ABSTRACT
Introdução: Caryocar brasiliense é conhecida popularmente como Pequi ou Pequizeiro, sendo uma planta com propriedades medicinais para tratamento de doenças respiratórias, úlceras gástricas e dores musculares. Objetivo: comparar a extração de biocompostos por meio de dois métodos extrativos, agitação magnética e banho ultrassônico. Além disso, avaliar a atividade antioxidante, o teor de compostos fenólicos, flavonoides e antocianinas em extratos das folhas e da casca de Pequi (C. brasiliense), com vistas a agregar valor quanto às suas propriedades funcionais. Metodologia: o conteúdo de compostos fenólicos foi determinado pelo método de Folin-Ciocalteu, flavonoides e antocianinas pelo método de Lima e Melo. A atividade antioxidante foi medida pelo método 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH). Resultados: o extrato das folhas de Pequi exibiu maior teor de fenólicos em relação à casca, independente do método de extração. O extrato das folhas obtido em banho ultrassônico apresentou forte atividade antioxidante com valor de 72,2%. Conclusão: os extratos de Pequi demonstraram um perfil fitoquímico promissor que deve ser investigado no futuro para aplicação farmacológica como adjuvante ou precursor na síntese de novos cosméticos ou medicamentos com propriedades antioxidante.
Introduction: Caryocar brasiliense is a medicinal plant used in the treatment of respiratory diseases, gastric ulcers and muscle pain. Objective: to compare the extraction of natural compounds using two extractive methods, magnetic stirring and ultrasonic bath. In addition, to evaluate the antioxidant activity, the content of phenolic compounds, flavonoids and anthocyanins in the leaves and bark of Pequi (C. brasiliense), with a view to adding value through its functional properties. Methodology: the phenolic content was determined by the Folin-Ciocalteu method, flavonoids and anthocyanins by the Lima and Melo method. Antioxidant activity was measured using the 2.2-diphenyl-1-picrilhhydrazyl (DPPH) method. Results: the extract of the Pequi leaves exhibited a higher phenolic content in relation to the bark for both extraction methods. The Pequi leaf in an ultrasonic bath showed strong antioxidant activity with a value of 72.2%. Conclusion: Pequi extracts demonstrated a promising phytochemical profile that should be investigated in the future for pharmacological application as an adjuvant or precursor in the synthesis of a new cosmetic or medicine with antioxidant function.
Subject(s)
Plants, Medicinal , Reference Drugs , MalpighialesABSTRACT
This work aimed to compare the antifungal activity of the essential oil of Varronia curassavica obtained by hydrodistillation and microwave against the fungus Colletotrichum musae and verify the alterations caused by these extraction methods on the leaf surface. This study used four essential oil samples obtained by different methods, two by hydrodistillation [HD1 (1.0 L of water and 100 min.) and HD2 (2.0 L of water and 140 min.)] and two by microwave [MI1 (500W, 20 min, without water) and MI2 (700W, 40 min, with 50 mL of water added to fresh leaves)]. Essential oils concentrations of 0.05, 0.1, 0.5, 1.0, and 3.0% (v / v) were tested in PDA medium. The mycelial growth of C. musae was evaluated by measuring the diameter, every 24 hours up to 144 hours after the beginning of the incubation. Untreated leaves and leaves treated with HD1 and MI1 were prepared for observation in a scanning electron microscope (SEM) LEO EVO 40. The most abundant compounds detected in the essential oil samples analyzed by gas chromatography were: shyobunol, germacrene D-4-ol, E-caryophyllene, bicyclogermacrene, and α-cadinol. Up to 72 hours after the beginning of the incubation, C. musae presented no mycelial growth, even at the lowest essential oil concentration. Conversely, mycelial growth was detected in the control (PDA + DMSO) from 24 hours after incubation. At 144 hours after incubation, regardless of the concentration, the essential oil samples obtained by HD provided lower mycelial growth of C. musae (1.49 cm) when compared with samples obtained by MI (1.80 cm). This difference possibly occurred due to the reduction to less than half of the germacrene D-4-ol content in the samples obtained by MI. The four essential oil samples tested inhibited the mycelial growth and thus presented a inhibitory effect on C. musae. The SEM revealed more drastic changes on the surface of the leaf treated with MI than on those treated with HD. The essential oil of V. curassavica, mainly when obtained by hydrodistillation, has the potential for use in the control of C. musae.
