Small Molecules Accelerate Skin Wound Healing: Shikonin Efficacy and Mechanism of Action in Mice / Las Moléculas Pequeñas Aceleran la Curación de Heridas en la Piel: Eficacia de Shikonin y Mecanismo de Acción en Ratones

SUMMARY: The objective of this study was to investigate the therapeutic wound healing potential and molecular mechanisms of shikonin as small molecules in vitro. A mouse burn model was used to explore the potential therapeutic effect of shikonin; we traced proliferating cells in vivo to locate the active area of skin cell proliferation. Through the results of conventional pathological staining, we found that shikonin has a good effect on the treatment of burned skin and promoted the normal distribution of skin keratin at the damaged site. At the same time, shikonin also promoted the proliferation of skin cells at the damaged site; importantly, we found a significant increase in the number of fibroblasts at the damaged site treated with shikonin. Most importantly, shikonin promotes fibroblasts to repair skin wounds by regulating the PI3K/AKT signaling pathway. This study shows that shikonin can effectively promote the proliferation of skin cell, and local injection of fibroblasts in burned skin can play a certain therapeutic role.

El objetivo de este trabajo fue investigar el potencial terapéutico de cicatrización de heridas y los mecanismos moleculares de la shikonina como moléculas pequeñas in vitro. Se utilizó un modelo de quemaduras en ratones para explorar el posible efecto terapéutico de la shikonina; Rastreamos las células en proliferación in vivo para localizar el área activa de proliferación de células de la piel. A través de los resultados de la tinción para patología convencional, encontramos que la shikonina tiene un buen efecto en el tratamiento de la piel quemada y promueve la distribución normal de la queratina de la piel en el sitio dañado. Al mismo tiempo, la shikonina también promovió la proliferación de células de la piel en el sitio dañado. Es importante destacar que encontramos un aumento significativo en la cantidad de fibroblastos en el sitio dañado tratado con shikonina. Lo más importante es que la shikonina promueve la función reparadora de fibroblastos en las heridas de la piel regulando la vía de señalización PI3K/ AKT. Este estudio muestra que la shikonina puede promover eficazmente la proliferación de células de la piel y que la inyección local de fibroblastos en la piel quemada puede desempeñar un cierto papel terapéutico.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2’:4’,2”-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-¹ representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ‘: 4’, 2 ” - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-¹ representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg/ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia / Análise espectral, citotoxicidade in vitro e estudos antibacterianos de princípios bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius, uma árvore comum de Jazan, Arábia Saudita

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2"-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p< 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 " - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p < 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Spectral analysis, in vitro cytotoxicity and antibacterial studies of bioactive principles from the leaves of Conocarpus lancifolius, a common tree of Jazan, Saudi Arabia

Abstract The objective of the present study was to analyse the bioactive compounds of the leaves of Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). The GC-MS analysis of the hot methanolic extract of the leaves (HMEL) of C. lancifolius exhibited the bioactive compounds such as 1-(3-Methoxy-2-nitrobenzyl) iso quinoline, morphin-4-ol-6,7-dione, 1-bromo-N-methyl-, phytol, hexadecanoic acid, 2,3-dihydroxypropyl ester, 2,2':4',2-terthiophene, ethyl iso-allocholate, caryophyllene oxide, campesterol, epiglobulol, cholestan-3-ol, 2-methylene-, (3á,5à)-, dasycarpidan-1-methanol, acetate (ester) and oleic acid, eicosyl ester. The FT-IR analysis of HMEL of C. lancifolius showed a unique peak at 3184, 2413, 1657 cm-1 representing coumaric acid, chlorogenic acid and ferulic acid. The HMEL of C. lancifolius was actively inhibiting the proliferation of breast cancer cells MCF-7 ATCC at the concentration of 72.66 ± 8.21 µg/ml as IC50 value. The HMEL of C. lancifolius also revealed a good spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial cultures screened in this work. The activity observed has shown more or less similar effects against screened bacteria. However, the magnitude of potentiality was significantly lesser compared to standard ciprofloxacin disc at p 0.001 level (99% confidence intervals). Furthermore, the study demonstrating the bioactive compounds can be isolated from the leaves of C. lancifolius.

Resumo O objetivo do presente estudo foi analisar os compostos bioativos das folhas de Conocarpus lancifolius (C. lancifolius). A análise por GC-MS do extrato metanólico quente das folhas (HMEL) de C. lancifolius exibiu os compostos bioativos como 1- (3-Metoxi-2-nitrobenzil) isoquinolina, morfina-4-ol-6,7- diona, 1-bromo-N-metil-, fitol, ácido hexadecanoico, 2,3-di-hidroxipropil éster, 2,2 ': 4', 2 - tertiofeno, isoalocolato de etil, óxido de cariofileno, campesterol, epiglobulol, colestano -3-ol, 2-metileno-, (3á, 5à) -, dasycarpidan-1-metanol, acetato (éster) e ácido oleico, éster eicosílico. A análise FT-IR de HMEL de C. lancifolius mostrou um pico único em 3184, 2413, 1657 cm-1 representando ácido cumarico, ácido clorogênico e ácido ferúlico. O HMEL de C. lancifolius inibiu ativamente a proliferação de células de câncer de mama MCF-7 ATCC na concentração de 72,66 ± 8,21 µg / ml como valor de IC50. O HMEL de C. lancifolius também revelou bom espectro de atividade contra culturas de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas rastreadas neste trabalho. A atividade observada mostrou efeitos mais ou menos semelhantes contra bactérias rastreadas. No entanto, a magnitude da potencialidade foi significativamente menor em comparação com o disco de ciprofloxacina padrão em nível de p 0,001 (intervalos de confiança de 99%). Além disso, o estudo demonstrando os compostos bioativos pode ser isolado das folhas de C. lancifolius.

Estratégias anti-aging baseadas em moléculas químicas naturais como potentes ativadores de telomerase / Anti-aging strategies based on natural chemical molecules as potent telomerase activators / Estrategias antienvejecimiento basadas en moléculas químicas naturales como potentes activadores de la telomerasa

Mesmo em tempos modernos, os grandes avanços tecnológicos não permitem de forma comprovada retardar o envelhecimento nos seres humanos. Neste sentido, uma das estratégias é o uso moléculas químicas naturais que possuem a ação de ativadores de telomerase, uma vez de que a telomerase é uma ribonucleoproteína transcriptase reversa que possui a função de alongar os telômeros e neutralizar a erosão normal dos telômeros. Neste contexto, este estudo de revisão dedicou-se a aprofundar o conhecimento sobre o uso de moléculas químicas naturais derivadas de plantas que possuem função de ativadores de telomerase para atividade anti-aging. Inúmeras moléculas têm sido propostas e, estudas os seus mecanismos com o intuito de desenvolver novas ferramentas para prevenir/retardar e tratar doenças relacionadas a idade e o envelhecimento. Adicionalmente, o uso de moléculas como ativadores da telomerase têm sido um meio de prolongar o encurtamento dos temoleros, como no caso, de moléculas isolada da erva Astragalus membranaceus (TA-65), curcumina, silbinina e alicina; ademais, outras moléculas de origem natural possuem atividade anti-aging comprovadas, conforme reportadas nesta revisão. Sendo assim, a procura por biomarcadores à base de compostos químicos naturais que estimulem a telomerase, a fim de prolongar a vida dos telômero e assim, retardar o processo de envelhecimento do organismo têm despertado o interesse de diversos pesquisadores ao redor do mundo.

