Evaluación comparativa de medición de linfocitos CD4+ por dos técnicas: estándar nacional versus test rápido de ejecución local

Antecedentes: El recuento de linfocitos CD4+ (LTCD4) es una herramienta fundamental para la evaluación y seguimiento de los pacientes que viven con VIH. En Chile, la medición de LTCD4 estandarizada es por citometría de flujo. En el sistema público se realiza en forma centralizada en tres centros. Actualmente existen tecnologías de medición rápida de recuento de LTCD4 en el lugar de atención, permitiendo optimizar la atención de pacientes con infección por VIH. Objetivo: Comparar la precisión de un test rápido de ejecución local versus la técnica estándar. Metodología: Realización de ambas técnicas en un grupo de 102 pacientes durante su control regular de salud. Resultados: El rango de variación promedio de los resultados entre las dos técnicas fue de 10%, con una concordancia en los recuentos de LTCD4 de 97% para el rango de CD4 < 200 cél/uL, de 88% para los pacientes con recuento de LTCD4 entre 200 y 349 cél/uL y de 67% en los rangos superiores. Conclusión: La técnica por test rápido es un sistema fácil de aplicar, de bajo costo, con alta concordancia con la técnica estándar, lo que debería considerarse en la atención de los pacientes que viven con VIH.

Background: The CD4+ lymphocyte cell count is an instrumental tool for the assessment and follow-up in the therapeutic management of patients living with HIV. In Chile, the standardized CD4+ lymphocyte count technique is by flow cytometry. In the public health system, it is performed centralized in 3 sites. Currently, there are technologies that allow measuring the CD4 lymphocyte count at the point of care, allowing to optimize the care of HIV-infected patients. Aim: To compare the accuracy of a point of care rapid test versus the standard technique in patients under regular care at a single HIV center. Results: The average variation of the results between the two techniques was 10%, with a 97% concordance in CD4 range values for patients with CD4 below 200 cells/uL, 88% for CD4 counts between 200 and 349 cells/uL. and 67% above that range. Conclusion: This point of care test is an easy-to-operate, low-cost system with high correlation with the standard technique and should be considered in the care of patients living with HIV.

Lípidos anormales y síndrome de inmunodeficiencia adquirida: asociación de lípidos séricos con el estado del VIH / Abnormal Lipids and Acquired Immune Deficiency Syndrome: Association of Serum Lipids with HIV Status

Contexto y objetivo: las anomalías hematológicas se encuentran entre las complicaciones más comunes de la infección por el VIH. También se han realizado bastantes estudios sobre las alteraciones en el perfil de lípidos, aunque los resultados en gran medida no han sido concluyentes. El presente estudio se llevó a cabo para evaluar el recuento de células CD4 y el perfil de lípidos en los pacientes infectados por el VIH y el SIDA en la población india y los correlaciona con los controles sero-negativos. Materiales y métodos: El presente estudio fue diseñado como un estudio transversal, con base en un hospital, para evaluar el recuento de células CD4 y el perfil de lípidos en los pacientes infectados por VIH y SIDA en la población india y los correlaciona con los controles sero-negativos. La evaluación del perfil de lípidos se realizó utilizando Erba EM 360, un analizador automático impulsado por un fotómetro de rejilla de difracción, mientras que los recuentos de células CD4 se evaluaron utilizando el Contador de ciclo de Partec. Análisis estadístico utilizado: Los datos se analizaron con SPSS versión 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.). La comparación de dichos parámetros se realizó mediante el análisis de varianza (ANOVA) y la prueba post-hoc de Games-Howell. Se consideró estadísticamente significativo un valor de p <0,05. Resultados: Los niveles de colesterol total y lipoproteínas de baja densidad (LDL) disminuyeron significativamente, mientras que los triglicéridos y las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) aumentaron significativamente en los pacientes infectados por VIH y SIDA en comparación con los controles sero-negativos. Conclusión: El colesterol total, las LDL, los triglicéridos y las VLDL se alteraron significativamente en los pacientes infectados por VIH y con SIDA en comparación con los controles sero-negativos

