30 por cento) nas concentrações de 70 e 210 x 10-4 por cento, respectivamente. Estes resultados sugerem a citotoxicidade do extrato etanólico da Crotalaria retusa de 10 a 30 por cento para células de Leishmania chagasi, associada possivelmente à concentração do etanol presente no extrato.

Actividad citotóxica y leishmanicida in vitro del aceite esencial de manzanilla (Matricaria chamomilla) / In vitro leishmanicidal and cytotoxic activities of Matricaria chamomilla essential oil

Este estudio describe la evaluación de las actividades citotóxica y leishmanicida del aceite esencial de Matricaria chamomilla, una planta conocida como “manzanilla” a la que se le atribuye una variedad de usos en la medicina tradicional. La actividad del aceite esencial se evaluó in vitro contra amastigotes axénicos de L. (V) braziliensis, a concentraciones menores o iguales que 250μg/ml, y amastigotes intracelulares de L. (V) braziliensis y L. (V) panamensis, a concentraciones menores o iguales que 30μg/ml. Por su parte, la actividad citotóxica se evaluó contra células mamíferas de la línea promonocítica humana U-937, a concentraciones por debajo de 1,0 mg/ml. El aceite esencial de manzanilla mostró ser activo contra amastigotes intracelulares de L. (V) panamensis y L. (V) braziliensis (CE50 de 2,87 y 10,30μg /ml, respectivamente). Aunque el aceite esencial de manzanilla también mostró ser potencialmente tóxico para las células mamíferas (CL50 de 30,21μg /ml), esta toxicidad fue similar a la mostrada por la Anfotericina B (CL50 de 31,39μg /ml). El aceite esencial de manzanilla no mostró actividad contra las formas axénicas de L. (V) braziliensis, demostrando la importancia del metabolismo del compuesto en el interior de la célula para que se produzca el metabolito activo contra el parásito. Estos resultados aportan bases para sugerir que el aceite esencial de manzanilla tiene potencial para el desarrollo de medicamentos contra Leishmania, el cual debe ser validado en estudios futuros in vivo en modelos animales.

This study describes the evaluation of cytotoxic and leishmanicidal activities for Matricaria chamomilla essential oil. M. chamomilla is a plant commonly named “manzanilla” that has many uses in traditional medicine. The activity of essential oil was evaluated in vitro against axenic amastigotes of L. (V) braziliensis at concentrations lower than or equal to 250μg/ml and intracellular amastigotes of L. (V) braziliensis and L. (V) panamensis at concentrations lower than or equal to 30μg/ml. On other hand, the cytotoxic activity was assessed against mammalian cells of the promonocytic human cell line U937 at concentrations below 1.0mg/ml. The essential oil of M. chamomilla showed activity against intracellular amastigotes of L. (V) panamensis and L. (V) braziliensis (EC50 of 2.87 and 10.30μg/ml, respectively). Although the essential oil of M. chamomilla also shown to be potentially toxic to mammalian cells LC50 of 30.21μg ml) this toxicity was similar to that shown by Amphotericin B (LC50 of 31.39μg/ml). This essential oil showed no activity against axenic forms of L. (V) braziliensis suggesting the importance of the compound metabolism inside cells to produce the metabolite that would be active against parasites. These results suggest that the essential oil of M. chamomilla has potential for development of drugs anti- Leishmania that must be validated in future studies in vivo using animal models.

SÍNTESIS Y ACTIVIDADES LEISHMANICIDA Y CITOTÓXICA in vitro DE ANÁLOGOS 2-ARILQUINOLINAS / SYNTHESIS AND in vitro LEISHMANICIDAL AND CYTOTOXIC ACTIVITIES OF 2-STYRYLQUINOLINES ANALOGS

Actualmente la quimioterapia de la leishmaniasis es promisoria, sin embargo aun no se dispone de un medicamento adecuado. Varias quinolinas sustituidas han presentado actividad in vitro contra agentes causales de leishmaniasis cutánea, leishmaniasis visceral, tripanosomiasis africana y enfermedad de Chagas. En este trabajo se sintetizan seis 2-arilquinolinas derivadas de la galipeina mediante condensación de Perkin a partir de quinaldina y aldehídos aromáticos. La actividad leishmanicida se evalúa en amastigotes axénicos y la actividad citotóxica en células U-937. Todos los compuestos muestran ser activos contra leishmania panamensis pero también contra células mamíferas. Los compuestos estirilquinolinas 2-[(E)-2-(2,5-dimetoxifenil)etenil]quinolina (1), 2-[(E)-2-(2,3-dimetoxifenil)etenil]quinolina (2) y N-{4-[(E)-2-quinolin-2-iletenil]fenil}acetamida (3) son mas activos sobre amastigotes axénicos (CE50 = 3,7; 4,5 y 19,1μg/mL) e intracelulares (CE50 = 1,4; 1,8 y 1,7μg/mL), en comparación con los derivados hidrogenados 2-[2-(2,5-dimetoxifenil)etil]quinolina (1a), 2-[2-(2,3-dimetoxifenil)etil]quinolina (2a) y N-[4-(2-quinolin-2-iletil)fenil]acetamida (3a) (CE50= 31,1; 23,6 y 59,3μg/mL). Todos los compuestos muestran también actividad contra células U-937 con CE50 de 3,7; 6,2 y 4,5μg/mL para las estirilquinolinas 1, 2 y 3, respectivamente y CE50 de 16,0; 12,9 y 20,2μg/mL para los derivados hidrogenados 1a, 2a y 3a, respectivamente. Aunque el proceso de hidrogenación produjo una disminución tanto de la actividad leishmanicida como de la actividad citotóxica, la actividad leishmanicida mostrada por los compuestos de tipo 2-estirilquinolinas les confiere un potencial como moléculas candidatas para el desarrollo de compuestos anti-leishmania.

