Relación in vitro entre cylindrocarpon cylindroides y neonectria fuckeliana asociados a cancros fustales de pinus radiata en Chile / In vitro relationship between cylindrocarpon cylindroides and neonectria fuckeliana associated with stem cankers on pinus radiata in Chile

Desde el punto de vista estrictamente micológico, se ha discutido por décadas la relación de Cylindrocarpon cylindroides como anamorfo de Neonectria fuckeliana, lo que entre otras consecuencias, ha incidido en la controversial ubicación taxonómica de este teleomorfo. Se añade a esto que en patología forestal se ha brindado poca atención a la presencia de C. cylindroides dentro del ciclo de la enfermedad causada por Neonectria fuckeliana en coníferas, razón por la cual los estudios específicos respecto de este anamorfo han sido también muy escasos. El presente trabajo tuvo como objetivo verificar la relación entre C. cylindroides y Neonectria fuckeliana, asociados a cancros en troncos de Pinus radiata en Chile, mediante el análisis de las características macro y micromorfológicas que ellos manifiestan en cultivos in vitro, además de análisis de tipo molecular. Se pudo constatar que ambos agentes dieron origen a colonias con idénticas características macro y micromorfológicas, destacando entre éstas la producción de abundantes conodióforos y microconidios del tipo Acremonium, el cual ya ha sido señalado en anteriores estudios como estado anamorfo de Neonectria fuckeliana. El que este mismo estado asexual del tipo Acremonium haya sido la manifestación in vitro tanto de C. cylindroides como de Neonectria fuckeliana, permitió confirmar la relación existente entre estos dos agentes en estudio, la que también fue ratificada mediante los análisis moleculares realizados.

From the point of view strictly mycological has been discussed for decades the relationship of Cylindrocarpon cylindroides as anamorph of Neonectria fuckeliana, which among other consequences, has influenced the controversial taxonomic status of this teleomorph. Add to this that in forest pathology has given little attention to the presence of C. cylindroides within the cycle of the disease caused by Neonectria fuckeliana on conifers, why specific studies regarding this anamorph have been very few. This study aimed to verify the relationship between C. cylindroides and Neonectria fuckeliana associated with cankers on trunks of Pinus radiata in Chile, by analyzing the macro and micromorphological characteristics they manifest in cultures in vitro, further analysis type molecular. It was found that both agents gave rise to colonies with identical macro and micromorphological characteristics, highlighting among them the production of abundant microconidia and conidiophores of Acremonium type, which has already been noted in previous studies as anamorph state of Neonectria fuckeliana. The asexual state that this same type of Acremonium has been the in vitro demons-tration of both C. cylindroides as Neonectria fuckeliana, allowed us to confirm the relationship between these two agents in the study, which was also ratified by the molecular analyzes performed.

Detección del sinanamorfo Cylindrocarpon cylindroides var. Tenue sobre cancros causados por Neonectria fuckeliana en Pinus radiata / Detection of sinanamorph Cylindrocarpon cylindroides var. tenue on Neonectria fuckeliana cankers in Pinus radiata

El presente trabajo tuvo por finalidad reportar y analizar la presencia de estructuras fungosas (esporodoquios) sobre cancros causados por Neonectria fuckeliana en árboles de Pinus radiata en Chile. Las muestras fueron colectadas en las Regiones de La Araucanía y de Los Ríos y fueron analizadas en el laboratorio. Los resultados de los análisis morfológicos y taxonómicos permitieron concluir que los esporodoquios hallados correspondían al sinanamorfo de Neonectria fuckeliana (forma cylindrocarpon cylindroides var tenue), siendo el primer reporte en el país. Estos antecedentes contribuyen al conocimiento y comprensión del ciclo patológico y epidemiológico de Neonectria fuckeliana en plantaciones de Pinus radiata.

The present work was aimed at reporting and analyzing the presence of fungal structures (sporodochia) present on cankers caused by Neonectria fuckeliana in Pinus radiata trees in Chile. The samples were collected in the regions of La Araucanía and Los Ríos and analyzed in the laboratory. The results of morphological and taxonomic analysis led to the conclusion that thesporodochia found corresponded to sinanamorph of Neonectria fuckeliana (cylindrocarpon cylindroides var. tenue morph), the first report in the country. This work contribute to understanding and comprehension of the disease cycle and epidemiology of Neonectria fuckeliana on plantations of Pinus radiata.

Caracterización morfológica de Acremonium sp. asociado a Neonectria fuckeliana en Pinus radiata en Chile / Morphological characterization of Acremonium-like asociated with Neonectria fuckeliana in Pinus radiata in Chile

En este estudio se realizaron los primeros aislamientos del estado asexual del patógeno Neonectria fuckeliana asociado a cancros o ®revirado del pino¼ en plantaciones de Pinus radiata. Se caracterizaron morfológicamente las cepas del sinanamorfo semejante a Verticillium (Acremonium), obtenidas en cultivo in vitro a partir de peritecios. El material para los aislamientos consistió en trozos de corteza de P. radiata con presencia de peritecios, colectados en Toltén, región de La Araucanía, lugar donde se realizó el primer reporte de N. fuckeliana en Chile. Se utilizaron diez cepas del semejante a Acremonium para la caracterización morfológica, mediciones de estructuras fúngicas, ritmo de crecimiento in vitro y morfología de las colonias. Las colonias presentaron un micelio flocoso y ralo de bordes blanquecinos e irregulares, destacándose tres tipos de colonias, blancas, naranjo oscura y naranjo claro. Taxonómicamente, las cepas coinciden con las estructuras mencionadas en la literatura, caracterizándose por la presencia de glioconidios. Las fialides midieron entre 7 – 78,4 x 1,4 - 4,9 ìm. Los conidios, de formas ovoides y algunas bicelulares, midieron entre 4,2 - 8,4 x 2,6 - 3,5 ìm. El ritmo de crecimiento in vitro fue lento, completando su desarrollo a los 19 días con un promedio de 71 +/- 0,3 mm de diámetro, a una tasa de crecimiento diario de 3,8 mm. Los resultados obtenidos hacen necesario futuros estudios de carácter molecular para analizar la variabilidad genética poblacional que puede presentarse en Chile.

First Neonectria fuckeliana isolates in Chile. Strains of Acremonium obtained from in vitro peritecia culture were morphologically characterized. The samples were collected in Toltén, La Araucanía region, were Neonectria fuckeliana was first reported in Chile. The material used for the isolation came from pieces of Pinus radiata bark with peritecia. Ten Acremonium-like strains were used for characterization of fungal structures, in vitro growth and strains morphology. The colonies were a floccose mycelium and thin edges whitish and irregular, varying color highlighting three types of strains, white, dark orange and pale orange. Taxonomically, the strains match the structures referred in the literature, characterized by the presence of gliospores. The phialides dimensions ranged from 7 to 7.8 ìm long and 1.4 to 4.9 ìm wide. The conidio of ovoid shapes and some bicelular measured between 4.2 to 8.4 ìm in length and width 2.6 and 3.5 ìm. In vitro growth rates were slow, the complete development take19 days with a daily growth average of 71 +/-3 mm in diameter, at a rate of 3.8 mm. It is necessary future molecular studies to analyze the population genetic variation that may occur in Chile.