Infrared or ultrasonic milk analysis can affect its results? / A análise infravermelha ou ultrassônica do leite pode afetar seus resultados?

ABSTRACT: Constant monitoring of milk quality by the processing industries demands the use of methodologies that add agility and low-cost analysis, such as the use of electronic equipment based on infrared or ultrasonic spectroscopy. In the present study, quality of raw milk received by dairy farms from western region of Santa Catarina state, Brazil, was evaluated throughout two methodologies of analysis of chemical composition and compared, being that both equipment used standard procedures for calibration, considering as reference data from the classic analytical methods recommended in Brazilian legislation. Milk samples from 45 producers were analyzed for SCC, TBC and physicochemical analysis, performed at dairy's laboratory and at the official laboratory. Infrared and ultrasound methodologies for chemical composition of fat, protein and lactose were compared and correlated. The comparison of the methods showed that there was no significant difference for the mean values of fat (P=0.06); however, they presented significant difference for protein (P=0.001), higher for IR (3.23 vs. 3.33), and lactose (P<0.0001), higher for US (4.47 vs. 4.83). Correlation was positive and significant for fat (r=0.73, P<0.0001), protein (r=0.47, P=0.001) and lactose (r=0.51, P=0.0003). Considering the minimal composition required, TBC and SCC levels, 95.5%, 84.1% and 64.4% of the milk producers met the current Brazilian legislation, respectively. It was concluded that the methodologies have affected results, which may have been influenced by the correction factor used for equipment calibration, specifically for analyzed samples during the study period.

RESUMO: O monitoramento constante da qualidade do leite por parte das indústrias beneficiadoras demanda o uso de metodologias que agregam agilidade e baixo custo por análise, como a utilização de equipamentos eletrônicos que podem ter como princípio a espectroscopia por infravermelho ou por ultrassom. No presente estudo, avaliou-se a qualidade do leite recebido por um laticínio da região extremo oeste catarinense e comparou-se duas metodologias de análise de composição química desta matéria prima, sendo que ambos os equipamentos utilizaram procedimentos padrões para calibração, considerando como referência os dados oriundos dos métodos analíticos clássicos preconizados na legislação Brasileira. Foram comparadas amostras de leite de 45 produtores para análise físico-química, de CCS e CBT, realizadas no laboratório do laticínio e em laboratório oficial. As metodologias por infravermelho (IR) e ultrassom (US) foram comparadas e correlacionadas para composição química de gordura, proteína e lactose. Os resultados demonstraram que não houve diferença significativa para as médias de gordura (P=0,06), entretanto, apresentaram diferença para proteína (P=0,001), maior para IR (3,23 vs. 3,33), e lactose (P<0,0001), maior para US (4,47 vs. 4,83). A correlação foi positiva e significativa para gordura (r=0,73, P<0,0001), proteína (r=0,47, P=0,001) e lactose (r=0,51, P=0,0003). Os resultados das análises de qualidade, considerando composição, CBT e CCS, atenderam a legislação vigente em 95,5%, 84,1% e 64,4% dos produtores, respectivamente. Concluiu-se que as metodologias afetaram os resultados, e estes podem ter sido influenciados pelo fator de correção, utilizado para calibração, sendo específicos para as amostras analisadas durante o período do estudo.

Meta-análisis: diagnóstico de tuberculosis resistente por técnicas no comerciales de amplificación / Meta-analysis: drug-resistant tuberculosis diagnosis by non commercial amplification techniques / Meta-análise: diagnóstico de tuberculose resistente por técnicas não comerciais de amplificação

La emergencia de tuberculosis (TB) multidrogo y extensivamente-resistente reactivó la necesidad de contar con métodos rápidos para detectar resistencia a isoniacida (INH) y rifampicina (RIF). Por tal motivo, los objetivos de este trabajo fueron evaluar, mediante meta-análisis, la exactitud global y la posible utilidad de métodos caseros basados en PCR para la detección rápida de resistencia a INH y RIF en aislamientos clínicos de Mycobacterium tuberculosis. La búsqueda bibliográfica incluyó Medline/PubMed, BioMedLib. Para estimar la variabilidad entre los resultados de los estudios y el grado de exactitud diagnóstica de los métodos utilizados se realizaron gráficos "forest plot" y curvas SROC (summary receiver operating characteristic) mediante el software Meta-DiSc. Fueron seleccionados 15 estudios, conteniendo 1311 aislamientos resistentes a INH y 953 a RIF. Para la detección de resistencia a INH la sensibilidad y especificidad globales fueron: 84,0% y 96,0% respectivamente, mientras que para la detección de resistencia a RIF esos valores fueron 92,0% y 97,0%. Además, estos métodos mostraron alta exactitud diagnóstica, con áreas bajo la curva SROC>0,9. La alta sensibilidad y especificidad obtenidas con métodos moleculares caseros sugieren que algunos de ellos podrían ser aplicados para el diagnóstico rápido de resistencia a partir del aislamiento de M. tuberculosis.

