Autophagy inhibitor 3-methyladenine could not modulate rotenone neurotoxicity in primary mesencephalic cell culture / El inhibidor de la autofagia 3-metiladenina no logra modular la neurotoxicidad de la rotenona en el cultivo primario de células mesencefálicas

Dysregulated autophagy, whether excessive or downregulated, has been thought to be associated with neurodegenerative disorders including Parkinson's disease. Accordingly, the present study was carried out to investigate whether 3-methyladenine, an autophagy inhibitor, can modulate the effects of rotenone on dopaminergic neurons in primary mesencephalic cell culture. Cultures were prepared from embryonic mouse mesencephala at gestation day 14. Four groups of cultures were treated on the 10th DIV for 48 h as follows: the first was kept as an untreated control, the second was treated with 3-methyladenine alone (1, 10, 100, 200 mM), the third was treated with 20 nM rotenone and the fourth was co-treated with 20 nM rotenone and 3-methyladenine (1, 10, 100, 200 mM). On the 12th DIV, cultured cells were stained immunohistochemically against tyrosine hydroxylase and culture media were used to measure the levels of lactate dehydrogenase. 3methyladenine had no effects on both the survival of dopaminergic neurons and the release of lactate dehydrogenase. Rotenone significantly decreased the number of dopaminergic neurons and increased the levels of lactate dehydrogenase in the culture media. When cultures concomitantly treated with 3-methyladenine and rotenone, 3-methyladenine had no effect against rotenone-induced dopaminergic cell damage and lactate dehydrogenase release into the culture medium. In conclusion, the autophagy inhibitor 3-methyladenine could not modulate rotenone-induced dopaminergic cell damage in primary mesencephalic cell culture.

Se estima que la autofagia desregulada, ya sea excesiva o con baja regulación, está asociada con trastornos neurodegenerativos, incluyendo la enfermedad de Parkinson. En consecuencia, el se realizó este estudio para investigar si la 3metiladenina, un inhibidor de la autofagia,puede modular los efectos de la rotenona en las neuronas dopaminérgicas en el cultivo primario de células mesencefálicas. Los cultivos se prepararon a partir de mesencéfalo de ratón embrionario el día 14 de gestación. Cuatro grupos de cultivos se trataron en el 10º DIV durante 48 h de la siguiente manera: el primer grupo se mantuvo como un control no tratado, el segundo se trató con 3-metiladenina sola (1, 10, 100, 200 mM), el tercer grupo se trató con rotenona 20 nM y el cuarto se trató conjuntamente con rotenona 20 nM y 3-metiladenina (1, 10, 100, 200 mM). En el 12º DIV; las células cultivadas fueron tratadas mediante tinción inmunohistoquímica en tirosina hidroxilasa y se usaron medios de cultivo para medir los niveles de lactato deshidrogenasa. La 3-metiladenina no tuvo efectos tanto en la supervivencia de las neuronas dopaminérgicas como en la liberación de lactato deshidrogenasa. La rotenona disminuyó significativamente el número de neuronas dopaminérgicas y se observó un aumento de los niveles de lactato deshidrogenasa en los medios de cultivo. Cuando los cultivos tratados concomitantemente con 3-metiladenina y rotenona, la 3metiladenina no tuvo efecto contra el daño celular dopaminérgico inducido por la rotenona y la liberación de lactato deshidrogenasa en el medio de cultivo. En conclusión, el inhibidor de la autofagia 3-metiladenina no moduló el daño celular dopaminérgico inducido por la rotenona en el cultivo celular mesencefálico primario.