Even in modern times, the great technological advances do not allow in a proven way to delay aging in humans. In this sense, one of the strategies is the use of natural chemical molecules that have telomerase activators, since telomerase is a ribonucleoprotein reverse transcriptase that has the function of lengthening telomeres and neutralizing the normal erosion of telomeres. In this context, this review study was dedicated to deepening the knowledge about the use of natural chemical molecules derived from plants that have telomerase activator function for anti-aging activity. Numerous molecules have been proposed and their mechanisms studied in order to develop new tools to prevent/delay and treat aging-related diseases. Additionally, the use of molecules as telomerase activators has been a means of prolonging the shortening of temolers, as in the case of molecules isolated from the herb Astragalus membranaceus (TA-65), curcumin, silbinin and allicin; in addition, other molecules of natural origin have proven anti-aging activity, as reported in this review. Therefore, the search for biomarkers based on natural chemical compounds that stimulate telomerase in order to prolong the life of telomeres and, thus delay the aging process of the organism has aroused the interest of several researchers around the world.

Aún en los tiempos modernos, los grandes avances tecnológicos no permiten de manera comprobada retrasar el envejecimiento en los humanos. En este sentido, una de las estrategias es el uso de moléculas químicas naturales que tengan activadores de la telomerasa, ya que la telomerasa es una ribonucleoproteína transcriptasa inversa que tiene la función de alargar los telómeros y neutralizar la erosión normal de los telómeros. En este contexto, este estudio de revisión se dedicó a profundizar en el conocimiento sobre el uso de moléculas químicas naturales derivadas de plantas que tienen función activadora de la telomerasa para la actividad antienvejecimiento. Se han propuesto numerosas moléculas y se han estudiado sus mecanismos para desarrollar nuevas herramientas para prevenir/retrasar y tratar enfermedades relacionadas con el envejecimiento. Adicionalmente, el uso de moléculas como activadores de la telomerasa ha sido un medio para prolongar el acortamiento de temolers, como es el caso de moléculas aisladas de la hierba Astragalus membranaceus (TA-65), curcumina, silbinina y alicina; además, otras moléculas de origen natural han demostrado actividad antienvejecimiento, como se reporta en esta revisión. Por ello, la búsqueda de biomarcadores basados en compuestos químicos naturales que estimulen la telomerasa para prolongar la vida de los telómeros y así retrasar el proceso de envejecimiento del organismo ha despertado el interés de varios investigadores a nivel mundial.

Inibidores de JAK no tratamento da dermatite atópica / JAK inhibitors in the treatment of atopic dermatitis

A dermatite atópica é a doença inflamatória cutânea mais prevalente mundialmente. A via JAK/STAT tem papel importante no mecanismo da doença e as pequenas moléculas inibidores de JAK são fármacos com grande potencial de uso na dermatite atópica. Foi realizada uma revisão sistemática da literatura na base de dados PubMed, utilizando os termos "atopic dermatitis" e/ou "JAK inhibitors" e/ou "small molecules" entre 2017 e 2022. Foram incluídos os resultados disponíveis de estudos de fase 3, avaliando o uso de inibidores de JAK em apresentações tópicas e sistêmicas. Entre 646 estudos, foram selecionados 37 em humanos que avaliaram a eficácia e segurança dos inibidores de JAK. Os resultados do uso, quando bem indicados, mostraram-se positivos e em alguns casos superiores a outros tratamentos já preconizados para o controle da dermatite atópica, com um bom perfil de segurança.

Atopic dermatitis is the most common inflammatory skin disease worldwide. The JAK/STAT pathway plays an important role in the disease mechanism, and small-molecule JAK inhibitors are drugs with great potential for use in atopic dermatitis. We systematically reviewed PubMed using the search terms "atopic dermatitis" AND/OR "JAK inhibitors" AND/OR "small molecules" for studies published between 2017 and 2022. Results from phase III trials evaluating both topical and systemic application of JAK inhibitors were included. Of 646 studies retrieved, 37 evaluating the efficacy and safety of JAK inhibitors in humans were selected for analysis. When properly indicated, the use of JAK inhibitors yielded positive results, some of which were superior to those of recommended treatments for the control of atopic dermatitis, with a good safety profile.

In silico approach of antiviral compounds potentials for SARS-CoV-2 and SARS-CoV and drug-like property predictions / Enfoque in silico de potenciales compuestos antivirales para SARS-CoV-2 Y SARS-CoV y predicción de propiedades drug-like

SUMMARY Introduction: SARS-CoV-2 (Coronavirus 2 of the severe acute respiratory syndrome; previously 2019-nCoV) and SARS-CoV (coronavirus of the severe acute respiratory syndrome) are closely related viruses, which have no treatment so far. Therefore, the search for new molecules is essential. Objectives: The objective of this study is to use in silico approach to propose antiviral compounds potential for SARS-CoV-2 and SARS-CoV and drug-like properties predictions. Materials and methods: Molecular docking were performed using AutoDock Vina with the molecules that had previously demonstrated drug-like properties. Subsequently, amino acids and the type of interaction involved in the protein-ligand complex were identified. Results: It was possible to identify six potential candidates available in the PubChem database capable of interacting with the 6U7 and 2GTB proteases, which bind to the same active site that lopinavir and remdesivir. Conclusion: Small molecules with drug-like properties could be used as antivirals, after experimental evaluations.

RESUMEN Introducción: Los coronavirus SARS-CoV-2 (coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave de tipo 2; previamente identificado como 2019-nCoV) y SARS-CoV (coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave) son virus estrechamente relacionados, que no tienen tratamiento hasta el momento. Por lo tanto, la búsqueda de nuevas moléculas es esencial. Objetivos: El objetivo de este estudio es utilizar un enfoque in silico para proponer potenciales compuestos antivirales para el SARS-CoV-2 y el SARS-CoV y predicciones de propiedades "drug-like". Materiales y métodos: El acoplamiento molecular se realizó utilizando "AutoDock Vina" con las moléculas que previamente habían demostrado propiedades similares a los fármacos. Posteriormente, se identificaron los aminoácidos y el tipo de interacción involucrada en el complejo proteína-ligando. Resultados: fue posible identificar seis candidatos potenciales disponibles en la base de datos PubChem capaces de interactuar con las proteasas 6U7 y 2GTB, que se unen al mismo sitio activo al que se unen lopinavir y remdesivir. Conclusiones: Moléculas pequeñas con propiedades similares a los fármacos podrían usarse como antivirales, después de evaluaciones experimentales.