Context and Aim: Hematological abnormalities are amongst the most common complications of infection with HIV.There have been quite a few studies on the alterations in lipid profile, too, though the results have largely been inconclusive. The present study was carried-out to assess CD4 cell counts and lipid profile in the HIV infected and AIDS patients in the Indian population and correlates them with the sero-negative controls. Materials and Methods: The present study was designed as a cross-sectional, hospital-based study to assess CD4 cell counts and lipid profile in the HIV infected and AIDS patients in the Indian population and correlates them with the sero-negative controls. Evaluation of lipid profile was done using Erba EM 360, an automated analyzer powered by a diffraction grating photometer while CD4 cell counts were evaluated using Partec Cyflow Counter. Statistical analysis used: The data was analyzed using SPSS version 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Comparison of the said parameters was done using Analysis of Variance (ANOVA) and post-hoc Games-Howell test. p-value of <0.05 was considered statistically significant. Results: The levels of total cholesterol and low-density lipoproteins (LDLs) were significantly decreased while triglycerides and very low density lipoproteins (VLDLs) were significantly increased in the HIV infected and AIDS patients when compared with the sero-negative controls. Conclusion: Total cholesterol, LDLs, triglycerides and VLDLs were significantly altered in the HIV infected and AIDS patients when compared with the sero-negative controls

Características sociodemográficas y clínicas de pacientes con diagnóstico nuevo de VIH / Sociodemographic and clinical characteristics of patients with new HIV diagnosis

Objetivo: Caracterizar de forma sociodemográfica y clínica pacientes con diagnóstico nuevo de VIH, que fueron hospitalizados en una Clínica Universitaria de alta complejidad entre el año 2010 - 2016. Materiales y métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptico, de corte transversal por medio de revisión de historias clínicas, que incluyo pacientes ≥14 años, a quienes se les diagnosticó VIH durante la hospitalización y tuvieran al menos un conteo de linfocitos CD4. Resultados: La mediana para la edad fue 41 años (RIC 31 - 51), el 85,1% eran hombres. Los principales síntomas al ingreso fueron generales/sistémicos (70,2%). 99 pacientes (61,5%) tenían infecciones oportunistas siendo tuberculosis la más frecuente (34,3%). La mediana para el conteo de CD4 fue 88 células/mm3 RIC (27 - 327) y el 77% se clasificó como SIDA. 29 pacientes murieron (18%) encontrando como posible factor de riesgo tener conteo de CD4 fue 88 células/mm3 RIC (27 - 327) y el 77% se clasificó como SIDA. 29 pacientes murieron (18%) encontrando como posible factor de riesgo tener conteo de CD4<200 células/mm3 , no pertenecer al régimen contributivo, ingresar con síntomas respiratorios, tener diagnóstico de neumonía, criterios de falla multiorgánica o necesidad de UCI/UCE. Conclusión: Para nuestro caso la mayoría de pacientes con diagnóstico nuevo de VIH se encontraban en estados avanzados de inmunosupresión con alta carga de enfermedades definitorias de SIDA. Es importante fortalecer las políticas de salud pública para diagnosticar más temprano la infección por VIH.

Purposes: To characterize sociodemographic and clinical aspects in newly diagnosed HIV patients that were hospitalized at a university health center between 2010 - 2016. Methods: We made an observational descriptive cross - sectional study reviewing clinical records, including patients older than 14 years old, who were diagnosed with HIV infection during hospitalization and at least a CD4 count. Results: Median age at diagnosis was 41 years old (IQR 31 - 51), 85% were men. The main symptoms were general/systemic (70.2%). 99 patients (61.5%) had opportunist infections, being tuberculosis the most frequent (34.3%). The median CD4 were 88 cells/mm3 (IQR 27 - 327) and 77% were classified as AIDS. 29 patients died (18%), finding as a risk factor for mortality don't having a good health care insurance, low CD4 count, having respiratory symptoms, pneumonia diagnosis, multiple organic failure's criteria and ICU admission. Conclusion: In our case, the majority of patients with a new diagnosis of HIV were in advanced stages of immunosuppression with a high burden of AIDS defining diseases. It is important to strengthen public health policies to diagnose HIV infection earlier.

