Antimicrobial activity of copaíba (Copaifera langsdorffii) oleoresin on bacteria of clinical significance in cutaneous wounds / Atividade antimicrobiana do óleo-resina de copaíba (Copaifera langsdorffii) em bactérias de significância clínica em úlceras cutâneas

The present study was designed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of Copaifera langsdorffii oleoresin, which has been used in folk medicine as an anti-inflammatory, antibacterial, healing among others. The oleoresin was tested against Gram-positive (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis) and Gram-negative (Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli) bacteria related to infections in cutaneous wounds. Antimicrobial activity was determined by the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) assays. Copaiba oleoresin showed antimicrobial activity only against the Gram-positive bacteria with MIC of 200 µg/mL, 400 µg/mL and 1100 µg/mL for S. aureus, S. pyogenes and E. faecalis, respectively. MBC values were the same as MIC for S. aureus and S. pyogenes and for E. faecalis it was 1200 µg/mL. Considering that infection significantly impairs the wound healing process, we believe that the use of copaiba oleoresin as a component of a topical formulation could be a valuable adjunct in the treatment of infected wounds, mainly in the case of wounds infected by Gram-positive microorganisms.

Este trabalho avaliou a atividade antimicrobiana in vitro do óleo-resina da Copaifera langsdorffii, o qual vem sendo utilizado há muitos anos na medicina tradicional popular, principalmente devido às suas propriedades antiinflamatórias, antibacterianas, cicatrizante entre outras. O óleo-resina foi testado em bactérias Gram-positivas (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis) e Gram-negativas (Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli) relacionadas com infecções de úlceras cutâneas. A atividade antimicrobiana foi determinada pelos testes da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM). O óleo-resina apresentou atividade antimicrobiana in vitro apenas para as bactérias Gram-positivas, com valores de CIM de 200 µg/mL, 400 µg/mL e 1100 µg/mL para S. aureus, S. pyogenes e E. faecalis, respectivamente. Os valores de CBM foram os mesmos que os valores de MIC para S. aureus e S. pyogenes. O valor de CBM para o microrganismo E. faecalis foi de 1200 µg/mL. Considerando que a presença de infecção significativamente impede o processo normal de cicatrização de úlceras cutâneas, acreditamos que o óleo-resina de copaíba, utilizado como componente de formulações tópicas, poderia ser um adjunto importante no tratamento de úlceras cutâneas infectadas, principalmente nos casos de infecção por microrganismos Gram-positivos.

Avaliação do efeito do óleo-resina de copaíba (Copaifera s) na proliferação celular in vitro / Effect of copaiba oleoresin (Copaifera sp) on the in vitro cellular proliferation

O óleo de copaíba é uma resina extraída pela perfuração do tronco de árvores do gênero Copaifera sp., usado como cicatrizante em várias regiões do Brasil. São comprovados seus efeitos antimicrobianos e antiinflamatórios, sem relatos de atividade sobre a proliferação celular. No presente trabalho foi observada a dinâmica da proliferação de células MDBK (Madin Darby Bovine Kidney) mantidas em meio de cultivo adicionado de diferentes concentrações do óleo de copaíba, utilizando-se como controle células mantidas em meio sem adição do oleoresina (grupo M) e células no meio com aplicação do solvente tween 80, na diluição 10-3 (grupo MT). Diluições decimais de 10-1 até 10-3 mostraram-se tóxicas e, portanto, os estudos de proliferação partiram da diluição 10-4 até 10-7. Observou-se que houve crescimento mais acelerado em todos os grupos adicionados do óleo-resina nas primeiras 24 horas, com destaque para a diluição 10-5, que teve sua taxa de proliferação 5,47 vezes maior que a do grupo M. Concluiu-se que o óleo-resina de copaíba se mostrou estimulante da multiplicação celular, o que pode ser um dos mecanismos de seu efeito positivo sobre a cicatrização, somado àqueles previamente comprovados na literatura.