Uso de Biomateriales Funcionalizados con Moléculas Bioactivas en la Ingeniería Biomédica / Use of Functionalized Biomaterials with Bioactive molecules in Biomedical Engineering

Resumen El artículo expone la importancia del uso de moléculas bioactivas para la funcionalización de biomateriales. Por esta razón, se realizó una revisión de investigaciones actuales y relevantes en diversos buscadores de datos, incluyendo los diferentes tipos de materiales y moléculas bioactivas utilizadas para elaborar biomateriales funcionalizados, con énfasis en los procesos y sus propiedades. Se encontró que el proceso de funcionalización o modificación de la superficie expande el camino para adaptar al biomaterial de acuerdo al entorno fisiológico de las células vivas. De esta manera, el proceso mejora la estructura y las funciones de los tejidos y órganos diseñados. Existen una variedad de métodos y moléculas bioactivas disponibles para la funcionalización de los biomateriales, las cuales dependen de la manera en las que las células o tejidos se regeneran. Entre los diferentes materiales para la fabricación de biomateriales, las biomoléculas como las proteínas, lípidos, carbohidratos, entre otros, son una de las opciones más utilizadas debido a la similitud de estas con los sistemas biológicos del cuerpo humano. Finalmente, el artículo también integra algunas de las más prometedoras aplicaciones de moléculas bioactivas incorporadas a los biomateriales.

Abstract The paper exposes the importance of the use of bioactive molecules for the functionalization of biomaterials. For this reason, a review of current and relevant research was carried out in various data searchers, including the different types of bioactive materials and molecules used to elaborate functionalized biomaterials, with emphasis on the processes and their properties. It was found that the process of functionalization or modification of the surface expands the path to adapt the biomaterial according to the physiological environment of living cells. This process improves the structure and functions of the designed tissues and organs. There are a variety of methods and bioactive molecules available for the functionalization of biomaterials, depending on the way in which the cells or tissues are regenerated. Among the different materials for the manufacture of biomaterials, biomolecules such as proteins, lipids, carbohydrates, among others, are one of the most used options due to the similarity of these with the biological systems of the human body. Finally, the paper also integrates some of the most promising applications of bioactive molecules incorporated into biomaterials.

BIOFILMS AND EXTRACTS FROM BACTERIA PRODUCING "QUORUM SENSING' SIGNALING MOLECULES PROMOTE CHEMOTAXIS AND SETTLEMENT BEHAVIORS IN Hydractinia Symbiolongicarpus (Cnidaria: Hydrozoa) LARVAE / Biopelículas y extractos de bacterias que producen moléculas de señalización de "Quorum Sensing' promueven comportamientos de quimiotaxis y asentamiento en larvas de Hydractinia symbiolongicarpus (Cnidaria: Hydrozoa)

ABSTRACT Many sessile marine invertebrates have life cycles involving the development of larvae that settle on specific substrates to initiate metamorphosis to juvenile forms. Although is recognized that bacterial biofilms play a role in this process, the responsible chemical cues are beginning to be investigated. Here, we tested the role of substrate-specific bacteria biofilms and their Quorum Sensing Signaling Molecule (QSSM) extracts on chemotaxis and settlement of larvae from Hydractinia symbiolongicarpus, a hydroid that grows on gastropod shells occupied by hermit crabs. We isolated and taxonomically identified by 16S rDNA sequencing, 14 bacterial strains from shells having H. symbiolongicarpus. Three isolates, Shigella flexneri, Microbacterium liquefaciens, and Kocuria erythromyxa, were identified to produce QSSMs using biosensors detecting N-acyl-L-homoserine lactones. Multispecies biofilms and QSSM extracts from these bacteria showed a positive chemotactic effect on H. symbiolongicarpus larvae, a phenomenon not observed with mutant strains of E. coli and Chromobacterium violaceum that are unable to produce QSSMs. These biofilms and QSSMs extracts induced high rates of larval attachment, although only 1 % of the attached larvae metamorphosed to primary polyps, in contrast to 99 % of larvae incubated with CsCl, an artificial inductor of attachment and metamorphosis. These observations suggest that bacterial QSSMs participate in H. symbiolongicarpus substrate selection by inducing larval chemotaxis and attachment. Furthermore, they support the notion that settlement in cnidarians is decoupled into two processes, attachment to the substrate and metamorphosis to a primary polyp, where QSSMs likely participate in the former but not in the latter.

RESUMEN Muchos invertebrados marinos sésiles tienen ciclos de vida que involucran el desarrollo de larvas que se asientan en sustratos específicos iniciando su metamorfosis a formas juveniles. Aunque es conocido que biopelículas bacterianas participan en este proceso, las señales químicas responsables hasta ahora se empiezan a investigar. Aquí evaluamos el papel de biofilms bacterianos y sus extractos de moléculas de señalización de "Quorum Sensing' (QSSM) sobre la quimiotaxis y el asentamiento larvario en Hydractinia symbiolongicarpus, un hidrozoario que crece sobre conchas de gastrópodos ocupadas por cangrejos ermitaños. Nosotros aislamos e identificamos taxonómicamente por secuenciación de rDNA 16S 14 cepas bacterianas de conchas con H. symbiolongicarpus. Tres de ellas, Shigella flexneri, Microbacterium liquefaciens, and Kocuria erythromyxa, mostraron producción de QSSMs usando biosensores que detectan N-acil-L-homoserin lactonas. Biopelículas y extractos de QSSMs de estas bacterias mostraron efectos quimiotácticos sobre larvas de H. symbiolongicarpus, efecto no observado en ensayos con cepas mutantes de E. coli y Chromobacterium violaceum que son incapaces de producir QSSMs. Las biopelículas y sus extractos indujeron adhesión larvaria sobre superficies, aunque solamente el 1 % de las larvas asentadas hicieron metamorfosis hacia pólipo primario, en contraste con 99 % de larvas incubadas con CsCl, un inductor artificial de asentamiento y metamorfosis. Estas observaciones sugieren que QSSMs de biopelículas bacterianas participan en la selección de sustrato de H. symbiolongicarpus, induciendo quimiotaxis y asentamiento de sus larvas. También sugieren que el asentamiento en cnidarios tiene dos procesos, adhesión y metamorfosis, donde las QSSMs participarían en el primero, pero no en el segundo.

Nature as a source of drugs for ophthalmology / Natureza como fonte de drogas para oftalmologia

ABSTRACT Nature has always provided an unlimited source of biologically-active compounds. Since the beginning of mankind, humans have sought resources in fauna and flora to treat eye diseases. However, it was only after the Industrial Revolution that extracts of plants and substances of animal origin could be used safely, as has been determined by controlled interventional studies. Two major challenges faced by ocular pharmacology are the following: developing drugs that are able to reduce blindness due to glaucoma; and controlling the pain associated with eye surgery. The search for a drug that effectively lowers intraocular pressure and controls the progression of glaucoma has led to the development of various ocular hypotensive agents, such as physostigmine from the Physostigma venenosum plant. The anesthetic properties of cocaine, extracted from Erythroxylon coca, finally enabled surgical procedures in the eye. Several new natural compounds have been investigated in an attempt to identify substances with the potential to provide additional benefits to eye tissue and vision. Emerging evidence of anti-inflammatory, wound-healing, antimicrobial, antioxidant, antitumor, and antiangiogenic properties attributed to plant extracts and animal tissues has encouraged more investment in research in this area. Despite technological advances in synthesizing drugs, the pharmaceutical industry still seeks new active compounds from natural sources as well as from revisiting already-established naturally derived compounds. Although a large number of naturally-occurring compounds is known, this review article focuses on the bioactive substances with scientifically-proven benefits for ocular tissues.

