Molecular analysis of a fragment of bovine leukemia virus env gene by Nested-PCR in dairy cows from Pasto, Nariño / Análisis molecular de un fragmento del gen env del virus de leucosis bovina, por PCR anidada en vacas lecheras de Pasto, Nariño / Análise molecular pela reação em cadeia da polimerase de um fragmento do gene env do vírus de leucose bovina aninhada em vacas leiteiras de Pasto, Nariño

Abstract: Introduction: Routine diagnosis for bovine leukemia is performed using indirect serologic tests, although it is recommended to use polymerase chain reaction (PCR), which allows a reliable diagnosis in early stages and in young animals. Moreover, by amplifying the DNA, it is possible to sequence fragments of the virus, which allows to identify genotypes and to construct phylogenetic trees. Objective: To analyze a fragment of the env gene of bovine leukemia virus (BLV) isolated from indirect ELISA-positive animals in dairy farms in the municipality of Pasto (Nariño). Materials and methods: Once the presence of BLV was established in 48 animals over two years old in seven dairy farms in the municipality of Pasto by indirect ELISA test, a nested PCR test was performed to confirm diagnosis and to sequence a fragment of the env gene in positive animals and their daughters. The sequences obtained were compared with the seven genotypes described worldwide by MEGA 6 program. Results: The sequences of the compared fragments do not differ from those described; but they allow their grouping into different clusters according to their similarity. The genotypes found in these farms correspond to genotype 1 and 2 described in the literature. Conclusions: Only one genotype was found on farms with proper recovery and adequate biosecurity measures, and on farms with less control in management and recovery practices, both genotypes described for the region were evident.

Resumen: Introducción: El diagnóstico de rutina para la leucosis bovina se realiza con pruebas serológicas indirectas, aunque se recomienda usar la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que permite un diagnóstico confiable en fases iniciales y en animales jóvenes. Además, mediante la amplificación del ADN se pueden secuenciar fragmentos del virus, que permite identificar los genotipos presentes y construir árboles filogenéticos. Objetivo: Analizar un fragmento del gen env del virus de leucosis bovina (VLB) aislado de animales positivos a ELISA indirecta en fincas lecheras del municipio de Pasto, Nariño. Materiales y métodos: Una vez establecida la presencia del VLB en 48 animales mayores de dos años en siete fincas lecheras del municipio de Pasto mediante la prueba de ELISA indirecta, se realizó una prueba de PCR anidada para confirmar el diagnóstico y secuenciar un fragmento del gen env en los animales positivos y sus hijas. Las secuencias obtenidas se compararon con los siete genotipos descritos en el mundo mediante el programa MEGA 6. Resultados: Las secuencias de los fragmentos comparados no difieren de las descritas; pero permiten su agrupación en diferentes clústeres de acuerdo con su similitud. Los genotipos encontrados en estas fincas corresponden al genotipo 1 y 2 descritos en la literatura. Conclusiones: En las fincas con reposición propia y adecuadas medidas de bioseguridad solo se encontró un genotipo y en las fincas con menor control en las prácticas de manejo y de reposición se encontraron los dos genotipos descritos para la región.

Resumo: Introdução: O diagnóstico de rotina para a leucose bovina se realiza com provas serológicas indiretas, mesmo que se recomenda usar a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permite um diagnóstico confiável em fases iniciais e em animais jovens. Além do mais, mediante a amplificação do ADN se podem sequenciar fragmentos do vírus, que permite identificar os genótipos presentes e construir árvores filogenéticas. Objetivo: Analisar um fragmento do gene env do vírus de leucose bovina (VLB) isolado de animais positivos a ELISA indireta em fazendas leiteiras do município de Pasto, Nariño. Materiais e métodos: Uma vez estabelecida a presença do VLB em 48 animais maiores de dois anos em sete fazendas leiteiras do município de Pasto mediante a prova de ELISA indireta, se realizou uma prova de PCR aninhada para confirmar o diagnóstico e sequenciar um fragmento do gene env nos animais positivos e suas filhas. As sequências obtidas foram compararam com os sete genótipos descritos no mundo mediante o programa MEGA 6. Resultados: As sequências dos fragmentos comparados não diferem das descritas; mas permitem a sua agrupação em diferentes clusters de acordo com sua similitude. Os genótipos encontrados nestas fazendas correspondem ao genótipo 1 e 2 descritos na literatura. Conclusões: Nas fazendas com reposição própria e adequadas medidas de biossegurança somente se encontrou um genótipo e nas fazendas com menos controle nas práticas de manejo e de reposição se encontraram os dois genótipos descritos para a região.