Glucose promotes resistance in lymphocytes against oxidative stress-induced apoptosis through signaling and metabolic pathways. Implications for Parkinson's disease / La glucosa promueve la resistencia en linfocitos contra el estrés oxidativo que induce apoptosis a través de rutas de señalización y metabólica. Impacto en la enfermedad de Parkinson / A glucose promove a resistência em linfócitos contra o estresse oxidativo que induz apoptose a través de rotas de sinalização e metabólica. Impacto na doença de Parkinson

SUMMARY Introduction: Parkinson's disease (PD) is a neurological disorder associated with the selective loss of dopaminergic (DAergic) neurons. Clinical data suggest that oxidative stress (OS) and dysregulation of glucose (G) metabolism are early events in PD. However, no data are available to explain the molecular connection between glucose metabolism, OS, and neuronal demise in PD. Human lymphocytes share a similar dopaminergic signaling mechanism with DAergic neurons. Further, rotenone (ROT) is a mitochondrial complex I inhibitor that selectively induces apoptosis through OS in dopaminergic neurons and lymphocytes. Thus, to test the hypothesis that G metabolism and OS are linked in dopaminergic system toxicity and PD, human lymphocytes were cultured with ROT in the presence or absence of various concentrations of glucose. Objective: This study examines the response of human lymphocytes to glucose (11, 55, 166, 277, 555 mM G) in the absence or presence of ROT (250 microM). Methods: Light and fluorescence microscopy and immunocytochemistry techniques were used to evaluate morphological and biochemical changes in human lymphocytes. Results: 55 mM G was effective in suppressing ROT-induced apoptosis in lymphocytes via 5 pathways: (i) pentose phosphate pathway (PPP), (ii) glutathione (GSH) pathway, (iii) superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) antioxidant systems, and (iv) Phosphoinositide 3-kinase (PI3-K) signaling. Additionally, we report for the first time that G rescued lymphocytes from ROT-induced apoptosis by (v) activating NF-kB and down-regulating p53 and caspase-3. Signaling (e.g., LY294002) and metabolic inhibitors of these pathways (e.g., dehydroepiandrosterone (DHEA), L-buthioninesulfoximine (BSO), 1,3-Bis (2-chloroethyl)-1-nitrosourea (BCNU), mercaptosuccinic acid (MS), 3-amino-1,2,4- triazole (AT), sodium diethyldithiocarbamate (DDC)) only partially reversed the protective effect of 55 mM G on lymphocytes exposed to ROT. Conclusion: These data suggest that high G simultaneously triggers cellular signaling and antioxidant systems to ensure global cell protection against stressful conditions in DAergic.

RESUMEN Introducción: la enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurológico asociado con la pérdida selectiva de neuronas dopaminérgicas (DAérgicas). Datos clínicos sugieren que el estrés oxidativo (EO) y la desregulación del metabolismo de la glucosa (G) son eventos tempranos en la EP. Sin embargo, no existe información que explique la posible asociación molecular entre el metabolismo de la glucosa, el EO y la muerte neuronal. Los linfocitos humanos comparten mecanismos de señalización DAérgicos comunes. Más aún, la rotenona (ROT) es un inhibidor que selectivamente induce apoptosis vía EO en neuronas DAérgicas y linfocitos. Para evaluar la hipótesis que el metabolismo de la G y el EO están asociados con la toxicidad del sistema DAérgicas y EP, se cultivaron linfocitos humanos con ROT en presencia o ausencia de varias concentraciones de G. Objetivo: este estudio examina la respuesta de los linfocitos a G (11, 55, 166, 277, 555 mM) en ausencia o presencia de ROT (250 microM). Métodos: se utilizaron técnicas de microscopía de luz y fluorescencia e inmunocitoquímica para evaluar los cambios morfológicos y bioquímicos de los linfocitos. Resultados: la G 55 mM fue eficaz en suprimir la apoptosis en linfocitos inducida por ROT vía activación de 5 rutas metabólicas: (i) la vía pentosa fosfato, (ii) la vía glutatión; (iii) los sistemas antioxidantes superóxido dismutasa (SOD) y catalasa (CAT); (iv) fosfoinositol 3 cinasa (PI3-K). Además, se observó por primera vez que la G rescata linfocitos de la apoptosis inducida por ROT vía (v) activación del factor nuclear kappa-B (NFkB) y por regulación a la baja de p53 y de la caspasa-3. Se demostró que los inhibidores de señalización (v.gr. LY294002) e inhibidores metabólicos (v.gr. DHEA, BSO, BCNU, MS, DCC) revierten parcialmente los efectos citoprotectores de la G 55 mM en linfocitos expuestos a ROT. Conclusión: estos hallazgos sugieren que la alta concentración de G induce simultáneamente sistemas de señalización y antioxidantes para asegurar la protección global de la célula contra condiciones estresantes en células DAérgicas.