Copaiba oleoresin is extracted from the trunk of Copaifera sp genus trees and used for treating wounds in several regions of Brazil. Its antimicrobial and anti-inflammatory effects have been proved, however there are no reports of activity on cell growth. Proliferation of MDBK (Madin Darby Bovine Kidney) cells was evaluated under the influence of different concentrations of Copaiba oleoresin. Control groups consisted of cells in medium without addition of oleoresin (M group) and cells in the medium with application of the solvent Tween 80 at dilution 10-3 (TM group). Decimal dilutions of 10-1 to 10-3 were shown to be toxic and, therefore, the proliferation studies were conducted from dilution 10-4 to 10-7. Cell growth was faster in all groups that received the Copaiba oleoresin dilutions in the first 24 hours, specially the 10-5 dilution group, which proliferation rate was 5,47 higher than that of M group. It was concluded that Copaiba oleoresin stimulates cell multiplication, which may be one mechanism of its positive effect on wound healing, in association with those previously known.

Detection of adulterated copaiba (Copaifera multijuga Hayne) oil-resins by refractive index and thin layer chromatography / Detecção de óleo-resinas de copaíba adulterados através do índice de refração e da cromatografia de camada delgada

The refractive indices (RI) of the eight samples of copaiba oils, collected for this study at RDS Tupé ranged from 1.50284 to 1.50786. The thin layer chromatography (TLC) plates of these oils revealed with anisaldehyde-sulphuric acid reagent showed dark lilac stains with several small stains at low Rf and a large rounded stain at high Rf. On the other hand, the twelve copaiba oils purchased at local markets presented RI between 1.48176 and 1.50886, and the TLC plates, showed as general profile blue stains, with smaller superimposed stains at low Rf, bigger superimposed stains like elongated stain at high Rf and a colorless rounded stain at middle Rf. Among 12 purchased oils at local markets, a) three oil-resins presented similar RI and TLC profile to those observed for collected copaiba oils; b) six oils showed same RI and TLC profiles to those observed for soybean oil; c) three samples presented RI near to those showed by copaiba oil-resin, however the TLC profile was near to profile observed for a prepared mixture soybean oil: copaiba oil, two samples with 3:1 proportion and one sample with 1:3 proportion. Therefore, the RI determination and the TLC profiles could be considered rapid and efficient procedures for detection of vegetal oil in the copaiba oil-resins.

Os índices de refração (IR) de oito amostras de óleo resina de copaíba coletadas para este estudo na RDS Tupé variaram de 1,50284 a 1,50786. As placas de cromatografia de camada delgada (CCD) dos óleo-resinas, reveladas com o reagente anisaldeído-ácido sulfúrico, apresentaram um perfil cromatográfico característico, com manchas em lilás escura com várias manchas menores na parte do Rf baixo e uma grande mancha arredondada, no Rf alto. Por outro lado, as doze amostras de óleo de copaíba adquiridas no mercado local apresentaram IR entre 1,48176 a 1,50886, e, as placas de CCD apresentaram como perfil característico geral manchas de cor azul, com manchas superpostas menores no Rf baixo, manchas superpostas maiores com aparência alongada no Rf alto e uma mancha arredondada incolor no Rf intermediário. Dentre os doze óleos adquiridos do mercado, a) três óleo-resinas apresentaram IR e perfil CCD semelhantes aos de amostras de óleo de copaíbas coletadas; b) seis óleos apresentaram o mesmo IR e perfil em CCD do óleo de soja; e, c) três amostras apresentaram IR semelhantes aos da amostra do Tupé, porém com o perfil cromatográfico semelhante à uma mistura de óleo de soja: óleo de copaíba, sendo duas na proporção de 3:1 e uma na proporção de 1:3. Portanto, a determinação do IR e a análise do perfil em CCD podem ser considerados ensaios rápidos e eficientes para a detecção de óleos vegetais em óleo-resina de copaíba.