DETERMINATION OF SEROPREVALENCE OF SWINE CYSTICERCOSIS AND IDENTIFICATION OF HUMAN TENIASIS IN PIG CREATING PERSONS IN THE URBAN AREA Ω OF THE COYAIMA TOLIMA MUNICIPALITY / Determinación de la seroprevalencia de cisticercosis porcina e identificación de teniasis humana en personas criadoras de cerdos en el área urbana del municipio de coyaima tolima / Determinação da seroprevalência da cítica e sua identificação da teniase humana no pig criando pessoas na área urbana do município de coyaima tolima

Introducción: La cisticercosis porcina causada por la etapa larval de Taenia solium, ocasiona graves pérdidas económicas para sus tenedores y un riesgo para la salud pública en Colombia y en el mundo especialmente en Asia, África y otros países de Latino América. Esta parasitosis se propaga con facilidad en zonas con condiciones higiénicas sanitarias, ambientales y socio económicas precarias. Objetivo: Determinar la seroprevalencia de cisticercosis porcina empleando el ensayo inmunoenzimático (ELISA) y la detección de teniasis humana por examen coproparasitológico en personas criadoras de cerdos en el área urbana. Materiales y Métodos: Se tomó muestra de sangre a 102 porcinos por punción en el pabellón auricular y se impregnaron en discos de papel de filtro para detectar anticuerpos anticisticerco empleando la técnica de ELISA con la fracción antigénica de 53kDa. A los tenedores de porcinos y demás participantes conformado por un grupo de 159 personas, se les solicitó una muestra de heces, que fue conservada en reactivo de Mertiolate Yodo Formol al 5%(MIF). Se preservó a 4°C, para su procesamiento se empleó la técnica de concentración de formol-éter, el diagnóstico se realizó por observación microscópica con objetivo de 40X. Resultados: De los 102 porcinos, el 17% (17/102) presentaron anticuerpos anticisticerco. Con respecto a las variables sociodemográficas del estudio se observó mayor asociación con fuentes de agua, pacientes teniásicos, condiciones ambientales, tipo de alimentación. La prevalencia general de parasitismo intestinal en los criadores fue de 43.3%, y en el 1.9% (3/159) se hallaron huevos de Taenia spp, Se identificó a las fuentes de agua y la tenencia de porcinos como variable estadísticamente significativa (p≤0,005) con la presencia de parasitismo intestinal en la comunidad. Conclusión: El estudio reveló un valor significativo de seroprevalencia de cisticercosis porcina en el área evaluada, ocasionando un serio problema de salud pública en la comunidad coyaimuna.

Introduction: Swine cysticercosis caused by the larval stage of Taenia solium, causes serious economic losses for their holders and a risk to public health in Colombia and the world, especially in Asia, Africa and other Latin American countries. This parasitic disease is spread easily in areas with hygienic sanitary, environmental and socio economic precarious. Objective: determine the seroprevalence of cysticercosis swine using the essay Enzyme Immunoassay (ELISA) and the detection of taeniasis human by test coproparasitologic in people brooders of pigs in the area urban. Materials and methods: Took blood sample to swine 102 puncture the pinna and they impregnated filter paper disks to detect Flisser antibodies using the ELISA technique with 53kDa antigenic fraction. To them holders of pigs and others participating conformed by a group of 159 people, is les requested a shows of Lee that was preserved in reagent of Mertiolate iodine formalin to the 5% (MIF). Is preserved to 4 ° C, for its processing is employed the technical of concentration of formol-eter, the diagnosis is made by observation microscopic with objective of 40 X. Results: Of the 102 pigs, the 17% (17 / 102) presented antibodies Flisser. With respect to the variable socio-demographic of the study is observed greater association with sources of water, patient's teniasicos, conditions environmental, type of power. The general prevalence of intestinal parasitism in the breeders was 43.3% and 1.9% (3/159) found eggs of Taenia spp., identified the sources of water and holding of pigs as variables statistically significant (p≤0. 005) with the presence of intestinal parasitism in the community. Conclusion: The study revealed a significant value of seroprevalence of porcine cysticercosis in the evaluated area, causing a serious problem of public health in the community coyaimuna.