O objetivo do trabalho foi comparar a atividade antifúngica do óleo essencial de Varronia curassavica obtido por hidrodestilação e micro-ondas frente ao fungo Colletotrichum musae e verificar as alterações que esses métodos de extração causam na superfície da folha. Quatro amostras de óleo essencial obtidas em diferentes condições foram utilizadas. Sendo duas por hidrodestilação, HD1 (1,0 L de água e 100 min.) e HD2 (2,0 L de água e 140 min.); e duas por micro-ondas, MI1 (500W, 20 min. sem adição de água) e MI2 (700W, 40 min. com adição de 50 mL de água às folhas frescas). Foram testadas as concentrações 0,05; 0,1; 0,5; 1,0 e 3,0 % (v/v) de óleo essencial em meio BDA. O crescimento micelial do C. musae foi avaliado por medições do diâmetro, a cada 24 horas até 144 horas após o início da incubação. Folhas sem qualquer tratamento e após os tratamentos HD1 e MI1 foram preparadas para observação em microscópio eletrônico de varredura (MEV) LEO EVO 40. Os compostos mais abundantes nas amostras de óleo essencial analisadas por cromatografia gasosa foram: shyobunol, germacreno D-4-ol, E-cariofileno, biciclogermacreno e α-cadinol. Até 72 horas após o início da incubação, não foi observado nenhum crescimento micelial do C. musae, mesmo nas concentrações mais baixas de óleo essencial, enquanto, para o controle (BDA + DMSO), foi observado crescimento do fungo a partir de 24 horas. Após 144 horas, independentemente da concentração, as amostras de óleo essencial obtidas por HD proporcionaram menor crescimento micelial do C. musae (1,49 cm) quando comparadas às amostras obtidas por MI (1,80 cm). Possivelmente essa diferença ocorreu devido à redução para menos da metade, do teor de germacreno D-4-ol, nas amostras obtidas por MI. As quatro amostras de óleo essencial testadas foram capazes de inibir o crescimento micelial, apresentando portanto, um efeito inibitório sobre o C. musae. Alterações mais drásticas observadas através da MEV foram visualizadas na superfície da folha submetida ao processo de extração por MI em comparação à HD. O óleo essencial de V. curassavica, sobretudo o obtido por hidrodestilação, apresenta potencial para o controle de C. musae.
Subject(s)
Oils, Volatile , Distillation , Cordia , Antifungal AgentsABSTRACT
ABSTRACT: Two chemical treatments, five enzymatic (pectinase, lipase, hemicellulase, hemicellulose-cellulase or lipase-pectinase) and one microbiological (Bacillus subtilis) treatment were evaluated to obtain glucosamine hydrochloride (Gluc-HCl) from the chitin obtained from crab (Callinectes bellicosus) exoskeletons. Chemical treatments were referred as Method A (HCl hydrolysis during 75 min at 90°C) and Method B (HCl hydrolysis during 20 min and 14 h of rest). Glucosamine and, in some cases, N-acetyl-D-glucosamine were identified and quantified by HPLC. Treatments with the greater concentrations of Gluc-HCl in descending order were: lipase (94.4 mg/g), microbiological (45.7 mg/g), lipase-pectinase (22.9 mg/g), hemicellulase-cellulase (20.9 mg/g), hemicellulase (15.3 mg/g), pectinase (10.7 mg/g), Chemical A (7.3mg/g) and Chemical B (7.3mg/g). In terms of yield, the best treatments in descending order were: pectinase (94%), microbiological (94%), hemicellulase (92%), lipase (91%), Chemical B (88%), lipase-pectinase (88%), hemicellulase-cellulase (86%) and Chemical A (28.5%). The two most profound treatments were lipase and microbiological, so they are proposed as part of a viable method to produce Gluc-HCl from crab exoskeletons; they are ecofriendly procedures and could add value to the crab´s productive chain.
