ABSTRACT
SUMMARY: Acrylamide is a toxic chemical substance with wide implementation in chemical industry. In 2002 the presence of acrylamide was discovered in foods rich in starch which are prepared at high temperatures. The aim of this study was to investigate the histopathological changes in the gastric tissue in Wistar rats induced with injection of oral acrylamide. The research was carried out 6 groups of 5 animals (Wistar rats), two control groups and four experimental groups. Histological changes in the stomach tissue of Wistar rats are seen as a direct slight damage of the surface epithelium, accompanynig inflammatory reaction and renewal of the epithelium. Examined inflammatory and degenerative parameters show a positive correlation with respect to dose and time of exposition to acrylamide. Knowing the mechanism of action of these toxic substances, allows to apply adequate prevention in nutrition and make an appropriate choice of therapeutic methods.
RESUMEN: La acrilamida es una sustancia química tóxica con amplia aplicación en la industria química. En el año 2002 se determinó la presencia de acrilamida en alimentos ricos en almidón preparados a altas temperaturas. El objetivo de este estudio fue investigar los cambios histopatológicos en el tejido gástrico en ratas Wistar inducidos con inyección de acrilamida oral. La investigación se llevó a cabo en 6 grupos de 5 animales, dos grupos control y cuatro grupos experimentales. Los cambios histológicos en el tejido del estómago de las ratas Wistar se ven como un ligero daño directo del epitelio superficial, que acompaña a la reacción inflamatoria y la renovación del epitelio. Los parámetros inflamatorios y degenerativos examinados muestran una correlación positiva con respecto a la dosis y el tiempo de exposición a la acrilamida. El conocimiento del mecanismo de acción de estas sustancias tóxicas permite aplicar una prevención adecuada en nutrición y hacer una elección oportuna de los métodos terapéuticos.
Subject(s)
Animals , Rats , Stomach/drug effects , Acrylamide/toxicity , Stomach/pathology , Administration, Oral , Rats, Wistar , Acrylamide/administration & dosageABSTRACT
SUMMARY: The purpose of this study was to evaluate by morphological methods, if a mixture of Fibroquel® and hyaluronic acid implanted in an animal model of cranial bone injury could promote bone regeneration. 12 Wistar rats were divided in three groups, control group, bone injury without treatment and bone injury with treatment. After experimental period, bone samples were taken and stained with H & E, Masson trichrome, PAS-D, immunohistochemistry with anti-PCNA monoclonal antibody and applied a semiquantitative morphometric method. Treatment group showed extensive areas of collagen fibers in contact with normal bone tissue, areas of normal histology, PAS positive material and less cellular proliferation. We demonstrated for the first time that a mixture of Fibroquel® and hyaluronic acid implanted in an animal model of cranial bone injury promotes bone regeneration.
RESUMEN: El propósito de este estudio fue evaluar por métodos morfológicos, si una mezcla de Fibroquel® y ácido hialurónico implantado en un modelo animal de lesión del hueso craneal podría promover la regeneración ósea. Se dividieron 12 ratas Wistar en tres grupos, grupo control, lesión ósea sin tratamiento y lesión ósea con tratamiento. Después del período experimental, se tomaron muestras de hueso y se tiñeron con H & E, tricrómico de Masson, PAS-D, inmunohistoquímica con anticuerpo monoclonal anti-PCNA y se aplicó un método morfométrico semicuantitativo. El grupo de tratamiento mostró áreas extensas de fibras de colágeno en contacto con tejido óseo normal, áreas de histología normal, material PAS positivo y menor proliferación celular. Demostramos por primera vez que una mezcla de Fibroquel® y ácido hialurónico implantado en un modelo animal de lesión del hueso craneal promueve la regeneración ósea.