Due to the emergency of multidrug and extensively-drug resistant tuberculosis, molecular methods for a rapid detection of isoniazid (INH) and rifampicin (RIF) resistance are urgently needed. For that reason, the objectivesof this study were to asses through a meta-analysis the global accuracy and the utility of the home-made molecular methods based in PCR for INH and RIF resistance rapid detection from Mycobacterium tuberculosis clinical isolates. The articles were searched using Medline/PubMed, BioMedLib. The variability among different studies results and the diagnostic accuracy of the used methods were estimated by forest plot and summary receiver operating characteristic (SROC) curves performed with software Meta-DiSc. Fifteen studies were chosed: 1311 containing INH resistant and 953 RIF resistant isolates. The pooled sensitivity and specificity for INH resistance detection was 84.0% and 96.0% respectively, while 92.0% and 97.0% were the pooled values for RIF resistance detection. Besides, these methods showed a high diagnostic accuracy, with the area under the SROC curve >0.9. Due to the high sensitivity and specificity obtained with the home-made molecular methods, some of these tests could be applied for a rapid detection of M. tuberculosis drug resistance in clinical practice.

A emergência de tuberculose (TB) multidrogas e extensivamente-resistente reativou a necessidade de contar com métodos rápidos para detectar resistência à isoniazida (INH) e rifampicina (RIF). Por isso, o objetivo deste trabalho foi a avaliação através da meta-análise, da exatidão global e da possível utilidade de métodos caseiros baseados em PCR para detectar rapidamente a resistência a INH e RIF em isolamentos clínicos de Mycobacterium tuberculosis. A pesquisa bibliográfica incluiu Medline/PubMed, Bio MedLib. Para estimar a variabilidade entre os resultados dos estudos e o grau de exatidão diagnóstica dos métodos utilizados, foram realizados gráficos "forest plot" e curvas SROC (summary receiver operating characteristic) com o software Meta-Disc. Foram selecionados 15 estudos, contendo 1311 isolamentos resistentes a INH e 953 a RIF. Para a detecção de resistência a INH, a sensibilidade e especificidade globais foram 84,0% e 96,0% respectivamente, enquanto que para a detecção de resistência a RIF esses valores foram de 92,0% e 97,0%. Alem disso, os mesmos métodos mostraram elevada exatidão diagnóstica, com áreas inferiores à curva SROC>0,9. A elevada sensibilidade e especificidade obtida através de métodos moleculares caseiros sugere que alguns deles poderiam ser aplicados para o diagnóstico rápido de resistência a partir do isolamento de M. tuberculosis.

Rapid assessment methods of resilience for natural and agricultural systems

The resilience, ecological function and quality of both agricultural and natural systems were evaluated in the mountainous region of the Atlantic Rain Forest of Rio de Janeiro through Rapid Assessment Methods. For this goal new indicators were proposed, such as eco-volume, eco-height, bio-volume, volume efficiency, and resilience index. The following agricultural and natural systems have been compared according: (i) vegetables (leaf, fruit and mixed); (ii) citrus; (iii) ecological system; (iv) cattle, (v) silvo-pastoral system, (vi) forest fragment and (vii) forest in regeneration stage (1, 2 and 3 years old). An alternative measure (index) of resilience was proposed by considering the actual bio-volume as a function of the potential eco-volume. The objectives and hypotheses were fulfilled; it is shown that there does exist a high positive correlation between resilience index, biomass, energy efficiency and biodiversity. Cattle and vegetable systems have lowest resilience, whilst ecological and silvo-pastoral systems have greatest resilience. This new approach offers a rapid, though valuable assessment tool for ecological studies, agricultural development and landscape planning, particularly in tropical countries.