RESUMO: Dois tratamentos químicos, cinco enzimáticos (pectinase, lipase, hemicelulase, hemicelulose-celulase ou lipase-pectinase) e um microbiológico (Bacillus subtilis) foram avaliados para obter o cloridrato de glucosamina (Gluc-HCl) da quitina obtida a partir de exoesqueletos de caranguejo (Callinectes. Bellicosus). Os dois tratamentos químicos foram nomeados como método A (hidrólise de HCl para 75 min a 90 °C) e método B (hidrólise de HCl para 20 min e 14 h de repouso). A Glucosamina e, em alguns casos, N-acetil-D-glucosamina foram identificados e quantificados por HPLC. Os tratamentos em que as melhores concentrações de Glucosamina-HCl foram obtidas, em ordem decrescente: lipase (94,4 mg/g), microbiológica (45,7 mg/g), lipase-pectinase (22,9 mg/g), hemicelulase-celulase (20,9 mg/g), hemicelulase (15,3 mg/g), pectinase (10,7mg/g), Quïmica A (7,3 mg/g) e Quïmica B (7,3 mg/g). Em termos de produtividade, os melhores tratamentos em ordem decrescente foram: pectinase (94%), microbiológica (94%), hemicelulase (92%), lipase (91%), química B (88%), lipase-pectinase (88%), hemicelulase- celulase (86%) e produto químico A (28,5%). Os dois melhores tratamentos foram lipase e microbiológicos, propostos como método viável para obtenção de Gluc-HCl a partir de exoesqueletos de caranguejo; cumprem procedimentos ecologicamente corretos e podem agregar valor à cadeia produtiva do caranguejo.
ABSTRACT
In view of the increasing search for natural products with biological activities, such as essential oils are of high quality because of their therapeutic and economic importance and represent the second class of natural compounds with the largest number of active constituents and production through Plants minimizes the environment and sanitary impacts . The objective of the present work is to assess the seasonal effect on the composition and antioxidant activity of essential oil in leaves of Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng using hydro and steam distillation techniques. With regarding to the extraction methodology of essential oils from the P. amboinicus, the hydrodistillation technique is the most efficient in obtaining the volatile product with the best features for the determination of antioxidant activity. The analyses of the essential oil indicated a similarity in their composition, being observed the Carvacrol as major compound in almost all analysis, except in January 2015 using steam distillation extraction. Regarding antioxidant activity and seasonality, it was verified that in October 2014 obtained the best value of inhibitory concentration, with IC50 = 124.97 ppm. However, it was possible to obtain the essential oil from the P. amboinicus leaves through hydro and steam distillation methodologies, but also noted the seasonality influence on it's the context of antioxidant capacity.
Tendo em vista a crescente busca de produtos naturais com atividades biológicas, os óleos essenciais apresentam alta qualidade devido à sua importância terapêutica e econômica e representam a segunda classe de compostos naturais com o maior número de constituintes ativos com produção através das plantas, o que minimiza os impactos ao meio ambiente. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito sazonal na composição e na atividade antioxidante do óleo essencial presente nas folhas da Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng utilizando as técnicas de hidrodestilação e arraste a vapor d'água. No que se refere à metodologia de extração dos óleos essenciais do malvarisco, constatou-se que a técnica de hidrodestilação é a mais eficiente na obtenção do produto volátil com as melhores características para a determinação da atividade antioxidante. Quanto à sazonalidade, verificou-se que no mês de Outubro/2014 obteve-se o melhor valor da concentração inibitória com CI50=124,97 ppm. Este trabalho mostra que é a obtenção do óleo essencial das folhas do malvarisco, utilizando as metodologias de hidrodestilação e arraste a vapor de água, como também, constatar a influência da sazonalidade na determinação da capacidade antioxidante do mesmo.