RESUMO A natureza sempre se forneceu uma fonte inesgotável compostos biologicamente ativos. Desde o início da humanidade, os homens buscaram recursos na fauna e flora para tratar as doenças oculares. Porém, foi somente após a Revolução Industrial que extratos de plantas e substâncias de origem animal puderam ser utilizados com segurança, como foi determinado por estudos controlados de intervenção. Dois grandes desafios enfrentados pela farmacologia foram: desenvolver drogas capazes de reduzir a cegueira pelo glaucoma; e controlar a dor associada à cirurgia ocular. A busca por uma droga que efetivamente reduza a pressão intraocular e controle a progressão do glaucoma levou ao desenvolvimento de diversos hipotensores oculares, como a physostigmine da planta Physostigma venenosum. As propriedades anestésicas da cocaína, extraídas da Erythroxylon coca, finalmente permitiram procedimentos cirúrgicos no olho. Vários novos compostos naturais foram investigados na tentativa de identificar substâncias com potencial para fornecer benefícios adicionais ao tecido ocular e à visão. Evidências emergentes de propriedades anti-inflamatórias, de cicatrização de feridas, antimicrobianas, antioxidantes, antitumorais e antiangiogênicas atribuídas a extratos de plantas e tecidos animais estimularam mais investimentos em pesquisas nessa área. Apesar dos avanços tecnológicos na síntese de drogas, a indústria farmacêutica ainda busca novos princípios ativos a partir de fontes naturais, bem como revisita drogas derivadas já estabelecidas. Embora um grande número de compostos que ocorrem naturalmente seja conhecido, este artigo de revisão concentra-se nas substâncias bioativas com benefícios cientificamente comprovados para os tecidos oculares.

Biosurfactant production by fungi as a sustainable alternative / Produção de biossurfactantes por fungos como uma alternativa sustentável

A wide variety of bacteria is far more exploited than fungi as biosurfactants (BS) or bioemulsifiers (BE), using renewable sources. BS are considered to be environmentally safe and offer advantages over synthetic surfactants. However, the BS yield depends largely on the metabolic pathways of the microorganisms and the nutritional medium. The production of BS or BE uses several cultural conditions, in which a small change in carbon and nitrogen sources affects the quantity of BS or BE produced. The type and quantity of microbial BS or BE produced depend mainly on the producer organism, and factors such as carbon and nitrogen sources, trace elements, temperature and aeration. The diversity of BS or BE makes it interesting to apply them in the pharmaceutical and cosmetics industries, agriculture, public health, food processes, detergents, when treating oily residues, environmental pollution control and bioremediation. Thus, this paper reviews and addresses the biotechnological potential of yeasts and filamentous fungi for producing, characterizing and applying BS or BE.(AU)

Uma grande variedade de espécies bacterianas é bem mais explorada que os fungos como agentes biossurfactantes (BS) ou bioemulsificantes (BE), usando fontes renováveis. Os BS são considerados ecologicamente seguros e oferecem vantagens sobre os surfactantes sintéticos. Entretanto o rendimento de BS depende grandemente das vias metabólicas dos micro-organismos e do meio nutricional. A produção de BS ou BE utiliza várias condições culturais, em que uma pequena alteração nas fontes de carbono e nitrogênio afeta a produção de BS. O tipo e a quantidade de BS ou BE microbianos produzidos dependem principalmente do organismo produtor e de fatores como fontes de carbono e nitrogênio, oligoelementos, temperatura e aeração. A diversidade de BS ou BE torna-os interessantes para aplicação nos campos farmacêutico, cosmético, da agricultura, da saúde pública, em processos alimentares, detergentes, no tratamento de resíduos oleosos, no controle de poluição ambiental e na biorremediação. Assim, a presente revisão aborda o potencial biotecnológico de leveduras e fungos filamentosos para produção, caracterização e aplicações de BS ou BE.(AU)

Nueva transferencia de cianometacrilato de muy baja viscosidad curado por luz ultravioleta en un modelo in vitro de corazón de oveja inmerso en solución salina y la técnica de pincelado / Novel Transfer of Very-low Viscosity Ultraviolet Light Curable Cyan Methacrylate on a Saline Immersed In-vitro Sheep Heart Model and the Paintbrush Technique

Objetivo: Desarrollar una nueva técnica para la transferencia de cianometacrilato de muy baja densidad sobre las superficies internas y externas del corazón. Material y métodos: Se combinó el cianometacrilato curado por luz ultravioleta de muy baja densidad con colorante comercial para demostrar su capacidad de transferencia sobre las superficies externas e internas de un modelo de corazón in vitro. Se mezclaron 0,5 ml de cianometacrilato con 0,2 ml tinta, y el material se inyectó sobre la superficie del corazón en aire seco, lo que permite su fijación durante 2-3 seg. A continuación, toda la preparación se sumergió en solución salina y se agitó vigorosamente para eliminar el compuesto no ligado. Se realizó un experimento similar sin cianometacrilato y con cianometacrilato de alta viscosidad (3000 cps). Se comprobó visualmente después del lavado que una cantidad significativa del compuesto se liga a las superficies del corazón en comparación con la tinta sola. Luego, se investigó la transferencia efectiva del compuesto a las superficies internas y externas del corazón después de haber sumergido el tejido en solución salina. Entre diversas técnicas, la de pincelado fue la más efectiva para la transferencia orientada del compuesto. Mediante esta técnica fue muy fácil transferir el compuesto sobre las superficies endocárdica y epicárdica. También otras áreas específicas, como la orejuela auricular izquierda, las superficies internas del ventrículo izquierdo en el origen del músculo papilar y el ápex ventricular izquierdo, fueron investigadas exitosamente. La fuente de luz ultravioleta fue un dispositivo en forma de lapicera basado en un diodo emisor de luz. Luego del tratamiento con luz ultravioleta, se observó cierta precipitación del compuesto en algunas zonas. El experimento se repitió con tres muestras para determinar el resultado. Conclusiones: La transferencia de cianometacrilato de muy baja viscosidad curado por luz ultravioleta es potencialmente útil para el estudio de las superficies internas y externas del corazón. Esta técnica podría servir para la transferencia de factor de crecimiento.

Background: Cyan methacrylate is a compound with remarkable adhesion properties used in different specific areas, including medicine, where it can be applied in some entities and is also subject of research in the field of cardiology Objective: The aim of this study was to develop a novel technique for the transfer of very-low viscosity cyan methacrylate on the inner and outer surfaces of the heart. Methods: Very-low viscosity ultraviolet curable cyan methacrylate was mixed with commercially available dye to demonstrate its ability of transfer on the inner and outer surfaces of an in-vitro heart model. Cyan methacrylate (0.5 ml) was mixed with 0.2 ml of ink, and the material was injected on the surface of the heart in dry air, allowing its fixation for 2-3 seconds. Subsequently, the whole preparation was immersed in saline, and was vigorously shaken to remove the unbound compound. A similar experi-ment was performed without cyan methacrylate, and with high viscosity cyan methacrylate (3000 cps). A significant amount of the compound was visually found to attach to the surfaces of the heart compared with ink alone. Then, after soaking the tissue in saline solution, effective transfer of the compound was assessed on the inner and the outer surfaces of the heart. Results: Among various techniques, the paintbrush technique was the most effective one for the targeted transfer of the com-pound. With this specific areas, such as instead of specific areas, as technique, it was easier to transfer the compound on the epicardial and endocardial surfaces. Also, other specific areas, as the left atrial appendage, the left ventricular inner surfaces at the origin of the papillary muscle and the left ventricular apex were successfully investigated. The ultraviolet light source was a pen-shaped device based on a light emission diode. Some compound precipitation was observed in some areas following ultraviolet treatment. The experiment was repeated with three different samples to determine the results. Conclusions: Very-low viscosity ultraviolet curable cyan methacrylate transfer is potentially useful to study the inner and outer surfaces of the heart. This technique could be useful for growth factor transfer.