The search of new treatments for leishmaniasis is an active task nowadays, since there is a lack of non-toxic, cheap and non-resistant medication. In the literature several quinolines have shown in vitro activity against agents of cutaneous leishmaniasis, visceral leishmaniasis, African trypanosomiasis and Chagas diseases. Six 2-styrylquinolines derived from galipeine were synthesized by Perkin condensation of quinaldine with aromatic aldehydes. Leishmanicidal activity was estimated for leishmania panamensis at the amastigote form and cytotoxic activity against U-937 cells. All compounds showed activity against both L. panamensis and U-937 cells. (E)-2-(2,5-dimethoxyphenyl)ethenyl)quinoline (1), (E)-2-(2,3-dimethoxyphenyl)ethenyl)quinoline (2) and (E)-N-[4-(2-quinolin-2-yl-ethenyl)phenyl]acetamide (3) were more active against axenic (EC50= 3.7, 4.5 and 19.1μg/mL) and intracellular amastigotes (EC50= 1.4, 1.8 and 1.7μg/ml, respectively), in comparison with hydrogenated derivatives 2-[2-(2,5-dimethoxyphenyl)ethyl]quinoline (1a), 2-[2-(2,3-dimethoxyphenyl)ethyl]quinoline (2a) and N-[4-(2-quinolin-2-ylethyl)phenyl]acetamide (3a) (CE50= 31.1, 23.6 and 59.3μg/mL, respectively). All compounds were also active against the U-937 cells. Styrylquinolines 1, 2 and 3 showed a LC50 of 3.7, 6.2 and 4.5μg/mL, respectively and the hydrogenated derivatives 1a, 2a and 3a showed a LC50 of 16.0. 12.9 and 20.2μg/mL, respectively. Although hydrogenation reduced the leishmanicidal and cytotoxic activities, the activity showed against leishmania parasites suggests this compound series has potential as drug candidates for the treatment of leishmaniasis.

Actividad leishmanicida de los extractos metanólicos de cuatro ecotipos de Lepidium peruvianum, Chacón (Brassicaceae)

El tratamiento clásico de la leishmaniosis cutánea consiste en la inyección de 15-20 ampollas de Glucantine lo que ocasiona efectos secundarios, este hecho justifica la búsqueda de nuevos medicamentos motivando la presente investigación. El objetivo fue evaluar in vitro la actividad leishmanicida de los extractos metanólicos (EM) de los ecotipos blanco, rojo, morado y negro de Lepidium peruvianum, Chacón (también conocida como Lepidium meyenii Walp.), sobre el crecimiento de Leishmania braziliensis peruviana. Los promastigotes alcanzaron la fase de crecimiento exponencial al quinto día de cultivo a 27 ºC en el medio bifásico Columbia, suplementado con 15% de sangre desfibrinada de carnero, en ese momento se enfrentaron, por separado, con los EM a concentraciones de 50, 100, 200 y 400 μg/ml. Los recuentos se hicieron diariamente con cámara Neubauer. La máxima disminución de promastigotes se produjo al segundo día de enfrentamiento para el ecotipo morado (17,41% de viabilidad) empleando 400 mg/ml. El efecto leishmanicida estaría relacionado con los alcaloides imidazólicos presentes en el EM. Se concluye que al segundo día de enfrentamiento con el EM, el ecotipo morado presenta la mayor actividad leishmanicida seguido del ecotipo blanco.

The classic treatment of the cutaneous leishmaniosis consists on the injection of 15-20 ampoule of Glucantine what causes serious secondary effects. This fact justifies the search of new medications what motivated the present investigation. The objective was to evaluate the leishmanicidal activity of the methanolic extracts (ME) of the white, red, purple and black ecotypes of Lepidium peruvianum Chacón (at present Lepidium meyenii Walp.) about the growth of Leishmania braziliensis peruviana in vitro. The promastigotes reached the logarithmic phase to the fifth day of cultivation at 27 ºC in the two-phase Columbia medium with 15% of defibrinated sheep blood and they faced, for separate, with the ME to concentrations of 50, 100, 200 and 400 μg/ml. The recounts were made daily with camera Neubauer. The maximum decrease of promastigotes (17.41% of viability) took place to the second day for the purple ecotype with the concentration of 400 mg/ml. The leishmanicidal effect would be related with the imidazolic alkaloids, glucosinolates, flavonoids, tannins and saponines present in the ME. The conclusion is that only ME of the white and purple ecotypes presents leishmanicidal activity, at second day of culture.