Subject(s)
Animals , Rats , Skull/drug effects , Bone Regeneration/drug effects , Povidone/pharmacology , Collagen Type I/pharmacology , Hyaluronic Acid/pharmacology , Immunohistochemistry , Rats, WistarABSTRACT
El objetivo fue evaluar el volumen óseo BV/TV (%) del hueso interradicular en ratas Wistar: A) en relación a la edad; B) en relación a la zona de estudio en animales de la misma edad. Se utilizó Grupo A) 15 ratas Wistar hembras de 6 (I), 10 (II) y 14 (III) semanas, Grupo B) 9 ratas Wistar macho de 8 semanas. Tras la eutanasia, se extrajeron los maxilares inferiores y se procesaron histológicamente para obtener cortes mesio-distales del primer molar inferior coloreados con H.E. Sobre microfotografías digitales se evaluó el BV/TV (%). El análisis estadístico se realizó en A) mediante ANOVA y Bonferroni test y en B) se calculó el rango (R). Los resultados en A) el BV/TV (%) aumenta significativamente con la edad de los animales; en B) se encontró que el BV/TV (%) varía hasta un 20% si se considera el volumen total y este rango disminuye a 8.3% al estudiar su mitad coronal. En conclusión, el BV/TV (%) del hueso interradicular del primer molar inferior de ratas Wistar varía considerablemente con la edad de los animales y en animales de una misma edad -según se considere evaluar todo el hueso interradicular del espacio alveolar o la mitad superior del mismo-. Los resultados de este trabajo recomiendan emplear animales de la misma edad y realizar mediciones histomorfométricas empleando la mitad coronal de dicho hueso, especialmente en los diseños de periodontitis experimental (AU)
Subject(s)
Animals , Rats , Histological Techniques , Mandible/anatomy & histology , Molar/anatomy & histology , Photomicrography , Data Interpretation, Statistical , Analysis of Variance , Rats, Wistar , JawABSTRACT
RESUMEN Se evaluó el efecto del trasplante de hMSC-GFP+ en un modelo experimental de Enfermedad de Parkinson (EP) en 27 ratas Wistar con tres grupos experimentales: control: animales sin cirugía, (CON n=7), lesionado: animales lesionados intracerebralmente con 6-OHDA a nivel de SNpc (LES n = 10) y trasplantado: animales LES con trasplante de hMSC-GFP+ intraestriatalmente (LES-T n = 10). Con el fin de evaluar la influencia del trasplante en el comportamiento motor, un mes después de la lesión, se desarrolló una batería comportamental compuesta por Test Neurológico (compuesto también por Pole Test y Test de Barra transversal, además, de inmunofluorescencia para células de SNpc con TH). Utilizando el test de Anova, se demostró una disminución en el número de giros en animales trasplantados (p=0,005), así como en el test neurológico (p=0,0004) y en el Test de barra transversal, que colocan a este grupo en una posición intermedia con respecto a LES y CON. Existe una posible recuperación de la vía nigroestriatal mediada por el trasplante de hMSC-GFP+.
ABSTRACT The effect of hMSCs-GFP+ transplantation was evaluated in an experimental model of Parkinson's disease (PD) in 27 Wistar rats, or in three experimental groups: control (CON n=7), injured (LES n = 10) and transplanted (LES+T n = 10). In order to evaluate the influence of the transplantation on the motor behavior, one month after the injury, rotation behavior induced by apomorphine, neurological test, transversal bar and SNpc cells positive to TH were developed. Using the Anova test, there was a decrease in the number of turns in transplanted animals (p=0,005) as well as in the neurological test (p=0,0004) and in the transverse bar that lead to this group in an intermediate position regarding LES and CON groups. There is a possible recovery of the transplantation-mediated nigroestriatal pathway of hMSC-GFP +.
ABSTRACT
Vernonia amygdalina (bitter-leaf) is native to West Africa but occurs mostly in its cultivated form in various parts of central and southern Nigeria. It is a dark-green leafy vegetable commonly used in cooking and as folkloric medicine for the management of several diseases in Nigeria. In the present study, the effects of varying doses of ethanolic leaf extract of Vernonia amygdalina on the rat testis histo-morphometry were investigated. Forty male wistar rats were divided into groups of four. Group A, as the control was given 10 ml/kg/day/oral distilled water while Group B, C and D subsequently treated with 100, 300 and 600 mg/kg/day/oral route Vernonia amygdalina leaves extract respectively for 56 days. Results showed that Group B rats had normal testis histology comparable to the control group. However, rats in Group C and D exhibited dose-dependent poor testes histo-morphometric profiles, with the higher dosage-group (D) providing a worse feature. Thus, there was a statistically significant (p < 0.05) reduction in the tubular diameter, cross-sectional area of the tubules, number of tubular profiles per unit area and the mean numerical density of seminiferous tubules of Group C and Group D animals compared to the control group. Our results therefore indicated that, while the lower dose (100 mg/kg) of Vernonia amygdalina leaves extract can be accommodated by rat testis, the higher doses (300 mg/kg and 600 mg/kg) demonstrate testicular toxicity in the rat.