Candida en la cavidad oral de pacientes con VIH en Cali, Colombia: determinación de especies y sensibilidad al fluconazol / Candida in the oral cavity of HIV-infected patients: Identification of species and susceptibility to fluconazole in Cali, Colombia / Candida na cavidade oral de pacientes com HIV: determinação de espécies e sensibilidade ao fluconazol em Cali, Colômbia

Introducción: Candida albicans es la levadura aislada con mayor frecuencia de la cavidad oral de individuos VIH positivos. El uso del fluconazol ha incrementado el aislamiento de especies de Candida diferentes de C. albicans resistentes o con sensibilidad disminuida a este antimicótico. Objetivo: establecer, en individuos VIH positivos de un hospital de la ciudad de Cali, las especies de Candida de la cavidad oral, su densidad poblacional y la sensibilidad al fluconazol de aquellas diferentes de C. albicans. Materiales y métodos: las muestras se sembraron en CHROMagar Candida y se hizo el recuento de unidades formadoras de colonias (UFC); se identificaron las levaduras con el API 20C Aux y se hicieron las pruebas de sensibilidad al fluconazol con el Etest. Resultados: se estudiaron 230 pacientes y hubo 202 aislamientos: 106 fueron únicos y 96, mixtos. C. albicans fue la especie más frecuente, seguida por C. dubliniensis y C. glabrataLas especies diferentes de C. albicans predominaron en los recuentos menores de 400 UFC/mL. El estudio de sensibilidad al fluconazol de las especies diferentes de C. albicans mostró que 14 (40 %) fueron sensibles dosis-dependientes y 7 (20 %), resistentes. Conclusión: en la población estudiada, la cavidad oral está colonizada por aislamientos no salvajes, lo que representa un riesgo para el desarrollo de candidiasis orofaríngea resistente al tratamiento con fluconazol.

Introduction: Candida albicans is the most frequently isolated yeast from the oral cavity of HIV-infected individuals. The use of fluconazole has increased the number of resistant or less-sensitive Candida species different from C. albicans, to this antifungal agent. Objective: To establish the Candida species present in the oral cavity of HIV-infected individuals at a hospital in Cali (Colombia), their population densities, and the susceptibility to fluconazole of species different from C. albicans. Materials and methods: Samples were cultured in CHROMagar Candida and the number of colony forming units (CFU) was counted. Yeast identification was done with API 20C Aux, and the susceptibility tests to fluconazole, by Etest. Results: 230 patients were studied, and 202 isolates were obtained: 106 single and 96 mixed. C. albicans predominated, followed by C. dubliniensis and C. glabrata. Candida species other than C. albicans predominated in counts lower than 400 CFU/mL. Susceptibility study to fluconazole of species different from C. albicans showed that 14 (40 %) of the isolates were susceptible dose-dependent and 7 (20 %), resistant. Conclusion: In the studied population, the oral cavity was colonized by non-wild type isolates that represent a risk for the development of oropharyngeal candidiasis resistant to fluconazole treatment.

Introdução: Candida albicans é o fermento isolado com maior frequência da cavidade oral de indivíduos HIV positivos. O uso do fluconazol incrementou o isolamento de espécies de Candida diferentes de C. albicans resistentes ou com sensibilidade diminuída a este antimicótico. Objetivo: estabelecer, em indivíduos HIV positivos de um hospital da cidade de Cali, as espécies de Candida da cavidade oral, sua densidade populacional e a sensibilidade ao fluconazol daquelas diferentes de C. albicans. Materiais e métodos: as mostras se semearam em CHROMagar Candida e se fez a recontagem de unidades formadoras de colônias (UFC); identificaram-se os fermentos com o API 20C Aux e se fizeram as provas de sensibilidade ao fluconazol com o Etest. Resultados: estudaram-se 230 pacientes e teve 202 isolamentos: 106 foram únicos e 96, mistos. C. albicans foi a espécie mais frequente, seguida por C. dubliniensis e C. glabrata. As espécies diferentes de C. albicans predominaram nas recontagens menores de 400 UFC/ML. O estudo de sensibilidade ao fluconazol das espécies diferentes de C. albicans mostrou que 14 (40 %) foram sensíveis doses-dependentes e 7 (20 %), resistentes. Conclusão: na população estudada, a cavidade oral está colonizada por isolamentos não selvagens, o que representa um risco para o desenvolvimento de candidíase orofaríngea resistente ao tratamento com fluconazol.

