Bases para un tratamiento con hipertermia moderada en leishmaniosis cutánea / Bases for a treatment of cutaneous leishmaniasis with moderate hyperthermia

Resumen Introducción: La hipertermia regional entre 38 y 39.5 °C ha sido empleada para tratar procesos inflamatorios y, ocasionalmente, infecciones cutáneas. En zonas endémicas de leishmaniosis se aplican compresas calientes como tratamiento antiparasitario. Objetivo: Conocer las bases del tratamiento térmico de la leishmaniosis para regularlo adecuadamente. Métodos: Parásitos Leishmania mexicana cultivados in vitro fueron incubados por periodos variables de 37 °C y después a 25 °C.. Los parásitos se tiñeron con anexina V-FITC y yoduro de propidio para detectar inducción de apoptosis y su viabilidad. Se realizaron curvas de crecimiento postratamiento e identificación del ciclo celular con anticuerpos anticiclinas. Resultados: Después de 30 minutos de exposición a una temperatura de 37 °C, un porcentaje variable de parásitos perdieron su característica forma ovalada y se tornaron esféricos, sin refringencia y con núcleos condensados, cambios que sugirieron apoptosis, la cual fue confirmada mediante tinción con anexina V-FITC. La cantidad de parásitos en proceso de apoptosis fue proporcional al tiempo de exposición. Los parásitos en los que se observó apoptosis se tiñeron con anticuerpos anticiclinas. Conclusiones: La elevación constante, regulada y fisiológica de la temperatura por más de 30 minutos induce apoptosis de parásitos Leishmania mexicana cultivados in vitro, cuando se encuentran en fase activa en el ciclo celular.

Abstract Introduction: Regional hyperthermia at between 38 and 39.5 °C has been used to treat inflammatory processes and, occasionally, skin infections. In areas where leishmaniasis is endemic, hot compresses are applied as anti-parasitic treatment. Objective: To identify the bases of leishmaniasis thermal treatment in order to properly regulate it. Methods: In vitro-cultured Leishmania mexicana parasites were incubated for variable periods at 37 and then, to 25 °C. The parasites were then stained with Annexin V-FITC to detect apoptosis induction and with propidium iodide for viability. Post-treatment growth curves and cell cycle identification with anti-cyclin antibodies were performed. Results: After 30 minutes of exposure to a temperature of 37 °C, a variable proportion of parasites lost their characteristic oval shape and became spherical, without refringence and with condensed nuclei, with these changes suggesting apoptosis, which was confirmed by Annexin V-FITC staining. The number of parasites that underwent apoptosis was proportional to exposure time. Parasites in which apoptosis was observed were stained with anti-cyclin antibodies. Conclusions: Constant, regulated and physiological elevation of temperature for more than 30 minutes induces apoptosis of in vitro-cultured L. mexicana parasites when they are in an active phase of the cell cycle.

La impronta como método no invasivo de toma de muestra para el diagnóstico molecular de la leishmaniosis cutánea en población militar de colombia / The imprint as a non-invasive method of sampling for the molecular diagnosis of cutaneous leishmaniasis in colombia's military population / In print como método não invasivo de coleta de amostra para o diagnóstico molecular da leishmaniose cutânea em população militar da colômbia

Resumen Teniendo en cuenta que los métodos tradicionales de toma de muestra y diagnóstico para la leishmaniosis cutánea presentan limitaciones, como el frotis directo, cuya sensibilidad depende de la pericia del profesional, el aspirado de lesión que puede ser usado para detección de parásitos en lámina, su ADN o para cultivos es demorado y exigente, y la biopsia de la lesión que es invasiva y dolorosa se comparó con el método de impronta en papel filtro de la lesión ulcerativa contra el método tradicional de aspirado mediante la técnica de POR convencional utilizando como blanco una región del ADN del kinetoplasto del parásito. En el presente trabajo, la por obtuvo una sensibilidad para impronta del 90,07% comparado con el aspirado, el 86,3%, que, además, por ser un método de toma de muestra no invasivo, con pocas exigencias para el transporte, se puede tomar directamente en el área de operaciones a muy bajo costo, resulta ser beneficioso para ser usado en los pacientes con leishmaniosis cutánea del Ejército Nacional de Colombia, que se encuentran en las diferentes áreas de operaciones.