Seroprevalence and risk factors of several bovine viral diseases in dairy farms of San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colombia / Seroprevalencia y factores de riesgo para varias enfermedades virales en bovinos de hatos lecheros de San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colombia / Soroprevalência e fatores de risco para várias doenças virais em bovinos de rebanhos leiteiros do Município de San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colômbia

Bovine viral diarrhea virus (BVDV), Bovine herpesvirus-1 (BoHV-1) and enzootic bovine leucosis (EBL) are viral infections that cause three of the most important cow diseases in the world. Antibody detection is the quickest and most cost-effective method to detect exposition to the virus. The aim of this study was to determine the seroprevalence and risk factors associated with these diseases in cows from the town of San Pedro de los Milagros, Antioquia. A total of 791 bovines of 24 dairy farms were sampled for blood between may and june of 2014, and analized for antibodies against BVDV and BoHV-1. These 24 farms plus other five were analized for antibodies against EBL for a total of 1003 bovines from 29 farms sampled. All tests were done with ELISA kits commercially available. The risk factors for farm and cow selected were evaluated to analize their relation with the serological state of these three diseases using logistic regression. In general, seroprevalence at the animal level for BVDV BoHV-1 and EBL was 75.7% (95% CI: 68.7-82.6%), 31.1% (95% CI: 22.1-40.1%) and 47.8% (95% CI: 40-55.7%), respectively. The odds ratio of being seropositive for BoHV-1 was significantly higher (OR=3.0) in animals older than 3 years in comparison to bovines younger than a year. Not using disposable needles was associated with prevalence of EBL. In conclusion there was a high seroprevalence of EBL and BVDV, and a lower one for BoHV-1. Seropositivity to BoHV-1 was associated with cows older than 3 years and seropositivity to EBL was associated with not using disposable needles in the farm.

Las infecciones por virus de la diarrea viral bovina (BVDV), el herpes virus bovino-1 (BoHV-1) y la leucosis enzoótica bovina (EBL) causan tres de las enfermedades más importantes de la vaca a nivel mundial. La detección de anticuerpos es el método más rápido y costo-efectivo para detectar la exposición a estos virus. El objetivo de este estudio fue determinar la seroprevalencia y los factores de riesgo asociados a estas enfermedades en vacas del municipio de San Pedro de los Milagros, Antioquia. Un total de 791 bovinos de 24 hatos lecheros no vacunados fueron muestreados para sangre entre mayo y junio de 2014 y analizados para anticuerpos contra BVDV y BoHV-1. Estos 24 hatos más otros cinco fueron analizados para anticuerpos contra EBL para un total de 1003 bovinos de 29 hatos. Todas las pruebas fueron efectuadas con kits de ELISA disponibles comercialmente. Los factores de riesgo de hato y de vaca seleccionados fueron evaluados para analizar su relación con el estado serológico de estas tres enfermedades por medio de regresión logística. En general, la seroprevalencia a nivel de animal para BVDV, BoHV-1 y EBL fue 75,7% (95% CI: 68,7-82,6), 31,1% (95% CI: 22,1-40,1) y 47,8% (95% CI: 40-55,7), respectivamente. La relación de disparidad de ser seropositivo para BoHV-1 fue significativamente más alto (OR=3,0) en animales mayores de 3 años en comparación con bovinos menores de un año. No usar agujas desechables en la granja estuvo asociada con la prevalencia a EBL. En conclusión hubo una alta seroprevalencia de EBL y BVDV y una baja para BoHV-1. La seropositividad a BoHV-1 estuvo asociada con vacas mayores a tres años y la seropositividad a EBL estuvo asociada con el no uso de agujas desechables en la granja.

