Antioxidants in the control of microorganism contamination and phenol oxidation in Eugenia pyriformis / Antioxidantes no controle da contaminação microbiana e da oxidação fenólica em Eugenia pyriformis

Uvaia (Eugenia pyriformis) is a fruit tree of the Myrtaceae family. It has recalcitrant seeds of limited longevity, making seed propagation difficult. Micropropagation is an alternative method to obtain a large quantity of progeny plants in a short period of time, by using any part of the plant as explant. The high concentration of phenols associated with the chemical composition of the Myrtaceae, and the presence of microorganisms in the plant material or culture media, can make in vitro propagation difficult and/or impossible. The objective was to evaluate various concentrations of antioxidants affecting the control of microbial contamination and phenol oxidation in vitro in uvaia. A completely randomized design was used, with a 3 (antioxidants PVP, L-cysteine, and ascorbic acid) × 3 (antioxidant concentrations 100, 200, and 300 mg L-1) × 2 (activated charcoal at 0 and 2 g L-1) factorial arrangement + 2 additional variables (absence of antioxidants and activated charcoal; absence of antioxidants with 2 g L-1 activated charcoal), with three repetitions comprising four plants each. The percentage of bacterial and fungal contaminations, along with the number of oxidized explants, was evaluated after 7, 14 and 21 days of in vitro cultivation. It was concluded that, where bacterial and fungal contaminations were concerned, in vitro cultivation of uvaia can be performed without the use of antioxidants. PVP or ascorbic acid must, however be used in the process, at a concentration of 300 mg L-1, along with 2 g L-1 of activated charcoal. This helps to minimize phenol oxidation.

A uvaia Eugenia pyriformis é uma frutífera da família das mirtáceas cujas sementes apresentam longevidade curta e aspecto recalcitrante, fato que dificulta a propagação seminífera. A micropropagação surge como alternativa para obtenção de grande quantidade de mudas em curto período de tempo, por meio da utilização de qualquer parte da planta como explante. A elevada concentração de fenóis associados à composição química das mirtáceas e a presença de microrganismos no material vegetal ou no meio de cultura podem dificultar e/ou impossibilitar a propagação in vitro. Objetivou-se avaliar tipos e concentrações de antioxidantes no controle da contaminação microbiana e da oxidação fenólica in vitro de E. pyriformis. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 (antioxidantes ­ PVP, L-cisteína e ácido ascórbico) x 3 (concentrações - 100, 200 e 300 mg L-1) x 2 (carvão ativado ­ 0 e 2 g L-1) + 2 adicionais (ausência de antioxidantes e de carvão ativado; ausência de antioxidantes com 2 g L-1 de carvão ativado), com três repetições constituídas por quatro plantas. Após sete, 14 e 21 dias do cultivo in vitro foram avaliadas a porcentagem de contaminação bacteriana, fúngica e de explantes oxidados. Conclui-se que o cultivo in vitro de E. pyriformis, em relação as contaminações bacterianas e fúngicas, pode ser efetuado sem a utilização de agentes antioxidantes. Entretanto, para reduzir a oxidação fenólica deve ser utilizado o PVP ou ácido ascórbico, ambos na concentração de 300 mg L-1, associados a 2 g L-1 de carvão ativado.

pH-sensitive polyvinylpyrrolidone-acrylic acid hydrogels: Impact of material parameters on swelling and drug release

In this study, we fabricated pH-sensitive polyvinylpyrrolidone/acrylic acid (PVP/AA) hydrogels by a free-radical polymerisation method with variation in the content of monomer, polymer and cross-linking agent. Swelling was performed in USP phosphate buffer solutions of pH 1.2, 5.5, 6.5 and 7.5 with constant ionic strength. Network structure was evaluated by different parameters and FTIR confirmed the formation of cross-linked hydrogels. X-ray crystallography showed molecular dispersion of tramadol HCl. A drug release study was carried out in phosphate buffer solutions of pH 1.2, 5.5 and 7.5 for selected samples. It was observed that swelling and drug release from hydrogels can be modified by changing composition and degree of cross-linking of the hydrogels under investigation. Swelling coefficient was high at higher pH values except for the one containing high PVP content. Drug release increased by increasing the pH of the medium and AA contents in hydrogels while increasing the concentration of cross-linking agent had the opposite effect. Analysis of the drug release mechanism revealed non-Fickian transport of tramadol from the hydrogels.

