Chalcones to control Alternaria alternata in murcott tangor fruits / Chalconas no controle de Alternaria alternata em frutos de tangor murcote

Alternaria brown spot (ABS), caused by the fungus Alternaria alternata pathotype tangerine, is one of the main phytosanitary problems for mandarin growers. About 15 applications per year of harmful fungicides are required for controlling ABS disease in citrus orchards. As chalcones seem to be less toxic to humans and environment than the commercial fungicides in use, this study initially aimed at synthesizing 137 chalcones through aldolic condensations between benzaldehydes and acetophenones. The resulting chalcones were screened for activity against A. alternata through a fungal growth assay that was carried out in 96-cell polypropylene plates, using the same concentration to all studied substances. The four active chalcones underwent conidia germination and mycelial growth, which confirmed the antifungal activity of the compounds. These chalcones were then poured onto Murcott tangor fruit that had been inoculated with conidia of the fungus. All four chalcones reduced the ABS progress to values significantly smaller (P0.05) than that observed for the control. Statistical calculations showed that the best results were afforded by two compounds, bearing a 2,4,5-trimethoxyphenyl group at position 3 of prop-2-enal and a 3-nitro- or 3-hydroxyphenyl group at position 1 of the aldehyde. Such compounds reduced the incidence of the disease in Murcott tangor fruit to values that did not differ statistically from those obtained with a commercial fungicide.

A mancha marron de Alternaria (MMA), causada pelo fungo Alternaria alternata patótipo tangerina, é um dos maiores problemas fitossanitários dos produtores de tangerina. Aproximadamente 15 aplicações de fungicidas de elevada periculosidade, por ano, são necessárias para o controle de MMA em várias plantações de citros. Como as chalconas parecem menos tóxicas para os seres humanos e para o ambiente que os fungicidas comerciais atualmente em uso, este estudo teve como objetivo inicial sintetizar 137 chalconas através da condensação aldólica de benzaldeídos com acetofenonas. As atividades das chalconas resultantes contra A. alternata foram avaliadas através do emprego de teste de crescimento fúngico em placas de polipropileno com 96 cavidades, empregando a mesma concentração para todas as substâncias estudadas. As quatro chalconas mais ativas foram submetidas a testes de germinação de conídios e de crescimento micelial, que confirmaram as atividades antifúngicas dos compostos selecionados. Estes foram então, aplicados em frutos de tangor Murcote que tinham sido inoculados com conídios do fungo. Todas as quatro chalconas reduziram o progresso de MMA a valores significativamente inferiores (P0.05) ao observado para o controle. Cálculos estatísticos mostraram que os melhores resultados foram obtidos para dois compostos, que tinham um grupo 2,4,5-trimetoxifenil na posição 3 do prop-2-enal e um grupo 3-nitro- ou 3-hidroxifenil na posição 1 do aldeído. Tais compostos reduziram a incidência da doença em frutos de tangor Murcote a valores que não diferiam estatisticamente do obtido com um fungicida comercial.

Comparison of methodologies for conidia production by Alternaria alternata from citrus / Comparação de metodologias para produção de conídios por Alternaria alternata do citros

Conidia production is a problem in the study of Alternaria alternata from citrus. Thus, this study aimed to compare existing methodologies for conidial production of A. alternata isolated from Ponkan tangerine (2 isolates), Cravo lemon (1 isolate), Pêra orange (2 isolates) and Murcott tangor (1 isolate). The methodologies used were conidia production with 12 and 24 hours under white fluorescent light, evaluation with 24 and 48 hours after applying fungal mycelium stress technique, cold stress followed by injury of mycelium and evaluation with 24 hours, using healthy vegetable tissue and the use of black fluorescent near ultraviolet (NUV) lamp. Satisfactory result was obtained with A. alternata isolate from Murcott tangor, with the production of 2.8 x 10(5) conidia mL-1, when fungal mycelium was stressed (Petri dish with 66.66 percent of fungi growth) and subsequently 24 h of growth. The use of white light (24 h) and black fluorescent NUV lamp also induced expressive conidia production by one isolate of Ponkan tangerine, which produced 17.2 x 10(5) and 10.1 x 10(5) conidia mL-1 and another of Murcott tangor, which produced 13.9 x 10(5) and 10.1 x 10(5) conidia mL-1, respectively. The remaining methodologies analyzed in this study were not able to induce conidia production in satisfactory quantity. The use of both mycelium stress technique and white light (24 h) and black fluorescent NUV lamp allowed the production of enough quantities of conidia to be used in vitro (detection of fungitoxic substances)and in vivo (pathogenicity test)assays, respectively.

A produção de conídios consiste em problema no estudo de Alternaria alternata do citros. Assim, este estudo objetivou comparar metodologias existentes para a produção de conídios de A. alternata por dois isolados de tangerina Ponkan, um de limão Cravo, dois de laranja Pêra e um de tangor Murcott. As metodologias empregadas foram a produção de conídios com 12 e 24 horas sob luz branca, avaliação com 24 e 48 horas após estressamento do micélio do fungo, choque térmico com imediato estressamento do micélio e avaliação com 24 horas, produção de conídios pelo emprego de tecido vegetal sadio e o emprego de luz negra ultravioleta. Produção satisfatória de conídios foi obtida com o isolado de A. alternata de tangor Murcott, a qual foi de 2,8 x 10(5) conídios mL-1, mediante emprego da técnica de estressamento da colônia e cultivo do fungo por 24 horas. Os empregos de luz branca (24 h) e negra ultravioleta promoveram expressiva produção de conídios por um isolado de tangerina Ponkan, a qual foi de 17,2 x 10(5) e 10,1 x 10(5) conidios mL-1 e por outro de tangor Murcott, a qual foi de 13,9 x 10(5) e 10,1 x 10(5) conídios mL-1, respectivamente. As outras metodologias analisadas neste estudo não foram capazes de induzir a produção de conídios em quantidade satisfatória. Com o emprego das técnicas de estressamento do micélio e a utilização de luz branca (24 h) e negra ultravioleta, tornou-se possível obter quantidades de conídios suficientes para serem utilizadas em testes in vitro (detecção de substâncias fungitóxicas)e in vivo (testes de patogenicidade), respectivamente.