Subject(s)
Plants, Medicinal , Oils, Volatile , Plectranthus , AntioxidantsABSTRACT
Abstract Enchytraeids are small oligochaetes found worldwide in soils with sufficient moisture and organic matter, but scarcely studied in the Southern hemisphere. This is the third study on enchytraeid abundance in Brazil using wet extraction and the first carried out in Araucaria Mixed Forest (subtropical region). The sampling and extraction were based on the standard method ISO 23611-3/2007 using an adapted split soil corer and wet extraction with and without heat to assess the abundance of enchytraeids in a forest fragment at Embrapa Forestry in Colombo, Paraná State. The samplings were performed in 3 occasions between September 2011 and April 2012. The average numbers estimated by each method varied from appr. 2.000-12.000 (cold) and 5.000-12.000 ind./ m2 (hot), respectively, with a maximum of 44.000 ind./ m2 in one of the samples, the highest value reported so far in Brazil. The hot extraction was more advantageous, given the speed and preservation of the specimens in vivo, allowing taxonomic identification. Advantages and disadvantages of wet extractions compared to handsorting and formol methods are also discussed. Guaranidrilus, Hemienchytraeus, Enchytraeus, Fridericia and Achaeta were the genera identified in the samples.
Resumo Os enquitreídeos são pequenos oligoquetas encontrados no mundo todo em solos com suficiente umidade e matéria orgânica, porém muito pouco estudados no hemisfério Sul. Este é o terceiro estudo sobre a abundância de enquitreídeos no Brasil utilizando o método de extração úmida e o primeiro realizado em Floresta Ombrófila Mista (região subtropical). A amostragem e extração foram baseadas no método padrão ISO 23611-3/2007, utilizando-se um trado desmontável adaptado e extração úmida com e sem aquecimento para acessar a abundância de enquitreídeo em um fragmento de floresta na Embrapa Florestas em Colombo, Paraná. As amostragens foram realizadas em três ocasiões entre setembro, 2011 e abril 2012. Os números médios estimados através de cada método variaram de 2.000-12.000 (frio) e 5.000-12.000 ind./ m2 (quente), respectivamente, e o máximo de 44.000 ind./ m2 em uma das amostras, o mais alto já relatado no Brasil. A extração quente foi a mais vantajosa, considerando a rapidez e preservação dos exemplares in vivo. As vantagens e desvantagens das extrações úmidas comparadas aos métodos de triagem manual e extração com formol foram discutidas. Os gêneros Guaranidrilus, Hemienchytraeus, Enchytraeus, Fridericia e Achaeta foram identificados nas amostras.
Subject(s)
Animals , Biodiversity , Ecology/methods , Oligochaeta/physiology , Brazil , Forests , Population Density , TemperatureABSTRACT
Abstract Enchytraeids are small oligochaetes found worldwide in soils with sufficient moisture and organic matter, but scarcely studied in the Southern hemisphere. This is the third study on enchytraeid abundance in Brazil using wet extraction and the first carried out in Araucaria Mixed Forest (subtropical region). The sampling and extraction were based on the standard method ISO 23611-3/2007 using an adapted split soil corer and wet extraction with and without heat to assess the abundance of enchytraeids in a forest fragment at Embrapa Forestry in Colombo, Paraná State. The samplings were performed in 3 occasions between September 2011 and April 2012. The average numbers estimated by each method varied from appr. 2.000-12.000 (cold) and 5.000-12.000 ind./ m2 (hot), respectively, with a maximum of 44.000 ind./ m2 in one of the samples, the highest value reported so far in Brazil. The hot extraction was more advantageous, given the speed and preservation of the specimens in vivo, allowing taxonomic identification. Advantages and disadvantages of wet extractions compared to handsorting and formol methods are also discussed. Guaranidrilus, Hemienchytraeus, Enchytraeus, Fridericia and Achaeta were the genera identified in the samples.
Resumo Os enquitreídeos são pequenos oligoquetas encontrados no mundo todo em solos com suficiente umidade e matéria orgânica, porém muito pouco estudados no hemisfério Sul. Este é o terceiro estudo sobre a abundância de enquitreídeos no Brasil utilizando o método de extração úmida e o primeiro realizado em Floresta Ombrófila Mista (região subtropical). A amostragem e extração foram baseadas no método padrão ISO 23611-3/2007, utilizando-se um trado desmontável adaptado e extração úmida com e sem aquecimento para acessar a abundância de enquitreídeo em um fragmento de floresta na Embrapa Florestas em Colombo, Paraná. As amostragens foram realizadas em três ocasiões entre setembro, 2011 e abril 2012. Os números médios estimados através de cada método variaram de 2.000-12.000 (frio) e 5.000-12.000 ind./ m2 (quente), respectivamente, e o máximo de 44.000 ind./ m2 em uma das amostras, o mais alto já relatado no Brasil. A extração quente foi a mais vantajosa, considerando a rapidez e preservação dos exemplares in vivo. As vantagens e desvantagens das extrações úmidas comparadas aos métodos de triagem manual e extração com formol foram discutidas. Os gêneros Guaranidrilus, Hemienchytraeus, Enchytraeus, Fridericia e Achaeta foram identificados nas amostras.
