Análise da integridade funcional dos espermatozoides de Tayassu pecari por diferentes soluções hiposmóticas e osmolaridades / Analysis of the functional integrity of Tayassu pecari sperm by different hyposmotic solutions and osmolarities

Queixada (Tayassu pecari) é um mamífero neotropical, classificado como vulnerável devido à caça e à destruição de seu habitat. Em razão das dificuldades na reprodução em cativeiro, técnicas de reprodução assistida podem ser aplicadas em programas de repovoamento da espécie. Dessa forma, objetivou-se identificar o melhor protocolo de teste hiposmótico (HOST) para avaliar a integridade funcional dos espermatozoides de queixada. O sêmen de quatro machos adultos foi coletado com auxílio de eletroejaculador após contenção física e protocolo de sedação e anestesia. O sêmen foi avaliado quanto às características macro e microscópicas e diluído nas seguintes soluções hiposmóticas: água destilada (0mOsmol/L), sacarose (50, 100, 150mOsm/L) e frutose (50, 100, 150mOsm/L). Cada amostra foi incubada em duplicata, e uma sofreu fixação em solução de citrato de sódio formolizado a 4%. Duzentos espermatozoides foram avaliados por amostra e classificados em reativos ou não ao HOST. Todas as soluções testadas foram semelhantes em identificar o percentual de espermatozoides reativos, independentemente de a amostra ser ou não fixada (P>0,05). Dessa forma, pode-se usar água destilada como HOST por este apresentar resultados similares e por ser um teste mais barato.(AU)

White-lipped peccary (Tayassu pecari) is a neotropical mammal classified as vulnerable due to overhunting and habitat destruction. Due to the low reproduction success in captivity, assisted reproduction techniques can be used in re-stocking programs. Therefore, we aimed to identify the best hyposmotic swelling test (HOST) to evaluate the functional integrity of peccary sperm. Semen samples of four adult males were collected with the aid of an electroejaculator after physical contention, sedation and anesthesia protocols. The semen was evaluated for macro and microscopic characteristics and diluted in the following hyposmotic solutions: distilled water (0mOsmol/L), sucrose (50, 100, 150mOsm/L) and fructose (50, 100, 150mOsm/L). Each sample was incubated in duplicate and one was fixed in 4% formalized sodium citrate solution. Two hundred spermatozoa were evaluated from each sample and classified as reactive or not- reactive to HOST. There were similar proportions of reactive and functional sperm regardless of whether the sample was fixed or not fixed (P> 0.05). Therefore, distilled water can be used as HOST to evaluate the functional integrity of white-lipped peccary sperm because it shows similar results and it is a cheaper test.(AU)

Use of the ACP® and BTS extenders for cooling at 15°C white-lipped peccary (Tayassu pecari) semen / Uso dos diluidores ACP® e BTS para refrigeração a 15°C de sêmen de queixada (Tayassu pecari)

Knowledge about reproduction of white-lipped peccary is of great importance to assist with the conservation of this species and enable its rational use in captivity. This study aimed to evaluate the effect of ACP-103®, ACP-116® and BTS semen extenders on sperm viability during cooling of Tayassu pecari semen. Five ejaculates from four adult males were chilled. The animals were submitted to the protocols of sedation and anesthesia for semen collection by the electroejaculation method. After collection, the semen was macro- and microscopically assessed and diluted to reach 35x106 spermatozoa/mL in each of the three different extenders tested. The fresh-extended semen was packed in a BotuFLEX® thermal box to keep samples at 15°C for 24 hours. After cooling, the following semen parameters were analyzed: sperm motility, functional and structural integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, chromatin condensation, and the thermoresistance test was performed. The parameters sperm motility, structural and functional integrity of sperm membranes, mitochondrial activity, and chromatin condensation were preserved after use of the extenders tested, and were similar to those of in natura semen (p>0.05). Curvilinear velocity (VCL) (p<0.05) was the only parameter with reduced values after cooling regardless of the extender used. The percentage of sperm with normal morphology was greater in samples cooled using the BTS extender (p<0.05). The ACP-103®, ACP-116® and BTS extenders can be used for the cooling and preservation of white-lipped peccary semen at 15°C for 24 hours.(AU)