Foram avaliadas, em região montanhosa da Mata Atlântica do Rio de Janeiro a resiliência, função ecológica e qualidade tanto do sistema agrícola como natural, através dos métodos de avaliação rápida ("rapid assessment methods"). Para este fim, foram propostos novos indicadores como eco-volume, eco-altura, bio-volume, eficiência volumétrica e índice de resiliência. Os seguintes sistemas agrícolas e naturais foram comparados: (i) hortaliças (folhas, frutos e mistos); (ii) citros; (iii) sistema ecológico; (iv) gado; (v) sistema silvo-pastoral; (vi) fragmento florestal; (vii) floresta em estágio de recuperação (1, 2 e 3 anos de idade). Uma forma alternativa de resiliência foi proposta considerando o bio-volume real como uma função do eco-volume potencial. Os objetivos e hipóteses foram alcançados; demonstrou-se que existe uma correlação altamente positiva entre índice de resiliência, energia da biomassa, eficiência energética e biodiversidade. Pecuária e sistemas de hortaliças apresentaram as mais baixas resiliências enquanto sistemas ecológico e silvo-pastoral tiveram maiores resiliências. Esta nova estratégia oferece uma rápida e valiosa ferramenta de avaliação para estudos ecológicos, desenvolvimento agrícola e planejamento paisagístico, especialmente em países tropicais.

Detection of salmonella sp in chicken cuts using immunomagnetic separation

The immunomagnetic separation (IMS) is a technique that has been used to increase sensitivity and specificity and to decrease the time required for detection of Salmonella in foods through different methodologies. In this work we report on the development of a method for detection of Salmonella in chicken cuts using in house antibody-sensitized microspheres associated to conventional plating in selective agar (IMS-plating). First, protein A-coated microspheres were sensitized with polyclonal antibodies against lipopolysacharide and flagella from salmonellae and used to standardize a procedure for capturing Salmonella Enteritidis from pure cultures and detection in selective agar. Subsequently, samples of chicken meat experimentally contaminated with S. Enteritidis were analyzed immediately after contamination and after 24h of refrigeration using three enrichment protocols. The detection limit of the IMS-plating procedure after standardization with pure culture was about 2x10 CFU/mL. The protocol using non-selective enrichment for 6-8h, selective enrichment for 16-18h and a post-enrichment for 4h gave the best results of S. Enteritidis detection by IMS-plating in experimentally contaminated meat. IMS-plating using this protocol was compared to the standard culture method for salmonellae detection in naturally contaminated chicken cuts and yielded 100 percent sensitivity and 94 percent specificity. The method developed using in house prepared magnetic microespheres for IMS and plating in selective agar was able to diminish by at least one day the time required for detection of Salmonella in chicken products by the conventional culture method.

A separação imunomagnética (IMS) é uma técnica que tem sido associada a diferentes métodos de detecção de Salmonella em alimentos para aumentar a sensibilidade e a especificidade e diminuir o tempo de análise. Neste trabalho é comunicada a obtenção de microesferas magnéticas sensibilizadas com anticorpos anti-Salmonella e seu uso em associação com a metodologia de cultivo convencional para desenvolver um método de detecção de salmonelas em cortes de frango (IMS-plaqueamento). Inicialmente, microesferas cobertas com proteína A foram sensibilizadas com anticorpos policlonais contra lipopolissacarídeo e flagelo de salmonelas e usadas na padronização de um procedimento que captura Salmonella Enteritidis em cultivo puro e faz posterior detecção em ágar seletivo. A seguir, amostras de carne de frango experimentalmente contaminadas com S. Enteritidis foram analisadas imediatamente após a contaminação e após 24h de refrigeração utilizando três protocolos de enriquecimento. O limite de detecção foi cerca de 2x10 UFC/mL. O protocolo que incluiu enriquecimento não-seletivo por 6-8h, enriquecimento seletivo por 16-18h e pós-enriquecimento por 4h foi o que proporcionou melhor resultado na detecção de S. Enteritidis em carne de frango experimentalmente contaminada. Este protocolo foi comparado à metodologia convencional em estudo de detecção de salmonelas em cortes de frango naturalmente contaminados e obteve 100 por cento de sensibilidade e 94 por cento de especificidade. O método desenvolvido foi capaz de diminuir em pelo menos um dia o tempo de detecção de salmonelas em cortes de frango pela metodologia convencional.