Abstract Taking into account that the traditional methods of sampling and diagnosis for cutaneous leishmaniasis , have limitations, such as direct smear, whose sensitivity depends on the professional's expertise, the lesion aspiration that can be used to detect parasites in the lamina, DNA or cultures takes a long time and is demanding, and the biopsy of the lesion that is invasive and painful were compared with the imprinting method on the filter paper of the ulcerative lesion against the traditional method of aspiration by means of the conventional PCR technique using as a target a DNA region of the parasite kinetoplast. In this present work, PCR obtained an imprinting sensitivity of 90.07% compared to the aspirate of 86.3%, which, besides being a non-invasive sampling method, with few transport requirements, it can be taken directly in the area of operations at a very low cost, which turns out to be beneficial to be used in patients with cutaneous leishmaniasis of the National Army of Colombia, who are in different operations areas.

Resumo Considerando que os métodos tradicionais de coleta de amostra e diagnóstico para a leishmaniose cutânea apresentam limitações, como exame direto de esfregaços, cuja sensibilidade depende da perícia do profissional, o raspado de lesão que pode ser usado para a detecção de parasitas em lâmina, seu DNA ou para culturas é demorado e exigente, e a biopsia da lesão que é invasiva e dolorosa, comparou-se com o método in print em papel filtro da lesão ulcerativa contra o método tradicional de aspirado mediante a técnica de PCR convencional utilizando como alvo uma região do DNA do cinetoplasto do parasita. No presente trabalho, a PCR obteve uma sensibilidade para in print de 90,07% comparado com o aspirado, 86,3%, que, além disso, por ser um método de coleta de amostra não invasivo, com poucas exigências para o transporte, pode ser coletado diretamente na área de operações a muito baixo custo, resulta ser benéfico para ser usado nos pacientes com leishmaniose cutânea do Exército Nacional da Colômbia, que se encontram nas diferentes áreas de operações.

Estudio de factores de riesgo para transmisión de leishmaniosis cutánea americana en una área endémica de la Provincia de Pichincha / Study of risk factors for transmission of American cutaneous leishmaniasis in an endemic area of ​​the Province of Pichincha

Contexto: En Ecuador, la leishmaniosis cutánea americana se reporta en 20 de 22 provincias, con una incidencia anual de 3.000 a 4.500 casos. En la Provincia de Pichincha, esta forma clínica de leishmaniosis se ha expandido a las zonas tropicales del noroeste y el conocimiento epidemiológico es exiguo. Objetivos: investigar el perfil epidemiológico y factores de riesgo de leishmaniosis cutánea americana. Material y métodos: el estudio efectuado en la Provincia de Pichincha vinculó a 1081 individuos mediante la aplicación de una encuesta con variables epidemiológicas relacionadas al parásito, evaluación de actitudes, conocimientos y prácticas de la población sobre la enfermedad. Resultados: el 15,7% de los encuestados sufrieron leishmaniosis cutánea americana en el pasado. Se observó la presencia de cánidos (56,4%) y aves de corral (37%) en las inmediaciones de las viviendas. La recolección de basura beneficia al 86,7% de inmuebles, donde el 87,7% de habitantes permanecen entre 18 a 22 horas diarias. El 51,9% de encuestados usan habitualmente insecticidas para el control de vectores. El 70,4% conocen sobre la leishmaniosis cutánea americana y el 25,6% saben cómo prevenirla mediante control químico (12%), control físico (18,9%), limpieza peridomiciliaria (11,7%) y selección adecuada del sitio para edificar viviendas distantes de vegetaciones (2,2%). Conclusión: es mandatorio iniciar campañas educativas para mejorar conocimientos, actitudes y prácticas sobre prevención. (AU)

Context: In Ecuador, American cutaneous leishmaniasis is reported in 20 of 22 provinces, with an annual incidence of 3,000 to 4,500 cases. In the Province of Pichincha, this clinical form of leishmaniasis has spread to the tropical zones of the northwest and the epidemiological knowledge is meager. Objective: to investigate the epidemiological profile and risk factors of American cutaneous leishmaniasis. Material and methods: The study carried out in the Province of Pichincha involved 1081 individuals, through the application of a survey with epidemiological variables related to the parasite, evaluation of attitudes, knowledge and practices of the population about the disease. Results: 15.7% of the respondents suffered from American cutaneous leishmaniasis in the past. The presence of canids (56.4%) and poultry (37%) were observed in the immediate vicinity of the dwellings. Garbage collection benefits 86.7% of properties, where 87.7% of inhabitants remain between 18 to 22 hours a day. 51.9% of respondents routinely use insecticides for vector control. 70.4% know about American cutaneous leishmaniasis and 25.6% know how to prevent it by chemical control (12%), physical control (18.9%), peridomiciliary cleaning (11.7%) and adequate site selection to build houses far from vegetation (2.2%). Conclusion: It is mandatory to initiate educational campaigns to improve knowledge, attitudes and prevention practices. (AU)