Introdução: Cisticercose porcina causada pelo estágio larval de Taenia solium, provoca sérias perdas econômicas para os seus titulares e um risco para a saúde pública na Colômbia e no mundo, especialmente na Ásia, África e outros países da América Latina. Esta doença parasitária é disseminada facilmente em áreas com higiene higiênica, ambiental e socioeconômica precária. Objetivo: Determinar a soroprevalência de cisticercose porco utilizando o ensaio imunoenzimático (ELISA) e a detecção de taeníase humana por teste coproparasitológico em pessoas criadas por porcos na área urbana. Materiais e métodos: Tomou amostras de sangue para suínos 102 perfurando o pinna e impregnaram discos de papel de filtro para detectar anticorpos Flisser usando a técnica ELISA com fração antigênica de 53kDa. A eles, titulares de porcos e outros participantes, conformados por um grupo de 159 pessoas, solicitase um show de Lee que foi preservado em reagente de Mertiolate iodine formalin a 5% (MIF). É preservada a 4 ° C, para o processamento é empregada a técnica de concentração de formol eter, o diagnóstico é feito por observação microscópica com objetivo de 40 X. Resultados: Dos 102 porcos, 17% (17/102) apresentaram anticorpos Flisser. Com relação à variável sociodemográfica do estudo, observase maior associação com fontes de água, teniasicos do paciente, condições ambientais, tipo de poder. A prevalência geral de parasitismo intestinal nos criadores foi de 43,3% e 1,9% (3/159) encontraram ovos de Taenia spp., Identificaram as fontes de água e a retenção de porcos como variáveis estatisticamente significativas (p≤0. 005) com a presença De parasitismo intestinal na comunidade. Conclusões: O estudo revelou um valor significativo de seroprevalência de cisticercose porcina na área avaliada, causando um grave problema de saúde pública na comunidade coyaimuna.

Obtención de anticuerpos monoclonales de ratón contra proteasa de cisteína 5 recombinante de Entamoeba histolytica / Production of monoclonal antibodies against cysteine protease 5 of Entamoeba histolytica

Objetivo. Obtener anticuerpos monoclonales de ratón contra la proteasas de cisteína 5 (EhCP5) de Entamoeba histolytica. Materiales y métodos. Se inmunizaron ratones BALB/c por vía intraperitoneal con adyuvante de Freund completo e incompleto con la proteína recombinante EhCP5 obtenida a partir del cultivo de E.coli DH5α trasfectada con el vector recombinante pJC45 que expresa dicha proteína. Se seleccionó el animal con mejor respuesta de anticuerpos. Al cual se le extrajo su bazo como fuente de linfocitos B, los cuales se fusionaron utilizando PEG con células de mieloma de ratón SP2-0/Ag14. Se procedió a selección de los hibridomas y a la evaluación de los sobrenadantes de las colonias que crecieron a los 7 días mediante ELISA. Los hibridomas con valores más altos de anticuerpos específicos contra la proteína EhCP5r se seleccionaron, y los clones obtenidos por diluciones limitantes fueron expandidos. Resultados. A partir de un clon secretor estable se purifico el anticuerpo monoclonal anti EhCP5r del isotipo IgG1 por cromatografía de afinidad con proteína G. Los clones fueron expandidos in vivo ein vitro. Con el anticuerpo purificado se diseñaron tres sistemas de captura para evaluar la aplicabilidad del anticuerpo monoclonal anti EhCP5r como método inmunodiagnóstico. Conclusiones. Se logro la producción de un anticuerpo monoclonal específico contra EhCP5r que permite diferenciar Entamoeba histolytica de Entamoeba dispar.

Objective. Obtain mouse monoclonal antibodies against cysteine proteases 5 (EhCP5) of Entamoeba histolytica. Materials and methods. BALB/c mice were immunized intraperitoneally with complete and incomplete Freund adjuvant EhCP5 with the recombinant EhCP5 protein obtained from E.coli DH5α culture transfected with the recombinant vector pJC45 that expresses said protein. The animal with the best antibody response was selected. Its spleen was extracted as a source of B-lymphocytes, which were merged using PEG miceSP2-0/Ag14 myeloma cells. The team proceeded to undergo the selection of the hybridomas and the evaluation of the supernatants of the colonies that grew after 7 days by ELISA. The hybridomas with higher values of specific antibodies against the protein EhCP5r were selected, and clones obtained by limiting dilution were expanded Results. With the use of a stable secreting clone the monoclonal antibody anti EhCP5r IgG1 isotype was purified by affinity chromatography with protein G. The clones were expanded in vivo and in vitro. Three capture systems were designed with the purified antibody to assess the applicability of the monoclonal antibody anti EhCP5r as an immunodiagnostic method. Conclusions. The production of a specific monoclonal antibody against EhCP5r was achieved to differentiate Entamoeba histolytica from Entamoeba dispar.

Estandarización en Colombia de una prueba ELISA para la evaluación de los niveles séricos de anticuerpos IgG contra diez serotipos de Streptococcus pneumoniae / An immunoenzymatic test for IgG antibody levels against 10 serotypes of Streptococcus pneumoniae