As infecções por vírus da diarreia viral bovina (BVDV), herpes vírus bovino-1 (BoHV-1) e leucose enzoótica bovina (EBL) causam três das doenças mais importantes da vaca no mundo todo. A detecção de anticorpos é o método mais rápido e custo-efetivo para detectar a exposição a estes vírus. O objetivo desta pesquisa foi determinar a soroprevalência e os fatores de risco associados a estas doenças em vacas de diferentes rebanhos leiteiros do município de San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colômbia. Um total de 791 bovinos pertencentes a 24 rebanhos leiteiros não vacinados foram amostrados para sangue entre os meses de maio e junho de 2014 e analisados para anticorpos contra BVDV e BoHV-1. Estes 24 rebanhos mais outros cinco foram analisados para anticorpos contra EBL para um total de 1003 bovinos de 29 rebanhos. Todos os testes foram feitos com kits de ELISA disponíveis comercialmente. Os fatores de risco do rebanho e do animal selecionados foram avaliados para analisar sua relação com o estado sorológico de estas três doenças por médio de regressão logística. Em geral, a soroprevalência no animal para BVDV, BoHV-1 e EBL foi 75,7% (95% CI: 68,7-82,6), 31,1% (95% CI: 22,1-40,1) e 47,8% (95% CI: 40-55,7), respetivamente. A relação de disparidade de ser soropositivo para BoHV-1 foi significativamente maior (OR=3,0) em animais maiores de três anos em comparação com os menores de um ano. O fato de não utilizar agulhas descartáveis na fazenda, esteve associada com a prevalência a EBL. Em conclusão, houve uma alta soroprevalência de EBL e BVDV e a sua vez, uma baixa para BoHV-1. A soropositividade a BoHV-1 esteve associada com vacas maiores a três anos e a soropositividade a EBL esteve associada com a não utilização de agulhas descartáveis na fazenda.

Posterior paralysis in a Holstein cow with Enzootic Bovine Leukosis / Parálisis posterior en una vaca Holstein con Leucosis Enzoótica Bovina / Paralise posterior numa vaca holandesa com Leucose Enzoótica Bovina

A 6 year-old Holstein cow was euthanized after a 3 week course of progressive paraplegia. In spite of the increasing difficulties to rise and walk, the animal remained bright, alert, afebrile and with good appetite throughout most of the clinical course. Complete blood counts, biochemical profiles and analysis of the cerebrospinal fluid were reported within normal limits. Antibody was detected for bovine leukaemia virus using an enzyme-linked immunosorbent assay, supporting a tentative diagnosis of bovine leukosis. Post-mortem examination revealed a localized form of lymphosarcoma with few 2-5 cm nodular tumors confined to the walls of the gastrointestinal tract, particularly in the abomasum. In addition, soft grey tumors were found within the vertebral canal surrounding the lumbar spinal cord and associated nerve roots. Microscopic examination revealed the nodular masses were composed of neoplastic lymphocytes. Mass in the lumbar vertebral canal had extradural neoplastic lymphocytes infiltrating connective tissues around the spinal cord and spinal nerve roots. Unlike the more common chronic and wasting presentation of the disease with widespread lymphadenopathy, the rapid progression of the disease to total paraplegia in this animal could be explained by the localized presence of tumors in the spinal canal.

Una vaca Holstein de 6 años de edad fue sacrificada después de un curso de paraplejía progresiva de 3 semanas de duración. A pesar de las crecientes dificultades para levantarse y caminar, el animal se mantuvo alerta, sin fiebre y con buen apetito casi todo el transcurso de la enfermedad. Los análisis del hemograma, perfil bioquímico y líquido cefalorraquídeo no mostraron alteraciones fuera del rango normal. El análisis de ELISA frente al virus de la Leucosis Bovina resultó positivo, apoyando el diagnóstico diferencial de leucemia. El examen post-mortem reveló una forma localizada de linfosarcoma, con escasas y pequeñas tumoraciones nodulares de 2-5 cm confinadas a las paredes del tracto gastrointestinal, sobre todo en el abomaso. Además, los tumores estaban presentes en el canal vertebral rodeando la médula lumbar espinal y raíces nerviosas adyacentes. El examen microscópico reveló que las masas nodulares estaban compuestas de linfocitos neoplásicos; igualmente, el tejido conectivo rodeando la medula lumbar presentaba gran infiltración de dichos linfocitos. A diferencia de la presentación más corriente y crónica de la enfermedad en que existe un desgaste progresivo del animal asociado a una linfadenopatía generalizada, en este caso la rápida progresión de la enfermedad hacia una paraplejia total se podría explicar por la presencia de tumores localizados en el canal espinal.