La Vernonia amygdalina (hoja amarga) es originaria de África Occidental, pero se produce mediante cultivo en varias partes del Centro y Sur de Nigeria. Es una verdura, una hoja color verde oscuro, común en la cocina y como medicina alternativa en el manejo de varias enfermedades en Nigeria. Se investigaron los efectos de diferentes dosis de extracto etanólico de la hoja de Vernonia amygdalina para estudiar los efectos sobre la histomorfometría testicular en la rata. Cuarenta ratas Wistar macho se dividieron en 4 grupos. Grupo A, como control con el suministro de 10 ml/kg/día/agua destilada vía oral, y los Grupos B, C y D tratados con 100, 300 y 600 mg/kg/día/ vía oral del extracto de Vernonia amygdalina, durante 56 días. Los resultados mostraron que las ratas del grupo B tenían una histología testicular normal y comparable con el grupo control. Sin embargo, las ratas del grupo C y D mostraron bajos perfiles histomorfométricos testiculares, dependientes de la dosis, y con la dosis más elevada, grupo (D) se observaron característica aún menores. Hubo una reducción estadísticamente significativa (p<0,05) en el diámetro tubular, área de sección transversal de los túbulos, número túbulos por unidad de superficie y densidad numérica media de los túbulos seminíferos del Grupo C y D en comparación con el grupo de control. Nuestros resultados indicaron que dosis bajas (100 mg/kg) del extracto de Vernonia amygdalina pueden ser aceptables y no alteran el testículo de rata, pero con dosis altas (300 mg/kg y 600 mg/kg) se observa toxicidad testicular.
Subject(s)
Male , Animals , Rats , Plant Extracts/toxicity , Testis , Testis/pathology , Vernonia/toxicity , Photomicrography , Rats, Wistar , Toxicity TestsABSTRACT
Se evalúa la resistencia a las reinfecciones por Trypanosoma cruzi, en crías de ratas chagásicas. Se utilizaron 30 crías machos (`) de madres infectadas y 30 crías ` de madres sanas, divididos en grupos de 10 crías c/u (I, II, III) y (IV, V, VI). Los grupos (I, IV) y (II, V) fueron inoculados y reinoculados por vía intradérmica con 5×104 tripomastigotes metacíclicos de T. cruzi Pl (homóloga) y Y (heteróloga) provenientes de Rhodnius prolixus, con intervalos de un mes. Los grupos controles (III, VI) recibieron inyecciones de solución salina fisiológica. Las pruebas parasitológicas y serológicas realizadas en ambos grupos de crías infectadas a los 10, 20 y 30 días post-inoculación (pi), mostraron parasitemias significativamente mayores en las crías de madres sanas durante la fase aguda de la primo infección y ausencia de tripanosomas sanguícolas después de la 1ra y 2da reinoculación, un incremento significativo en los niveles anticuerpos anti-T. cruzi a partir de la inoculación inicial y reinoculaciones. Los análisis histopatológicos e inmunohistoquímicos en las secciones de corazón y músculo esquelético de las crías sacrificadas a los 45, 75 y 105 días pi, revelaron instauración progresiva de una miocarditis y miositis aguda de variable intensidad acompañada de escasos nidos de amastigotes y agravamiento del cuadro patológico producido por la inoculación inicial; presencia de abundantes depósitos antigénicos que se intensificaron con las reinoculaciones. En conclusión, la resistencia de las crías de madres infectadas a las reinfecciones por cepas T. cruzi homóloga y heteróloga, es producida, primero por la transferencia vertical del parásito y/o de anticuerpos humorales desde la madre infectada a su progenie, y segundo por un proceso de sensibilización del hospedador por las continuas descargas antigénicas producidas al ser destruidos los parásitos inoculados.