Utilidad del conocimiento de la mucosa oral como órgano blanco para inducir farmacoinmunoterapia. revisión sistemática / Knowledge of oral mucosa as a tarjet organ to induce pharma- immunotherapy

La mucosa bucal ha sido utilizada en Medicina como órgano blanco para inducir moléculas farmacológicas, inmunomoduladoras y vacunas. Tales prácticas se han basado en "investigaciones científicas avaladas por sus resultados" y en la "Medicina basada en la evidencia". Hoy en día ambas terapias se aplican como prácticas correctas. Sin embargo, es posible establecer la pregunta siguiente: ¿Son conocidas, previamente, las características específicas de la mucosa oral y sus variantes? Para obtener una respuesta satisfactoria, se presenta una revisión sistemática de calidad, consultando en la bibliografía las cualidades específicas de la mucosa bucal.(AU)

Oral mucosa have been used in Medicine as a tarjet organ to induce pharmacological, immuno modulated molecules and vaccines .Such practices have been based on the scientific investigations results, and by "Evidence Based Medicine (EBM)". Today both therapies are applied as corrected practice. However, it´s possible to establish the following question: ¿There are known, previously, the specific characteristics of oral mucosa and its variants which could benefit or interfere the results? In order to identify relevant studies about this request, it´s present a systematic review of quality, consulting .specific bibliography.(AU)

The mile-stone of PET radiopharmaceuticals development / Hitos en el desarrollo de los radiofármacos PET

The positron emitting nuclides were already tried in 1940's as in vivo radio-tracers in the research field of medical biology. In 1976, the discovery of 18FDG with the developing of a positron imaging device, allowed to obtain the image of the human brain by PET technology. Today, 18FDG is widely used in tumour diagnosis by a metabolic trapping mechanism, which is a new concept for functional imaging and makes possible the monitoring of the therapy process. This is first milestone of PET radiopharmaceutical development. The second milestone is the establishment of a molecular imaging method in nuclear medicine and third, is the development of the theragnostic concept of radiopharmaceuticals. At present highlight works are focused in tau protein imaging for Alzheimer disease diagnosis and inflammation imaging

Los núclidos emisores de positrones fueron tratados en 1940 como radiotrazadores in vivo en el campo de las investigaciones biomédicas. En 1976, el descubrimiento de 18FDG, con el desarrollo de un equipo de imagenología positrónica, facilitó la obtención de imágenes del cerebro humano mediante la aplicación de la tecnología PET. En la actualidad, el 18FDG tiene amplia utilización en el diagnóstico de tumores mediante el mecanismo de captura metabólica. Este mecanismo es un concepto nuevo para la obtención de imágenes funcionales lo que permite realizar el monitoreo de los procesos terapéuticos. Este es el primer hito del desarrollo de radiofármacos PET. El segundo hito lo constituye el establecimiento del método de imagen molecular en la medicina nuclear. El tercer hito es el desarrollo del concepto teragnóstico de los radiofármacos. En el momento actual los trabajos principales están enfocados a la imagen de proteínas tau para el diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer y las imágenes de inflamaciones

Molecular imaging of cancer microenvironment / Imagen molecular del microentorno del cáncer

In the last decades, researchers have been focusing on cancer cells looking for novel targets, however, tumours grow in a host environment that either contribute to or inhibit tumour expansion and metastatization. Several efforts have been focused on cancer microenvironment for diagnostic and therapeutic purposes. Nuclear medicine can contribute to understand the complexity and role of tumour microenvironment by imaging several of its components (chemokine receptors, immune cells, stromal antigens, vascular factors, etc). In a tumour, each microenvironment component offers many potential targets for several drugs or radiopharmaceuticals. Cancer may be studied using different strategies from different viewpoints: imaging tumour markers or differentiating markers for diagnostic purposes in order to plan personalized therapies (receptor agonists or superagonists); imaging tumour stroma and vascularization to monitor cell adhesion, metastases, angiogenesis and hypoxia; imaging the host response of cancer cells to monitor efficacy of immunotherapeutic strategies

En las últimas décadas los investigadores han centrado su atención en la observación de las células cancerosas, en búsqueda de nuevos sitios blanco. Sin embargo, el crecimiento del tumor se produce en un entorno que, o inhibe, o contribuye a la expansión del tumor y su metástasis. Varios esfuerzos han estado enfocados al estudio del microentorno del cáncer, con propósitos diagnósticos o terapéuticos. La Medicina Nuclear puede contribuir a la comprensión de la complejidad y del papel que juega el microentorno del tumor, mediante la obtención de las imágenes de varios de sus componentes (receptores de quimioquinas, células inmunes, antígenos del estroma, factores vasculares, etc.). En un tumor, cada componente del microentorno ofrece muchos blancos potenciales para varias drogas o radiofármacos. El cáncer puede ser estudiado mediante diferentes estrategias y enfoques: mediante la imagen de marcadores tumorales, o la diferenciación de estos, con propósitos diagnósticos a fin de planificar terapias personalizadas (receptores agonistas o superagonistas); mediante la imagen del estroma del tumor y la vascularización, para monitorear la adhesión celular, la metástasis, la angiogénesis y la hipoxia; mediante la imagen de la respuesta del huésped de las células cancerosas, con el objetivo de monitorear la eficacia de las estrategias inmunoterapéuticas

Implicancias clínicas de metiltransferasas de moléculas pequeñas / Clinical implications of small molecule-methyltransferases / Implicações clínicas de metiltransferases de pequenas moléculas

Se encaran las metilaciones naturales y aquellas patológicas relacionadas con disfunciones en el metabolismo de un carbono (C1) correspondiente a los ciclos de folato y de metionina. Dado que las enzimas que intervienen en este tipo de reacciones son las metiltransferasas, se analizan las correspondientes a humanos, y mamíferos en general, dependientes de S-adenosil-L-metionina (SAMe). Un papel importante corresponde a las llamadas metiltransferasas de moléculas pequeñas, las cuales fueron dejadas de lado durante años, pero han resurgido pues algunas intervienen en procesos de alteración de la percepción en humanos. En este trabajo se pone énfasis en la importancia clínica de la activación y/o inhibición de algunas metiltransferasas de moléculas pequeñas, con ejemplos referidos a: feniletanolamina-N-metiltransferasa, catecol-O-metiltransferasa (COMT), histamina-N-metiltransferasa, 5-hidroxiindol-O-metiltransferasa (HOMT) e indoletilamina-N-metiltransferasa (INMT). Se hace un análisis histórico de las metiltransferasas que actúan sobre sustratos indólicos, con énfasis en indol-N-metiltransferasas, en particular indoletilamina-N-metiltransferasa, con sus características y localización, así como su importancia en esquizofrenia. A continuación se analiza la posible etiología de la esquizofrenia, destacando las disfunciones y deterioros generados en los ciclos de folato y de metionina. En este aspecto se analizan las implicancias clínicas de la metilación, con énfasis en la disfunción serotoninérgica en esquizofrenia, ejemplificando con investigaciones de este laboratorio en pacientes y en conejos.