Uma vaca holandesa de seis anos de idade foi abatida após um curso de paraplegia progressiva de três semanas de duração. Ainda que a vaca teve muitas e crescentes dificuldades para levantarse e caminhar, o animal se manteve alerta, sem febre e com bom apetite quase todo o transcurso da doença. A análise do resultado de um hemograma, do perfil bioquímico e do líquido cefalorraquiano não mostraram alterações fora do padrão normal. A análise feita pelo teste de ELISA para o vírus da leucose bovina foi positivo, apoiando o diagnostico diferencial de leucemia. O exame post-mortem revelou uma forma localizada de linfosarcoma, com escassas e pequenas tumorações nodulares de 2-5 cm confinadas às paredes do trato gastrointestinal, principalmente no abomaso. Alem, os tumores estavam presentes no canal vertebral rodeando a medula espinhal na região lombar e as raízes nervosas adjacentes. A avaliação microscópica revelou que as massas nodulares estavam compostas de linfócitos neoplásicos; igualmente, o tecido conjuntivo ao redor da medula espinhal na região lombar apresentava uma grande infiltração desses linfócitos. A diferença deste caso com a forma mais comum e crônica da doença na qual existe um desgaste progressivo do animal associado a uma linfadenopatia generalizada, foi que neste caso houve uma rápida progressão da doença que evoluiu para uma paraplegia total que poderia explicar-se pela presença de tumores localizados na medula espinhal.

Linfossarcoma em bovinos no Agreste Meridional de Pernambuco / Lymphosarcoma in cattle from the hinterland of Pernambuco state

Neste trabalho são descritos os sinais clínicos, patologia clínica e patologia de 24 bovinos com leucose bovina enzoótica atendidos na Clínica de Bovinos de Garanhuns da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Esses casos representaram 0,5 por cento de 4.758 bovinos atendidos entre os anos de 2000 e 2010. A doença afetou 22 (91,7 por cento) fêmeas e dois machos. Vinte e um animais (87,5 por cento) eram de raças leiteras (seis Holandês, 13 Girolando, um Jersey e um Pardo Suíça) e três (12,5 por cento) eram da raça Nelore. Vinte e três animais (95,8 por cento) tinham idade entre 3 e 8 anos e um era mais jovem. Todos eram criados em regime de confinamento ou semi-confinamento. Clinicamente todos os animais apresentaram aumento dos linfonodos superficias. Outros sinais frequentes foram hiporexia, diminuição da produção de leite, emagrecimento progressivo, escore corporal baixo, desidratação, hipomotilidade dos pré-estômagos e fezes alteradas e em pouca quantidade. Com menor frequência foram observados exoftalmia, dispneia e aumento de volume do útero. No leucograma foi constatada leucocitose média de 34.082/µL, com linfocitose de 21.814/µL e neutrofilia de 10.906/µL. Treze animais foram necropsiados e os demais foram enviados pelos proprietários para o abate. Dos treze animais abatidos todos apresentaram lesões nos linfonodos superficiais, seis nos linfonodos mesentéricos, seis no intestino, três no abomaso, um no coração, um no fígado, um no rúmen, um no útero e um no rim. Diante da importância desta enfermidade e dos prejuízos causados pela mesma é necessário alertar produtores sobre os cuidados a serem tomados durante a aquisição de animais, assim como da necessidade de implantar medidas que evitem a difusão da doença entre as fazendas.

The article reports epidemiological data, clinical signs, and laboratory and pathological findings in 24 cattle with enzootic bovine leukosis observed in the Clinic of Garanhuns, at the Federal Rural University of Pernambuco. The 24 cases represented 0.5 percent of 4,758 cattle examined from 2000 to 2010. The disease affected 22 (91.7 percent) females and two males. Twenty one of the animals were dairy (six Holstein, 13 girolando, one Brown Swiss and one Jersey), and three were for meat production (Nelore). Twenty three animals were 3-8 years of age and one was younger. All were raised in confinement or semi-confinement. All animals showed enlarged superficial lymph nodes. Other frequent clinical signs were hyporexia, decreased milk production, progressive weight loss, dehydration, hypomotility of the fore stomachs, and altered scant feces. Exophthalmia, dyspnea, and enlarged uterus were observed with less frequency. Leukocytosis (mean of 34,082 leukocytes/µL) with lymphocytosis (21,814 lymphocytes/µL) and neutrophilia (10,906lymphocytes/µL) was observed in the white blood count. Thirteen bovines were necropsied and 11 were slaughtered. Gross lesions were observed on the superficial lymph nodes of all animals necropsied. Six had lesions in the mesenteric lymph nodes, six in the gut, three in the abomasum, two in the uterus, one in the heart, one in the rumen, one in heart, and one in the liver. Due to the importance of enzootic bovine leukosis it is necessary for the farmers to introduce animals free of the disease and to establish a strict health policy for its control.