ABSTRACT
Objetivou-se isolar, fracionar e avaliar a toxicidade in vivo dos polissacarídeos sulfatados (PSs) da rodofícea Hypnea musciformis, quando obtidos por três métodos de extração (M I; M II e M III). Os PSs foram extraídos com papaína em tampão acetato de sódio 100mM (pH 5,0), contendo cisteína e EDTA (5mM) (M I) ou água (25-80°C (M II); 80°C (M III)) e, em seguida, determinados sua composição química de carboidratos totais, sulfato livre (SL) e proteínas contaminantes (PCs). Os PSs foram submetidos à cromatografia de troca iônica (DEAE-celulose) usando um gradiente de cloreto de sódio, sendo avaliado o grau de homogeneidade e densidade de carga por eletroforese em gel de agarose das frações obtidas e comparadas à heparina. O ensaio in vivo foi realizado em grupos (n=6) de camundongos Swiss machos e fêmeas (24-33g), os quais receberam: PSs (9mg kg-1; i.p.) isentos do PCs (M I) e salina 0,9 por cento (0,1mL 10g-1; i.p.), durante 14 dias consecutivos. No 15o dia, os animais foram anestesiados e sacrificados para coletas de sangue e órgãos, os quais foram utilizados para dosagens bioquímicas e correlações com suas massas corpóreas, respectivamente. O teor de SL (31,05±0,53 por cento) (P<0,05) e o fracionamento, em DEAE-celulose, indicaram o M I mais eficiente na obtenção de PSs, comparado ao M II e M III. Os animais mostraram-se tolerantes aos PSs do M I e não se observou alteração de ordem hepática ou renal (P>0,05).
This study aimed to isolate, fractionate and evaluate the in vivo toxicity of sulfated polysaccharides (SPs) from Hypnea musciformis (Rhodophyta), when obtained by three extraction methods (M I, M II and M III). SPs were extracted with papain in 100mM sodium acetate (pH 5.0) containing cysteine and EDTA (5mM) (M I) or water (25-80°C (M II), 80°C (M III)), and then their chemical composition of total carbohydrates, free sulfate (FS) and contaminant proteins (CPs) was determined. SPs were submitted to ion-exchange chromatography (DEAE-celulose) using a sodium chloride gradient, being the degree of homogeneity and charge density evaluated by agarose gel electrophoresis of the fractions obtained and compared to heparin. The in vivo assay was performed using groups (n=6) of male and female Swiss mice (24-33g), which received: SPs (9mg kg-1, i.p.) absence of CPs (M I) and 0.9 percent saline (0.1mL 10g-1, i.p.), for 14 consecutive days. On the 15th day, collect blood and organs for biochemical dosages and corporal mass correlation, respectively, from the animals anesthetized and sacrificed were performed. The sulfate content of FS (31.05±0.53 percent) (P<0.05) and the fractionation by DEAE-cellulose showed M I more effectiveness in obtaining SPs compared to M II and M III. The animals were tolerable to SPs from M I, and it wasn't observed hepatic or renal alteration (P>0.05).
ABSTRACT
Este estudo teve como objetivo isolar, fracionar e avaliar o potencial anticoagulante de iota-carragenanas (i-CARs) da rodofícea Solieria filiformis, quando obtidas por dois métodos de extração (M I e M II). As i-CARs foram isoladas com papaína bruta em tampão acetato de sódio 0,1M (pH 5,0), contendo cisteína 5mM e EDTA 5mM (M I) ou água (80°C) (M II) e, em seguida, determinada sua composição química de carboidratos totais, sulfato livre (SL) e proteínas contaminantes. As i-CARs foram submetidas à cromatografia de troca iônica (DEAE-celulose) usando um gradiente de cloreto de sódio, sendo avaliado o tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e tempo de protrombina das frações obtidas e comparadas à heparina (193UI mg-1). Uma fração anticoagulante também foi submetida ao procedimento de eletroforese em gel de agarose a 0,5 por cento. A diferença no rendimento de i-CARs entre os métodos foi 10,14 por cento. A composição química de SL (29,40 por cento) e o fracionamento, por DEAE-celulose, indicaram o M I mais eficiente na obtenção de i-CARs, comparado ao M II. O TTPA também foi somente alterado para as i-CARs do M I. Contudo, a atividade anticoagulante in vitro de uma fração rica (8,52UI mg-1) foi inferior à da heparina.
