Pulpa dentaria sana vs. pulpitis reversible: caracterización estereológica de fibroblastos / Healthy normal dental pulp vs. reversible pulpitis: stereological characterization of fibroblasts

La reacción y reparación de la dentina depende del número de células presentes en la pulpa, dentro de éstas fibroblastos. Los métodos diseñados para obtener una estimación fiable de la cantidad de elementos celulares de la pulpa han sido subjetivos y sesgados, sobre todo al evaluar los cambios cuantitativos y potencial capacidad reparadora en presencia de caries. El objetivo fue estimar y comparar cuantitativamente las densidades de número, volumen y superficie de fibroblastos en pulpas sanas y con diagnóstico de pulpitis reversible producto de caries en dientes humanos jóvenes. Se utilizaron dientes premolares humanos obtenidos de exodoncias, divididos en un grupo sano y cariado, los cuales fueron fijados y posteriormente descalcificados con ácido nítrico al 5 %. Siguiendo el protocolo del orientator se obtuvieron 5 secciones de 5 µm teñidas por H-E de cada diente. Se aplicó el recuento estereológico de los fibroblastos pulpares (FP) con el test multipropósito M42. Se estimaron las densidades de número (Nv), volumen (Vv) y superficie (Sv), y calcularon las Medias (±DE) por diente, y Medias (±EE) por grupo. Las diferencias entre grupos se analizaron mediante la prueba T, con un valor p 0,05 de significación estadística. En dientes sanos, la Media (±EE) para Nv de FP fue 0,393 x 105/mm3 (±0,020x105/mm3), para Vv 15,467 % (±1,334 %) y para Sv 16,330 mm2/mm3 (±1,274 mm2/mm3). En dientes cariados, la Nv fue 0,447 x 105/mm3 (±0,019x105/mm3), la Vv 20,171 % (±1,213 %) y la Sv 20,150 mm2/mm3 (±1,447 mm2/mm3). Al comparar las Nv, los FP del grupo con caries aumentaron significativamente (p= 0,047), al igual que la Vv (p= 0,0105) y Sv (p= 0,013). Existe un aumento del número de FP en los dientes con pulpitis reversible, lo que condicionaría su capacidad de respuesta. La metodología empleada puede ser aplicable para determinar el comportamiento pulpar y cuantificar variables de respuesta odontoblástica en tratamientos restauradores atraumáticos de manera imparcial y reproducible.

Dentine reaction and repair depends on the number of cells present in the pulp, within these fibroblasts. The methods designed to obtain a reliable estimate of the amount of cellular elements of the dental pulp have been subjective and biased, especially when evaluating quantitative changes and potential reparative capacity in the presence of caries. The aim of this study was to estimate and quantitatively compare with stereological tools, number, density, volume and surface of fibroblasts in healthy teeth and reversible pulpitis diagnosis due to caries. We obtained premolar teeth from human tooth extractions, divided into healthy and carious groups, which were fixed and decalcified with 5 % nitric. Following the orientator protocol we obtained 5 sections of 5 µm from each tooth which were stained by H-E. The stereological counting of pulp fibroblasts (FP) with M42 multipurpose test was applied. Number densities (Nv), volume (Vv) and surface (Sv) were estimated, and calculated the means (±SD) for a tooth, and Mean (±SE) per group. Differences between groups were analyzed by t-test, p 0.05 a statistically significant value. In healthy teeth, the mean (±SE) for Nv FP was 0.393x105/mm3 (±0.020x105/mm3), Vv 15.467 % (±1.334 %) and Sv 16.330 mm2/mm3 (±1.274 mm2/mm3). In decayed teeth, it was 0.447x105 Nv/mm3 (±0.019x105/mm3), the Vv 20.171 % (±1.213 %) and Sv 20.150 mm2/mm3 (± 1.447 mm2/mm3). Comparing Nv, the FP carious group increased significantly (p =0.047), as Vv (p =0.0105) and Sv (p =0.013). There is an increased number of FP teeth with reversible pulpitis, which would determine their responsiveness. The methodology can be applied to determine the pulp behavior and odontoblast quantify response variables in impartially and reproducible atraumatic restorative treatments.

