ABSTRACT
Introducción: En el presente trabajo se muestran los resultados de la validación de los ensayos serológicos in vitro para la detección de anticuerpos IgM, IgG y anticuerpos totales contra el SARS-CoV-2 UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 y UMELISA SARS-CoV-2 IgG desarrollados por el Centro de Inmunoensayo (CIE). Métodos: Se utilizaron paneles de muestras de suero de individuos negativos y de casos confirmados de COVID-19 para determinar el desempeño analítico de cada ensayo. Resultados: La especificidad clínica de los ensayos UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 y UMELISA SARS-CoV-2 IgG fue del 100 por ciento en todos los ensayos y la especificidad analítica fue de 100 por ciento para los dos primeros ensayos y del 93,1 por cientopara el último. La sensibilidad clínica fue de 64,3, 80,8 y 97,5 por ciento, respectivamente. El valor predictivo positivo fue de 100 por ciento en todos los ensayos, en tanto que el negativo osciló entre 83,3 y 95,2 por ciento. La concordancia fluctuó entre 92,4 y 96,9 por ciento y el índice kappa de todos los ensayos fue muy bueno. La sensibilidad de los ensayos se incrementó a 82,76, 96,5 y 100 por ciento, respectivamente, en las muestras de suero colectadas con más de 14 días de iniciado el cuadro clínico. Conclusiones: Los ensayos demostraron una elevada sensibilidad y especificidad, lo que permite contar con herramientas basadas en una tecnología desarrollada en Cuba que posibilita la realización de estudios serológicos, vigilancia epidemiológica y de otro tipo, incluyendo los relacionados con vacunas en una plataforma con amplia distribución nacional(AU)
Introduction: This paper shows the results obtained in the validation of in vitro serological assays to detect IgM, IgG antibodies, and total antibodies against SARS-CoV-2 UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 and UMELISA SARS-CoV-2 IgG developed by the Immunoassay Center. Methods: Panels of serum samples from negative and COVID-19 confirmed patients were used to determine the analytical performance of each assay. Results: UMELISA SARS-CoV-2 IgM, UMELISA ANTI-SARS-CoV-2 and UMELISA SARS-CoV-2 IgG assays demonstrated 100 percent clinical specificity for all assays; and 100 percent analytical specificity for the first two assays, and 93.1 percent for the last one. Clinical sensitivity was 64.3 percent, 80.8 percent and 97.5 percent, respectively. The positive predictive value was 100 percent in all assays, while the negative predictive value ranged from 83.3 percent to 95.2 percent. Concordance varied from 92.4 percent to 96.9 percent, and kappa index in every assay was very good. Assays sensitivity increased to 82.7 percent, 96.5 percent and 100 percent, respectively for serum samples collected more than 14 days after onset of the symptoms. Conclusions: The assays demonstrated high sensitivity and specificity, which allows us to have Cuban technology-based tools for serological, epidemiological surveillance, and other types of studies, including those related to vaccines on a platform with wide national distribution(AU)
Subject(s)
HumansABSTRACT
Rabbit hemorrhagic disease is a contagious viral disease of rabbits controlled by vaccination. The present study was aimed to diagnose rabbit hemorrhagic disease from 11 infected farms from Qalubia governorate during 2019 and to prepare homologous vaccine against rabbit hemorrhagic disease virus 2. For this purpose, 11 liver samples were collected from suspected cases and subjected to detection and identification of circulating rabbit hemorrhagic disease virus. Ten samples were confirmed to be rabbit hemorrhagic disease virus using hemagglutination test, animal inoculation and reverse transcriptase polymerase chain reaction. Sequencing and phylogenetic analysis of two isolates (R5&R6) revealed the presence of rabbit hemorrhagic disease virus 2 (A/Qalubia/2019 and B/Qalubia/2019) under accession number MT07629 and MT067630 respectively. The