Situação epidemiológica da leucose bovina enzoótica em Portugal entre os anos de 1995 e 2005 / Epidemiological survey of enzootic bovine leukosis in Portugal from 1995 to 2005

This paper evaluated the epidemiological situation of the enzootic bovine leucosis from 1995 to 2005, in Portugal. With exception of the South region, Algarve, the disease was distributed throughout the country, being more prevalent in the north, between Douro and Minho and Trás-os-Montes, than in the centre. A decrease in prevalence and incidence of the infection throughout the studied period was also observed.

Prevalência da infecção pelo Vírus da Leucose dos Bovinos em rebanhos leiteiros criados no estado do Amazonas, Brasil

The prevalence of bovine leukaemia virus (BLV) was determined, through the anti-BLV serum antibody test, in 661 samples collected in 16 dairy herds from four municipalities in the micro region of Manaus, at the Amazonas state. The agar gel immunodiffusion test with an envelop glycoprotein virus-antigen (gp-51) was used as a method of diagnosis the infection or the presence of anti-BLV antibodies transferred passively by the colostrum to calves up to six- month-old.. ll herds were positive for the BLV test. The overall prevalence was 8.9%. When the calves less than six-month-old were excluded a rate of 9.6% (58/604) infection prevalence was found. The influence of the age and sex factors on the prevalence of BLV were analysed by the two-proportion test. Higher prevalence rate was found in cattle older than 12-month-old as compared to the younger calves. No sexual effect was found.

Determinou-se a prevalência de anticorpos séricos anti-Vírus da Leucose dos Bovinos (anti-VLB) em 661 amostras de soro sangüíneo, colhidas em 16 rebanhos leiteiros criados em quatro municípios da Microrregião de Manaus, no Estado do Amazonas (Manaus, Iranduba, Autazes e Careiro da Várzea). Para detecção de anticorpos anti-VLB utilizou-se o teste de Imunodifusão Radial Dupla de Ouchterlony em gel de ágar, com uso do antígeno glicoprotéico (gp-51) da cápsula do vírus. Os resultados demonstraram a ocorrência da Leucose Enzoótica dos Bovinos nos rebanhos estudados, sendo a taxa de prevalência de anticorpos séricos anti-VLB na população examinada igual a 8,9% (59/661), com a exclusão dos animais com menos de seis meses de idade, nos quais a sororeação positiva poderia representar transferência passiva de anticorpos colostrais, verificou-se uma taxa de prevalência da infecção igual a 9,6% (58/604). Os animais avaliados, foram estratificados em grupos de acordo com a faixa etária e sexo. A análise dos resultados obtidos, pelo teste de duas proporções, permitiu concluir que a prevalência de bovinos portadores de anticorpos anti-VLB foi significativamente maior nos animais com mais de 12 meses de idade, não havendo diferenças significativas nos resultados obtidos entre machos e fêmeas.

A rapid and sensitive diagnosis of bovine leukaemia virus infection using the nested shuttle polymerase chain reaction

Bovine leukaemia virus (BLV) is the causative agent of enzootic bovine leukosis (EBL). In Argentina, where a program to eradicate EBL has been introduced, sensitive and reliable diagnosis has attained high priority. Although the importance of the agar gel immunodiffusion test remains unchanged for routine work, an additional diagnostic technique is necessary to confirm cases of sera with equivocal results or of calves carrying maternal antibodies.Utilizing a nested shuttle polymerase chain reaction, the proviral DNA was detected from cows experimentally infected with as little as 5 ml of whole blood from BLV seropositive cows that were nonetheless normal in haematological terms. It proved to be a very sensitive technique, since it rapidly revealed the presence of the provirus, frequently at 2 weeks postinoculation and using a two-round procedure of nested PCR taking only 3 hours. Additionally, the primers used flanked a portion of the viral genome often employed to differentiate BLV type applying BamHI digestion. It is concluded that this method might offer a highly promising diagnostic tool for BLV infection.

