Efectividad de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR-RT) e Inmunodot en el diagnóstico temprano de leptospirosis: análisis comparativo con la prueba de Microaglutinación (MAT) / Effectiveness of the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and Immunodot in the early diagnosis of Leptospirosis: comparative analysis with the Microagglutination test (MAT)

Introducción: la leptospirosis es una enfermedad infecciosa producida por espiroquetas del género Leptospira. Se disemina a través de la orina de animales domésticos, con mayor frecuencia por roedores. En República Dominicana se necesitan pruebas confiables para el diagnóstico en etapas tempranas de la enfermedad. En el presente trabajo se aborda la validez diagnóstica del PCR en Tiempo Real y del IGM (INMUNODOT) en comparación con la prueba de Microaglutinación (MAT). Materiales y métodos: se realizó un estudio observacional, descriptivo, de corte transversal con 69 pacientes admitidos en el Hospital Regional "José María Cabral y Báez" con diagnóstico presuntivo de leptospirosis desde el 2010 hasta el 2012. Resultados: del total de los casos (69), la mayoría fueron del sexo masculino (94.2 %), menores de 49 años (79.4 %) y provenían de la provincia de Santiago (58 %). La mortalidad fue de 52.1 % de los cuales 52.3 % fueron reportados positivos para Leptospira y 47.6 % resultaron negativos según el MAT. Al comparar los resultados de PCR en relación al MAT se obtuvo una sensibilidad de 27.3 % y una especificidad de 80 %. Los resultados del PCR y del Immunodot fueron equivalentes. Conclusión: en el presente trabajo la realización del PCR en sangre, después del 5to día de inicio de la enfermedad, no demostró ser mejor que la Inmunodot para la detección temprana de la enfermedad, al contrastarlos con el resultado del MAT. En República Dominicana, los casos hospitalizados con diagnóstico presuntivo de leptospirosis permanecen con muy alta mortalidad. Por tanto, es prioritario optimizar el diagnóstico y el tratamiento de estos casos. En este estudio, los casos confirmados con Leptospirosis que fallecieron indican que debe actualizarse el protocolo de tratamiento y asegurarse que pueda implementarse. Por otra parte, los casos no confirmados fallecidos exigen investigar otras causas de enfermedad como la Infección por Hanta Virus.

Introduction: Leptospirosis is an infectious disease caused by spirochaetes of the genus Leptospira. It spread through the urine of domestic animals most frequently in rodents. Need reliable tests to diagnose in early stages of the disease and it has been proposed the use of the PCR in real-time as an option. The present work deals with the diagnostic real-time PCR and IGM (INMUNODOT) in comparison with the Microagglutination (MAT) test. Materials and methods: An observational, descriptive, cross-sectional study with 69 patients admitted as possible Leptospirosis in the Hospital "Jose Maria Cabral y Báez" of Santiago from 2010 to 2012. Results: Of the total cases (69), most were male (94.2%), under 49 years of age (79.4%) coming from the province of Santiago (58%). Mortality was 52.1% of which 52.3% were reported positive for leptospirosis and 47.6% were negative according to the MAT. To compare the results of PCR in relation to the MAT was obtained a sensitivity of 27.3% and a specificity of 80%. The results of the PCR and immunodot were equivalent. Conclusion: In this study, the realization of the PCR in blood after the 5th day of the disease not proved to be better than the Inmunodot for the early detection of the disease. Is necessary to evaluate cases less than 5th day. In the Dominican Republic, hospitalized with a presumptive diagnosis of Leptospirosis cases remain with very high mortality. Therefore, it is important to optimize the diagnosis and treatment of these cases. In this study, confirmed cases with Leptospirosis who died, indicate that you must upgrade the treatment protocol and ensure that it can be implemented. On the other hand, the deceased not confirmed cases require to investigate other causes of disease as the Hanta Virus infection.