Nesse estudo, preparamos hidrogéis de polivinilpirrolidona/ácido acrílico(PVP/AA), sensíveis ao pH, por meio de método de polimerização de radical livre, com variações no conteúdo de monômero, de polímero e de agente de ligação cruzada. O inchamento foi realizado em soluções tampão fosfato USP pH 1,2, 5,5, 6,5 e 7,5, com força iônica constante. A estrutura reticular foi avaliada por diferentes parâmetros e o FTIR confirmou a formação de hidrogéis de ligação cruzada. A cristalografia de raios X mostrou dispersão molecular do cloridrato de tramadol. Realizou-se estudo de liberação do fármaco em soluções tampão fosfato pH 1,2, 5,5 e 7,5 para amostras selecionadas. Observou-se que o inchamento e a liberação do fármaco dos hidrogéis podem ser modificados mudando-se a composição e o grau de ligação cruzada dos hidrogéis em estudo. O coeficiente de inchamento foi alto em pH mais altos, exceto para um deles com alto conteúdo de PVP. A liberação do fármaco aumentou com o aumento do pH do meio e do conteúdo em AA nos hidrogéis, enquanto que o aumento na concentração do agente de ligação cruzada apresentou efeito oposto. A análise do mecanismo de liberação do fármaco revelou transporte não Fickiano do tramadol dos hidrogéis.

An improved method for genomic DNA extraction from strawberry leaves / Otimização de um método para extração de DNA genômico a partir de folhas de morangueiro

Several extraction methods of genomic DNA for identification and characterization of genetic diversity in different plant species are routinely applied during molecular analysis. However, the presence of undesirable compounds such as polyphenols and polysaccharides is one of the biggest problems faced during the isolation and purification of high quality DNA in plants. Therefore, achievement of fast and accurate methods for DNA extraction is crucial in order to produce pure samples. Leaves of strawberry genotypes (Fragaria ananassa) have high contents of polysaccharides and polyphenols which increase the sample viscosity and decrease the DNA quality, interfering with the PCR performance. Thereby, in this study we evaluated the quality and amount of genomic DNA extracted from young leaves of strawberry after tissue lyophilization and maceration in presence of polivinilpirrolidone (PVP). The CTAB method was used as reference procedure and it was modified to improve the DNA extraction. The modifications consisted of tissue lyophilization overnight until it was completely freeze-dried and addition of PVP during the tissue maceration in liquid nitrogen. The results showed the efficiency and reliability of the modified method compared to the unmodified method, indicating that combination of lyophilization and PVP improve the quality and amount of the DNA extracted from strawberry leaves.

Vários métodos de extração de DNA genômico para a identificação e caracterização da diversidade genética em diferentes espécies de plantas são rotineiramente aplicados durante a análise molecular. Entretanto, a presença de compostos indesejáveis, tais como polifenóis e polissacarídeos, é um dos maiores problemas que ocorrem durante o isolamento e purificação de DNA de alta qualidade em plantas. Dessa forma, o sucesso no desenvolvimento de métodos de extração de DNA rápidos e acurados é crucial para produzir amostras puras. Folhas de genótipos de morangueiro (Fragaria ananassa) têm elevado conteúdo de polissacarídeos e polifenóis que aumentam a viscosidade da amostra e reduzem a qualidade do DNA, interferindo no desempenho da PCR. Neste estudo, avaliamos a qualidade e a quantidade de DNA genômico extraído de folhas jovens de morangueiro após a liofilização do tecido e a maceração na presença de polivinilpirrolidona (PVP). O método CTAB foi utilizado como procedimento de referência e foi modificado para melhorar a extração do DNA. As modificações consistiram na liofilização do tecido a baixa temperatura até que ele tivesse sido desidratado completamente, associada à adição de PVP durante a maceração do tecido no nitrogênio líquido. Os resultados demonstraram a eficiência e a confiabilidade do método modificado comparado ao método não modificado, indicando que a combinação da liofilização com PVP melhora a qualidade e quantidade do DNA extraído de folhas de morangueiro.