Introducción. Streptococcus pneumoniae es causante de gran morbimortalidad en niños pequeños y ancianos. Sin embargo, en Colombia no está disponible una prueba que evalúe la respuesta humoral a la vacunación específica contra este microorganismo Objetivo. Estandarizar en Colombia un ensayo inmunoenzimático para evaluar los niveles séricos de anticuerpos IgG contra diez serotipos de S. pneumoniae en respuesta a la vacunación específica y caracterizar esta respuesta en individuos sanos de nuestra población. Materiales y métodos. Se hizo un ELISA en fase sólida utilizando como antígenos los polisacáridos capsulares 1, 3, 4, 5, 6B, 9V, 14, 18, 19F y 23F de S. pneumoniae. Resultados. Los sueros de referencia y control reaccionaron fuertemente contra los polisacáridos evaluados, especialmente contra 14 y 19F. En los cinco niños sanos evaluados, los polisacáridos 5 y 19F presentaron los mayores títulos antes de la vacunación. Antes de la vacunación en los niños, y antes y después de la vacunación en los adultos, los polisacáridos 14 y 19F reaccionaron fuertemente. Para todos los polisacáridos, excepto para el 5, existe una relación inversa entre títulos altos de anticuerpos IgG antes de la vacunación y la razón de incremento de los títulos después de la misma. Conclusión. Esta prueba ELISA cuantifica de forma confiable los niveles de IgG sérica contra diez serotipos de S. pneumoniae y, de acuerdo con los resultados obtenidos en individuos sanos de nuestra población, en este trabajo se validan los parámetros internacionales para considerar adecuada la respuesta a la vacuna 23-valente contra este microorganismo.

Introduction. Streptococcus pneumoniae is a major cause of morbi-mortality in early childhood and elderly. However, a test to measure the antibody responses after specific vaccination is not available in Colombia. Objective. An immunoenzymatic test was standardized for the measurement of serum IgG levels against 10 serotypes of S. pneumoniae in response to the specific vaccination. Material and methods. Capsular polysaccharides 1, 3, 4, 5, 6B, 9V, 14, 18, 19F, 23F of S. pneumoniae were used as antigens in a solid-phase ELISA. These responses were characterized in a randomized selected healthy individuals from a Colombian population. Results. The reference and control sera showed great reactivity against all the polysaccharides evaluated, especially against polysaccharide 14 and 19F. The lowest reactivity in these two sera was observed against polysaccharide 3 and 4. Among the children evaluated, polysaccharide 5/19F showed the highes pre-vaccination reactivity, and polysaccharide 14/19F showed the highest post-vaccination reactivity. Among the adults, polysaccharides 14 and 19F showed the greatest reactivity pre- and post-vaccination. For all the polysaccharides (excepting polysaccharide 5), an inverse association among high polysaccharide-specific pre-vaccination- and the increase of post-vaccination-IgG levels was observed. Conclusion. This ELISA test reliably quantifies the serum levels of specific IgG against 10 serotypes of S. pneumoniae. According to the responses by healthy individuals, the current study validates parameters used internationally as an adequate the response to the 23-valent pneumococcal vaccine.

ELISA y técnica de sedimentación espontánea para el diagnóstico de infección por Giardia lamblia en muestras fecales de niños de Perú / ELISA and spontaneous sedimentation technique for the diagnosis of Giardia lamblia infection in stool samples of Peruvian children

OBJETIVO: Comparar un kit ELISA comercial para coproantígenos y la técnica de sedimentación espontánea en tubo (TSET) para el diagnóstico de Giardia lamblia en muestras fecales de niños de una zona endémica peruana. MATERIAL Y MÉTODOS: Fueron analizadas 174 muestras mediante la TSET y el kit Giardia 2nd Generation ELISA. RESULTADOS: Fueron positivas 51 muestras por ELISA y 49 por TSET. CONCLUSIONES: El ELISA resultó ser altamente sensible y específico, sencillo y rápido; sin embargo, la muy buena concordancia, alta precisión, bajo costo y capacidad para detectar otros enteroparásitos hace que la TSET sea recomendable para el diagnóstico en zonas endémicas del Perú.

OBJETIVE: To compare a commercial coproantigen ELISA kit and the technique of spontaneous sedimentation in tube (TSET) for the diagnosis of Giardia lamblia in fecal specimens from children in a Peruvian endemic area. MATERIAL AND METHODS: 174 fecal samples were analyzed by TSET and 2nd Generation Giardia ELISA kit. RESULTS: 51 samples were positive by ELISA and 49 by TSET. CONCLUSIONS: The ELISA was highly sensitive and specific, simple and fast. However, the very good agreement, high precision, low cost and ability to detect other intestinal parasites makes use of TSET recommended for laboratory diagnosis in endemic areas of Peru.

Human leptospirosis in the Caribbean, 1997-2005: characteristics and serotyping of clinical samples from 14 countries / Leptospirosis humana en el Caribe entre 1997 y 2005: características y serotipificación de muestras clínicas de 14 países