Microscopio agglutination test: Variables that affect the time of serological confirmation of human leptospirosis cases / Test de microaglutinación: variables que afectan el tiempo de confirmación de los casos humanos de leptospirosis

Abstrac Leptospirosis is considered an endemic disease in Buenos Aires province, Argentina,with human cases reported annually from rural and urban areas. The aim of the study was todescribe the variables that influence the delay in the serological confirmation of leptospirosisin human cases (period 2006-2014) from Buenos Aires province. Sixty-four percent (64%) ofcases could be confirmed by microscopic agglutination test (MAT) with the first sample. The time of confirmation of the human leptospirosis cases was on average 21 days from the onset of the first clinical signs, and varied depending on the distance of the different sanitary regions. The geographical distribution of the confirmed leptospirosis human cases, in addition to the high number of suspected cases and probable cases (which could not be confirmed by MAT), demonstrate that leptospirosis is endemic and underreported in Buenos Aires province, and that distance and lack of resources could be determinant factors of this situation.

Resumen La leptospirosis se considera una enfermedad endémica en la provincia de Buenos Aires, con casos humanos registrados anualmente en áreas rurales y urbanas. El objetivo de este estudio fue describir las variables que influyen en el retraso de la confirmación serológica de la leptospirosis en humanos, a partir del análisis de los casos ocurridos en el período 2006-2014 en la provincia de Buenos Aires. El 64% de los casos fue confirmado por microaglutinación (MAT) con la primera muestra clínica. El tiempo de confirmación promedio fue de 21 días desde el inicio de los primeros signos clínicos; este valor se vio afectado por la distancia entre los centros de salud y los laboratorios de referencia en las distintas regiones sanitarias. La distribución geográfica de los casos confirmados de leptospirosis en humanos, además del alto número de casos sospechosos y probables (que no pudieron ser confirmados por MAT), demuestra que esta afección es endémica y se encuentra subregistrada en la provincia de Buenos Aires, y que la distancia y la falta de recursos serían factores determinantes de estas características.

Seroprevalencia de leptospirosis en grupos humanos en riesgo por factores ambientales, laborales o sociales / Seroprevalence of leptospirosis in human groups at risk due to environmental, labor or social conditions

Abstract Leptospirosis is important in Uruguay due to the economic loss caused by the diseases of production animals, mainly bovines, and also due to frequent human infection. We decided to study anti-Leptospira antibodies in the sera of dairy workers, rice laborers, veterinarians, suburban slum dwellers and garbage recyclers. Our aims were to estimate the seroprevalence of infection by Leptospira spp. in these people at risk, the relative importance of the known risk factors associated with infection, and the impact of human infections in each setting. Groups at risk were identified and 35 visits to their locations were made, conducting field surveys and exchange talks for information and education. Simple epidemiological questionnaires were administered and sera samples were taken from 308 persons. The microagglutination Technique (MAT) and the IgM Indirect Immunofluorescence (IIF) assay were employed to detect antibodies. Environmental water samples, canine and equine sera were also examined. More than 45% of human sera were reactive and the studied groups were confirmed to be widely exposed to infection. Female sera were frequently reactive, though most illnesses occur in men, and the most severe cases in elderly males; the emergence and evolution of the disease may strongly depend on the host condition and functions. Animal contact and unsafe water usage were the main identified risk factors to be considered in prevention. Fifty per cent of the studied horses showed a positive MAT reaction. The underdiagnosis of the illness and its long-term symptoms require further study, as well as greater health and social attention efforts.