The resistance to reinfection by Trypanosome cruzi in chagasic rat offspring was evaluated. Thirty male offspring (`) from infected mothers and 30 offspring ` from healthy mothers were used, divided into groups of 10 offspring each (I, II, III) and (IV, V, VI). The groups (I, IV) and (II, V) were inoculated and reinoculated by intradermal route with 5 × 104metacyclictrypomastigotes of homologous (pL) and heterologous (Y) strains of T. cruzi, from laboratory infected Rhodnius prolixus, at one-month intervals. The control groups (III, VI) received saline injections. The parasitological and serological testing performed on both groups of infected offspring at 10, 20 and 30 days post-reinoculation (pr) showed significantly higher parasitemia levels in offspring from healthy mothers during the acute phase of the primary infection, the absence of bloodstream trypomastigotes after the 1st and 2nd reinoculation, and a significant increase in anti-T. cruzi antibody levels after initial inoculation and reinoculations. The histopathological and immunohistochemical analysis of heart and skeletal muscle sections from the offspring sacrificed at 45, 75 and 105 days pi, revealed the gradual establishment of myocarditis and acute myositis of variable intensity accompanied by few nests of amastigotes, a worsening of the pathologic picture produced by the initial inoculation, and the presence of abundant antigenic deposits that intensified with the reinoculations. In conclusion, the resistance of offspring born from chm to homologous and heterologous reinfection by T. cruzi strains, is produced, first, by vertical transmission of the parasites and/or humoral antibodies from infected mothers to their progeny, and second, by a sensibilization process in the host from continuous antigenic downloads produced when the inoculated parasites are destroyed.
Subject(s)
Animals , Rats , Animals, Laboratory , Bacterial Infections , Protozoan Infections/pathology , R Factors , Trypanosoma cruziABSTRACT
Azadirachta indica is a tree whose medicinal value is unquantifiable. Any part of the tree can be used in the treatment of malarial infection. Reports have indicated its antifertility effects, and this necessitated this study on the effects of the methanol leaf extract on serum luteinizing (LH) and follicle stimulating hormones (FSH) levels and the histomorphology of the pars anterior of Wistar rats. Thirty adult male Wistar rats were equally divided into 3 groups of A, B and C. Group A was the control and the animals received distilled water orally, while groups B and C were treated with 200mg/kg and 400mg/kg respectively of the leaf extract by oral gavage for fourteen days. On day fifteen, the animals were sacrificed by chloroform anaesthesia. Blood was obtained from their hearts, while the skull was opened to assess the hypophysis. Hormonal assay showed that luteinizing (LH) and follicle stimulating (FSH) hormone levels in the serum were lower in groups B and C treated with 200mg/kg and 400mg/kg respectively of the leaf extract, while that of LH were significant (P<0.001). Histomorphologic sections of the pars anterior revealed reduced acidophil and basophil populations, with prominent degranulated chromophobes which were larger in the group treated with 400mg/kg of A. indica leaf extract. This group also presented hypertrophy of the basophils compared to the control. In conclusion, methanol leaf extract of A. indica decreases serum LH and FSH and caused histomorphologic changes in the pars anterior of adult male Wistar rats.
Azadirachta indica es un árbol cuyo valor medicinal es invaluable. Cualquier parte del árbol se puede utilizar en el tratamiento de la infección por malaria. Reportes han indicado su efecto antifertilidad, lo que requirió estudiar los efectos del extracto metanólico de la hoja sobre los niveles séricos de las hormonas luteinizante (LH) y folículo estimulante (FSH) y la histomorfología de la pars anterior de ratas Wistar. Treinta ratas Wistar adultas fueron divididas en tres grupos. El grupo A fue utilizado como control y los animales recibieron agua destilada por vía oral, mientras que los grupos B y C fueron tratados con 200 mg/kg y 400 mg/kg respectivamente, con extracto de hoja mediante una sonda nasogástrica durante catorce días. A los quince días, los animales fueron sacrificados por anestesia con cloroformo. Se obtuvo sangre desde sus corazones, mientras que el cráneo fue abierto para evaluar la hipófisis. Los ensayos hormonales mostraron que los niveles en suero de la LH y FSH se redujeron en los grupos B y C, tratados con 200 mg/kg y 400 mg/kg respectivamente, siendo la reducción de LH significativa (p<0,001). Secciones histomorfológicos de la pars anterior revelaron una reducción de las poblaciones acidófilas y basófilas, con prominentes cromófobos degranulados que fueron mayores en el grupo tratado con 400 mg/kg del extracto de A. indica. Este grupo también presentó hipertrofia de los basófilos en comparación con el control. En conclusión, el extracto alcohólico de la hoja de de A. indica disminuye el nivel sérico de LH y FSH y provoca cambios histomorfológicos en la pars anterior de ratas Wistar adultas.