Comparação de Dois Métodos de Antissepsia Pré-operatória de Mãos em Cirurgia Bucal / Comparison Between Two Methods of Preoperative Antisepsis of Hands in Oral Surgery

Objetivo: Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia da escovação pré-operatória, efeito imediato e residual de dois antissépticos na redução bacteriana das mãos, previamente a procedimentos cirúrgicos bucais ambulatoriais. Metodologia: Para a realização do experimento, foram selecionados 20 acadêmicos de odontologia, que participaram de quatro grupos experimentais: grupo I, utilizando o polivinilpirrolidona-iodo (PVP-I) a 10% degermante associado à técnica de escovação cirúrgica, promovendo antissepsia mecânica e química; grupo II, PVP-I a 10% e o método de lavagem cirúrgica, realizando somente antissepsia química; grupo III, clorexidina a 2% associado à técnica de escovação cirúrgica; grupo IV, clorexidina a 2% realizando a técnica de lavagem cirúrgica. Resultado: Como resultado do efeito residual, o grupo I apresentou, em média, de 71% de redução bacteriana; o grupo II apresentou 83%; o grupo III, 97% de ação antimicrobiana, e o grupo IV demonstrou aproximadamente 97% de efeito bactericida. Conclusão: Ao se observar em dois grupos que utilizaram a mesma solução antisséptica em relação ao método de lavagem cirúrgica das mãos, ou seja, sem o uso de artefatos, este apresentou resultados melhores ou, no mínimo, semelhantes quanto à redução bacteriana em relação à técnica convencional de escovação cirúrgica. Com relação à solução antisséptica, a clorexidina apresentou maior redução da carga microbiana que o PVP-I.

Purpose: The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of preoperative brushing, the immediately and residual effect of the antiseptics on bacterial reduction of hands, before the oral surgical procedures. Methodology: To the experiment, were selected 20 students of dentistry, who participated in four experimental groups: group I, using povidone-iodine (PVP-I) 10% degerming associated with hand-scrubbing, mechanical and chemical antisepsis; group II, PVP-I 10% and hand-rubbing, performing only chemical antisepsis; group III, digluconate of the chlorhexidine 2% solution degermante with hand-scrubbing; group IV, chlorhexidine 2% and hand-rubbing. Results: As a result of residual effect, the group I made on average 71% of bacterial reduction, while the group II showed 83%; group III resulted in 97% of antimicrobial action, the group IV showed approximately 97% of bactericidal effect. Conclusion: Noting that both groups used the same anti-septic solution to hand-rubbing method showed better at least similar results in bacterial reduction than hand-scrubbing. About the anti-septic solution the chlorhexidine showed greater reduction of microbial load that the PVP-I.

Citotoxicidade in vitro das membranas de hidrogel reticuladas por radiação ionizante / In vitro cytotoxicity of hydrogel membranes reticulate by ionizing radiations

Hidrogéis constituídos de poli N-vinil-2-porrolidona (PVP), ágar e polietilenoglicol (PEG) säo utilizados como membranas para uso tópico, no tratamento de lesöes de pele. Com o objetivo de melhorar algumas das propriedades mecânicas da membrana, como tensäo de ruptura e elongaçäo, substituiu-se o PEG pelo copolímero poli (dimetilsiloxano)-co-poli (óxido de etileno) (SEO). A biocompatibilidade "in vitro" das membranas de PVP-SEO com diferentes concetraçöes de SEO foi testada em cultura de células. O teste de citotoxicidade foi realizado pelo estudo comparativo de dois métodos: 1) difusäo em ágar, utilizando-se as linhagens celulares RC-IAL e NCTC Clone L-929 e 2) inibiçäo da formaçäo de colônias utilizando-se a linhagem celular CHO-K1. Os resultados obtidos nos dois métodos foram análogos e demonstraram que as membranas do PVP-SEO apresentaram toxicidade nas concentraçöes testadas e nas linhagens celulares utilizadas. Foi possível também concluir que a adiçäo de SEO ocasiona caráter citotóxico às membranas de PVP

Hydrogels composed by PVP, agar and PEG are used as wound dressings in the treatmentof skin ulcers. In order to improve the mechanical properties of the membrane, such as tensile strengthand elongation, PEG was replaced by copolymer poly (dimethilsiloxane)-co-polyoxiethylene (SEO).The "in vitro" biocompatibility evaluation of PVP-SEO membranes with different concentrations of SEOwas carried out in cell culture. A comparative study of cytotoxicity assays was performed by twomethods: 1) diffusion agar assay, using RC-IAL and NCTC Clone L-929 cells and 2) colony suppressionassay, using CHO-K1 cells. In the cytotoxic evaluation of PVP-SEO membranes by both methods,analogous results were obtained. It was also possible to conclude that the addition of SEO promotescytotoxicity in PVP membranes