Características Histológicas de la Pulpa Dental de Ratones de 4 y 12 Semanas / Histological Features of Dental Pulp in 4 and 12 Week-old Mice

En condiciones fisiológicas, el órgano dentinopulpar no se encuentra asociado a procesos de remodelación y resorción. Los hallazgos histológicos muestran que la pulpa presenta características especiales como tejido conectivo que le confieren su capacidad de adaptación. El propósito del presente estudio fue evaluar las características histológicas de la pulpa dental de ratones de la cepa Albino Suizo de 4 y 12 semanas de edad. Ocho hemimandíbulas de ratones albino suizo de 4 y 12 semanas de edad fueron utilizados. Las hemimandíbulas fueron fijadas en Paraformaldehído al 4%, sometidas a decalcificación con EDTA al 5% durante 10 días a 4C e incluidas en Paraplast®. Se obtuvieron secciones de 5 µm que fueron teñidos con H&E, Tricrómico de Masson e Impregnación Argéntica. Las características histológicas de la pulpa revelaron dos zonas principales en ambos grupos de edad: la zona periférica pulpar conformada por un conjunto de células compatibles con odontoblastos y una zona pobre en células, y otra zona central pulpar, rica en fibroblastos y vasos sanguíneos. Las diferencias entre los grupos de edad se vieron en la expresión de matriz fibrilar de colágeno. Se encontraron semejanzas en la presencia de fibras reticulares entre los grupos. La pulpa dentaria en ratones Albino Suizo mostró una división en dos zonas: central y periférica, con grupos poblacionales bien definidos. La mayor diferencia por edad estuvo en la cantidad de colágeno.

Under physiological conditions, the dentinopulpar complex is not associated with remodeling and resorption. Histological findings show that the pulp as a connective tissue, has special features that bear on its ability to adapt. The purpose of this study was to evaluate the histological features of the dental pulp of mice of albino Swiss strain of 4 and 12 weeks-old. Eight hemimandibles of Swiss albino mice of 4 and 12 weeks-old were used. Hemimandibles were fixed in 4% paraformaldehyde, decalcified with EDTA 5% for 10 days at 4°C and included in Paraplast®; 5 mm sections were obtained and stained with H&E, Masson's trichromic and silver impregnation. The histological characteristics of the pulp revealed two main areas in both age groups: the peripheral zone of the pulp formed by a set of cells compatible with odontoblastos and a poor-cell zone, and a central zone rich in pulp fibroblasts and blood vessels. Differences between age groups were seen in the expression of fibrillar collagen matrix. We found similarities in the presence of reticular fibers between the groups. The pulp of Swiss albino mice showed a division into two well-defined zones: central and peripheral. The greatest difference by age was in the amount of collagen.

Caracterización estereológica de odontoblastos en pulpas dentarias humanas sanas y con pulpitis reversible / Stereological characterization of odontoblasts in normal healthy and reversible pulpitis in human dental pulps

La reacción y reparación dentinaria depende del número de odontoblastos. Los métodos para obtener estimaciones fiables sobre la cantidad de odontoblastos en la pulpa dental han sido subjetivos y sesgados, sobre todo al evaluar los cambios cuantitativos y la potencial capacidad reparativa en presencia de caries. El objetivo de este trabajo fue estimar y comparar cuantitativamente el número, densidad y volumen de odontoblastos en dientes sanos y con diagnóstico de pulpitis reversible producto de caries a través de herramientas estereológicas. Se utilizaron dientes premolares humanos obtenidos de exodoncias, divididos en un grupo sano y otro cariado. Fueron fijados y descalcificados con ácido nítrico al 5%. Siguiendo el protocolo del orientator se obtuvieron 5 secciones de 5 mm teñidas por H-E de cada diente. Se aplicó el recuento estereológico de los odontoblastos con el test multipropósito M42. Se estimaron las densidades de número (Nv), volumen (Vv) y superficie (Sv), y calcularon las Medias (±DE) por diente, y Medias (±EE) por grupo. Las diferencias entre grupos se analizaron mediante la prueba T, con un valor p 0,05 de significación estadística. En dientes sanos, la Media (±EE) para Nv de odontoblastos fue 0,409x105/mm3 (±0,018x105/mm3), para Vv 19,714% (±1,43%) y para Sv 21,016 mm2/mm3 (±1,425 mm2/mm3). En dientes cariados, la Nv fue 0,521x105 /mm3 (±0,023x105/mm3), la Vv 24,686% (±1,625%) y la Sv 23,203 mm2/mm3 (±1,364 mm2/mm3). Al comparar las Nv, los odontoblastos del grupo con caries aumentaron significativamente (p=0,0062), al igual que la Vv (p=0,0197). Existe un aumento del número de odontoblastos en los dientes con pulpitis reversible, lo que condicionaría su capacidad de respuesta. La metodología empleada puede ser aplicable para determinar el comportamiento pulpar y cuantificar variables de respuesta odontoblástica en tratamientos restauradores atraumáticos de manera imparcial y reproducible.