Atención hospitalaria de la leishmaniosis tegumentaria americana en los miembros inferiores / Hospital care of American tegumentary leishmaniasis in the lower limbs

La leishmaniosis tegumentaria americana (LTA) como enfermedad endémica crónica continúa afectando a la población del medio rural venezolano, ocasionándole morbilidad y limitaciones laborales. Mediantes la descripción de casos clínicos se evaluaron 38 pacientes con LTA que recibieron atención hospitalaria por úlceras leishmánica en miembros inferiores. De los pacientes descriptos 63% eran niños, 84% procedía del Estado Miranda, 66% tenía una lesión ulcerosa única, 45% recibió cefadroxilo previo al tratamiento antiparasitario específico y el 24% había recibio inmunoterapia previa para la enfermedad. Treinta y siete pacientes (97%) recibieron antimoniato de meglumina en series terapéuticas de aiez días y uno anfoterecina B, por contraindicación cardiovascular para el uso del antimonial. Todos presentaron re-epitelización adecuada de sus lesiones, por lo que el antimoniato de meglumina demuestra una vez más su utilidad en la terapéutica de esta zoonosis parasitaria.

American tequmentary leishmaniasis (ATL) endemic chronic disease continues to affect the population of rural Venezuela, causing morbidity and labor constraints. By the description of clinical were evaluated 38 patients with ATL who received hospital care for leishmanial ulcers in lower limbs. Sixty-three percent of the patients were children, 84% came from Miranda state, 66% had a unique ulcerated lesion, 45% received cefadroxil prior to parasite specific treatment and 24% had received immunotherapy for the diseaes. Thirtyseven patients (97%) received meglumine antimoniate in series of ten days and one patient received anfotericine B, due to cardiovascular contraindication for the use of the antimonial. All ulcers healed. The antimoniate of meglumine demonstrates once again its usefulness in the treatment of this parasitic zoonosis.

Reacción de antígenos de Leishmania (Leishmania) mexicana con sueros de pacientes con leishmaniosis cutánea de Sinaloa, México / Reaction of Leishmania (Leishmania) mexicana antigens by sera of patients with cutaneous leishmaniasis from Sinaloa, Mexico

OBJETIVO: Detectar los antígenos de Leishmania (Leishmania) mexicana que reaccionan con sueros de pacientes con leishmaniosis cutánea (LC) de Sinaloa, México. MATERIAL Y MÉTODOS: Un extracto crudo de L. (L.) mexicana fue usado como antígeno para Western blots 2-D empleando sueros de cinco pacientes con LC y controles originarios de Sinaloa, México, durante el 2008. RESULTADOS: Cinco antígenos fueron detectados sólo por los sueros de los cinco pacientes estudiados; estos son: 26 kDa (pI 7.8), 27 kDa (pI 8.1), 28 kDa (pI 8.6), 29 kDa (pI 8.5) y 31 kDa (pI 9.0). CONCLUSIONES: Se detectaron nuevos antígenos de L. (L.) mexicana potencialmente inmunodominantes, lo que sugiere a este parásito como el agente causal de la LC en Sinaloa.

OBJECTIVE: To detect Leishmania mexicana antigens reacting with sera of patients with cutaneous leishmaniasis (CL). MATERIAL AND METHODS: A crude extract of L. mexicana was used as antigen for 2-D Western blot using sera from 5 patients with CL and controls from Sinaloa, Mexico during 2008. RESULTS: Five antigens were detected in the five infected patients analyzed; their molecular weights and isoelectric points were: 26 kDa (pI 7.8), 27 kDa (pI 8.1), 28 kDa (pI 8.6), 29 kDa (pI 8.5) and 31 kDa (pI 9.0). CONCLUSION: New potentially immunodominant L. mexicana antigens were detected, suggesting that this parasite could be the species responsible for human infection in Sinaloa.