This study aimed to isolate, fractionate and evaluate the anticoagulant potential of iota-carrageenans (i-CARs) from Solieria filiformis when two extraction methods (M I and M II) were used. i-CARs were isolated with papain in 0.1M sodium acetate (pH 5.0) containing 5mM cystein and 5mM EDTA (M I) or water (80°C) (M II), and then their chemical composition of total carbohydrates, free sulfate (FS) and contaminant proteins were determined. i-CARs were submitted to anion-exchange chromatography (DEAE-cellulose) using a sodium chloride gradient,being evaluated the activated partial thromboplastin time (APTT) and prothrombin time of obtained fractions and compared to heparin (193IU mg-1). A rich fraction of anticoagulant was also submitted to 0.5 percent agarose gel electrophoresis procedure. The difference of yield between methods was 10.14 percent. The chemical composition of FS (29.40 percent) and the fractionation by DEAE-cellulose showed M I more effectiveness in the obtaining of i-CARs compared to M II. The APTT was also modified for i-CARs from M I. However, the in vitro anticoagulant activity of a rich fraction (8.52IU mg-1) was inferior to heparin.
ABSTRACT
Avaliação de diferentes métodos de extração lipídica sobre a composição de ácidos graxos poliinsaturados em leite de vaca. Estudos comparativos entre 4 (quatro) diferentes métodos de extração de lipídios totais foram avaliados em relação à eficiência de extração lipídica e as implicações sobre a composição de ácidos graxos no leite de vaca. As extrações de lipídios totais foram realizadas de acordo com métodos convencionalmente utilizados no mundo, essas metodologias incluem os métodos de: Bligh e Dyer (BD), Folch et al. (FLS), Roese-Goottlieb (RG) e Gerber (GE). Os resultados mostram que não houve diferença significativa (p<0,05), no teor de lipídios totais entre os métodos de extração. As menores concentrações de ácidos graxos ômega-6 e ácidos graxos poliinsaturados foram observadas no método GE, possivelmente devido à degradação pelo ácido sulfúrico, o qual foi utilizado na metodologia. As maiores concentrações dos ácidos graxos poliinsaturados da série ômega-3 (n-3) foi observada no método BD, especialmente para a razão ômega-3/ômega-6 e os ácidos alfa-linolênico (LNA, 18:3n-3), eicosapentaenóico (EPA, 20:5n-3) e docosahexaenóico (DHA, 22:6n-3), com diferenças significativas das demais metodologias. Os resultados das diferentes metodologias de extração influenciaram decisivamente nos resultados da composição quantitativa de ácidos graxos e, as avaliações indicaram o método BD como o melhor e a o método de GE como a pior na determinação quantitativas de ácidos graxos poliinsaturados em leite de vaca.
Comparative studies among 4 (four) different methods of total lipids extraction were carried out to evaluate the lipid extraction efficiency and fatty acids contents in cow milk. Total lipids extraction methods were Bligh e Dyer (BD), Folch et al. (FLS), Roese-Gottlieb (RG) and Gerber (GB). There were non-significant (p<0.05) difference, in total lipids content among the extraction methods. The smallest concentrations of omega-3 (n-3) fatty acids and polyunsaturated fatty acids (PUFA) were observed on method GE, possibly due degradation of PUFA immersed in sulfuric acid used during analysis of total lipids. The highest concentrations of n-3 PUFA were observed by BD method, especially to omega-3/omega-6 ratio and alpha-linolenic acid (LNA, 18:3n-3), eicosapentaenoic (EPA, 20:5n-3) and docosahexaenoic (DHA, 22:6n-3), significant differences were observed among the methods. The results demonstrate that the different extractions influenced decisively on quantitative fatty acids composition and evaluations indicated the methods BD as better and GE as the worst to polyunsaturated fatty acids determination.