Para auxiliar na conservação da espécie e permitir o uso racional do queixada em cativeiro é de grande importância o conhecimento sobre a reprodução da espécie. Objetivou-se avaliar o efeito dos diluidores de sêmen ACP-103®, ACP-116® e BTS na viabilidade espermática durante a refrigeração do sêmen do Tayassu pecari. Foram refrigerados cinco ejaculados provenientes de quatro machos adultos. Os animais foram contidos com auxílio de puçá e submetidos ao protocolo de sedação e anestesia para realização da coleta de sêmen pelo método da eletroejaculação. Depois da coleta, o sêmen foi avaliado macro e microscopicamente e diluído para atingir 35x106 espermatozoides/mL em cada um dos três diferentes diluidores testados. O sêmen diluído foi acondicionado em caixa térmica BotuFLEX® para manter as amostras a 15°C por um período de 24 horas. Depois da refrigeração, os espermatozoides foram avaliados quanto aos parâmetros de movimento espermático, integridade funcional e estrutural das membranas espermáticas, atividade mitocondrial, condensação da cromatina e teste de termorresistência. Os diluidores testados preservaram as características cinéticas, a integridade estrutural e funcional das membranas espermáticas, a atividade mitocondrial e a condensação da cromatina semelhante ao sêmen in natura (P>0,05). O único parâmetro que reduziu com o processo de refrigeração independente do diluidor utilizado foi a Velocidade Curvilinear (VCL) (P<0,05). Foi observado aumento do percentual de espermatozoides morfologicamente normais nas amostras refrigeradas em BTS (P<0,05). Os diluidores ACP-103®, ACP-116® e BTS podem refrigerar e conservar o sêmen de queixada a 15°C por 24 horas.(AU)

Use of a Mycoplasma suis-PCR protocol for screening a population of captive peccaries (Tayassu tajacu and Tayassu pecari) / Uso de um protocolo de PCR para a detecção de Mycoplasma suis para avaliação de uma população de catetos e queixadas de cativeiro (Tayassu tajacu and Tayassu pecari)

Mycoplasma suis is a hemotropic bacteria of red blood cells and the causative agent of swine eperythrozoonosis. Diagnosis of infection may be reached by direct examination of blood smears; however, the use of polymerase chain reaction (PCR) of the 16S RNA gene of M. suis improves the sensitivity and specificity of detection. The aim of this study was to screen peccaries (Tayassu tajacu and T. pecari) for M. suis infection using a specific conventional PCR. A total of 28 blood samples from captive collared and white-lipped peccaries were collected, DNA extracted and a specific M. suis PCR assay performed. All samples were negatives by both blood smear examination and PCR testing. To verify the presence of amplifiable DNA, PCR for beta-actin gene was performed in all samples. This study was part of an active surveillance program, which is crucial for monitoring animal health status, particularly in wildlife species.

Mycoplasma suis é uma bactéria hemotrópica dos eritrócitos e é o agente causador da eperitrozoonose suína. O diagnóstico da infecção pode ser realizado pelo exame direto de esfregaços sanguíneos; entretanto, o uso da reação em cadeia da polimerase (PCR) baseada no gene 16S RNA de M. suis aumenta a sensibilidade e especificidade da detecção. O objetivo deste estudo foi avaliar catetos e queixadas (Tayassu tajacu e T. pecari) para a infecção por M. suis, utilizando PCR convencional específico. Um total de 28 amostras de sangue de catetos e queixadas de cativeiro foram coletadas, o DNA foi extraído e a PCR específica para a detecção de M. suis realizada. Todas as amostras foram negativas pelo esfregaço sanguíneo e PCR. Para verificar a presença de DNA amplificável, PCR para o gene da beta actina foi realizada em todas as amostras. Este estudo foi parte de um programa de vigilância ativa, o qual é crucial para o monitoramento do estado de saúde animal, particularmente em espécies selvagens.

Nerve endings of filliform, fungiform and vallate papillae of dorsal tongue mucosa of White-lipped peccary (Tayassu pecari): Neurohistological observations / Terminação nervosa das papilas filiformes, fungiformes e valadas da mucosa dorsal da língua de queixada: observação neurohistológica

The neurohistologic observations were performed using the specimens prepared by Winkelmann and Schmitt silver impregnation method. The tissues were fixed in 10 percent formalin solution and sections of 40µm thickness were obtained by Leica Cryostat at -30ºC. The sections of dorsal mucosa of White-lipped peccary tongue showed numerous filliform and fungiform papillae, and two vallate papillae on the caudal part. The epithelial layer revealed queratinized epithelial cells and the connective tissue papillae of different sizes and shapes. Thick nerve fiber bundles are noted into the subepithelial connective tissue of the papillae. The connective tissue of fungiform and vallate papillae contained numerous sensitive nerves fibers bundles forming a complex nerve plexus.