Subject(s)
Animals , Male , Rats , Pituitary Gland, Anterior/drug effects , Plant Extracts/pharmacology , Azadirachta , Luteinizing Hormone/drug effects , Luteinizing Hormone/blood , Rats, Wistar , Plant Leaves , Follicle Stimulating Hormone/bloodABSTRACT
En el presente estudio se analizó el desarrollo intrauterino de los fetos de ratas Wistar, que recibieron una inyección por vía intraperitoneal de 2x10(5) tripomastigotes sanguícolas de las cepas Planalto (IP1) y ASM (IP2) de Trypanosoma cruzi. A los 12 días post-infección fueron apareadas; a los 20 días de preñez fueron sacrificadas y los fetos fueron extraídos de los sacos uterinos para ser evaluados. Ratas sanas preñadas (SP) y vírgenes (CI1, CI2) fueron usadas como controles. Los resultados indican que la parasitemia fue significativamente (P<0,05) mayor en las ratas preñadas en comparación con las ratas vírgenes CI1 y CI2 infectadas con diferentes cepas de T. cruzi. En las ratas IP1 se observaron 19 fetos con peso y longitud promedio de 2,86 ± 2,19 g y 2,63 ± 1,17; en una de las ratas se desarrolló un solo feto en el cuerno uterino izquierdo, en otra rata se observó inflamación del cuerno izquierdo, restos fetales, placentales y 6 fetos de aspecto normal en el cuerno derecho; en dos ratas se desarrollaron 8 y 4 fetos, respectivamente, de aspecto normal. En las ratas preñadas IP2, se desarrollaron 28 fetos con peso y longitud promedio de 2,77 ± 0,77 g y 3,31 ± 1,99 cm; en una rata los 4 fetos (57,14%) del cuerno uterino derecho presentaron malformaciones morfológicas sobre el lado dorsal del cuerpo, estrechamiento alrededor de la parte posterior y gran desarrollo de la base de la pata anterior derecha y en el cuerno izquierdo se observaron 3 fetos con aspecto normal; en otra rata se encontraron 2 fetos muertos y denso líquido amniótico en el cuerno uterino derecho y 5 fetos con aspecto normal en el cuerno izquierdo, y en dos ratas se observaron 8 y 6 fetos con aspecto normal, respectivamente. En las SP se desarrollaron 21 fetos con características físicas normales, con peso y longitud promedio de 6,16 ± 0,99 g y 2,88 ± 0,65 cm de longitud. La relación peso fetal/longitud fetal (g/cm) en los grupos de ratas preñadas IP1 e IP2 fue significantemente menor en comparación con los fetos de las ratas SP (P<0,00001). La comparación del peso fetal y diámetro de las placentas entre las ratas IP1, IP2 y SP resultó significativa (P<0,001). En conclusión, la infección por diferentes cepas de T. cruzi en las ratas preñadas produce restricción patológica del crecimiento fetal, anomalías morfológicas estructurales y funcionales en los fetos y muerte fetal. Los fetos de las ratas SP no mostraron ningun anomalía.
