Proteinase activity in latex of three plants of the family Euphorbiaceae

In the family of Euphorbiaceae, the genera Euphorbia and Sapium are known to contain essentially latex-bearing species. In the present study, the latex of Euphorbia selloi (Klotzsch & Garcke) Boiss., Euphorbia papillosa A.St.-Hil., and Sapium glandulosum (L.) Morong, plants native from Brazil, were examined concerning proteolytic activity. All studied species have proteins with significant proteolytic activity and E. papillosa has the greatest specific activity. Aiming to verify the type of protease present, an assay with different inhibitors was performed. In the three tested plants, the proteolytic activity was significantly inhibited by a serine protease inhibitor 4-(2-aminoethyl)-benzenesulfonyl fluoride hydrochloride (AEBSF). Using techniques of electrophoresis with polyacrylamide gels (SDS-PAGE), the subunits of proteins were separated according to their molecular masses, and the protein activity was visually detected by zymography.

Dentro da família Euphorbiaceae, os gêneros Euphorbia e Sapium são conhecidos por incluírem basicamente espécies produtoras de látex. No presente estudo, o látex das plantas Euphorbia selloi (Klotzsch & Garcke) Boiss., Euphorbia papillosa A.St.-Hil. e Sapium glandulosum (L.) Morong, espécies nativas do Brasil, foi analisado em relação à atividade proteolítica. Todas as amostras analisadas possuem proteínas com significativa atividade, sendo que o látex da espécie E. papillosa apresenta a maior atividade específica. Com o objetivo de analisar quais os tipos de proteases responsáveis pela atividade proteolítica, realizaram-se ensaios com diferentes inibidores. Nas três plantas testadas a atividade foi inibida significativamente pelo cloridrato de 4-(fluoreto de 2-aminoetilbenzenossulfonil) (AEBSF), um inibidor de serino-proteases. Utilizando técnicas de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), as subunidades das proteínas foram separadas de acordo com sua massa molecular e, através da zimografia, a atividade proteolítica pode ser detectada visualmente.

Infecções oportunistas por leveduras e perfil enzimático dos agentes etiológicos / Opportunistic yeast infections and enzymatic profile of the etiological agents

Infecções por leveduras são freqüentes em imunocomprometidos, contudo espécies emergentes têm alterado o perfil epidemiológico. A habilidade de secretar proteases tem sido associada à patogenicidade do gênero Candida. Esta pesquisa teve como objetivos diagnosticar leveduroses em pacientes imunocomprometidos e avaliar a virulência dos agentes etiológicos baseado em teste de secreção de protease utilizando soro de albumina bovina como substrato. Do total de 104 pacientes estudados, 19 apresentaram episódios de leveduroses. O trato respiratório (63,2 por cento), seguido pelo trato urinário (10,5 por cento) foram os locais mais comuns de infecção. Candida albicans, Candida parapsilosis, Candida tropicalis e espécies emergentes como Candida krusei e Candida guilliermondii foram isoladas. Cinco isolados de Candida parapsilosis e um de Candida albicans e Candida guilliermondii exibiram alta atividade enzimática. Concluímos que a caracterização enzimática de isolados de Candida pode ser um útil marcador prognóstico, especialmente em imunocomprometidos, uma vez que leveduroses nestes pacientes são geralmente graves.

Yeast infections are common in immunocompromised patients, although emerging species have been changing the epidemiological profile. The ability to secrete proteinases has been associated with pathogenicity within the genus Candida. This study had the aims of diagnosing yeast infections in immunocompromised patients and evaluating the virulence of the etiological agents, based on a proteinase secretion assay using bovine serum albumin as a substrate. Out of a total of 104 patients studied, 19 presented episodes of yeast infection. The respiratory tract (63.2 percent), followed by the urinary tract (10.5 percent), were the most common sites of infection. Candida albicans, Candida parapsilosis, Candida tropicalis and emerging species such as Candida krusei and Candida guilliermondii were isolated. Five isolates of Candida parapsilosis and one of Candida albicans and Candida guilliermondii exhibited high enzymatic activity. We conclude that enzymatic characterization of Candida isolates may be a useful prognostic marker, especially among immunocompromised individuals, since yeast infections in such patients are generally serious.