OBJECTIVE: To determine the frequency of human leptospirosis in the sera of suspected clinical cases sent by 14 Caribbean countries for diagnosis to a regional laboratory in 1997-2005. METHODS: All serum samples were initially tested using the immunoglobulin M (IgM) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for leptospirosis. Demographic data (such as age and sex), month of the year and clinical manifestations that had been observed by the attending physician were related to seropositivity. The microscopic agglutination test (MAT) was used to serotype sera using a panel of 23 international serovars. RESULTS: Of 3 455 samples tested, 452 (13.1 percent) were seropositive for IgM antibodies to leptospirosis by the ELISA, with frequencies significantly (P < 0.05; χ2) different across countries and years. Among seropositive patients, the frequency of detection of leptospirosis (23.1 percent) was significantly higher in the age groups 1-20 years and 31-40 years combined compared with other age groups; and in male patients (72.1 percent) compared with female patients (19.7 percent) (P < 0.05; χ2). Chills, jaundice, vomiting, weakness, diarrhea, and kidney failure/problems were significantly (P < 0.05; χ2) exhibited at a higher frequency in seropositive, rather than seronegative patients. Using the MAT on 100 sera tested, 98 (98 percent) were seropositive, of which the serogroup Icterohaemorrhagiae was most prevalent with the detection of serovars Copenhageni (70 percent), Icterohaemorrhagiae (67 percent), and Mankarso (29 percent). CONCLUSIONS: Since only 13.1 percent of the suspected cases of leptospirosis were seropositive for IgM ELISA antibodies, other clinical conditions may have been responsible for the clinical manifestations observed, or the patient may have had chronic leptospirosis (IgG). In the Caribbean, serovars of the serogroup Icterohaemorrhagiae were responsible for most infections in the cases tested.

OBJETIVO: Determinar la frecuencia de leptospirosis humana en el suero de presuntos casos clínicos enviados por 14 países del Caribe a un laboratorio regional para la confirmación del diagnóstico entre 1997 y 2005. MÉTODOS: Todas las muestras de suero se analizaron inicialmente mediante el ensayo inmunoenzimático de adsorción (ELISA) para detectar inmunoglobulina M (IgM) contra Leptospira. Se relacionó la seropositividad con datos demográficos (como la edad y el sexo), el mes del año y las manifestaciones clínicas observadas por el médico a cargo. Se usó la prueba de aglutinación microscópica para serotipificar los sueros con un grupo de 23 serovariedades internacionales. RESULTADOS: De las 3 455 muestras analizadas por ELISA, 452 (13,1 por ciento) fueron seropositivas para anticuerpos IgM contra Leptospira, con frecuencias significativamente diferentes (P < 0,05; χ2) según el país y el año. En los pacientes seropositivos, la frecuencia de detección de leptospirosis (23,1 por ciento) fue significativamente mayor en los grupos etarios de 1 a 20 años y de 31 a 40 años combinados, en comparación con otros grupos de edad; y mayor en los varones (72,1 por ciento) en comparación con las mujeres (19,7 por ciento) (P < 0,05; χ2). Los escalofríos, la ictericia, los vómitos, la debilidad, la diarrea y la insuficiencia o los trastornos renales fueron significativamente más frecuentes (P < 0,05; χ2) en los pacientes seropositivos que en los seronegativos. De los 100 sueros que se analizaron con la prueba de aglutinación microscópica, 98 (98 por ciento) fueron seropositivos, y entre estos el serogrupo Icterohaemorrhagiae fue el más frecuente, con detección de las serovariedades Copenhageni (70 por ciento), Icterohaemorrhagiae (67 por ciento) y Mankarso (29 por ciento). CONCLUSIONES: Ya que solo 13,1 por ciento de los presuntos casos de leptospirosis fueron seropositivos por ELISA para anticuerpos IgM, las manifestaciones clínicas observadas pueden haberse debido a otras enfermedades, o el paciente puede haber tenido leptospirosis crónica (con anticuerpos IgG). En los casos analizados en el Caribe, las serovariedades del serogrupo Icterohaemorrhagiae causaron la mayoría de las infecciones.

Comparison of the QuantiFERON®-TB Gold assay and tuberculin skin test to detect latent tuberculosis infection among target groups in Trinidad & Tobago / Comparación entre la prueba QuantiFERON®-TB Gold y la prueba cutánea de la tuberculina para detectar la infección tuberculosa latente en grupos destinatarios en Trinidad y Tabago

OBJECTIVE: To compare the QuantiFERON®-TB Gold (QFT-G) assay and tuberculin skin test (TST) in screening/diagnosis of latent tuberculosis infection (LTBI) among individuals in Trinidad & Tobago at high risk for TB. METHODS: A total of 560 individuals (TB patient contacts, HIV patients, health care workers, prison inmates, and TB patients [controls]) were recruited for the study. Blood was drawn and processed using the QFT-G assay, followed by immediate administration of TST solution on subjects' forearm. Data were analyzed with Epi InfoTM 3.5.1 software. Results were compared across the target groups using the chi-square test (P < 0.05). RESULTS: The QFT-G assay detected LTBI in 51 percent of the subjects (with most positive results occurring among the control group) whereas the TST detected it in 39.4 percent (P = 0.001). Overall, the QFT-G assay detected LTBI more frequently than the TST among all subjects except the control group, where detection favored the TST. The QFT-G assay produced indeterminate and nonreactive results in some HIV patients but required less turnaround time than the TST (23.3 h versus 70.2 h; P < 0.0001). The TST cost less per subject than the QFT-G assay (US $3.70 versus US $18.60; P = 0.0008). CONCLUSIONS: The QFT-G assay cost more but had a higher detection rate among most target groups and required less turnaround time than the TST. However, its sensitivity was lower among immunocompromised subjects. Therefore, the QFT-G assay should be used with caution for LBTI screening/diagnosis in resource-poor, high-HIV prevalence settings such as Trinidad & Tobago.