Início da terapia anti-retroviral em estágio avançado de imunodeficiência entre indivíduos portadores de HIV/AIDS em Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil / Initiation of antiretroviral therapy in HIV-infected patients with severe immunodeficiency in Belo Horizonte, Minas Gerais State, Brazil

O objetivo deste trabalho foi verificar a proporção de início tardio da terapia anti-retroviral (TARV) e seus fatores associados. Estudo de corte transversal com pacientes de dois serviços públicos de referência (n = 310) em Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil. Atraso no início da TARV foi definido como ter contagem de linfócitos T CD4+ < 200 células/mm³ ou manifestação clínica de imunodepressão grave. A maioria era do sexo masculino (63,9 por cento) e não possuía plano de saúde (76,1 por cento). A proporção de início tardio da TARV foi 68,4 por cento. Grande parte (75,2 por cento) iniciou TARV < 120 dias após a primeira consulta médica. Estar desempregado, realizar anti-HIV por indicação de profissional de saúde, < 2 consultas no serviço até seis meses antes do início da TARV e tempo entre primeira consulta para o HIV e início da TARV < 120 dias estiveram associados de forma independente com início tardio da TARV. São necessários estudos que avaliem o custo-efetividade da realização do anti-HIV como teste de rastreamento da população geral. Facilitar o acesso dos pacientes com resultado positivo aos serviços de referência pode contribuir para a redução do número de pacientes que iniciam tardiamente a TARV.

The main objective was to assess the proportion of delayed initiation of antiretroviral therapy (ART) and associated factors. This was a cross-sectional study of 310 patients enrolled in two public health centers in Belo Horizonte, Minas Gerais State, Brazil. Delayed ART initiation was defined as starting treatment with a CD4 count lower than 200 cells/mm³ or clinical symptoms of severe immunodepression at the time of first antiretroviral prescription. The majority of participants were males (63.9 percent), had no health insurance (76.1 percent), and started ART less than 120 days after the first medical visit (75.2 percent). The proportion of delayed ART initiation was 68.4 percent. Unemployment, referral by a health professional for HIV testing, fewer than two medical visits in the six months prior to ART initiation, and time between first medical visit and ART initiation less than 120 days were independently associated with the outcome. Our results suggest that every patient 13 to 64 years of age should be offered HIV testing, which could increase the rate of early HIV diagnosis, and thus patients that tested positive could benefit from timely follow-up and antiretroviral therapy.

Establecimiento de intervalos de referencia en subpoblaciones linfocitarias por citometría de flujo / Reference values in lymphocyte subpopulations using flow cytometry

La determinación de Subpoblaciones Linfocitarias Humanas (SLH) por Citometría de Flujo, Linfocitos CD3+ (LT), LTCD4+, LTCD8+ y la relación LTCD4+/LTCD8+, permiten monitorear pacientes infectados con virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), los cuales son comparados con Valores de Referencia (VR). A su vez los VR informados por la bibliografía son variables debido a la falta de validación analítica y partición estadística de los datos de VR, entre otros. En este trabajo, utilizando un ensayo validado (ISO15189), se establecieron VR para SLH con criterios estadísticos de partición en individuos con serología negativa para VIH (397 mujeres (F) y 279 varones (M), edad: 17-83 años). Las SLH fueron medidas en un Citómetro de Flujo (Coulter Epics XL-MCL). Los datos fueron procesados empleando como criterio estadístico de partición el algoritmo de Martin Gellerstedt (AMG). Del análisis estadístico y del AMG se determinó la partición de los datos en 6 subpoblaciones definidas por edad (intervalo de años) y género (F y M): grupos I y IV: 17-35 (F y M); grupos II y V: 36-50 (F y M); y grupos III y VI: >50 años (F y M). Para los 6 grupos se definieron VR de linfocitos totales, LT, LTCD4+, LTCD8+ y LTCD4+/LTCD8+. Para cada límite inferior y superior de VR se estableció el intervalo de confianza al 90%. En conclusión, este estudio permitió establecer VR para SLH en un ensayo validado empleando un criterio estadístico de partición, lo cual permitiría incrementar la confiabilidad de los resultados y uniformar a nivel internacional los VR en SLH en diferentes poblaciones.

