Doença de Alzheimer prodrômica. MCI, biomarcadores, prevenção e novas drogas / Alzheimer´s disease prodromal AD, mild cognitive impairment, prevention and new drugs

Este artigo discute dois novos conceitos: doença de Alzheimer prodrômica (DAp) e deficiência cognitiva leve / mild cognitive impairment (MCI). Aborda a questão dos biomarcadores e da perspectiva futura de tratamentos e prevenção.

Leucemia Mielóide Crônica: novas drogas em desenvolvimento / Chronic Myeloid Leukemia: development of new drugs

A LMC é um modelo de investigação biológica e clinica que deve ser seguido nesta nova fase da oncologia moderna. A resposta terapêutica ao uso do imatinibe como droga de primeira linha mudou os conceitos e paradigmas e criou uma expectativa que drogas mais potentes possam ser desenvolvidas no futuro. Infelizmente nem todos conseguem atingir essa situação ideal. Por esta razão, Baccarani M sugeriu que a falência de resposta subótima, precaução ou alerta fossem estudadas no sentido de serem desenvolvidas intervenções terapêuticas diferenciadas mais precoces. A resistência ao imatinibe existe e depende de vários mecanismos. Tanto mais tardia a introdução do imatinibe e mais avançada for a fase evolutiva da doença maior a freqüência de resistência. Do ponto de vista biológico, a superexpressão do BCR-ABL, os defeitos genéticos adicionais e as mutações que podem atingir várias regiões da molécula - a alça de fosfato, a alça de ativação, o domínio da quinase são os mais importantes fatores associados à resistência ao imatinibe. Por esta razão, são necessárias outras opções terapêuticas e hoje há o desenvolvimento de um grande número de drogas para um número maior de alvos. Inicialmente temos o dasatinibe, já aprovado nos EUA, na Europa e também no Brasil; o nilotinibe, em fase avançada de estudos clínicos (inclusive de fase III), e também já aprovado para uso nos EUA; o bosutinibe, o INNO - 406 bem como outras drogas que atuam em alvos como as aurora-quinases ou inibidores de histona-deacetilases.

Chronic Myeloid Leukemia (CML) is a model of clinical and biological investigation that may be useful for other neoplastic diseases. The therapeutic response to imatinib as the front line therapy has changed concepts and procedures in CML and has created hope concerning new more potent drugs for this and other oncological diseases that have a similar mechanism of action. However, not all patients achieve this ideal situation. Thus, Baccarani et al. suggested that cases of failure of suboptimal response, as a precaution or in warning situations should be studied in order to develop differentiated new therapies earlier. Resistance to imatinib exists and may depend of several mechanisms. Delay in its use or the advanced phase of the disease are more frequently associated with imatinib resistance. In respect to the biological point of view, over expression of the BCR-ABL gene, additional genetics abnormalities and mutations that involve other regions of the molecule (P-Loop, A-Loop or kinase dominion) are the most important factors associated to imatinib resistance. Hence, new therapeutic options are necessary in order to overcome resistance and to act on other target cells. Currently, Dasatinib was approved in the US, Europe and Brazil. Nilotinib is in advanced phase III studies and was recently approved in the US. Both Dasatinib and Nilotinib have been approved for intolerant and refractory imatinib patients. Bosutinib, INNO - 406 as well as other TK, aurora kinase and histone deacetylase inhibitors are in clinical studies and probably will be available in the future.

Estabelecimento e caracterização de linhagens celulares infectadas pelo vírus linfotrópico de célula T humana do tipo I (HTLV-I)

O vírus linfotrópico de célula T humana do tipo I (HTLV-I) está associado etiologicamente ao desenvolvimento da leucemia da célula T do adulto (LTA) e da paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTLV-I (PET/MAH). O objetivo deste trabalho foi estabelecer linhagens celulares infectadas pelo HTLV-I e caracterizá-las quanto a: a) morfologia, b) tipo celular, c) proliferação contínua sem adição de fatores de crescimento, d) demonstrar a presença do DNA proviral integrado ao genoma das células das linhagens, e) caracterizar esta integração, f) verificar a expressão de partículas virais, g) expressão de citocinas e finalmente, h) avaliar o efeito de imunossupressores na proliferação celular. Estabelecemos três linhagens infectadas pelo HTLV-I a partir de células mononucleares de pacientes portadores de LTA. Não foi utilizada a técnica de co-cultivo com células não infectadas. As culturas apresentam células dismórficas, bi e multinucleadas com figuras de mitose, uma das linhagens manteve o fenótipo de célula T, enquanto que nas duas outras não foi possível caracterizar o tipo celular predominante, tendo havido perda de todos os marcadores de superfície, e não se conseguiu demonstrar rearranjo da cadeia g do TCR. Caracterizou-se a cepa de HTLV-I em relação à seu subtipo, sendo uma cepa Cosmopolita B, mais freqüente no Japão, local de origem do paciente doador das células e as duas outras do subtipo Cosmopolita A, cepa comum em várias regiões do Globo. Demonstrou-se haver dois clones celulares nas linhagens através do estudo do local de integração do DNA proviral, entretanto não podemos afastar a possibilidade de ser um único clone com dois DNAs provirais integrados. A expressão tanto de proteínas como de partículas virais não foi significativa, somente em uma linhagem conseguiu-se mostrar partículas virais por contrastação negativa em microscopia eletrônica. As linhagens expressam de forma constitutiva três citocinas IL-10, IL-15 e IFN-g com intensidade variável. E finalmente, as três linhagens foram resistentes à ação da Ciclosporina A. O estabelecimento destas linhagens possibilitará o estudo das vias de ativação alteradas pela infecção, assim como servirão de modelo experimental terapêutico para o ensaio in vitro de novas drogas.

The human T-cell type lymphotropic virus human type I (HTLV-I) is etiologically associated to two main diseases: a malignant one, the adult T-cell leukemia (ATL) and to a progessive myelopathy, tropical spastic paraparesis/HTLV-I- associated myelopathy (TSP/HAM). The objectives of this work were the establishment of HTLV-I-infected cell lines and the analysis of these lines in the following aspects: a) morphology, b) cellular phenotype, c) continuous proliferation without exogenous growth factors, d) presence of integrated HTLV-I DNA provirus; e) the type of integration (mono, oligo or policlonal) as well as the HTLV-I subtype, f) expression of viral proteins as well as viral particles, g) expression of cytokines; and finally h) evaliation of Cyclosporin A effect on the proliferation of the lines. We established three HTLV-I transformed cell lines. We established three HTLV-I transformed cell lines. The cells are large and dimorphic, showing two or multiple nucleus; one cell line remainde with the T cell phenotype. It was not possible to characterize the two others, due to the loss of their surface markers and, it was not possible to demonstrate the TCR g chain rearrangement. Concerning the HTLV-I subtype strain, one of the cell lines harbours the Cosmopolitan B subtype, which is more frequent in Japan, the place of origin of the cells’ donor. The other two cell lines are the Cosmopolitan A subtype, common in many regions around the world. Concerning provirus integration, the cell lines are oligoclonal. We were able to demonstrate two cellular clones in the lines by study of the local site of integration, but can not exclude the possibility to be just one clone with two proviral DNAs. The viral proteins as well as viral particles were not significantly expressed. Only one cell line showed viral particles in the negative staining technique on electronic microscopy. The three cell lines constitutively express, with variable intensity, the following citokines: IL-10, IL-15 e IFN-g. The infected cells proliferated even in the presence of 1 mg/ml of Cyclosporine A. The establishment of these cells will provide a helpful tool for the study of the activation pathways altered by the infection as well as an experimental model for therapeutic drugs assays.