Leishmanicidal, antibacterial, and antioxidant activities of Caryocar brasiliense Cambess leaves hydroethanolic extract / Atividades leishmanicida, bactericida e antioxidante do extrato hidroetanólico das folhas de Caryocar brasiliense Cambess

The antimicrobial and antioxidant activities of the hydroethanolic extract from Caryocar brasiliense leaves were evaluated. The extract showed leishmanicidal effect against Leishmania amazonensis promastigote forms and bactericidal activity against some pathogenic bacteria. The extract also showed relevant antioxidant activity, similar to that of vitamin C and rutin.

As atividades antimicrobiana e antioxidante do extrato hidroetanólico das folhas de Caryocar brasiliense foram estudadas. O extrato demonstrou efeito leishmanicida sobre formas promastigotas de Leishmania amazonensis e atividade bactericida sobre estirpes de bactérias patogênicas para o homem. Além disso, o extrato demonstrou relevante capacidade antioxidante, similar às atividades da vitamina C e da rutina.

Avaliação da atividade leishmanicida in vitro de plantas medicinais / Evaluation of the in vitro leishmanicidal activity of medicinal plants

Na busca de novos agentes leishmanicidas, avaliamos em culturas de promastigotas de Leishmania amazonensis o efeito dos extratos hidroalcoólicos das folhas de Tephrosia cinerea (L.) Pers. (Fabaceae), Dichorisandra sp (Commelinaceae), Syzygium jambolanum DC. (Myrtaceae), Julocroton triqueter (Lam.) Didr. var. triqueter (Euphorbiaceae), Passiflora edulis Sims(Passifloraceae), Cecropia sp (Cecropiaceae), Chenopodium ambrosioides L.(Chenopodiaceae), Pedilanhus tithymaloides (L.) Poit (Euphorbiaceae), Peristrophe angustifolia Nees(Acanthaceae) e o extrato aquoso do mesocarpo de Orbignya phalerata Mart. (Arecaceae). As promastigotas de Leishmania amazonensis foram cultivadas em presença de 31,3; 63,5; 125,0; 250,0 e 500,0 µg/mL dos extratos por 24 horas. Ao final desse período foi calculada a concentração inibitória do crescimento (CI50) em relação às culturas não tratadas com os extratos. Os extratos das espécies J. triqueter, Dichorisandra sp e T. cinerea apresentaram maior eficácia em induzir a morte das promastigotas, com CI50 de 29,5; 32,9 e 43,6 µg/mL, respectivamente. P. edulis, C. ambrosioides e S. jambolanum apresentaram eficácia moderada com CI50 de 150,1; 151,9 e 166,6 µg/mL, respectivamente. P. tithymaloides e O. phalerata apresentaram baixo efeito leishmanicida com CI50 >500 µg/mL, enquanto Peristrophe angustifolia e Cecropia spnão apresentaram efeito. Dessa forma, dos dez extratos testados, três apresentaram uma expressiva atividade leishmanicida in vitro.

Searching for new leishmanicidal agents, promastigotes forms of L. amazonensis were cultured with the hydroalcoholic extracts obtained from the Tephrosia cinerea (L.) Pers. (Fabaceae), Dichorisandra sp (Commelinaceae), Syzygium jambolanum DC. (Myrtaceae), Julocroton triqueter (Lam.) Didr. var. triqueter (Euphorbiaceae), Passiflora edulis Sims(Passifloraceae), Cecropia sp (Cecropiaceae), Chenopodium ambrosioides L.(Chenopodiaceae), Pedilanhus tithymaloides (L.) Poit (Euphorbiaceae), Peristrophe angustifolia Nees(Acanthaceae) leaves and the aqueous extract obtained from the Orbignya phalerata Mart. (Arecaceae) mesocarp flour. The in vitro assay was performed with promastigotes incubated during 24 hours with 31.3, 62.5, 125.0, 250.0 and 500.0 µg/mL of each extract. Then the inhibitory concentration of the parasite growth (IC50) was determined. The effectiveness of J. triqueter, Dichorisandra sp and T. cinerea hydroalcoholic extracts to induce promastigotes death was intense since the IC50 were 29.5; 32.9 and 43.6 µg/mL, respectively. P. edulis, C. ambrosioides and S. jambolanum extracts had moderated effectiveness since the IC50 were 150.1; 151.9 and 166.6 µg/mL, respectively. P. tithymaloides and O. phalerata extracts showed a low efficacy in comparison with IC50 >500 µg/mL. Peristrophe angustifolia and Cecropia sp extracts had no leishmanicidal effect. Thus, three of the ten extracts that were tested showed a significant in vitro leishmanicidal activity.