Asociación entre la incidencia de leishmaniosis cutánea y el índice de desarrollo humano y sus componentes en cuatro estados endémicos de Venezuela / Association between cutaneous leishmaniasis incidence and the human development index and its components in four endemic states of Venezuela

Objetivos. Evaluar las posibles asociaciones entre el índice de desarrollo humano (IDH) y sus componentes, y la incidencia de Leishmaniosis cutánea (LC) en cuatro estados endémicos de Venezuela (Mérida, Trujillo, Lara y Sucre) en el período 1994 al 2003. Materiales y métodos. La data socioeconómica (clasificada de acuerdo al Banco Mundial) se obtuvo del Instituto Nacional de Estadística y la epidemiológica del Ministerio de Salud, ambos de Venezuela. Para este estudio ecológico se evaluó la variación anual de las variables y se realizó modelos de regresión. Resultados. El IDH varió en el período, de 0,6746 en 1994 a 0,8144 en 2003 (p=0,90), asimismo, se observó un aumento de la incidencia acumulada de Leishmaniosis, en especial del año 1998 (7,3 casos/100 000 hab) a 1999 (11,3 casos/100 000 hab). Al analizar con los modelos de regresión lineal, se observó que la relación entre las variables epidemiológicas y sociales era diferente a nivel de los Estados evaluados. Para Mérida y Trujillo se observó un descenso significativo de la incidencia de LC con relación al aumento del porcentaje de alfabetización (p menor que 0,05), de estudiantes matriculados (p menor que 0,05), la esperanza de vida (p menor que 0,05), su ingreso en USD per cápita por año (p menor que 0,05) e IDH (p minor that 0,05). Conclusión. Esta información refleja la influencia significativa de los indicadores socioeconómicos sobre la incidencia de la LC en los Estados Trujillo y Mérida, siendo inversa entre ambos tipos de variables; con el incremento o mejoría de los indicadores socioeconómicos, la incidencia acumulada de la enfermedad disminuyó.

Objectives. Assess potential relationships between the Human Development Index (HDI) and its components and the incidence of cutaneous leishmaniasis (CL) in four endemic States of Venezuela (Mérida, Trujillo, Lara and Sucre) in the period 1994-2003. Material and methods. Socioeconomical data (classified according the World Bank) wasobtained from the National Institute of Statistics, and the epidemiological data from the Ministry of Health, both fromVenezuela. For this ecological study the annual variation of the variables was assessed and also regression modelswere done. Results. The HDI varied in the period from 0.6746 in 1994 to 0.8144 in 2003 (p=0.90). During this time an increase in the cumulative incidence of Leishmaniasis was observed, particularly from 1998 (7.3 cases/100,000 pop) to 1999 (11.3 cases/100,000 pop). Analyzing the linear regression models, it was observed that the relationship betweenepidemiological and social variables was different at States levels. For Mérida and Trujillo it was observed a significantdecrease in the CL regard to the increase of literacy (p minor that 0.05), of the gross combined enrollment (p minor that 0.05), life expectancy (p minor that 0.05), money income (p minor that 0.05) and the HDI (p minor that 0.05). Conclusion. This information reflects the significant influence of socioeconomical indicators on the CL incidence at Trujillo and Merida, being an inverse relationship between both types of variables; with an increase or improvement in the socioeconomical indicators, the disease incidence rate decreased.

Leishmaniosis cutánea en la Región Sanitaria No 3, República de Honduras, enero 1998-septiembre 2002 / Cutaneous leishmaniasis in Health Region No 3, Republic of Honduras, January, 1998 - September, 2002

Se realizó un estudio descriptivo retrospectivo en el área metropolitana de la Región Sanitaria No. 3 de Honduras, con el propósito de identificar características sociodemográficas, clínicas y epidemiológicas de la leishmaniosis. Los datos se obtuvieron de las fichas de vigilancia existentes en el área de salud. Para el análisis se utilizaron las distribuciones de frecuencias y el test de comparación de proporciones. El sexo masculino resultó ser el más afectado por esta enfermedad, así como los estudiantes. La forma clínica que predominó fue la úlcera, con lesiones únicas situadas fundamentalmente en piernas y brazos. La solicitud de servicios médicos se produjo entre 1 y 3 meses después de presentarse las lesiones. La entrada a zonas boscosas fue fundamental para la aparición de la enfermedad. No hubo recaídas en los pacientes que hicieron un tratamiento adecuado. La leishmaniosis es una enfermedad más que todo social en Honduras y nuestros médicos deben poder reconocerla.

