Change in malate dehydrogenase and alpha amylase activities in Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi treated granary weevil, Sitophilus granarius / Mudança nas atividades de malato desidrogenase e alfa amilase em Rubus fruticosus e gorgulho tratado com Valeriana jatamansi, Sitophilus granarius

Poor storage conditions provide favorable environment to stored grain pests for their growth. The bio-pesticides are the best alternatives to synthetic pesticides. Present study was conducted to compare toxicity of Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi against granary weevil, Sitophilus granarius and subsequent changes in enzyme activity responsible for grain damage. In current research 5 g of R. fruticosus fruit and V. jatamansi rhizome powders were tested separately against S. granarius, in 50 g wheat whole grains for seven days in comparison with the control. The enzymatic activity of malate dehydrogenase and α-amylase was observed in the cellular extracts of S. granarius. The insects were crushed and homogenized in phosphate-buffer solution and centrifuged at 10000 rpm for 5 minutes. For the enzymatic measurement supernatant was tested; the spectrophotometer was adjusted at 340 nm. The reagents were mixed and incubated at 25 °C for five minutes. The cuvettes were placed in the experimental and reference sites of spectrophotometer and recorded the change in absorbance for 3-4 minutes. There was 5.60% and 14.92% reduction in the activity of malate dehydrogenase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. The alpha amylase enzyme activity was 6.82% reduced and 63.63% increase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. Present study addresses that both plant powders are effective against granary weevil by altering enzyme activities so both the plant powders can be used as bio-pesticides against the stored grains pests.

As más condições de armazenamento proporcionam um ambiente favorável às pragas armazenadas para o crescimento. Os biopesticidas são as melhores alternativas aos pesticidas sintéticos. O presente estudo foi conduzido para comparar a toxicidade de Rubus fruticosus e Valeriana jatamansi contra gorgulhos, Sitophilus granarius e subsequentes alterações na atividade enzimática responsáveis ​​por danos aos grãos. Na pesquisa atual, 5 g de frutos de R. fruticosus e pós de rizoma de V. jatamansi foram testados separadamente contra S. granarius, em 50 g de grãos integrais de trigo por sete dias, em comparação com o controle. A atividade enzimática da malato desidrogenase e α-amilase foi observada nos extratos celulares de S. granarius. Os insetos foram esmagados e homogeneizados em solução tampão fosfato e centrifugados a 10000 rpm por 5 minutos. Para a medição enzimática, o sobrenadante foi testado; o espectrofotômetro foi ajustado a 340 nm. Os reagentes foram misturados e incubados a 25 °C por cinco minutos. As cubetas foram colocadas nos locais experimentais e de referência do espectrofotômetro e registradas as alterações na absorbância por 3-4 minutos. Houve redução de 5,60% e 14,92% na atividade da malato desidrogenase em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. A atividade da enzima alfa amilase foi reduzida em 6,82% e aumento de 63,63% em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. O presente estudo aborda que ambos os pós de plantas são eficazes contra o gorgulho do celeiro, alterando as atividades enzimáticas, de modo que ambos os pós de plantas possam ser usados ​​como biopesticidas contra pragas de grãos armazenados.

Change in malate dehydrogenase and alpha amylase activities in Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi treated granary weevil, Sitophilus granarius

Abstract Poor storage conditions provide favorable environment to stored grain pests for their growth. The bio-pesticides are the best alternatives to synthetic pesticides. Present study was conducted to compare toxicity of Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi against granary weevil, Sitophilus granarius and subsequent changes in enzyme activity responsible for grain damage. In current research 5 g of R. fruticosus fruit and V. jatamansi rhizome powders were tested separately against S. granarius, in 50 g wheat whole grains for seven days in comparison with the control. The enzymatic activity of malate dehydrogenase and -amylase was observed in the cellular extracts of S. granarius. The insects were crushed and homogenized in phosphate-buffer solution and centrifuged at 10000 rpm for 5 minutes. For the enzymatic measurement supernatant was tested; the spectrophotometer was adjusted at 340 nm. The reagents were mixed and incubated at 25 °C for five minutes. The cuvettes were placed in the experimental and reference sites of spectrophotometer and recorded the change in absorbance for 3-4 minutes. There was 5.60% and 14.92% reduction in the activity of malate dehydrogenase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. The alpha amylase enzyme activity was 6.82% reduced and 63.63% increase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. Present study addresses that both plant powders are effective against granary weevil by altering enzyme activities so both the plant powders can be used as bio-pesticides against the stored grains pests.