Resumen La leptospirosis es importante en Uruguay por las pérdidas económicas que ocasionan las enfermedades en los animales de producción, principalmente en los bovinos, y a causa de la frecuente infección humana. Decidimos estudiar anticuerpos anti -Leptospira en trabajadores de tambo y de plantaciones de arroz, así como en veterinarios, habitantes de asentamientos y recicladores de residuos. Buscamos evaluar la importancia de distintos factores de riesgo conocidos asociados con la infección por Leptospira spp., y estimar la frecuencia y el impacto de las infecciones humanas en la población expuesta. Se efectuaron 35 visitas a colectivos de riesgo, realizando relevamientos de campo e intercambios educativos, llenando formularios epidemiológicos sencillos y tomando muestras de sangre a 308 personas. Se investigaron anticuerpos séricos con técnicas de microaglutinación (MAT) e inmunofluorescencia indirecta para IgM. Se examinaron también, muestras de agua ambiental, y sueros caninos y equinos. Más del 45% de los sueros humanos fueron reactivos y se confirmó que los grupos estudiados estaban ampliamente expuestos a la infección. Los sueros de mujeres fueron frecuentemente reactivos, aunque la mayoría de las enfermedades ocurren en varones, y los casos más graves en varones añosos. La emergencia y la evolución de la afección pueden depender fuertemente del estado del huésped y su respuesta. El contacto con animales y el uso de agua insegura fueron los principales factores de riesgo identificados para considerar en la prevención. El 50% de los sueros equinos fueron reactivos por MAT. Es necesario incrementar los esfuerzos de atención social y sanitaria en estos sectores, superar el subdiagnóstico y estudiar la evolución y la sintomatología a largo plazo de los pacientes.

Situación epidemiológica de la leptospirosis humana en Centroamérica, Suramérica y el Caribe / Epidemiology of human leptospirosis in Central America, South America and the Caribbean / Situação epidemiológica da leptospirosis humana em América Central, América do Sul e do Caribe

Para identificar y describir el estado epidemiológico de la leptospirosis humana o enfermedad de Weil, se realizó búsquedas de publicaciones científicas y reportes en entes reguladores de salud, durante el periodo 2006-2013. La extracción de información fue independiente y se realizó una lista de chequeo para evaluar la calidad metodológica de los artículos hallados. El país con mayor prevalencia fue Trinidad & Tobago (22 casos por 100.000 habitantes) y la mayor proporción de casos fue en Guyana (60%). En Colombia, el departamento con mayor proporción de casos fue Antioquia (85,7%) y el de mayor seroprevalencia, Córdoba (67,9%). Para diagnóstico, la técnica más utilizada es la aglutinación microscópica y el posible factor de riesgo es por contacto con animales. La información analizada presentó diversos aspectos epidemiológicos, dificultando su unificación. Para algunos países, es evidente el interés y la concientización académica y gubernamental en el área de salud pública.

To identify and describe the epidemiological status of human leptospirosis or Weil's disease, we searched scientific publications and reports issued by health control authorities from 2006 to 2013. Information extraction was done independently and the methodological quality of the articles was evaluated using a checklist created for that purpose. The country with the highest incidence of human leptospirosis was Trinidad & Tobago (22 cases per 100,000 people) and the highest percentage of cases occurred in Guyana (60%). In Colombia, the department with the highest percentage of cases was Antioquia (85.7%) and the highest incidence was in Cordoba (67.9%). Contact with animals is possibly the highest risk factor; its diagnosis is commonly accomplished using a microscopic agglutination test. The analyzed data presented various epidemiological aspects, making it difficult to merge the information. Only in some countries is the academic and governmental interest and awareness evident in the area of public health.

Para identificar e descrever o estado epidemiológico da leptospirosis humana o doença de Weil, realizou-se pesquisas de publicações científicas e relatórios de entes reguladoras de saúde, durante o período 2006-2013. A extração da informação foi independente e realizou-se uma lista de verificação para avaliar a qualidade metodológica dos artigos encontrados. O país com maior prevalência foi Trinidad & Tobago (22 casos por 100.000 habitantes) e a maior proporção de casos foi em Guyana (60%). Em Colômbia, o departamento com maior proporção de casos foi Antioquia (85,7%) e o de maior soroprevalência, Córdoba (67,9%). Para o diagnóstico, a técnica mais utilizada é a aglutinação microscópica e o possível fator de risco é pelo contacto com animais. A informação analisada apresentou diversos aspetos epidemiológicos, dificultando a sua unificação. Para alguns países, é evidente o interesse e a consciência académica e governamental na área de saúde pública.