Subject(s)
Breast-Milk Substitutes , Fatty Acids, Unsaturated , LipidsABSTRACT
Agrotóxicos organoclorados (OC) são classificados como poluentes orgânicos persistentes e podem ser determinados em uma ampla variedade de matrizes ambientais e biológicas. O controle da exposição a estes químicos é considerado um desafio para as autoridades de saúde pública, desde que o espectro de efeitos adversos às populações inclui desregulação do sistema endócrino e carcinogenicidade. O objetivo deste artigo é apresentar uma revisão sobre os métodos de análise de OC em amostras biológicas, e discutir os fatores que mais influenciam o monitoramento biológico. Os métodos para análise de resíduos de OC requerem alta sensibilidade, e a etapa de extração dos analitos da matriz é crítica para garantir a qualidade dos resultados. Muitos métodos são disponíveis tais como a extração líquido-líquido, utilização de cartuchos ou discos para extração em fase sólida, extração em fase sólida com micro fibras e extração com barra agitadora. A matriz biológica mais utilizada para detectar OC é o soro, que pode ser convenientemente obtida.
Organochlorine pesticides (OC) are classified as persistent organic pollutants and can be determined in a great variety of environment and biological matrices. The control of the exposure to these chemicals is considered a challenge to the public health authorities, since the spectrum of adverse effects to the populations includes disruption of endocrine system and carcinogenicity. The objective of this study is to present a review about the methods of analysis of OC in biological samples, and to discuss the factors that most influence biological monitoring. The methods used for trace analysis of OC need to be highly sensitive and the extraction stage of the analytes from the matrix is a critical step to ensure the quality of results. Many methods are available such as liquid-liquid extraction, utilization of cartridges, disks and micro fibers for solid phase extraction, and extraction with stirring bars. The most used biological matrix for tracking OC is the serum, which can be very conveniently obtained.
ABSTRACT
Brazilian propolis from São Paulo state was submitted to extraction using several solvents, resulting in extracts with different composition. These extracts were submitted to Thin Layer Chromatography (TLC). Bioauthographic analysis of the TLC plates identified fractions with inhibitory activity, which were then analysed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). In vitro assays, commonly used to evaluate the activity of propolis against Gram-positive bacteria, were compared to determine which rendered the most consistent results. The bactericidal activity of these extracts were analysed by Serial Dilution in Tubes and Agar Plate Diffusion. Serial Dilution in Tubes obtained the most consistent results, with the Minimal Bactericidal Concentration of the extracts ranging between 2.5 and 20.0 mg/mL, for the species of Gram-positive bacteria tested. The results of the Agar Plate Diffusion were directly proportional to the hydro-solubility of the extracts and did not evaluate their bactericidal activity correctly. The bactericidal activity of this sample of propolis was due to the combined effect of several components that were identified by HPLC and were best extracted using 50% ethanol as a solvent.
Própolis brasileira, proveniente do estado de São Paulo, foi submetida à extração usando vários solventes, resultando em extratos com diferentes composições. Estes extratos foram submetidos à Cromatografia em Camada Delgada (CCD). Análise bioautográfica das placas de CCD permitiu identificar as frações com atividade antimicrobiana, que foram então analisadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Ensaios in vitro freqüentemente utilizados para avaliar a atividade de própolis frente a bactérias Gram-positivas foram comparados para determinar qual renderia os resultados mais consistentes. A atividade bactericida destes extratos foi analisada por Diluição Seriada em Tubos e por testes de Difusão em Agar. O método de Diluição em Tubos permitiu obter os resultados mais consistentes e a Concentração Bactericida Mínima dos extratos variou entre 2,5 e 20,0 mg/mL, para as espécies de bactérias Gram-positivas testadas. Os resultados do método de Difusão em Agar foram diretamente proporcionais à hidrossolubilidade dos extratos, e não avaliaram a atividade bactericida corretamente. A atividade bactericida desta amostra resultou da combinação de vários componentes, identificados por CLAE, que foram extraídos preferencialmente usando etanol 50% como solvente.