The determination of Human Lymphocyte Subpopulations (HLS) including Lymphocytes CD3+ (LT), LTCD4+, LTCD8+ and LTCD4+/LTCD8+ ratio by flow cytometry, makes it possible to monitor patients infected who HIV, which are compared against reference values (RV). However, RV reported by the international bibliography are variable due to the absence of two main factors: analytical validation procedures and partitioning statistical criteria. This study, using a validated method (ISO15189), RV were established for HLS in individuals with negative serology for HIV (397 females (F) and 279 males (M), age: 17-83 years) applying partitioning statistical criteria. The values of HLS were obtained by flow cytometry (Coulter Epics XL-MCL). The data were processed using partitioning statistical criteria based on Martin Gellerstedt's algorithm (MGA). From the statistical analysis and MGA the partition of the data was determined in 6 subpopulations defined by age (interval of years) and gender (F and M): groups I and IV: 17-35 (F and M); groups II and V: 36-50 (F and M); and groups III and VI: >50 years (F and M). Hence, RV of total lymphocytes, LT, LTCD4+, LTCD8+ and LTCD4+/LTCD8+ ratio were defined. For each limit (lower and upper) of reference values, the 90% confidence interval was determined. In conclusion, this study allowed establishing RV for HLS in a validated method using a partitioning statistical criterion, which would allow increasing the assurance results and establishing an international criterion for reference values in HLS in different populations.

Coexpresión de CD4 y CD8 en linfocitos de sangre periférica en pacientes positivos para VIH / Peripheral blood lymphocyte CD4 and CD8 co-expression in HIV positive patients

Objetivo. La coexpresión en membrana de las moléculas CD4 y CD8 en leucocitos de sangre periférica se halla generalmente restringida a casos de leucemias agudas T prolinfocíticas o de leucemias T del adulto y no representa más de 3 por ciento a 5 por ciento de los linfocitos T periféricos. En este trabajo buscamos establecer la frecuencia de elevación de los linfocitos CD4+CD8+ de la totalidad de las muestras de pacientes remitidos para tipificación al Instituto de Referencia Andino en el año 2007. Diseño. Se hizo la tipificación de 1.883 subpoblaciones de linfocitos T de individuos diferentes y, luego, se procedió a la revisión retrospectiva de los resultados que correspondían a la totalidad de los análisis del 2007 en nuestro instituto. Además, se tabularon 142 muestras recibidas en enero de 2008 con el fin de determinar valores de referencia para la población estudiada. Metodología. Las muestras de sangre total se marcaron con anticuerpos monoclonales fluorescentes utilizando el reactivo Cyto-Stat® triCHROME™ CD8-FITC/CD4-RD1/CD3-PC5 y, luego, se procesaron en un citómetro Epics XL-MCL. Resultados. El análisis de los pacientes tipificados en 2007 reveló la existencia de dos individuos (0,11 por ciento) en los que se presentó el fenómeno de aumento de la coexpresión en membrana de las moléculas CD4 y CD8. Conclusiones. El hallazgo de este fenotipo linfocitario en sangre periférica de pacientes no leucémicos debe alertar a los laboratorios que tipifican aisladamente los linfocitos CD4+ sin evaluar los marcadores CD3 y CD8, puesto que podrían estar sobreestimando los recuentos y porcentajes reales de células CD4+CD8- en la sangre periférica de sus pacientes y subestimando una subpoblación de linfocitos que es infrecuente, pero que se ha reportado como funcional y diferenciada en una variedad de infecciones y modelos experimentales.