Natural methylations, and those pathological related with dysfunctions in one-carbon metabolism involving the folate and methionine cycles are addressed herein. Since the enzymes that catalyze these reactions are methyltransferases, we analyze those S-adenosyl-L-methionine (SAMe)-dependent enzymes occurring in humans, and mammals in general. An important role is played by the so-called small-molecule methyltransferases, which were neglected for years, but have reappeared as some of them are involved in altering perception in humans. In this work the clinical importance of the activation and/or inhibition of some small-molecule methyltransferases is emphasized, illustrated by reference to phenylethanolamine N-methyltransferase, catechol O-methyltransferase (COMT), histamine N-methyltransferase, 5-hydroxyindole O-methyltransferase (HOMT), and indoleethylamine N-methyltransferase (INMT). A historical analysis of methyltransferases acting on indole substrates is carried out, with emphasis on indole N-methyltransferases, particularly characteristics and location as well as importance in schizophrenia of indoleethylamine N-methyltransferase. Then, the possible etiopathology of schizophrenia is discussed, highlighting malfunctions and damages arising from folate and methionine cycles. In this regard clinical implications of methylation are discussed, with emphasis on serotonergic dysfunction in psychiatric disorders and schizophrenia, exemplifying with research of this laboratory in patients and rabbits.

Metilação naturais, e aqueles patológicas relacionadas com disfunções no metabolismo de um carbono que envolvem os ciclos de folato e metionina são aqui abordados. Como as enzimas envolvidas nestas reacções são metiltransferases, analisamos as enzimas dependentes de S-adenosil-L-metionina (SAMe) que ocorren nos humanos e mamíferos em geral. Um papel importante é desempenhado pelos chamadas metiltransferases de pequenas moléculas, as quais foram negligenciadas por anos, mas ressurgiram como alguns deles estão envolvidos em processos de alterações de percepção em seres humanos. Neste trabalho, a importância clínica da activação e/ou inibição de algumas metiltransferases de pequenas moléculas são enfatizados, ilustrado por referência aos phenylethanolamine N-metiltransferase, catecol O-metiltransferase (COMT), histamina N-metiltransferase, 5-hidroxi-indole O-metiltransferase (HOMT) e indoletilamina N-metiltransferase (INMT). A análise histórica do methyltransferases que actuam em substratos de indole é realizada, com ênfase em indole N-metiltransferases, principalmente indoletilamina N-metiltransferase, com suas características e localização, bem como a sua importância na esquizofrenia. Em seguida, a possível etiologia da esquizofrenia é discutido, destacando as avarias e danos gerados nos ciclos de folato e metionina. Neste aspecto são discutidas as implicações clínicas de metilação, com ênfase na disfunção serotonérgica em esquizofrenia, exemplificando com a investigação deste laboratório em pacientes e coelhos.

Estudo dos processos de mobilização, ativação e apoptose das células da medula óssea em modelo de morte encefálica em ratos / Study of bone marrow cells mobilization, activation and apoptosis in brain dead rats

Estudos experimentais suportam a evidência de leucopenia persistente desencadeada pela morte encefálica (ME). OBJETIVO: Esse estudo teve como objetivo investigar o comportamento leucocitário na medula óssea e no sangue após a morte encefálica em ratos. MÉTODOS: A morte encefálica foi induzida através da inserção e insuflação rápida de um cateter no espaço intracraniano. Ratos falso-operados (FO) foram apenas trepanados. Decorridas seis horas, as células da medula óssea, coletadas da cavidade femural, foram utilizadas para as contagens total e diferencial e analisadas por citometria de fluxo para a caracterização das subpopulações linfocitárias, a expressão de moléculas de adesão granulocíticas e apoptose/necrose (método de Anexina V/Iodeto de Propídio (PI)). RESULTADOS: Ratos com ME apresentaram uma redução de 30% no número de células da medula óssea devido à redução de linfócitos (40%) e células segmentadas (45%). As subpopulações de linfócitos na medula óssea foram semelhantes nos animais ME e FO (CD3, p=0,1; CD4, p=0,4; CD3/CD4, p=0,4; CD5, p=0,4, CD3/CD5, p=0,2; CD8, p=0,8). A expressão de L-selectina e beta2-Integrinas nos granulócitos também não diferiram entre os grupos (CD11a, p=0,9; CD11b/c, p=0,7; CD62L, p=0,1). Não existem diferenças nas porcentagens de apoptose e de necrose (Anexina V, p=0,73; PI, p=0,21; Anexina V/PI, p=0,29). CONCLUSÃO: Os dados sugerem que a redução na mobilização de células da medula óssea para o sangue, desencadeada pela morte encefálica, não se relaciona a alterações de subpopulações de linfócitos, expressão de moléculas de adesão granulocíticas, ou apoptose e necrose...

Experimental findings support the evidence of a persistent leucopenia triggered by brain death (BD). AIMS: This study aimed to investigate leukocyte behavior in bone marrow and blood after BD in rats. METHODS: BD was induced by quickly inflation of an intracranial balloon catheter. Sham operated (SH) rats were trepanned only. Six hours thereafter bone marrow cells harvested from the femoral cavity were used for total and differential counts, and analyzed by flow cytometry to characterize lymphocyte subsets, granulocyte adhesion molecules expression, and apoptosis/necrosis (annexin V/propidium iodide (PI) protocol). RESULTS: BD rats exhibited a 30% reduction in bone marrow cells due to a reduction in lymphocytes (40%) and segmented cells (45%). Bone marrow lymphocyte subsets were similar in BD and SH rats (CD3, p=0.1; CD4, p=0.4; CD3/CD4, p=0.4; CD5, p=0.4, CD3/CD5, p=0.2; CD8, p=0.8). Expression of L-selectin and ?2-integrins on granulocytes did not differ (CD11a, p=0.9; CD11b/c, p=0.7; CD62L, p=0.1). There were no differences in the percentage of apoptosis and necrosis (Annexin V, p=0.73; PI, p=0.21; Annexin V/PI, p=0.29). CONCLUSIONS: Data presented suggest that the down-regulation of the bone marrow triggered by BD is not related to changes in lymphocyte subsets, granulocyte adhesion molecules expression, or apoptosis and necrosis...