Neuralgia amiotrófica posterior a la vacunación contra la leptospirosis humana / Neuralgic amyotrophy following vaccination against human leptospirosis

Introducción: la neuralgia amiotrófica o síndrome de Parsonage-Turner se asocia a vacunaciones en 15 por ciento de los casos. No existen reportes que vinculen esta condición con la vacuna contra la leptospirosis humana. Objetivo: describir las características clínicas de un paciente que presentó una plexopatía braquial aguda posterior a la inmunización contra la leptospirosis humana. Presentación del caso: un varón de 31 años de edad, obrero agrícola en 2008 recibió una dosis de la vacuna cubana contra la leptospirosis humana (vax-Spiral); 3 semanas después presentó dolor intenso localizado en ambos hombros, a la semana siguiente aparece debilidad muscular y posteriormente atrofia del músculo deltoides derecho. La evaluación neurológica era compatible con afección aguda asimétrica de la porción superior del plexo braquial, con mayor intensidad en el lado derecho, en el cual también estaba involucrado el diafragma. Se comprobó el compromiso de la porción superior del plexo braquial con estudios de neuroconducción y electromiografía. El paciente es tratado con analgésicos y fisioterapia, evolucionando de modo favorable. Conclusiones: el evento ocurrido en este caso sugiere que la vacuna cubana contra leptospirosis humana pudiera producir inmunorreactividad cruzada contra antígenos del sistema nervioso periférico

Introduction: neuralgic amyotrophy or Parsonage-Turner syndrome is associated with vaccination in 15 percent of cases. There are no reports linking this condition to the vaccine against human leptospirosis. Objective: describe the clinical characteristics of a patient who developed acute brachial plexopathy after vaccination against human leptospirosis. Case presentation: a male 31 year-old agricultural worker received a dose of the Cuban vaccine against human leptospirosis (vax-SPIRAL) in 2008. Three weeks later he presented intense pain in both shoulders. The following week he had muscular weakness, and then atrophy of the right deltoid muscle. Neurological evaluation showed acute asymmetric damage to the upper brachial plexus, with greater intensity on the right side, and involvement of the diaphragm. Nerve conduction examination and electromyography revealed involvement of the upper brachial plexus. The patient was treated with analgesics and physical therapy, and was found to evolve favorably. Conclusions: the events described suggest that the Cuban vaccine against human leptospirosis might produce immunological cross-reactivity against antigens of the peripheral nervous system

Seroprevalencia de leptospirosis humana en un asentamiento del área urbana de la ciudad de Guatemala / Seroprevalence of human leptospirosis in a settlement of the urban area in Guatemala city

Introducción: aunque la leptospirosis es considerada una enfermedad de ambientes rurales, la reciente aparición de epidemias urbanas la hace emerger como un problema en salud pública. En Guatemala (2008), se demostró una seroprevalencia de 51,8 % en áreas rurales, por lo que es importante llevar a cabo estudios en áreas urbanas que permitan establecer el impacto que pudiera tener en la población guatemalteca. Objetivos: determinar la seroprevalencia de leptospirosis humana en un asentamiento ubicado en la ciudad de Guatemala, así como los serovares de Leptospira interrogans circulantes y los factores de riesgo asociados a la exposición con esta bacteria. Métodos: participaron 119 habitantes con 6 años y más de los 2 sexos, que aceptaron, previo consentimiento informado. Con una entrevista estructurada se recolectaron los datos sociodemográficos y las muestras de sangre venosa. La técnica de microaglutinación y ELISA IgG se utilizaron para la detección de anticuerpos. Los sueros se enfrentaron a 20 serovariedades de Leptospira interrogans sensu lato. La prevalencia se determinó con un IC95% y las variables sociodemográficas con chi cuadrado, la razón de prevalencia con Epi Info 3.5.1. Resultados: la seroprevalencia de leptospirosis en la población estudiada resultó de 30,3 %, (IC95%). Los serovares más frecuentes fueron Australis y Lanka (11,1 % ambos). El título más frecuente fue de 1:80 por microaglutinación. En la población se encontraron distintos factores de riesgo, pero ninguno mostró una asociación significativa con la presencia de anticuerpos anti-Leptospira (p> 0,05). Conclusiones: la seroprevalencia de leptospirosis detectada fue de 30,3 % en los habitantes del asentamiento ubicado en la ciudad de Guatemala, la cual es comparable a las áreas urbanas de países en donde esta enfermedad es hiperendémica, por lo que es importante implementar medidas de prevención y de control de la enfermedad en la comunidad, en forma conjunta con la municipalidad del distrito.