OBJETIVO: Comparar la prueba QuantiFERON®-TB Gold (QFT-G) con la prueba cutánea de la tuberculina (PPD) para el tamizaje y diagnóstico de la infección tuberculosa latente (ITBL) en personas con alto riesgo de tuberculosis en Trinidad y Tabago. MÉTODOS: Para el estudio, se reclutó un total de 560 individuos (personas en contacto con pacientes de tuberculosis, pacientes con VIH, trabajadores de la salud, presidiarios y pacientes de tuberculosis [grupo testigo]). Las muestras de sangre se extrajeron y procesaron utilizando la prueba QFT-G, seguida de la aplicación inmediata de la solución de PPD en el antebrazo de las personas. Los datos se analizaron con el software Epi InfoTM 3.5.1. Los resultados obtenidos en los grupos destinatarios se compararon utilizando la prueba de la ji al cuadrado (P < 0,05). RESULTADOS: La prueba QFT-G detectó la infección tuberculosa latente en 51 por ciento de los individuos (la mayoría de los resultados positivos se presentaron en el grupo testigo) mientras que la prueba PPD la detectó en 39,4 por ciento (P = 0,001). En términos generales, la prueba QFT-G detectó la infección tuberculosa latente con mayor frecuencia que la PPD en todos los individuos, excepto en aquellos del grupo testigo, donde el índice de detección favoreció a la PPD. La prueba QFT-G produjo resultados indeterminados y no reactivos en algunos pacientes con VIH, pero requirió menos tiempo de respuesta que la PPD (23,3 h contra 70,2 h; P < 0.0001). La prueba PPD tuvo un costo menor por individuo que la QFT-G (US$3,70 en comparación con US$18,60; P = 0.0008). CONCLUSIONES: La prueba QFT-G tuvo un costo más elevado, pero la tasa de detección fue más alta en la mayoría de los grupos destinatarios y el tiempo de respuesta fue más rápido en comparación con la PPD. Sin embargo, la sensibilidad de la prueba QFT-G fue inferior entre los individuos inmunodeficientes. Por consiguiente, se deben tomar las precauciones necesarias para utilizar la prueba QFT-G en el tamizaje y diagnóstico de ITBL en entornos de escasos recursos y alta prevalencia de VIH como Trinidad y Tabago.

Evaluacion por Western blot, inmunofluorescencia indirecta y ELISA de perros infectados con Leishmania (Leishmania) infantum / Western blot, ELISA and indirect immunofluorescence test evaluation of Leishmania (Leishmania) infantum-infected dogs

Objetivo Evaluar el desempeño de las pruebas empleadas en Colombia para el diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina y adaptar una técnica de Western blot empleando animales experimental y naturalmente infectados. Metodología Se obtuvieron sueros de 10 perros infectados experimentalmente con L. infantum, 5 perros infectados naturalmente, 16 perros sanos, 26 de reacción cruzada (infectados con Babesia canis, Erhlichia canis, Dirofilaria immitis, Trypanosoma cruzi, Leishmania (Viannia) spp.), 40 de zonas no endémicas y 150 de zona endémica. Todos fueron evaluados mediante las pruebas de inmunofluorescencia indirecta (IFI), ELISA y Western blot (WB). Resultados Se encontró que IFI tuvo el mayor porcentaje de positividad en los perros infectados (73 por ciento) mientras que el menor porcentaje de falsos positivos se obtuvo por WB (2,5 por ciento). La prueba de ELISA fue la menos eficiente. Fueron reconocidas 24 fracciones antigénicas, las bandas de 29, 34, 50, 69, 75, 86, 99 y 123 kDa fueron responsables de reacciones inespecíficas en los sueros de perros sanos, de zona no endémica y de reacción cruzada. Las bandas por debajo de 29 kDa mostraron ser potencialmente diagnósticas, especialmente la fracción de 13 kDa. Conclusiones Los métodos directos y serológicos pueden subdiagnosticar la infección por Leishmania, solamente un constructo que combine tanto pruebas directas como indirectas sería la forma más eficiente de diagnóstico.