O Vírus da leucemia bovina (BLV) é o agente causal da Leucose Enzoótica Bovina (EBL). Na Argentina, iniciou-se um programa de erradicação da EBL. Neste estágio, é prioritário possuir uma ferramenta de diagnóstico confiável. Embora seja indiscutível a importância do teste de agar gel imunodifusão, empregado rotineiramente no diagnóstico serológico da EBL, faz-se necessária uma técnica de diagnóstico adicional capaz de confirmar os resultados duvidosos. Foi possivel detectar ADN proviral aplicando Nested-PCR em novilhos experimentalmente infectados com pequenas doses de sangue total (5ml) obtidas de um bovino BLV soropositivo. Esta técnica, cujo procedimento leva 3 horas, demonstrou ser muito sensível, uma vez que foi capaz de detectar a presença do provirus duas semanas após a inoculação. Os primers utilizados são os que detectam uma porção do genoma viral que geralmente é usado para diferenciar os tipos de BLV, utilizando a digestão com BamHI. Sugerimos que este método possa ser um instrumento válido para o diagnóstico precoce da infeção pelo BLV.

Levantamento sorológico da infecção pelo vírus da leucose bovina nos rebanhos leiteiros do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil / Serological survey of the bovine leukosis virus infection in dairy herds of the Rio Grande do Sul State, Brazil

O vírus da Leucose Enzoótica Bovina (VLB) causa uma infecção persistente em bovinos, sendo responsável por perdas econômicas significativas para a pecuária bovina. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência da infecção pelo VLB no rebanho leiteiro do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil e estudar alguns aspectos epidemiológicos da infecção. Um total de 39.799 amostras de soro. coletadas em 4.200 propriedades de 172 municípios, distribuídos em 9 regiões geográficas, foram testadas pela técnica de imunodifusão em gel de ágar (IDGA), com antígeno glicoprotéico (glicoproteína gp 51). Os exames sorológicos revelaram 3.645 (9,2%) amostras positivas. No entanto, a prevalência média do Estado, quando foi considerada aproximadamente 1% da população em cada região, foi de 12,0% (1.295/10.357) e 29,1% (385/1.321) das propriedades apresentaram pelo menos um animal positivo. A prevalência da infecção variou de 2,2% (17,8% das propriedades) em Uruguaiana, a 19,6% (57,8% das propriedades) em São Gabriel. Foram observadas taxas de 15,5% (41.8% das propriedades) na grande Porto Alegre; 9,9% (64,4%) em Pelotas: 19,4% (42,9%) em Bagé; 9,2% (36,2%) na grande Santa Rosa; 12.9% (37,8%) em Erexim; 7,1% (26,5%) em Passo Fundo e 8,0% (33,8%) em Santa Maria. Esses resultados demonstram que a infecção pelo VLB esta amplamente distribuída no rebanho leiteiro do Estado. No entanto, os índices de infecção são relativamente baixos se comparados com índices de outros estados e países e são compatíveis com programas de controle e erradicação.

Bovine leukosis vírus (BLV) is associated with a persistem infection in cattle that is responsible for serious lasses to the livestock industry. The objective of this study was to determine the prevalence and to analyse some epidemiological aspects of the BLV infection in the dairy herd of the Rio Grande do Sul state. A total of 39.799 blood samples, collected in 4,200 herds from 172 counties, distributed in 9 geographic regions, were tested by the agar-gel immunodiffusion test (AGID) with glycoproteic antigen (glycoprotein gp 51). The sorologic tests showed 3,645 (9.2%) positive; however, the prevalence in the state, when considered about 1% of the population in each region was only, 12.0% (1,295/10,357) and 29.1% (385/1,321) of the herds had at least one seropositive animal. The prevalence ranged from 2.2% (17.8% of the herds) in Uruguaiana to l9.6% (57.85% of the herds) in São Gabriel. Prevalences of 15.5% (41.8% of herds) in the Porto Alegre metropolitan area. 9.9% (64.4%) in Pelotas, 19.4% (42.9%) in Bagé, 9.2% (36.2%) in Santa Rosa, 12.9% (37.8%) in Erexim, 7.1% (26.5%) in Passo Fundo and 8% (33.8%) in Santa Maria were observed. These results show that the BLV infection is widely spread within the Rio Grande do Sul dairy herd. Nevertheless, the overall prevalence is still low if compared to other states and countries and may be compatible with control and eradication efforts.