inactivated rabbit hemorrhagic disease virus vaccines were prepared using Montanide ISA 206 oil or aluminum hydroxide gel adjuvants. Prepared vaccines were inoculated subcutaneously in susceptible rabbits and submitted to sterility, safety and potency tests. Obtained results showed that mean hemagglutination inhibition titer for aluminum hydroxide gel vaccine was 6,7.7,8.9 and 9.1 log2 while, Montanide vaccine reached to 6.7,8.7,9.2 and 9.5 log2 at 1st, 2nd, 3rd, and 4th weeks post vaccination, respectively. Immunized rabbits with Montanide vaccine showed better protection reach to 70 percent, 90 percent percent, 100 percent and 100 percent when compared to aluminum hydroxide gel vaccine 60 percent, 70 percent, 90 percent and 90 percent at 1st, 2nd, 3rd and 4th weeks post vaccination respectively. It was concluded that newly emerged rabbit hemorrhagic disease virus 2 was isolated from suspected cases. The two prepared vaccines were sterile, safe and potent. The oily adjuvanted rabbit hemorrhagic disease virus 2 vaccine stimulated an earlier and higher humoral immune response than the aluminum hydroxide gel adjuvanted vaccine. This humoral immune response achieved significant level of protection(AU)
La enfermedad hemorrágica del conejo es una enfermedad viral contagiosa de los conejos que se controla mediante vacunación. El presente estudio tuvo como objetivo diagnosticar la enfermedad hemorrágica del conejo en 11 granjas infectadas de la provincia de Qalubia, durante 2019 y preparar una vacuna homóloga contra el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2. Para este propósito, se recolectaron 11 muestras de hígado de casos sospechosos y se sometieron a detección e identificación de virus circulante de la enfermedad hemorrágica del conejo. Se confirmó que diez muestras eran positivas al virus de la enfermedad hemorrágica del conejo, utilizando para ello la prueba de hemaglutinación, inoculación en animales y Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa. La secuenciación y el análisis filogenético de dos aislamientos (R5 y R6) revelaron la presencia del virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 (A/Qalubia/2019 y B/Qalubia/2019) con los números de acceso MT07629 y MT067630 respectivamente. Las vacunas inactivadas del virus de la enfermedad hemorrágica del conejo se prepararon usando adyuvantes de gel de hidróxido de aluminio o aceite Montanide ISA 206. Las vacunas preparadas se inocularon por vía subcutánea en conejos susceptibles y se sometieron a pruebas de esterilidad, seguridad y potencia. Los resultados obtenidos mostraron que el título medio de inhibición de la hemaglutinación para la vacuna en gel de hidróxido de aluminio fue de 6; 7,7; 8,9 y 9,1 log2, mientras que la vacuna de Montanide alcanzó 6,7; 8,7; 9,2 y 9,5 log2 en la 1ª, 2ª, 3ª y 4ª semanas después de la vacunación, respectivamente. Los conejos inmunizados con la vacuna Montanide tuvieron una mejor protección, alcanzándose niveles de 70 por ciento, 90 por ciento, 100 por ciento y 100 por ciento en comparación con la vacuna en gel de hidróxido de aluminio 60 por ciento, 70 por ciento, 90 por ciento y 90 por ciento en la 1ª, 2ª, 3ª y 4ª semanas después de la vacunación, respectivamente. Se concluyó que el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 de reciente aparición se aisló de los casos sospechosos. Las dos vacunas preparadas fueron estériles, seguras y potentes. La vacuna contra el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 con adyuvante oleoso estimuló una respuesta inmune humoral más temprana y mayor que la vacuna con adyuvante en gel de hidróxido de aluminio. Esta respuesta inmune humoral confirió un nivel significativo de protección(AU)
Subject(s)
Animals , Rabbits , Polymerase Chain Reaction/methods , Hemorrhagic Disease Virus, Rabbit/immunology , Caliciviridae Infections/veterinary , Lethal Dose 50 , Vaccines , EgyptABSTRACT