Dentinal reaction and repair depends on factors like the amount of odontoblasts. Methods for obtaining reliable estimates of the number of odontoblasts in the dental pulp have been subjective and biased, especially when assessing the potential quantitative changes and reparative capacity in the presence of cavities. The aim of this study was to estimate and quantitatively compare, through stereological tools, the number, density and volume of odontoblasts in healthy teeth, diagnosed with reversible pulpitis due to caries. We used human premolars obtained from extractions, divided into groups of healthy teeth and teeth with caries, fixed and decalcified in 5% nitric acid. Following the orientator protocol, five 5-µm-thick sections stained by HE were obtained from each tooth. Stereological counting for odontoblast with M42 multipurpose test was applied. Numerical density (Nv), volume density (Vv) and surface density (Sv) were estimated, and the mean (± SD) for each tooth, and Mean (± SE) per group were calculated. Differences between groups were analyzed by t test, with p 0.05 for statistical significance. In the healthy teeth group, the mean (± SE) for Nv was 0.409x105/mm3 (±0.018x105/mm3), Vv 19.714% (±1.43%) and to Sv 21.016 mm2/mm3 (±1.425 mm2/mm3) odontoblast cells. In the caries teeth group, the Nv was 0.521x105 /mm3 (±0.023x105/mm3), Vv 24.686% (±1.625%) and Sv 23.203 mm2/mm3 (±1.364 mm2/mm3). When comparing Nv, an increased in odontoblasts significantly (p = 0.0062), as well as Vv (p = 0.0197) in caries teeth group. There is an increased number of odontoblasts in teeth with reversible pulpitis, which would condition its responsiveness. The methodology can be applied to determine pulp behavior, and quantify variables of odontoblastic response in atraumatic restorative treatments in an impartial and reproducible form.

Aislamiento y caracterización de las células madre mesenquimales de la pulpa dentaria humana / Isolation and characterization of stem cells mesenchymal of human dental pulp

Las células madre mesenquimales de la pulpa dentaria han surgido como una herramienta promisoria en la medicina regenerativa. El objetivo de la presente investigación es establecer el cultivo de las células madre mesenquimales de la pulpa dentaria humana. Estas fueron aisladas de terceros molares retenidos de pacientes entre 15 y 24 años, con técnica de disgregación enzimática y cultivadas en medio DMEM-F12, suplementado con 15% de SFB , 100 ?M L-ácido ascórbico 2-fosfato, 2 mM L-glutamina, 100 U/mL de penicilina, 100 µg/mL de estreptomicina y 2 µg/mL de anfotericina B . Las células fueron observadas diariamente bajo microscopio. Pruebas inmunohistoquímicas mostraron en las poblaciones de células aisladas la existencia de células mesenquimales STRO-1+, marcador de células madre mesenquimales, también expresaron CD146+ y no expresaron CD45-, marcador de células hematopoyéticas. Las células aisladas mostraron capacidad de autorrenovación y eficiencia de formación de colonias. En el presente estudio, en las poblaciones de células aisladas se identificaron células con características de células madre mesenquimales, como su capacidad de adherirse a las placas plásticas en cultivo, formar colonias altamente proliferativas, su morfología fusiforme y la expresión consistente de marcadores de superficie que caracteriza células madre mesenquimales adultas de pulpa dentaria. Sin embargo, faltaría determinar su capacidad de diferenciación para cumplir con los criterios básicos para definirlas como células madre

Mesenchymal stem cells dental pulp-derived have emerged as a promising tool in regenerative medicine. The objective of the present investigation is to establish the culture of mesenchymal stem cells of dental pulp human. The dental pulp mesenchymal cells were isolated from impacted third molars of patients between 15-24 year-old. The dental pulp tissue was extracted, enzymatic digestion technique and culture in medium DMEM-F12, supplemented with 15% de SFB , 100 ?M L-ascorbic acid 2- phosphate, 2 mM L-glutamine, 100 U/mL de penicillin, 100 µg/mL de streptomycin y 2 µg/mL de amphotericin B. Cells were observed daily under microscope. Immunocytochemistry tests showed cells STRO-1+ mesenchymal stem cell marker. These cells also expressed CD146+ and no expressed CD45- hematopoietic stem cell marker. The isolated cells showed self-renewal capabilities and colony-forming efficiency. In this study, isolated cell populations were identified cells with mesenchymal stem cell characteristics, such as its ability to adhere to plastic culture plates, highly proliferative colony forming, fusiform morphology and consistent expression of surface markers characterized adult mesenchymal stem cells from dental pulp. However, missing differentiating their ability to meet the basic criteria to define them as stem cells