Inflamacion subclinica en diabetes tipo 1 infanto-juvenil / Subclinical inflammation in children and adolescents with type 1 diabetes / Inflamação subclínica em crianças e adolescentes com diabetes tipo 1

En ninos y adolescentes con diabetes tipo 1 (DT1) puede aparecer precozmente un estado de inflamacion subclinica. El objetivo del trabajo fue determinar los niveles plasmaticos de moleculas proinflamatorias en una poblacion infanto-juvenil con DT1, sin evidencias clinicas de complicaciones vasculares y correlacionar estos parametros entre si y con el grado de control glucemico y tiempo de evolucion de la enfermedad. Se estudiaron 42 pacientes con DT1 (21M/21F), de 10 a 13 anos, que se compararon con un grupo control. Se evaluaron: recuento de leucocitos, formas solubles de E-selectina (sE-S) y molecula de adhesion celular vascular 1 (VCAM-1), mieloperoxidasa (MPO), TNF-á, Fibrinogeno (Fg) y uPCR. Los datos se expresaron como mediana y rango intercuartil. Los diabeticos presentaron niveles aumentados de: sE-S [108 (69-150) vs. 68 (52-86) ng/mL, p=0,003], VCAM-1 [785 (732-835) vs 712 (658-758) ng/mL, p=0,04], uPCR [1,00 (0,67-1,70) vs. 0,20 (0,18-0,87) mg/L, p=0,01]. No se observaron diferencias en las moleculas estudiadas segun el grado de control glucemico y tiempo de evolucion de la enfermedad. La uPCR se correlaciono con glucemia en ayunas, HbA1c, sE-S y VCAM1. Los niveles elevados de uPCR, sE-S y VCAM-1 sugieren un estado proinflamatorio asociado a activacion endotelial en ninos con DT1, potenciando el riesgo de enfermedad vascular.

In children and adolescents with type 1 diabetes (T1D), clinical manifestations of vascular complications are uncommon; however, endothelial disturbance and a pro-inflammatory state can emerge early. The objectives of this work were: I) to determine plasma levels of proinflammatory molecules in a T1D pediatric population with no clinical evidence of vascular complications; II) to correlate these parameters with each other, and with glycemic control degree and disease duration. Forty-two patients with T1D (21 M/21W), aged 10 and 13 years and an evolution time not more than 6 years were compared with a control group. The biochemical parameters evaluated were: WBC, sE-S and VCAM-1, MPO, TNF-á, hsCRP and plasma Fg. Glycemic control was performed by determining fasting glucose and HbA1c. Data were expressed as the median and interquartile range. Increased levels of sE-S [108 (69-150) vs. 68 (52-86) ng/mL, p=0.003], VCAM-1 [785 (732-835) vs. 712 (658-758) ng/mL, p=0.04], hsCRP [1.00 (0.67-1.70) vs. 0.20 (0.18- 0.87) mg/L, p=0.01] were found in diabetic patients compared with the control group. No differences in the studied molecules were observed when diabetic patients were grouped according to glycemic control degree and evolution of the disease. hsCRP correlated with fasting glucose, HbA1c, sE-S and VCAM-1. High hsCRP, sE-S and VCAM-1 levels suggest a proinflammatory state associated with endothelial activation in children and adolescents with T1D, potentiating the risk of vascular disease.

Em crianças e adolescentes com diabetes tipo 1 (DT1), um estado de inflamação subclínica pode aparecer de forma precoce. O objetivo do trabalho foi determinar os níveis plasmáticos de moléculas pró-inflamatórias em uma população infanto-juvenil com DM1 sem evidências clínicas de complicações vasculares e correlacionar estes parâmetros, entre si com o grau de controle glicêmico e tempo de evolução da doença. Foram estudados 42 pacientes com DM1 (21M/21F), de 10 a 13 anos, que foram comparados com um grupo controle. Foram avaliadas a contagem de leucócitos, formas solúveis de E-selectina (sE-S) e molécula de adesão celular vascular 1 (VCAM-1), mieloperoxidase (MPO), TNF-á, fibrinogênio (Fg) e PCRus. Os dados foram expressos como mediana e intervalo interquartil. Os pacientes diabéticos apresentaram níveis aumentados de SE-S [108 (69-150) vs. 68 (52-86) ng/mL, p=0,003], VCAM-1 [785 (732-835) vs. 712 (658-758) ng/mL, p=0,04], PCRus [1,00 (0,67-1,70) vs. 0,20 (0,18-0,87) mg/L, p=0,01]. Não foram observadas diferenças nas moléculas estudadas segundo o grau de controle glicêmico e tempo de evolução da doença. O PCRus foi correlacionado com glicemia em jejum, HbA1c, sES e VCAM1. Os níveis elevados de PCRus, sE-S e VCAM-1 sugerem um estado pró-inflamatório associado com a ativação do endotélio em crianças com DM1, aumentando o risco de doença vascular.

Actividad antimicrobiana y sinérgica de metabolitos producidos por Streptomyces erythrogriseus M10-77 de origen marino / Antimicrobial and synergetic activity of metabolites produced by marine origin Streptomyces erythrogriseus M10-77

Los metabolitos de un actinomiceto de origen marino, identificado como Streptomyces erythrogriseus cepa M10-77, fueron evaluados por su capacidad antimicrobiana y sinérgica con antibióticos convencionales. Las pruebas de antagonismo se realizaron frente a patógenos multidrogorresistentes (MDR) de origen clínico, siendo muy efectivos principalmente frente a especies patógenas de Staphylococcus y Enterococcus. Se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de extractos diclorometánicos frente a los patógenos S. aureus 1094, S. epidermidis 1093 y Staphylococcus coagulasa negativo 348, siendo estos valores de 3,9; 15,7 y 1,9 µg/mL respectivamente. Los componentes del extracto diclorometánico fueron fraccionados parcialmente, obteniéndose hasta 4 fracciones orgánicas (I, II, III, IV), las que mostraron actividades inhibitorias de la cepa referencial S. aureus ATCC 43300. Los bioensayos frente a S. aureus meticilino resistente (MRSA) mostraron actividad sinérgica de la fracción II del extracto con antibióticos betalactámicos y aminoglucósidos, resaltando la repotenciación de la actividad de la bencilpenicilina en 128 veces el valor basal; así como de la gentamicina en 8 veces sobre el valor basal. S. erythrogriseus cepa M10-77 resultó ser un productor de metabolitos antibacterianos de alta potencia y con actividad sinérgica con antibióticos de referencia médica.

Metabolites of a marine actinomycete, identified as Streptomyces erythrogriseus M10-77 strain were evaluated for antimicrobial and synergistic activity with conventional antibiotics. Antagonism tests were conducted against multidrug resistant (MDR) pathogens of clinical origin, being very effective mainly against pathogenic Staphylococcus and Enterococcus. Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) of dichloromethane extracts were determined against pathogenic S. aureus 1094, S. epidermidis and coagulase-negative Staphylococcus 1093 348, these values being 3.9; 15.7 and 1.9 μg/mL respectively. The components of dichloromethane extracts were fractionated partially yielding four organic fractions (I, II, III, IV), which showed inhibitory activity against the reference strain S. aureus ATCC 43300. The bioassays against S.aureus methicillin-resistant (MRSA ) produced synergistic activity of the extract fraction II with beta-lactams and aminoglycoside antibiotics, highlighting the upgrading of the activity of penicillin at 128 times above the baseline and gentamicin 8-fold above baseline. S. erythrogriseus M10-77 strain proved to be a producer of antibacterial metabolites with high power and synergistic activity with antibiotics of medical use.

