Bioautography to assess antibacterial activity of Ottonia martiana Miq. (Piperaceae) on the human oral microbiota

Ottonia martiana Miq. (Piperaceae), planta conhecida popularmente por "anestésia" e empregada no tratamento de odontalgias devido à sua ação anestésica sobre a mucosa oral, foi investigada por meio de ensaios antibacterianos de difusão em disco de papel e de bioautografia frente a microorganismos presentes na microbiota oral humana [Streptococcus mutans (ATCC 25175), Streptococcus mitis (ATCC 49456), Streptococcus pyogenes (ATCC 19615), Streptococcus salivarius (ATCC 25975), Escherichia coli (ATCC 11229 e 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Enterobacter aerogenes (ATCC 27853). Os resultados dos bioensaios mostraram que o extrato bruto de O. martiana (32.9 mg mL-1) apresenta potencial antibacteriano frente às bactérias Gram-positivas testadas. Dentre as substâncias bioativas detectadas foram identificadas a piperovatina (Rf 0.35), piperlonguminina (Rf 0.52) e a isopiperlonguminina (Rf 0.52). A piperovatina e isopiperlonguminina foram isoladadas do extrato das raízes de O. martiana, guiadas pelo teste de bioautografia.

Ottonia martiana Miq. (Piperaceae), a plant known popularly in southern Brazil as "anestésia" and used in the treatment of odontalgia for its anesthetic action on the oral mucosa, was investigated for antibacterial activity by paper disc agar diffusion and bioautographic methods, against microorganisms present in the human oral cavity [Streptococcus mutans (ATCC 25175), Streptococcus mitis (ATCC 49456), Streptococcus pyogenes (ATCC 19615), Streptococcus salivarius (ATCC 25975), Escherichia coli (ATCC 11229 and 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) and Enterobacter aerogenes (ATCC 27853).The crude extract of O. martiana (32.9 mg mL-1) had antibacterial potential against all Gram-positive bacteria tested. Analysis of the bioautograms led to the detection of bioactive substances, among which it was possible to identify piperovatine (Rf 0.35), piperlonguminine (Rf 0.52) and isopiperlonguminine (Rf 0.52). The piperovatine and isopiperlonguminine were isolated from the roots of O. martiana, guided by a bioautographic antibacterial bioassay.

Effects of the Ottonia martiana Miq. (Piperaceae) extract on dog's ocular surface / Efeitos do extrato de Ottonia martiana Miq. (Piperaceae) sobre a superfície ocular de cães

The anesthetics effects of aqueous extract of Ottonia martiana leaves were studied on the ocular surface of healthy beagle dogs. The dogs were divided in three groups (n=15): control group (CG), proxymetacaine group (PG) and Ottonia group (OG), which were treated with 0.9% saline, 0.5% proxymetacaine hydrochloride ophthalmic solution and O. martiana extract respectively. An oftalmic evaluation was performed before the treatments. Eye drops were instilled at time 0 (T0) and 3 minutes later (T3). Axial corneal sensitivity was evaluated by esthesiometry 5 and 10 minutes after T0. Tear production and intraocular pressure were evaluated 10 minutes after T0. Slit lamp biomicroscopy was performed 10 and 20 minutes after T0 and the eyes were stained with fluorescein 20 minutes after T0. The STT was reduced in PG. Conjunctival hyperemia was observed in 13 animals from PG and constituted the only ocular alteration observed during the study. Esthesiometry revealed a decreased corneal sensitivity for PG and OG. Those results show that the O. martiana extract acts reducing corneal sensitivity in dogs. Moreover, its use does not decrease the tear production and does not cause any clinical ophthalmic alteration.

Estudaram-se os efeitos do extrato das folhas de Ottonia martiana sobre a superfície ocular de cães hígidos da raça Beagle. Compuseram-se três grupos de tratamento (n=15): grupo controle (GC), grupo proximetacaína (GP) e grupo Ottonia (GO), tratados, respectivamente, com solução fisiológica, colírio de cloridrato de proximetacaína a 0,5% e extrato de O. martiana. Após avaliação oftálmica inicial, os tratamentos foram realizados no tempo 0 (T0) e decorridos 3min (T3). Avaliaram-se a sensibilidade axial da córnea por estesiometria (T5 e T10) e a produção lacrimal e a pressão ocular (T10). Realizaram-se a biomicroscopia com lâmpada em fenda (T10 e T20), e o teste do tingimento pela fluoresceína (T20). Relativamente ao teste de Schirmer, observou-se diminuição nos cães do GP. Houve alteração clínica somente nos do GP, em que 13 animais apresentaram hiperemia conjuntival. Relativamente à estesiometria, houve diminuição da sensibilidade corneal nos animais do GP e do GO. Admite-se que o extrato de O. martiana age diminuindo a sensibilidade corneal em cães e que sua utilização não diminui a produção lacrimal, tampouco causa alterações clínicas oftálmicas.

Atividade antimicrobiana do extrato bruto etanólico de raízes e partes aéreas de Ottonia martiana Miq. (Piperaceae) / Antimicrobial activity of crude ethanolic extracts of Ottonia martiana Miq. (Piperaceae) roots and aerial parts

Ottonia martiana Miq., Piperaceae, conhecida na medicina popular brasileira como "anestésia", é um arbusto característico da Floresta Atlântica. Devido à ação anestésica sobre a mucosa oral, raízes e partes aéreas são popularmente utilizadas em dores de dente, na forma de alcoolaturas (bochechos) ou pela mastigação de fragmentos de partes da planta. Como os microrganismos estão adquirindo resistência aos antibióticos tradicionais, a procura por novos agentes antimicrobianos, a partir de plantas, vem sendo intensificada. Nesta perspectiva, avaliou-se o efeito antimicrobiano do extrato bruto etanólico dos órgãos totais desta espécie (EBEtOH) frente às bactérias Enterococcus faecium (ATCC 6569), Enterobacter aerogenes (ATCC 13048) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442), utilizando-se os métodos de difusão em ágar e bioautografia. Os resultados obtidos por difusão em ágar mostraram que o EBEtOH de O. martiana apresenta potencial antibacteriano contra E. faecium, evidenciado pelo aparecimento de zonas de inibição de crescimento no respectivo bioautograma e não demonstraram ação antimicrobiana contra as outras cepas testadas.

Ottonia martiana Miq., Piperaceae, known in Brazilian folk medicine as "anestésia", is an herbaceous shrub found in Atlantic Tropical Forest. Due to its anesthetic action on the mucous membranes of the mouth, roots and aerial parts are commonly used to relief toothache, usually as alcoholic macerates (mouth washing) or by chewing parts of the plant. As most microorganisms are acquiring resistance to traditional antibiotics, the search for new antimicrobials agents, specially from plants, is being intensified. Based on this, the activity of the crude ethanolic extract from roots and aerial parts (EBEtOH) of O. martiana against Enterococcus faecium (ATCC 6569), Enterobacter aerogenes (ATCC 13048) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442) was evaluated using the agar difusion and bioautographic methods. Results from the agar diffusion assay showed that O. martiana EBEtOH has a potencial effect against E. faecium, which was corroborated by the presence of inhibition zones in the bioautographic test, whereas no inhibitory action against the other assayed bacteria was observed.