Introduction: although leptospirosis is considered a rural environment disease, recent urban epidemics make it emerge as a public health problem. A seroprevalence of 51.8 % has been found in rural areas of Guatemala; therefore it is important to establish the impact that this disease may have on the Guatemalan urban population. Objectives: to determine the seroprevalence of human leptospirosis in a settlement of Guatemala city and also to identify urban Leptospira interrogans serovars and risk factors associated with exposure to the bacteria. Methods: there were selected 119 people aged 6 years old and over from both sexes, who agreed to participate after giving their informed consent. Sociodemographic data were collected and venous blood samples were taken. The microagglutination test (MAT) and ELISA IgG were used to detect antibodies. Sera were tested against 20 serovars of Leptospira interrogans sensu lato. The seroprevalence was determined with a 95% confidence interval, and sociodemographic variables were evaluated with Chi square and Odds Ratio using Epi Info 3.5.1. Results: a 30.3 % seroprevalence of leptospirosis was found in the study population (CI, 95%). The more frequently serovars founded were Australis and Lanka (11.1 % each). The most common titer was 1:80 (MAT). Different risk factors were found, but none showed a significant association with the presence of Leptospira IgG antibodies (p> 0.05). Conclusion: the prevalence of IgG anti-Leptospira antibodies detected in the residents of the settlement is comparable to that of the urban areas of other countries where leptospirosis is hyperendemic. For avoiding outbreaks in these areas, it is important to prevent and control the infection in the community.

Evolución de la leptospirosis según el Sistema de Vigilancia Epidemiológica Nacional, Chile 2003-2009 / Evolution of leptospirosis according to the National Epidemiological SurveillanceSystem, Chile 2003-2009

Introduction: Since 2002, leptospirosis is a disease, which requires universal and immediate notification in Chile. Furthermore, it is an agent of laboratory surveillance. Aim: To describe leptospirosis in Chile and its evolution from the beginning of the obligatory notification and surveillance to the last year of available information. Methods: A descriptive analysis of the data registered from 2003 to 2009 was conducted using different databases of cases reported to the Ministry of Health (registry of notified cases, hospital discharges, laboratory registry, and deaths). As a zoonosis, animal cases registered by the Servicio Agrícola y Ganadero were also included, in order to establish an association in terms of space and temporary distribution. In accordance with the International Classification of Diseases, 10th revision, the codes A270 (icterohaemorragic leptospirosis), A278 (other forms), and A279 (leptospirosis, not specified) were distinguished. Results: Crossing of information from the different sources revealed an underreporting of the disease, making it impossible to determine the incidence rate and defining it only as a reporting rate. Discussion: According to these data, the disease tends to decrease. There was a correlation between the regions with highest human and animal cases, corresponding to the regions of Bio Bio and Maule; comparing the years of notification, there was no temporal correlation. Our study suggests that the surveillance of this disease should be further evaluated for its consistency, comparability, validity, sensitivity, and integrity.