Objective Evaluating canine visceral leishmaniasis diagnostic test performance in Colombia and adapting the Western blot test in naturally and experimentally infected dogs. Methods Sera were obtained from 10 experimentally L. Infantum-infected dogs, 5 naturally infected dogs, 16 healthy dogs, 26 Babesia canis, Erhlichia canis, Dirofilaria immitis, Trypanosoma cruzi and Leishmania (Viannia) spp infected dogs, 40 dogs from non-endemic areas and 150 from endemic areas. Sera were tested for L. infantum infection using immunofluorescent antibody (IFAT), ELISA and Western blot (WB) tests. Results Positives results were obtained for 73 percent of known infected dogs by the IFAT test and false positives were obtained for 2.5 percent of non-infected dogs using WB. ELISA was not efficient for diagnosis. 24 antigenic fractions were recognised in tested sera using WB; however, 29, 34, 50, 69, 75, 86, 99 and 123 kDa bands were recognised in sera from dogs from non-endemic areas, healthy dogs and Trypanosoma cruzi, Erhlichia canis, Dirofilaria immitis and Babesia canis infected dogs. The 13 kDa fraction proved potentially useful for diagnosing canine visceral leishmaniasis. ConclusionsThe separate use of parasitological and serological test could lead to misdiagnosis of Leishmania infection; using both kinds of technique simultaneously is thus highly recommended.

Herramientas no invasivas en Venezuela: comparación entre las pruebas inmunoserológicas DAT, rK26 y rK39 en el diagnóstico de leishmaniasis visceral / Non invasive diagnostic tools for visceral leishmaniasis: a comparison of the immunoserological tests DAT, rK26 and rK39

Introducción. La leishmaniasis visceral constituye un problema de salud pública en los países en donde es endémica por ser potencialmente letal, principalmente en niños. El diagnóstico rápido es importante en el control de la enfermedad. Objetivo. Comparar las pruebas inmunocromatográficas rK39 (rK39 dipstick, Kalazar detect test, Inbios Internacional Inc.), ELISA rK26 y la prueba de aglutinación directa (Kit Biomedical Research) en relación con la prueba de ELISA rK39, como herramientas serodiagnósticas para la leishmaniasis visceral en Venezuela.Materiales y métodos. Se estudiaron 50 muestras séricas de pacientes positivos por la prueba ELISA rK39, provenientes de diferentes zonas endémicas: Nueva Esparta, Lara, Anzoátegui y Trujillo; se incluyeron 17 muestras de voluntarios sanos y 25 de pacientes con otras enfermedades. Se utilizó la prueba ELISA rK39 como método de referencia, considerándola como patrón de referencia imperfecto, a partir del cual se determinaron los valores de sensibilidad, especificidad, razón de verosimilitud y valores diagnóstico positivo y negativo en las demás pruebas evaluadas. Resultados. Todas las pruebas mostraron una fuerte correlación (p<0,0001) con la ELISA rK39. La aglutinación directa y la prueba inmunocromatográfica rK39 presentaron altos valores de sensibilidad, 89,74% (IC95% 81,34-98,15) y 94,15% (IC95% 87,65-100), respectivamente, y de especificidad, 81% (IC95% 79,96-99,51) y 100% (IC95% 100-100). La prueba ELISA rK26, a pesar de poseer buena especificidad, 99% (IC95% 95,17-100), tuvo baja sensibilidad, 37% (IC95% 23,41-50,15). Conclusión. Las pruebas de aglutinación directa y la prueba inmunocromatográfica rK39 presentaron los mayores valores de sensibilidad y especificidad. Ambas son simples, económicas y fácilmente aplicables. Por ello, son recomendables para efectuar un diagnóstico de leishmaniasis visceral eficaz y precoz en Venezuela.

Introduction. Human visceral leishmaniasis is a serious public health problem in endemic countries because of its high potential lethality, particularly in children. Rapid diagnosis is essential to early treatment and control of visceral leishmaniasis.Objective. The aim was to compare three serodiagnostic tools for human visceral leishmaniasis. Materials and methods. Three methods were compared: the rK39 dipstick (Kalazar detection test, Inbios International Inc.), ELISA rK26 and direct agglutination test (DAT) (KIT Biomedical Research). Fifty serum samples from patients positive for rK39 ELISA were compared from four endemic provinces in Venezuela: Nueva Esparta (Margarita island), Lara, Anzoátegui and Trujillo. Additional serum samples from 17 healthy volunteers and 25 patients with other diseases were included. The rK39 ELISA served as the baseline standard method. Sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and likelihood ratio were calculated for each test. Results. All methods had a positive correlation with rK39 ELISA (p<0.0001). They showed high sensitivity and specificity. The direct agglutination test and the rK39 dipstick showed high sensitivity values, 89.7% (95% CI: 81.34.0-98.2%) and 94.2% (95% CI: 87.7-100%), respectively, and high specificity, 81.0% (95% CI: 80.0-99.5%) and 100%. The rK26 ELISA showed good specificity, 99% (95% CI: 95.2-100%), but a very low sensitivity, 37% (95% CI: 23.4-50.2%). Conclusion. Overall results indicated that DAT and rK39 dipstick have the highest specificity and sensitivity. Both are simple, cost-effective and field applicable tests. Therefore, they are recommended for early and accurate diagnosis of visceral leishmaniasis.