Recubrimiento pulpar directo e idirecto: mantenimiento de vitalidad pulpar / Direct and indirect pulp capping: maintaining pulp vitality

El recubrimiento pulpar directo e indirecto, desde el punto de vista biológico y clínico, representa importantes mecanismos para el mantenimiento de la vitalidad pulpar; sin embargo aún es considerado un tema controversial en la clínica odontológica, debido a la complejidad del diagnóstico y a la delicada conducta terapéutica necesaria para obtener éxito en el tratamiento clínico. En tal sentido, este artículo realizará un abordaje biológico y clínico del Recubrimiento Pulpar Directo e Indirecto con la intención de resaltar la importancia fundamental del diagnóstico clínico y radiográfico de la condición pulpar, enfatizando las indicaciones y contra indicaciones de ambos tratamientos. Adicionalmente serán materia de discusión los materiales comúnmente utilizados para la protección del complejo dentinopulpar y las nuevas perspectivas en esta área

Direct and indirect pulp capping represents important mechanisms, from the point of clinical and biological aspects to maintain the pulp vitality. However, it still a controversy issue at dental field, once the complexity diagnosis and the accurately therapeutics are need to achieve the success of clinical treatment. Seeing that, this article outlines the broad of the biological and clinical approach of the direct and indirect pulp capping. Emphasizing fundamentally the importance of the corrected diagnose of clinical and radiographic pulp condition, further the indications and contra-indications of both treatments. Furthermore, it will be discussed regarding the classical dental materials used to dentin-pulp protection and contemporary perspectives in this area

Evaluación “in vitro” de la asociación del efecto antimicrobiano del ozono unido a vehículos y medicamentos de accion prolongada / Evaluation

Se realizó una evaluación “in vitro” de la capacidad de asociación del efecto antimicrobiano del ozono con diversos vehículos (aceite de oliva, aceite de girasol y propilenoglicol) y medicamentos de acción prolongada (propilenoglicol con hidróxido de calcio, calen y calen con paramonoclorofenol alcanforado) con la intención de encontrar un medicamento de acción prolongada de gran poder germicida y de baja o ninguna toxicidad para los tejidos paradentarios. Para tal fin, se empleó el medio de cultivo Agar Muller Hinton (Bacto®) Laboratorios DIFCO Ltda. contenido en 6 placas de petri. Como bacterias indicadoras se emplearon cepas de Pseudomonas aeruginosa y Enterococcus faecalis. Por cada medio previamente sembrado, se realizaron nueve pozos que permitieron alojar a su vez los diversos materiales empleados, los cuales fueron sometidos al proceso de ozonización por burbujeo. Posteriormente fueron evaluados mediante la técnica de sensibilidad antimicrobiana (difusión en agar y medición del halo de inhibición en cultura de bacterias) en cinco períodos de tiempo: 1, 7, 15, 30 y 180 días. Dadas las diferencias existentes entre los diámetros de los distintos halos de difusión formados en el agar por parte de los vehículos en los diferentes vehículos empleados, no se consideró necesario el análisis estadístico y se observó que el propilenoglicol ozonizado formó el mayor halo de inhibición en ambas bacterias. Conclusiones. De acuerdo con la metodología empleada y los resultados obtenidos podemos afirmar que entre las sustancias evaluadas, el propilenoglicol mostró la mejor capacidad de asociación al ozono, seguida del propilenoglicol con hidróxido de calcio, aceite de girasol y aceite de oliva respectivamente, manteniendo su acción antimicrobiana por todo el tiempo de evaluación. Calen y Calen PMCC no se mostraron con una acción sinérgica tan efectiva, por lo que podemos concluir que estas pastas no tienen capacidad de asociación con el ozono