Introducción: En Chile, a partir de 2002 la leptospirosis es una enfermedad de notificación obligatoria, universal e inmediata, además de ser agente de vigilancia de laboratorio. Objetivo: Describir la leptospirosis en Chile y su evolución desde el inicio del sistema de vigilancia obligatoria hasta el último año de información disponible. Métodos: Se realizó un análisis descriptivo de los datos registrados desde 2003 al 2009, considerando las diferentes fuentes del Ministerio de Salud que notifican casos (registro obligatorio de casos, egresos hospitalarios, registro de laboratorio y defunciones). Por ser una zoonosis también se consideraron los casos animales registrados por el Servicio Agrícola y Ganadero, de manera de establecer una asociación en términos de su distribución espacial y temporal. Se distinguieron según la Clasificación Internacional de Enfermedades (CIE 10) los códigos A270 (Leptospirosis icterohemorrágica), A278 (Otras formas) y A279 (Leptospirosis, no especificadas). Resultados: Luego del cruce de información desde las diferentes fuentes, se puede apreciar una sub-notificación de la enfermedad, imposibilitando la determinación de la tasa de incidencia y definiéndola sólo como tasa de notificación. Discusión: De acuerdo a estos datos, la enfermedad tiende a disminuir. Existe correlación entre las regiones que registran mayor número de casos humanos y animales, correspondiendo a las regiones del Bío Bío y Maule, no existiendo concordancia en los años de registro de casos. Se sugiere que el sistema de vigilancia de esta enfermedad sea sometido a una evaluación, en términos de su consistencia, exactitud, comparabilidad, validez, sensibilidad e integralidad.

Sistemas serológicos rápidos utilizados para la pesquisa de leptospirosis humana en Cuba / Rapid serological diagnosis systems for human leptospirosis screening in Cuba

Introducción: la leptospirosis humana necesita de un diagnóstico microbiológico rápido y oportuno por ser una enfermedad letal y frecuente en todo el mundo. Objetivo: incrementar la calidad del diagnóstico microbiológico de esta infección, ampliar el conocimiento sobre la circulación de serogrupos de leptospiras en Cuba y demostrar la utilidad de un sistema de aglutinación con partículas de látex cubano y los sistemas inmunocromatogénicos comerciales LEPTO Dipstick, Lepto Tek Lateral Flow, Lepto Tek Dri Dot y SD Leptospira IgM-IgG. Métodos: en esta investigación descriptiva se utilizaron sueros de casos controles positivos y negativos para evaluar y medir el valor diagnóstico de los sistemas serológicos rápidos con respecto al método de referencia de microaglutinación (MAT). Todas las técnicas utilizadas en este reporte aparecen descritas en el Manual de Operaciones y Procederes del Laboratorio de Leptospiras, del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí". Resultados: todos los sistemas estudiados presentaron aceptables valores de sensibilidad, especificidad y concordancia en comparación con el método de referencia internacional de microaglutinación con microrganismos vivos. Se constató la amplia selectividad (reactividad antigénica) y la fiabilidad diagnóstica de los sistemas, se destacan en particular el látex mezclado de producción nacional, el LEPTO Dipstick y el SD Leptospira IgM-IgG. Conclusiones: ninguno de los procedimientos utilizados fue superado en cuanto a su sencillez, rapidez, simplicidad técnica y grado de ejecución al comparárseles con los métodos tradicionales, incluido el de referencia, y todos resultaron útiles en la pesquisa de anticuerpos frente a leptospiras.

Introduction: human leptospirosis requires rapid and early microbiological diagnosis since it is a common lethal disease worldwide. Objectives: to increase the quality of microbiological diagnosis of this infection, to expand the knowledge on the circulation of groups of leptospiras in Cuba and to show the benefits of an agglutination assay using Cuban latex particles and of commercial immunochromatogenic systems LEPTO Dipstick, Lepto Tek Lateral Flow, Lepto Tek Dri Dot and SD Leptospira IgM-IgG. Methods: this descriptive research used sera from positive and negative control cases to evaluate and measure the diagnostic value of rapid serological diagnosis systems with respect to the microagglutination method of reference (MAT). All the techniques used in this report are described in the Manual of Operations and Procedures of the Leptospira Lab in "Pedro Kourí" Institute of Tropical Medicine. Results: all the studied diagnosis systems exhibited acceptable values of sensitivity, specificity and agreement when compared to the international microagglutination method of reference with live microorganisms. The great selectivity (antigen reactivity) and the diagnostic reliability of the diagnostic systems were confirmed; particularly the mixed Cuban-made latex, the LEPTO Dipstick and the SD Leptospira IgM-IgG. Conclusions: the procedures used in this research work exceeded the traditional methods including the microagglutination method of reference in terms of easiness, rapidity, technical simplicity and level of performance, and all were useful for the screening of antibodies to leptospiras.