In the present study was analyzed the intrauterine development of Wistar rats fetuses that received an injection of 2x10(5) bloodstream trypomastigotes of Planalto (IP1) and ASM (IP2) Trypanosoma cruzi strains. The rats with 12 days post-infection were mated; at day 20 the pregnat rats were sacrificed and its fetuses were extracted from the uterine horns in order to be evaluated. Healthy pregnant rats (HP) and virgin rats (CI1, CI2) were used as controls. The results showed that parasitemia was significanty (P<0.05) higher in pregnancy rats in comparison with the virgins rats CI1 and CI2 infected with different T. cruzi strains. The rats IP1, showed 19 fetuses with weight and measure average of 2.86 g ± 2.19 and 2.63 ± 1.17 cm of length. One rat showed 1 fetus in the left uterine horn, other rat showed the left uterine horn with inflammated aspect and with fetal and placental rests, and 6 fetuses of normal aspect into right uterine horn; in two rats were observed 8 and 4 fetuses of normal aspect. The pregnant rats IP2, developed 28 fetuses with weight and measure average of 2.77 ± 0.77 g and 3.31 ± 1.99 cm; in one rat, the 4 fetuses (57.14%) of right uterine horn presented morphological malformations on the dorsal side of the body, tightness around the body and development his anterior right footpad with big size and the left uterine horn of same rat was observed 3 fetuses with normal aspect; other rat showed 2 fetuses dead and dense amniotic liquid into right horn, and 5 fetuses with normal aspect in the left uterine horn, in two rats were developed 8 and 6 fetuses with normal aspect respectively. The HP development 21 fetuses with normal aspect of weight and measure average of 6.16 ± 0.99 g and 2.88 ± 0.65 cm of length. The relation weight/length fetal (g/cm) in infected pregnant rats groups IP1 and IP2 was significantly less in comparison with fetuses of HP rats (P<0.00001). The comparison of the fetal weight and placental diameters of IP1, IP2 and HP rats were significant (P<0.001). In conclusion, acute infection with different T. cruzi strains in pregnant rats, produces pathologic restriction of fetal growth, functional structural morphological anomalies in the fetuses and death of some fetuses. The fetuses of HP rats did not show any anomaly.
ABSTRACT
Se investigan los efectos de la ingestión de una dieta con alto contenido en grasas en ratas albinas (R. norvegicus) crónicamente infectadas con Trypanosoma cruzi Planalto, mediante pruebas de diagnóstico sero-parasitológicas, cuantificación del Índice de Masa Corporal (IMC), detección de la Proteína C Reactiva (PCR), evaluación de los niveles de lípidos plasmáticos (colesterol total, lipoproteínas de alta densidad - HDL y triglicéridos) y presencia de depósitos lipídicos en la arteria aorta. Durante el curso de la infección chagásica, se detectaron parasitemias patentes entre los 10 y 35 días pi, con un máximo promedio de 36,68±2 trips./mm³ de sangre a los 25 días. A los 90 días pi, se evidenció ausencia de parasitemias y presencia de anticuerpos IgG anti- T. cruzi. Las ratas chagásicas (A) y las sanas (C) sometidas a la dieta rica en grasas, mostraron: diferencias significativas (p<0,05) en el IMC, en comparación con los grupos de ratas sometidas a la dieta normal (B: infectadas y D: sanas); discreta reacción de la PCR en los sueros de las ratas infectadas B; aumento significativo en los niveles de colesterol total, colesterol - HDL y triglicéridos en los grupos A y C en comparación con los grupos controles B y D (p<0,05). El estudio histológico de las arterias de ratas del grupo A, reveló importantes depósitos lipídicos ubicados en la capa muscular próximos a las capas íntima y adventicia. Estos resultados sugieren que el incremento en los niveles de lípidos plasmáticos estimulado por el proceso infeccioso, son los principales mecanismos por el cual T. cruzi podría estar influyendo en la iniciación o progresión de placas ateromatosas
The effects of ingesting a high fat diet on albino rats (R. norvegicus) chronically infected with Trypanosome cruzi Planalto were researched using serological and parasitological diagnostic tests, body mass index (BMI) quantification, detection of C-Protein Reactive (CPR), evaluation of the plasmatic lipid levels (total cholesterol, high density lipoproteins HDL and triglycerides) and the presence of lipidic deposits in the aorta artery. During the course of the chagasic infection, patent parasitemias were detected between the ages of 10 and 35 days post-infection (pi) with a maximum average of 36.68 ± 2 tryps/mm³ of blood at 25 days. At 90 days pi, the absence of parasitemias and the presence of IgG anti T. cruzi antibodies were in evidence. The chagasic rats in chronic phase (A) and the healthy controls (C) submitted to a high fat diet showed: 1. Significant variations (p0.05) in the BMI, in comparison with the rat groups receiving a normal diet (B: infected and D: healthy rats); 2. A discrete CRP reaction in the serum of infected rats B; 3. A significant increase was shown in the total cholesterol levels, HDL cholesterol and triglycerides for groups A and C in comparison with control groups B and D (p0.05). The histological study of rat arteries in group A revealed important lipid deposits located in the muscular layer near the intimal and adventitial layer. These results suggest that the increase in plasmatic lipid levels stimulated by the infectious process are the main mechanisms through which T. cruzi could be influencing the initiation or the progression of atheromatous plaque