Resumo As más condições de armazenamento proporcionam um ambiente favorável às pragas armazenadas para o crescimento. Os biopesticidas são as melhores alternativas aos pesticidas sintéticos. O presente estudo foi conduzido para comparar a toxicidade de Rubus fruticosus e Valeriana jatamansi contra gorgulhos, Sitophilus granarius e subsequentes alterações na atividade enzimática responsáveis por danos aos grãos. Na pesquisa atual, 5 g de frutos de R. fruticosus e pós de rizoma de V. jatamansi foram testados separadamente contra S. granarius, em 50 g de grãos integrais de trigo por sete dias, em comparação com o controle. A atividade enzimática da malato desidrogenase e -amilase foi observada nos extratos celulares de S. granarius. Os insetos foram esmagados e homogeneizados em solução tampão fosfato e centrifugados a 10000 rpm por 5 minutos. Para a medição enzimática, o sobrenadante foi testado; o espectrofotômetro foi ajustado a 340 nm. Os reagentes foram misturados e incubados a 25 °C por cinco minutos. As cubetas foram colocadas nos locais experimentais e de referência do espectrofotômetro e registradas as alterações na absorbância por 3-4 minutos. Houve redução de 5,60% e 14,92% na atividade da malato desidrogenase em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. A atividade da enzima alfa amilase foi reduzida em 6,82% e aumento de 63,63% em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. O presente estudo aborda que ambos os pós de plantas são eficazes contra o gorgulho do celeiro, alterando as atividades enzimáticas, de modo que ambos os pós de plantas possam ser usados como biopesticidas contra pragas de grãos armazenados.

Effect of glutamine on the mRNA level of key enzymes of malate-aspartate shuttle in the rat intestine subjected to ischemia reperfusion / Efeito da glutamina sobre o nível de RNA Mensageiro das enzimas-chave do ciclo malato-aspartato no intestino de ratos submetidos à isquemia e reperfusão

PURPOSE: To determine the effects of oral L-glutamine (L-Gln) and the dipeptide l-alanyl-glutamine (L-Ala-Gln) upon the activity of the malate-aspartate shuttle in the rat distal small intestine following ischemia and reperfusion. METHODS: Seventy-two Wistar rats (350-400g), were randomized in 2 groups (n = 36): group S (Sham) and Group T (Treatment) and divided into 12 subgroups (n = 6): A-A6, and B1-B6. The subgroups A1-A3 were subjected to sham procedures at 30 and 60 minutes. Thirty minutes before the study, rats were treated with calcium caseinate, 0.5g/Kg (subgroups A1, A4, B1, B4), L-Gln, 0.5g / kg (subgroups A2, A5, B2 and B5) or L-Ala-Gln, 0.75g/Kg (subgroups A3, A6, B3, B6), administered by gavage. Ischemia was achieved by clamping the mesenteric vessels, delimiting a segment of bowel 5 cm long and 5 cm apart from the ileocecal valve. Samples were collected 30 and 60 minutes after start of the study for real-time PCR assay of malate dehydrogenases (MDH1-2) and aspartate-aminotransferases (GOT1-2) enzymes. RESULTS: Tissue MDH and GOT mRNA expression in intestinal samples from rats preconditioned with either L-Gln or L-Ala-Gln showed no significant differences both during ischemia and early reperfusion. CONCLUSION: Activation of the malate-aspartate shuttle system appears not to be the mechanism of glutamine-mediated elevation of glucose oxidation in rat intestine during ischemia/reperfusion injury.

OBJETIVO: Determinar os efeitos da administração oral de L-glutamina (L-Gln) e do dipeptídeo L-alanil-glutamina (L-Ala-Gln) sobre a atividade do ciclo malato-aspartato no intestino delgado distal de ratos após isquemia/reperfusão. MÉTODOS: Setenta e dois ratos Wistar (350-400g) foram randomizados em 2 grupos (n = 36): T grupo S (Sham) e grupo (Tratamento) e distribuídos em 12 subgrupos (n = 6): A-A6, e B1-B6. Os subgrupos A1-A3 foram submetidos a procedimentos "sham" aos 30 e 60 minutos. Trinta minutos antes do estudo, os ratos foram tratados com caseinato de cálcio, 0,5 g/kg (subgrupos A1, A4, B1 e B4), L-Gln, 0,5 g/kg (subgrupos A2, A5, B2 e B5) ou L-Ala -Gln, 0,75g/kg (subgrupos A3, A6, B3, B6), administrado por gavagem. A isquemia foi obtida por pinçamento dos vasos mesentéricos, delimitando um segmento do intestino cinco centímetros de comprimento e 5 cm da válvula ileocecal. Amostras foram coletadas aos 30-60 minutos para ensaio de PCR em tempo real das enzimas malato desidrogenases (MDH1-2), aspartato-aminotransferase (GOT1-2). RESULTADOS: A expressão de MDH e GOT mRNA nas amostras provenientes do intestino delgado de ratos pré-condicionados com L-Gln ou L-Ala-Gln não apresentou diferenças significativas, tanto durante a isquemia como na fase inicial de reperfusão. CONCLUSÃO: Ativação do ciclo malato-aspartato não parece ser o mecanismo de elevação glutamina-mediada da oxidação da glicose no intestino de ratos durante a isquemia / reperfusão.