Seroprevalencia de infección por Leptospira spp. en auxiliares y veterinarios de consultorios de pequeños animales de Villavicencio (Colombia) / Leptospira spp. infection seroprevalence in assistants and veterinarians working in small animal consulting rooms in Villavicencio (Colombia)

Objetivo: Determinar seroprevalencia por la prueba de MAT a seis serovares de Leptospira spp. en el grupo de riesgo: auxiliares y veterinarios de consultorios de pequeños animales de Villavicencio, Meta, Colombia, que previamente había sido serorreactor por Elisa-Pambio. Materiales y métodos: Se tomaron 72 muestras de sueros de individuos pertenecientes al subgrupo de auxiliares y veterinarios, de una población mayor que incluía otros 7 grupos humanos a riesgo a Leptospira spp. y que había presentado reactividad serológica considerada como “positiva” (17 %) a la prueba de Elisa para Leptospira spp. con un kit de Pambio. Los sueros, que se habían conservado a -70°C en el Laboratorio de Reproducción y Genética Animal de la Universidad de los Llanos, fueron evaluados para reactividad serológica a la prueba de microaglutinaciónlisis (MAT) con los serovares L. hardjopra- jitno, L. copenhageni, L. canícola, L. icterohaemorrhagiae, L. autumnalis, L. bratislava, L. australis y L. pomona. Se utilizó el protocolo de laboratorio del Programa Nacional de Investigación en Salud Animal de corpoica-ceisa. Resultados: La seropositidad a MAT fue 26.4%. En los auxiliares 21% y los veterina- rios 29%. La seropositidad por serovar fue L. bratislava 24%, L. australis 8%, L. copenhageni 6%, L. canícola 3%, L. autumnalis y L. hardjoprajitno 1%. No se encontraron reactores a icterohaemorrhagiae y pomona. Los títulos serológicos estuvieron en un rango entre 1:25 y 1:400. La copositividad entre MAT y ELISA IgM fue 42% y la conegatividad 77%. Conclusiones: La seropositidad en el grupo estudiado es alta y preocupante, por lo tanto, exige extremar las medidas de bioseguridad durante la práctica médico veterinaria...

Objective: Determining to six serovares Leptospira spp. seroprevalence in assistants and veterinarians working in small animal consulting rooms in Villavicencio, Meta Colombia that previously had been seroreactor for Elisa-Pambio. Materials and Methods: 72 sera samples were taken from a subgroup of individuals consisting of assistants and veterinarians, in turn forming part of a larger population which included another 7 human groups at risk of becoming infected by Leptospira spp.; a cross-sectional epidemiological model was used and subjects were chosen by convenience. The sera had remained frozen (-70°C) in the Universidad de los Llanos Animal Reproduction and Genetics laboratory since being obtained. A commercial indirect ELISA kit (Pambio) was used for determining IgM antibodies. hardjoprajitno, copenhageni, canícola, icterohaemorrhagiae, autumnalis, bratislava, australis and pomona serovars were used in the microscopic agglutination test (MAT). The protocol of laboratory of the national program of investigation in animal health of CORPOICA-CEISA was used. Results: MAT seropositivity was 26.4% (21% in assistants and 29% in veterinarians) Seropositivity by serovar was: 24% bratislava, 8% australis, 6% copenhageni, 3% canícola, 1% autumnalis and hardjoprajitno. No reactors to icterohaemorrhagiae and pomona were found. Serological titres ranged from 1:25 to 1:400. Conclusions: It was thus concluded that seropositivity in the group being studied was high and worrying, meaning that biosafety measures must be maximized for all people working in veterinary practice...

Seroprevalencia de Leptospira spp. en grupos de población de Villavicencio, Colombia / Seroprevalence of Leptospira spp in population groups of Villavicencio, Colombia

Objetivo Determinar la seroprevalencia de anticuerpos a Leptospira spp. en población humana aparentemente sana y en grupos a riesgo y los factores asociados en el Municipio de Villavicencio, Meta, Colombia. Materiales y Métodos Se utilizó un modelo epidemiológico transversal con selección de sujetos por conveniencia. Se obtuvieron muestras de sangre por punción cubital de (n: 503) personas, 230 estudiantes de primer semestre de diversos programa de la Universidad de los Llanos y 273 que correspondían a 8 grupos de riesgo. Se obtuvo información de factores de riesgo mediante entrevista. Se determinaron anticuerpos IgM mediante un Kit comercial de ELISA indirecto (Pambio). Resultados La seroprevalencia en el grupo de bajo riesgo fue 5,2 por ciento. La seroprevalencia para los grupos de riesgo fue 19 por ciento, por grupos trabajadores de matadero 7 por ciento, veterinarios y auxiliares de clínica de pequeños animales 17 por ciento, estudiantes de último año de Medicina Veterinaria y Zootecnia 17 por ciento, ordeñadores de granjas de ganado doble propósito 21 por ciento, trabajadores de arrozales 23 por ciento, trabajadores de granjas porcícolas 35 por ciento, trabajadores de piscícolas 48 por ciento. Se encontraron tres factores asociados: estrato rural, tenencia de mascota canina y contacto con roedores en el trabajo. Conclusiones Se encontró una alta seroprevalencia para Leptospira spp en grupos de riesgo, siendo los más afectados los trabajadores piscícolas y de granjas porcícolas. El riesgo relativo de 1,86 entre los dos grupos señalan mayor riesgo de contagio en la población con exposición ocupacional.