Papel da insulina na vigência da peritonite decorrente da infecção por Staphylococcus aureus em animais diabéticos e sadios / Insulin role in peritonitis presence due to Staphylococcus aureus infection in diabetic and healthy animals

A nefropatia diabética é uma doença crônica caracterizada por falência renal, que torna necessária a hemodiálise. A diálise peritoneal é uma alternativa para a hemodiálise, porém causa peritonite e morte, principalmente devido à infecção com Staphylococcus aureus, especialmente em pacientes imunodeprimidos, como pacientes diabéticos. Nossa hipótese é que a insulina possa modular a peritonite causada por S. aureus. Para tanto, investigamos sua intervenção, após a indução de diabetes mellitus, na infecção peritoneal por cepas diferentes de S. aureus, analisando os mecanismos moleculares (produção/liberação de citocinas, expressão de moléculas de adesão) e a atividade microbicida dos macrófagos peritoneais envolvidos. Ratos Wistar, machos, diabéticos (aloxana, 42 mg/kg, i.v., 10 dias) e respectivos controles (salina, i.v.) foram submetidos à injeção intraperitoneal de uma suspensão de S. aureus (5x109 CFU/mL) ou volume equivalente de PBS estéril. Os animais foram submetidos a dois tratamentos com insulina NPH: 1) dose única (1UI e 4UI respectivamente, controle e diabético), administrada por via subcutânea; ou, 2) com 4 doses sendo a primeira administrada 2 horas antes da infecção, seguida de metade desta dose às 17 horas e no mesmo horário pelos próximos 2 dias (dose inicial 4UI e 1UI, grupo diabético e grupo controle, respectivamente), passadas 16 horas da última dose de insulina, a glicemia foi determinada e, em seguida, foi realizada eutanásia e coleta de amostras. Avaliamos: a) número de células no lavado peritoneal (LPe), leucograma e glicemia (monitor de glicose); b) níveis séricos de corticosterona e insulina (ELISA); c) concentrações de citocinas (IL-1ß, TNF-α, IL-6, IFN-γ, IL-4, IL-10, IL-12) e quimiocinas (CINC-1, CINC-2, CINC-3) no sobrenadante do LPe (ELISA); d) expressão de moléculas de adesão (P-selectina, PECAM-1, ICAM-1) no endotélio vascular (imunoistoquímica); e) atividade microbicida. Após a infecção com a cepa ATCC 25923, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento no número de leucócitos (350%) e nas concentrações de CINC-1 (1900%), IL-1ß (1300%), IFN-γ (280%), IL-4 (800%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu as concentrações de CINC-1 (17%) e IFN-γ (30%) e o leucócitos (55%); e aumentou a concentração de IL-4 (260%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu o número de leucócitos (82%) e as concentrações de CINC-1 (96%) e CINC-2 (45%); e, aumentou as concentrações de TNF-α (270%), IFN-γ (220%), IL-1ß (42%), IL-6 (760%) e a expressão de ICAM-1 (1360%); enquanto as concentrações de CINC-3, IL-10 e IL-12 não foram alteradas pelos tratamentos com insulina. Após a infecção com a cepa N315 HLA+, comparados aos não infectados, ratos diabéticos apresentaram aumento do número de leucócitos (200%), nas concentrações de CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-γ (200%) e na expressão de PECAM-1 (800%) e diminuição de CINC-2 (92%). O tratamento destes animais com dose única de insulina diminuiu a concentração de CINC-1 (85%); e aumentou a concentração de CINC-2 (2030%), IL-1ß (370%) e IL-4 (250%); enquanto o tratamento com 4 doses diminuiu a concentração de CINC-1 (92%); e, aumentou número de leucócitos (66%), as concentrações de CINC-2 (100%), IL-1ß (490%), IL-6 (1870%) e IFN-γ (330%), e os outros parâmetros não foram modificados pelos diferentes tratamentos com insulina. Estes dados sugerem que a insulina possa modular a peritonite induzida por cepas diferentes de S. aureus, controlando pelo menos em parte, o infiltrado inflamatório, a produção das citocinas CINC-1, CINC-2, IL-4, IL-6, IFN-γ, TNF-α e IL-1ß; e, consequentemente a expressão P-selectina e PECAM-1 no endotélio vascular do mesentério

Diabetic nephropathy is a chronic disease characterized by kidney failure, so hemodialysis is necessary. Peritoneal dialysis is an alternative to hemodialysis, but causes peritonitis and death primarily due to infection by Staphylococcus aureus, especially in immunocompromised patients, such as diabetics. Our hypothesis is that insulin can modulate peritonitis caused by S. aureus, therefore, we investigated its action, after diabetes induction, in peritoneal infection with different S. aureus strains, analyzing the molecular mechanisms (cytokines production/release, adhesion molecules expression) and the microbicidal activity of peritoneal macrophages involved. Wistar male diabetic (alloxan, 42 mg/kg, iv, 10 days) and their respective controls (saline,iv) were subjected to intraperitoneal injection of S. aureus suspension (5x109CFU/mL) or an equivalent volume of PBS sterile. Animals were submitted to two treatments with NPH insulin administered subcutaneously : single dose (1IU and 4IU respectively , control and diabetic) 8 hours prior to euthanasia ; or 4 doses : first dose 2 hours before infection (4IU and 1IU , diabetic and control group, respectively), then half this dose of 17 pm and in the same time for the next 2 days, after 16 hours of the last dose, blood glucose was determined, and then it was carried out euthanasia and sampling. We evaluated: a) number of cells in peritoneal wash (PW), white blood cell count and blood sugar (glucose monitor) ; b) serum insulin and corticosterone (ELISA); c) concentrations of cytokines (IL-1ß, TNF-α, IL-6, IFN-γ, IL-4, IL-10, IL-12) and chemokines (CINC -1, CINC-2, CINC-3 ) in supernatant of the SBA assay (ELISA); d) expression of adhesion molecules (P- selectin, ICAM-1, PECAM-1) in vascular endothelium ( immunohistochemistry); e) microbicidal activity. After infection with ATCC 25923 strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes number (350%) and in concentrations of CINC-1 (1900%), IL-1ß (1300%), IFN-γ (280%), IL-4 (800%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased concentrations of CINC-1 (17%) and IFN-γ (30%) and leukocytes number (55%); and increased IL-4 concentrations (260%); while treatment with 4 doses decreased leukocytes number (82%) and concentrations of CINC-1 (96%) and CINC-2 (45%); and increased concentrations of TNF-α (270%), IFN-γ (220%), IL-1ß (42%), IL-6 (760%) and expression of ICAM-1 (1360%); while the concentrations of CINC-3, IL-10 and IL-12 were not affected by treatments with insulin. After infection with N315 HLA+ strain, compared to uninfected, diabetic rats showed an increase in leukocytes (200%), concentrations of CINC-1 (1000%), IL-4 (860%), IFN-γ (200%) and in the expression of PECAM-1 (800%); and CINC-2 decrease (92%). Treatment of these animals with a single dose of insulin decreased the concentration of CINC-1 (85%); and increased concentrations of CINC-2 (2030%), IL-1ß (370%) and IL-4 (250%); while treatment with 4 doses decreased the concentration of CINC-1 (92%); and increased leukocytes number (66%), concentrations of CINC-2 (100%), IL-1ß (490%), IL-6 (1870%) and IFN-γ (330%), and other parameters were not modified by treatments with insulin. These results suggest that both S. aureus strains activate differently the innate response during peritonitis, and insulin was not always able to modulate this response