Relación entre los niveles de carga viral y los niveles de linfocitos CD4 en el diagnóstico de Cryptosporidium spp. en heces de niños de la Clínica Pediátrica de VIH/SIDA del Hospital Universitario del Valle, Cali, Colombia / Relation between viral load and CD4 versus Cryptosporidium spp. in feces of children with AIDS

Introducción: Cryptosporidium spp. (C. spp.) causa morbimortalidad en niños con SIDA. Objetivo: Identificar la asociación entre carga viral, CD4 y C. spp. en heces de niños con SIDA. Materiales y métodos: Estudio observacional en niños del Hospital Universitario del Valle de Cali. Se tomaron datos como edad, género, procedencia, consanguinidad, tratamiento, estadio, supervivencia materna y peso. Se analizaron las heces por la técnica de Ziehl-Neelsen modificada. Se midieron carga viral y niveles de linfocitos ayudadores TCD4. La estadística incluyó análisis estratificado, modelos de regresión logística, pruebas t de Student, X2, y prueba de Fisher, con p significativa <0.05. Resultados: Ingresaron 72 niños entre 0 y 15 años, 52.7% masculinos, 50% consanguíneos y con madre viva, 54.2% del área urbana, 69.1% institucionalizados, 36.1% grado C de severidad, 73.6% con análogo nucleósido con inhibidor de proteasa, 55% con >100,000 copias de carga viral y >100,000 células CD4. La prevalencia de C. spp. fue 51.4%, siendo más afectados entre los 5-10 años; con mayor proporción de niños positivos para C. spp. con grado severo para SIDA (p = 0.03). Con intervalo de confianza de 95%, los >2 años tuvieron un riesgo 8 veces mayor de ser positivos en heces para C. spp. (1.6-40.1); para edad, género y procedencia rural, 7.7 (1.5-38.9); para madre viva y estar institucionalizado, 6.1 (1.1-32.7), y para severidad de la enfermedad y peso, 5.7 (1-32.3). Conclusión: La prevalencia para C. spp. fue 51.4%, con factores de riesgo edad >2 años y grado de severidad C, sin diferencias significativas en peso, carga viral y niveles de CD4.

Introduction: Cryptosporidium spp. (C. spp.) cause morbi-mortality in children with AIDS. Objective: To identify the association between viral load, CD4 levels and C. spp., presence in feces of children with AIDS. Materials and methods: Observacional study in children of the Hospital Universitario del Valle of Cali. Data like age, gender, origin, consanguinity, treatment, stage, maternal survival and weight, were taken. Feces were analyzed by the technique of Ziehl-Neelsen modified. Viral load and CD4 levels were measured. Statistic included stratified analysis, models of logistic regression, and tests, t Student, X2, and Fisher’s, being significant p <0.05. Results: Were analized 72 children between 0 and 15 years, 52.7% masculine ones, 50% consanguinity and with alive mother, 54.2% of the urban area, 69.1% institutionalized ones, 36.1% severity degree C, 73.6% with analog nucleoside with protease inhibitor, 55% with >100,000 copies of viral load and >100,000 cells CD4. The prevalence of C. spp. was 51.4%, being more affected between 5 to 10 years; with a greater proportion of positive children for C. spp. with severe degree for AIDS (p = 0.03). With interval of confidence of 95%, >2 years had a greater risk 8 times to be positive in feces for C spp. (1.6-40.1); for age, gender and rural origin, 7.7 (1.5-38.9); alive mother and to be institutionalized, 6.1 (1.1-32.7), and for severity of the disease and weight, 5.7 (1-32.3). Conclusion: The prevalence for C. spp. was 51.4%, with risk factors age >2 years and degree of severity C, without significant differences in weight, viral load and CD4 levels.