As observações neuro-histológicas foram realizadas utilizando amostras preparadas segundo o método de impregnação por prata de Winkelmann e Schmitt. Os tecidos foram fixados em solução de formol a 10 por cento e seções de 40µm de espessura foram obtidas em criostato Leica -30ºC. As seções da mucosa dorsal da língua de queixada revelaram numerosas papilas filiformes, fungiformes e duas papilas valadas sobre a parte caudal. A camada epitelial revelou células epiteliais queratinizadas e papilas de tecido conjuntivo de diferentes tamanhos e formas foram observadas. Espessos feixes de fibras nervosas são notados no tecido conjuntivo subepitelial das papilas. O tecido conjuntivo das papilas fungiformes e valadas contêm numerosos feixes de nervos de fibras sensíveis formando um plexo nervoso complexo.

Macroscopic and morphometric features of testicles in collared peccary and white-lipped peccary / Aspectos macroscópicos e morfométricos dos testículos em catetos e queixadas

Aspectos macroscópicos e morfométricos dos testículos em catetos e queixadas. Este trabalho objetiva fornecer dados macroscópicos e morfométricos dos testículos dos catetos e queixadas. O material utilizado consistiu de catetos e queixadas oriundos da Fazenda Devaneio Pró-Fauna, Iguape, SP (Reg.1/3593/08480). Em 33 queixadas e 20 catetos, após o abate, os testículos foram colhidos e tomados dados morfométricos como: comprimento, largura e espessura (com o auxílio de um paquímetro). Os testículos são ovalados, localizados na região pélvica, inclinados dorso-caudalmente e possuem posição intermediária. O mediastino testicular esta no centro do testículo, ligeiramente desviado para a margem epididimária deste, e termina na extremidade capitata. Os queixadas adultos possuem em média 30,92 ± 3,82 kg de peso corporal e 78,89 ± 4,77 cm de comprimento corporal, enquanto os jovens apresentam 22,93 ± 2,07 kg e 71,57 ± 3,95 cm de comprimento. Os resultados demonstram que no grupo de queixadas adultos estudado o testículo direito teve comprimento, largura e espessura médios de 5,36 ± 0,64cm; 3,64 ± 0,64cm e 3,30 ± 0,52cm respectivamente, enquanto que o esquerdo teve 5,45 ± 0,77cm; 3,68 ± 0,59cm e 3,32 ± 0,54cm. Nos queixadas jovens os valores encontrados foram de 3,20 ± 0,44cm, 2,12 ± 0,26cm e 2,11 ± 0,40cm, e de 3,23 ± 0,47cm; 2,21 ± 0,39cm e 1,99 ± 0,36cm, para a largura, comprimento e espessura dos testículos direito e esquerdo respectivamente. Já para os catetos o testículo direito teve comprimento, largura e espessura de 4,36 ± 0,38cm; 2,74 ± 0,27cm e 2,33 0,46cm respectivamente, enquanto que o esquerdo teve 4,19 ± 0,36cm; 2,68 ± 0,31cm e 2,34 ± 0,28cm. Os dados analisados não tiveram diferenças significativas (p<0,05) entre os valores encontrados para os testículos direito e esquerdo pelo testes de Qui-dradado.

Macroscopic and morphometric features of testicles in collared peccary and white-lipped peccary. This work aims to describe the morphometrical aspects on the testicles of the collared peccary and white-lipped peccary. The material derived from the Devaneio Pro-Fauna Farm, Iguape, SP (Reg.1/3593/08480). From 33 white-lipped peccary and 20 collared peccary after the slaughter, the testicles were removed and morphometric information was taken like: length, width and thickness (with the help of a pachymeter). Testicles are oval shaped, located into the pelvic region, laying dorsocaudally and they have intermediary position. The mediastinun testis is in the center of the testis and ends on the capitata extremity. The adult white-lipped peccary has 30.92 ± 3.82 kg in average and 78.89 ± 4.77 cm of length and the young has 22.93 ± 2.07 kg and 71.57 ± 3.95 cm of length. Results obtained show that in the adult white-lipped peccary group, the right testicle measured, in average, length, width and thickness of 5.36 ± 0.64cm, 3.64 ± 0.64cm and 3.30 ± 0.52cm respectively while the left testicles measured, in average, 5.45 ± 0.77cm, 3.68 ± 0.59cm and 3.32 ± 0.54cm. In the young group the testis measured in average 3.20 ± 0.44cm, 2.12 ± 0.26cm and 2.11 ± 0.40cm, to right testis and 3.23 ± 0.47cm, 2.21 ± 0.39cm and 1.99 ± 0.36cm, to left testis, to length, width and thickness, respectively. As per the collared peccary, the right testicles measured, in average, 4.36 ± 0.38cm; 2.74 ± 0.27cm and 2.33 ± 0.46cm respectively for length, width and thickness, when for the left ones measures were 4.19 ± 0.36cm, 2.68 ± 0.31cm and 2.34 ± 0.28cm. The data does not have significative difference (p<0.05) between right and left testicular measurements using the Qui-square test.