The objective of this study was to investigate the effects of Spirulina platensis (SP) powder supplementation on immune response in SPF chickens. For this purpose, 120 SPF chicks were randomly clustered into six groups consisting of 20 birds each which assigned to five groups vaccinated by commercial inactivated Newcastle disease (ND) vaccine at 21 days of age. The four groups were supplemented with 0.5, 1, 1.5 and 2 g of SP per kg of ration at 7 day of age and other group as control treatment group. Control unvaccinated group still without any treatment. Individual blood samples were collected weekly from all groups, and NDV-HI antibodies were measured using Hemagglutination inhibition (HI) test. After 28 days post-vaccination, ten birds from all groups were challenged intramuscularly at a dose 0.5 mL/bird containing 106 EID50 of local NDV genotype VII. Challenge virus shedding was detected using real time qrt-PCR of oropharyngeal swabs that were collected from all challenged chicken groups of at 3, 5, 7 and 10 days post challenge. Obtained results showed that vaccinated groups of SPF-chickens either supplied with Spirulina or control treatment group induced positive serological response as NDV-HI antibody were measured in sera of immunized chicks (7.6, 8, 8.3, 8.9 and 7.4 log2, respectively) at 4 weeks post vaccination (WPV). Significant differences were observed at 2 WPV in the vaccinated SPF chickens consumed 1, 1.5 and 2 g of SP/kg of ration, compared to untreated vaccinated group (p<0.05). Immunized SPF chickens supplied with different SP concentration confer satisfactory protection against heterologous challenge virus (90 percent, 100 percent, 100 percent and 100 percent respectively), in contrast to untreated vaccinated chickens. Different percentages of reduction of viral shedding (55 percent, 65 percent, 76 percent and 87 percent) of treated vaccinated chickens with different concentration of SP were detected, despite untreated group were reduced 46 percent from total viral shedding. These findings suggest that dietary Spirulina has immune-stimulatory effects on the immune system of SPF chickens. One gram from SP per kg of ration was minimum recommended concentration that able to exhibit optimum immune response, increase protection against heterologous strains and able to reduce viral shedding(AU)
El objetivo de este estudio fue investigar los efectos de la suplementación con polvo de Spirulina platensis (SP) sobre la respuesta inmune en pollos SPF. Para este propósito se agruparon al azar 120 polluelos SPF en seis grupos de 20 aves cada uno, que se asignaron a cinco grupos vacunados con la vacuna comercial inactivada contra la enfermedad de Newcastle (ND) a los 21 días de edad. Cuatro grupos se suplementaron con 0,5; 1; 1,5 y 2 g de SP por kg de ración a los 7 días de edad, un grupo vacunado sin suplemento y un grupo sin ningún tratamiento. Semanalmente, se recogieron muestras de sangre individuales de todos los grupos y se midieron los anticuerpos hemaglutinantes contra el virus Newcastle (NDV-HI) mediante la prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI). 28 días después de la vacunación, fueron retadas diez aves de cada grupo por vía intramuscular a una dosis 106 EID50 del genotipo VII del NDV local en un volumen de 0,5 mL/ave. Se detectó la eliminación del virus mediante qrt-PCR en hisopos orofaríngeos que se recolectaron en todos los grupos a los 3, 5, 7 y 10 días después del reto. Los resultados obtenidos mostraron que los grupos vacunados de pollos y suplementados con Espirulina y el grupo de control vacunado, indujeron una respuesta serológica positiva cuando se determinaron los anticuerpos NDV-HI en los pollitos inmunizados (7,6; 8; 8,3; 8,9 y 7,4 log2 respectivamente) a las 4 semanas después de la vacunación (SPV). Se observaron diferencias significativas a las 2 SPV en los pollos vacunados que consumieron 1, 1,5 y 2 g de SP/kg de ración, en comparación con el grupo vacunado no tratado (p<0,05). Los pollos inmunizados que recibieron diferentes concentraciones de SP