It was made an in vitro evaluation to test the capability of association of the antimicrobian effect of the ozone with severe vehicles (olive oil, sunflower oil and propylene glycol) and delayed dressings (propylene glycol with calcium hydroxide, calen and calen with alcanphored paramonoclorofenol ) with the intention of finding a new delayed dressing with great germicide power and of low or non toxicity to the paradental tissues. For this purpose, there were used several culture cultivations in 6 plaques of Petri. As indicative bacterias were studied the Pseudomonas aeruginosa and Enteroccus faecalis. In each plaque previously sowed, nine holes received the diverse materials and were submitted to ozonization by a bubble process. After that, they were evaluated by the antimicrobian sensitivity technique (agar diffusion and measurement of the inhibition halo) in five periods of time: 1, 7, 15, 30 and 180 days after being prepared. No statistical analysis has been made as the difference of diffusion at the agar with the different vehicles was significant enough and it was observed that the ozonized propylene glycol formed the biggest inhibiton halo in both bacterias. Conclusions: According to the used methodology and with the obtained results we can affirm that between the evaluated substances, the propylene glycol showed the best capability of association with the ozone, followed by the propylene glycol with calcium hydroxide, sunflower oil and olive oil respectively, maintaining its antimicrobian action by all the time of evaluation. Calen and Calen PMCC did not show an effective synergic action, and so we conclude that these pastes do not have a capability of association with the ozone or this was not sufficient enough to increase their antimicrobian action

Evaluación del Hidróxido de Calcio en la Prevención del Dolor Endodóntico Intercitas en Pulpas Necróticas

El dolor posoperatorio como resultado de la terapia canalicular es un efecto colateral bastante frecuente en el tratamiento endodóntico, que puede durar de unas horas a varios días, debido a una reacción inflamatoria de la zona perirradicular. Por ser tan controversial la eficacia del hidróxido de calcio en la prevención del dolor en las exacerbaciones en pulpas necróticas, se realizó un estudio a doble ciegas en 80 pacientes que requerían tratamiento endodóntico en piezas no vitales y se observó que la frecuencia de agudizaciones posoperatorias fue relativamente baja, con una significación del 0,00018. Esto permite concluir que el hidróxido de calcio como tratamiento en la prevención del dolor intercitas en pulpas necróticas, no evita la sintomatología posoperatoria, ya que existen otros factores que deben ser considerados y aunque son controlados dentro del tratamiento, pueden ser causa de la aparición del dolor intercitas.

Postoperative pain as a result of the canalicular therapy is a very frequent side effect that may last a few hours to several days in the endodontic treatment due to the inflammatory reaction in the periradicular area. Since the efficacy of calcium hydroxide in preventing pain in necrotic dental pulps is so controversial, then a double blind study was carried out with80 patients who required endodontic treatment in non-vital teeth. It was observed that the frequency of postoperative pain exacerbation was relatively low, with significance index of 0,00018. This allows us to reach the conclusion that calcium hydroxide as a treatment in the prevention of pain in necrotic pulps interappointments does not avoid postoperative symptomatology because there are other factors that should be taken into account and although they are under control within the treatment, it is possible that they influence over the occurrence of interappointment pain.

Patologías pulpares y periapicales más frecuentes en urgencias en 2 clínicas estomatológicas

Las patologías pulpares y periapicales son unas de las enfermedades que más llevan a los pacientes a acudir a una consulta de urgencia estomatológica debido a su sintomatología. Es de gran importancia realizar un correcto diagnóstico en este momento para brindar la terapeútica adecuada.La frecuencia de estas patologías en consulta de urgencia fue lo que nos motivó a la realización de este trabajo, el cual tuvo entre sus objetivo contribuir al conocimiento de las patologías pulpares y periapicales más frecuentes en urgencias, determinar la patología pulpar aguda más frecuente según grupos de edad, así como la patología periapical aguda. Para realizar el trabajo se examinaron 70 pacientes de las Clínicas Estomatológicas "Dr. Mario Pozo Ochoa" y "Manuel Angulo Farrán". Se observó que las patologías agudas fueron las que más se presentaron, entre ellas, la hiperemia y el absceso alveolar agudo.

Pulpar and periapical pathologies are some of the diseases that make the patients attend the dental emergency department due to their symptomatology. It is very important to make a right diagnosis at this moment in order to give the adequate therapy. The frequency of these pathologies at the dental emergency department led us to write this paper. One of its objectives was to contribute to the knowledge of the most frequent pulpar and periapical pathologies in emergencies and to determine the most common acute pulpar pathology according to age groups and the acute periapical pathology. 70 patients from the ?Dr. Mario Pozo Ochoa? and ?Manuel Angulo Farrán? Dental Clinics were examined. It was observed that the acute pathologies were the most frequent and, among them, hyperemia and acute alveolar abscess.