A descriptive study was conducted in metropolitan area of Health Region No. 3 of Honduras to identify the sociodemographic, clinical and epidemiological features of leishmaniasis. Data were collected from surveillance record cards available in health area. In analysis frequencies distribution and ratio comparison test were used. The more affected sex was the male one as well as the students. Clinical form predominant was the ulcer with single lesions located mainly in legs and arms. Medical services request was between 1 and 3 months after lesions appearance. Entry to wooded zones was the main cause of disease appearance. There were not relapses between patients who fulfilled with the treatment parameters. In Honduras, leishmaniasis is a social disease and our physicians must to know it.

Respuesta inmune de células T en leishmaniosis cutánea / Immune response of t cells in cutaneous leishmaniosis

El papel de las sub poblaciones de células TCD4+, Th1 y Th2, ha sido bien estudiado en la infección por Leishmania major en el modelo murino experimental. Las cepas singénicas de ratones que desarrollan el fenotipo Th1 (células que secretan principalmente IL-2, IFN-y y TNF-!3) son resistentes a la infección por este protozoo. En contraste, las que desarrollan el fenotipo Th2 (células que secretan principalmente IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 e IL-13) son susceptibles a ella. Los estudios recientes indican que la IL-4 es una señal esencial en la estimulación primaria y maduración de las células Th2, mientras que IL-12 permite la maduración de las células Th1. Adicionalmente, IL.4 e IFN-y ejercen efectos reguladores opuestos sobre las células Th1 y Th2 respectivamente. Por otra parte, varios estudios han establecido claramente que la subpoblación de linfocitos TCD8+ también contribuye a la resolución de la enfermedad y la resistencia contra la reinfección en leishmaniosis cutánea. En los humanos, aunque la respuesta inmune dirigida contra el parásito es menos polarizada que en el ratón, se ha evidenciado una clara tendencia hacia la producción del fenotipo Th1 en las formas menos severas de la enfermedad. La identificación de subpoblaciones de células T humanas que se correlacionen con susceptibilidad o resistencia a la infección podría ayudar al desarrollo de ensayos in vitro para identificar antígenos de Leishmania que estimulen una respuesta inmune protectora y que puedan evaluarse como candidatos en el desarrollo de una vacuna capaz de controlar la infección.

Presencia de vectores de leishmaniosis cutánea y visceral en la Isla de Santa Cruz de Mompóx, Departamento de Bolívar, Colombia / Vectors of cutaneous and visceral leishmaniosis in Snata Cruz de Mompox island, Bolivar, Colombia

Se realizó una prospección entomológica en la Isla de Santa Cruz de Mompóx entre los días 23 y 29 de diciembre de 1993, con el fin de determinar si se trata de una zona de riesgo potencial de infección por Leishmania; para ello se practicaron capturas de flebotomíneos en sitios de reposo diurno y con trampas de luz tipo CDC y Shannon, colocadas simultáneamente en el peri y el extradomicilio. Se colectaron 367 ejemplares de flebotomíneos cuya Identificación demostró por primera vez la presencia en la Isla de siete especies de Lutzomyia entre las cuales se encuentran Lu. panamensis y Lu. gomezi, vectoras de leishmaniosis cutánea y Lu. evansi vectora principal de la forma visceral en la Costa Caribe Colombiana; el hallazgo demuestra que la Isla es una zona de riesgo potencial para leishmanlosis cutánea y visceral

Se realizó una prospección entomológica en la Isla de Santa Cruz de Mompox entre los días 23 y 29 de diciembre de 1993, con el fin de determinar si se trata de una zona de riesgo potencial de Infección por Leishmania; para ello se practicaron capturas de flebotomíneos en sitios de reposo diurno y con trampas de luz tipo CDC y Shannon, colocadas simultáneamente en el peri y el extradomicilio. Se colectaron 367 ejemplares de flebotomíneos cuya Identificación demostró por primera vez la presencia en la Isla de siete especies de Lutzomyia entre las cuales se encuentran Lu. panamensis y Lu. gomezi, vectoras de leishmaniosis cutánea y Lu. evansi vectora principal de la forma visceral en la Costa Caribe Colombiana; el hallazgo demuestra que la isla es una zona de riesgo potencial para leishmaniosis cutánea y visceral