mostraron una protección satisfactoria contra el desafío heterólogo viral (90 por ciento, 100 por ciento y 100 por ciento respectivamente), en contraste con los pollos vacunados no tratados. Se observaron diferentes porcentajes de reducción de la diseminación viral (55 por ciento, 76 por ciento y 87 por ciento) entre los pollos vacunados tratados con diferente concentración de SP. En el grupo no tratado se redujo al 46 por ciento. Estos hallazgos sugieren que la Espirulina en la dieta tiene efectos inmunoestimuladores sobre el sistema inmunitario de los pollos. Un gramo de SP por kg de ración fue la concentración mínima recomendada para una respuesta inmune óptima, y de esta forma aumentar la protección contra las cepas heterólogas y disminuir la diseminación viral(AU)
Subject(s)
Humans , Male , Female , Newcastle disease virus/pathogenicity , Vaccines, Inactivated , Chickens , Spirulina , Real-Time Polymerase Chain Reaction/methods , Newcastle Disease/diagnosis , BirdsABSTRACT
Se realizó un estudio descriptivo y transversal de 30 féminas con infección por el virus del papiloma humano, atendidas en la consulta de Inmunología del Policlínico de Especialidades perteneciente al Hospital Provincial Docente Clinicoquirúrgico "Saturnino Lora Torres" de Santiago de Cuba, desde junio del 2009 hasta igual mes del 2010, a fin de caracterizarlas según la respuesta inmunitaria. Para evaluar la respuesta inmune celular y humoral se empleó el test de rosetas y la cuantificación de inmunoglobulinas, respectivamente. En la serie prevaleció la infección por el virus antes mencionado en las mujeres de 25-35 años (40,0 %), en especial las procedentes de la zona urbana y se evidenció una disminución de la respuesta celular significativa con relación a la humoral.
A descriptive and cross-sectional study was carried out in 30 females infected with the human papilloma virus, attended in the office of Immunology of the Specialty Polyclinic belonging to "Saturnino Lora" Provincial Clinical Surgical Teaching Hospital in Santiago de Cuba, from June 2009 to June 2010, in order to characterize them according to immune response. To evaluate the humoral and cellular immune response rosetting assay and quantification of immunoglobulines were used respectively. Women between 25-36 years of age (40 %) infected with this virus, especially those coming from urban areas, prevailed in the series, and a significant decrease of the cellular response as compared to the humoral response was evidenced.
ABSTRACT
Objetivos: estudiar detalladamente la respuesta humoral de las distintas clases de inmunoglobulinas en el fluido oral de individuos infectados con el HTLVI, compararla con la del suero y correlacionarla con la existencia de una replicación viral activa en la mucosa oral. Métodos: se determinaron mediante ELISA y western blot las respuestas de IgG, IgM e IgAs específicas para las proteínas de HTLV-I tanto en el suero como en el fluido oral (FO) de 14 pacientes con paraparesia espástica tropical, mieolopatía asociada al HTLV-I (PET/MAH), 11 seropositivos asintomáticos y 12 controles seronegativos. Mediante RT-PCR se amplificaron moldes de RNA genómico viral de pol y tax presentes en el FO. Los datos fueron sometidos a diferentes pruebas de decisión estadística. Resultados: el total de muestras de suero y FO i incluidos en el estudio mostró una distribución diferencial en el contenido de anticuerpos IgG, IgM e IgAs específicos para antígenos virales. Aquellos individuos que contenían inmunoglobulinas anti-HTLV-I en FO mostraron patrones de western blot de IgG e IgAs contra las proteínas gp61/68, p55/53, gp46, p40, p24 y p19, además de las recombinantes r-tax y r-env. En general, fluidos orales con niveles detectables de IgAs, mostraron amplificación del cDNA para los genes tax y pol. Conclusión: los resultados obtenidos apoyan la hipótesis de que la dinámica de la respuesta inmune a la infección por el virus en la mucosa oral es compleja e involucra múltiples procesos