Objective Determining Leptospira spp . antibody seroprevalence in an apparently healthy population and in groups at risk plus their associated factors in the town of Villavicencio in the Meta department of Colombia Materials and Methods A cross-sectional epidemiological model was used (subjects being selected by convenience sampling). Blood-samples were obtained by cubital puncture from (n: 503) people, consisting of 230 first semester students from different programmes at the Universidad de los Llanos and 273 people corresponding to 8 groups at risk. Information regarding risk factor was obtained from interviewing the 503 people. A commercial indirect ELISA kit (Pambio) was used for determining IgM antibodies. Results Seroprevalence was 5,2 percent in the low risk group. There was 19 percent seroprevalence for groups at risk, 7 percent for the group of people working in slaughterhouses, 17 percent for vets and small animal clinic assistants, 17 percent for students in their last year of Veterinary Medicine and Zootechnia, 21 percent for people milking cows on dual-purpose farms, 23 percent for people working in rice-fields, 35 percent for people working on pig-farms and 48 percent for those working on fish-farms. Three factors were found to be associated: rural social level, having a pet dog and coming into contact with rodents in the workplace. Conclusions A high seroprevalence for Leptospira spp was found in the groups at risk, people working on pig-farms and fish-farms being those most affected. There was a 1,86 relative risk in both groups indicated as having a greater risk of contagion amongst the population suffering occupational exposure.

Leishmaniasis Visceral Canina: pruebas diagnósticas no identifican Estados Reales de la infección / Canine Visceral Leishmaniasis: diagnostic tests do not detect real state of the infection

Objetivos Establecer la capacidad de las pruebas serológicas de Inmunofluorescencia indirecta (IFAT) e Inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA), para detectar el estado real de la infección en leishmaniasis visceral canina (LVC). Métodos Un total de 211 perros criollos localizados en el sur del Departamento del Tolima, zona endémica para la leishmaniasis visceral, fueron evaluados por medio de examen clínico y serológico, usando como antígeno la cepa colombiana de Leishmania infantum (infantum) MHOM/COL/CL044B. Así mismo, con la finalidad de establecer reacciones cruzadas o coinfecciones, se evaluó la reactividad de los sueros ante antígenos específicos de Trypanosoma cruzi, por medio de la prueba Western Blot (WB). La frecuencia de LVC fue del 44,1 por ciento (93/211) y 50,2 por ciento (103/211) mediante IFAT y ELISA respectivamente. Resultados La seroreactividad ante antígenos específicos de T. cruzi fue del 1,42 por ciento (3/211). La concordancia de las técnicas serológicas fue baja (K=12,1 por ciento) y a pesar de la presencia de signos clínicos en los animales evaluados, las razones de prevalencia halladas, demostraron que no hay asociación entre la ocurrencia de las manifestaciones clínicas y la seropositividad a las pruebas diagnósticas. Conclusiones La baja asociación de las pruebas serológicas utilizadas en el diagnóstico de Leishmania infantum, sugiere que es necesario desarrollar estudios que permitan establecer un algoritmo de pruebas diagnósticas en el país para confirmar el estado real de la infección de los animales y de esta forma orientar eficientemente los recursos de Salud Pública destinados al control de la enfermedad.

Objectives Establishing indirect immunofluorescence (IFAT) and enzyme-inked immunoassay (ELISA) serological tests' ability to detect canine visceral leishmaniasis (CVL) infection. Methods 211 cross-bred dogs from the south of the Tolima department (a visceral leishmaniasis endemic area) were evaluated by clinical and serological exams, using the Colombian Leishmania infantum (infantum) MHOM/COL/CL044B strain as antigen. Sera reactivity to Trypanosoma cruzi- specífic antigens was evaluated by Western blot (WB) for establishing crossed-reactions or coinfections. CVL frequency was 44 ,1 percent (93/211) by IFAT and 50,2 percent (103/211) by ELISA. Results Seroreactivity to T. cruzi-specific antigens was 1 ,42 percent (3/211). Agreement between the serological techniques was low (K=12 ,1 percent) and, in spite of clinical signs being present in the animals being evaluated, the prevalence ratios found demonstrated the lack of association between the occurrence of the clinical manifestations and the diagnostic tests' seropositivity. Conclusions The low association between the serological tests used in diagnosing Leishmania infantum suggested the need for further studies aimed at establishing an algorithm for diagnostic tests in Colombia for confirming the real state of the animals' infection and thereby efficiently orientating public health resources allocated for controlling canine visceral leishmaniasis.