ABSTRACT
Visando a dar suporte a trabalhos de melhoramento genético para porta-enxertos de pera e ajuste de protocolo de germinação de pólen para fins de polinização intra e interespécies, objetivou-se ajustar os componentes básicos do meio de cultura e as condições ambientais para a realização de testes de germinação in vitro e viabilidade de grãos de pólen dos porta-enxertos para pereiras 'Taiwan Nashi-C' (Pyrus calleryana) e 'Taiwan Mamenashi' (P. betulaefolia). O pólen utilizado foi obtido de anteras provenientes de flores em estádio de balão. Em seguida, com auxílio de um pincel n°2, os grãos de pólen foram espalhados sobre a superfície de placas de Petri, contendo 20ml de meio de cultura de acordo com os seguintes experimentos: 1) concentrações de sacarose (0, 30, 60 e 90g L-1) e agar (4, 6, 8 e 10g L-1); 2) concentrações de nitrato de cálcio (0, 200, 400 e 800mg L-1) e ácido bórico (0, 400, 800 e 1200mg L-1); 3) valores de pH (4,0; 4,5; 5,0; 5,5; 6,0 e 6,5); 4) temperaturas (20; 25; 30 e 35); e 5) tempo de emissão do tubo polínico (1, 2, 3, 4, 5, 6 e 12 horas após a inoculação), os quais foram montados de forma sequencial. A utilização de 10g L-1 de agar e 90g L-1 de sacarose para o porta-enxerto 'Taiwan Mamenashi' e 47,78g L-1 para 'Taiwan Nashi-C', com 795 a 838mg L-1 de ácido bórico, na ausência de nitrato de cálcio, pH entre 5,2 e 5,8 e temperatura de 28°C, proporcionou as melhores condições de germinação de grãos de grãos. A porcentagem máxima de polens germinados é obtida com oito horas após a inoculação para 'Taiwan Nashi-C' e com 12 horas para 'Taiwan Mamenashi'.
In order to support the works with genetic improvement for pear rootstocks and adjust the pollen germination protocol for intra and inter species polinization, this study aimed to adjust the culture medium basic compounds and environmental conditions for the realization of in vitro pears pollen grains germination and viability tests of 'Taiwan Nashi-C' (Pyrus calleryana) e 'Taiwan Mamenashi' (P. betulaefolia) pear rootstock. Thus, five experiments were performed: 1) Sucrose concentrations (0, 30, 60 and 90g L-1) and agar (4, 6, 8 and 10g L-1); 2) calcium nitrate (0, 200, 400 and 800mg L-1) and boric acid (0, 400, 800 and 1200mg L-1); 3) pH (4.0; 4.5; 5.0; 5.5; 6.0 and 6.5); 4) temperatures (20; 25; 30 and 35 ) and 5) emission time of the pollen tube (1, 2, 3, 4, 5, 6 and 12 hours after inoculation), which were assembled sequentially. The use of 10g L-1 of agar combined with 90g L-1 sucrose for the rootstock 'Taiwan Mamenashi' and 47.78g L-1 for the 'Taiwan Nashi-C', with 795 to 838mg L-1 of boric acid, under absence of calcium nitrate and pH between 5.2 and 5.8 and temperature of 28 °C, provided the best conditions to the germination of the pollen grains. The maximum percentage of germinated pollen is obtained with eight hours after inoculation for 'Taiwan Nashi-C' and twelve hours for 'Taiwan Mamenashi'.
ABSTRACT
This work aimed to evaluate the effect of different concentrations of calcium and ammonium nitrate on the in vitro development of orchids. Cattleya loddigesii Tipo orchid plantlets, 1.0 cm in size produced by self pollinization and also by in vitro germinated seeds, were inoculated in flasks containing 60 mL of WPM culture medium, modified with different concentrations of calcium nitrate (0, 278, 556, 834, and 1112 mg L-1) and ammonium nitrate (0, 200, 400, 600 and 800 mg L-1). The culture medium was supplemented with 20 g L-1 of sucrose, 150 g L-1 of Nanica banana pulp, activated charcoal 2 g L-1, solidified with agar 6 g L-1, and pH adjusted to 5.7 ± 0.1 before being autoclaved at 121ºC, 1.5 atm pressure during 20 minutes. After inoculations, the flasks were transferred to a growth room with controlled temperature around 25±2ºC, 16 h photoperiod regime, with a light intensity of 35 µmol m-2 s-1. After 90 days, it was observed that the best results in terms of number of leaves was achieved with 400 mg L-1 of ammonium nitrate, and the highest number of sprouts was obtained with 450 mg L-1 of ammonium nitrate, but the major number of roots was verified in the treatment with 600 mg L-1 of ammonium nitrate and 278 mg L-1 of calcium nitrate. In resume, it is recommended to use the WPM medium in its original composition, without calcium nitrate to micropropagate Cattleya loddige
Objetivou-se avaliar diferentes concentrações de nitrato de cálcio e nitrato de amônio no crescimento in vitro de orquídea. Plântulas de Cattleya loddigesii oriundas de sementes germinadas in vitro, com 1,0 cm de comprimento, foram inoculadas em frascos contendo 60 mL de meio de cultura WPM modificado em suas concentrações de nitrato de cálcio (0, 278, 556, 834 e 1112 mg L-1) e nitrato de amônio (0, 200, 400, 600 e 800 mg L-1). O meio foi acrescido de 20 g L-1 de sacarose, 150 g L-1 de polpa de banana nanica madura e 2 g L-1 de carvão ativado, pH ajustado para 5,7 ± 0,1 e solidificado com 6 g L-1 de ágar, antes da autoclavagem a 121ºC e 1,5 atm, por 20 min. Após a inoculação, os frascos foram transferidos para sala de crescimento a 25 ± 2ºC, fotoperíodo de 16h e 35 µmol m-2 s-1 de intensidade luminosa. Decorridos 90 dias, observaram-se melhores resultados para número de folhas e de brotos com 400 e 450 mg L-1 de nitrato de amônio, respectivamente, enquanto que o maior número de raízes foi obtido com 600 mg L-1 de nitrato de amônio e 278 mg L-1 de nitrato de cálcio. Recomenda-se a utilização do meio WPM em sua composição original, sem nitrato de cálcio na micropropagação desta espécie.