RESUMO Introdução: a doença de Parkinson (PD) é uma desordem neurológica associada a perda seletiva de neurônios dopaminérgicos (Daergicas). Dados clínicos sugerem que o estresse oxidativo (EO) e a desregulação do metabolismo da glicose (G) são eventos iniciais no PD. No entanto, não há nenhuma informação que explica a possível associação molecular entre o metabolismo da glicose, EO e morte neuronal. Linfócitos humanos compartilham comum Daergicos mecanismos de sinalização. Além disso, a rotenona (ROT) é um inibidor que seletivamente induz apoptose através de EO nos neurônios Daergicas e linfócitos. Para avaliar a hipótese de que o metabolismo do G e EO estão associadas com a toxicidade do Daergicas e sistema de EP, linfócitos humanos com ROT foram cultivados na presença ou ausência de várias concentrações de G. Objetivo: este estudo analisa a resposta dos linfócitos a G (55 11, 166, 277, 555 mM) na ausência ou presença de podridão (250 microM). Métodos: luz e imunocitoquímica, microscopia de fluorescência foram utilizadas técnicas para avaliar as alterações morfológicas e bioquímicas de linfócitos. Resultados: a 55mM G foi eficaz em suprimir a apoptose em linfócitos induzidos por (ROT) a través da ativação de 5 vias metabólicas: (i) a través do fosfato de pentose, (ii) a través de glutationa; (iii) a superóxido dismutase de antioxidante (SOD) e catalase (CAT) sistemas; (iv) Phosphoinositide 3 cinase (PI3-K). Além disso, foi observada pela primeira vez que o G resgata a apoptose de linfócitos induzida por (ROT) via ativação (v) por fator nuclear kappa-B, (NF-kB) e por regulação por baixo de p53 e Caspase-3. Mostrou que inibidores (por exemplo, LY294002), inibidores de sinalização e metabólicos (por exemplo, DHEA, BSO, BCNU, MS, DCC) reverteu parcialmente os efeitos dos tilacoides do G 55 mM de linfócitos expostos à (ROT). Conclusão: estes resultados sugerem que a alta concentração de G induz simultaneamente antioxidantes e sistemas de sinalização para garantir a proteção global da célula de condições estressantes nas células Daergicas.

A comparison of visual and collection-based methods for assessing community structure of coral reef fishes in the Tropical Eastern Pacific / Una comparación de métodos visuales y basados ​​en colecciones para evaluar la estructura de la comunidad de peces de arrecifes de coral en el Pacífico Oriental Tropical

Gorgona Island, the major insular area in the Colombian Pacific Ocean, is characterized by a remarkably high biological and ecosystem diversity for this area of the world. Coral reefs are well developed and their fish communities have been described using conventional visual surveys. These methods, however, are known to be biased towards detecting larger and more mobile species, tending to ignore small and cryptobenthic species. The two main objectives of this study were to describe the assemblage structure of the cryptobenthic fish fauna and estimate the extent to which this fauna is underestimated by visual surveys.At the beginning and the end of the warm season, we compared the cryptobenthic fish assemblage recorded using visual surveys against the one recorded using “enclosed anesthetic/rotenone samples” on isolated coral colonies (N=54 beginning of warm season; N=17 end of warm season). The crypthobenthic fish fauna associated to coral colonies was characterized by small body sizes and was composed mainly by species of the families Antennaridae, Blennidae, Gobiidae, Labrisomidae, Muraenidae, Serranidae, Scorpaenidae and Syngnathidae. Conventional visual surveys underestimated overall species richness by 28-36% and number of individuals by 16-35%. Noteworthy, four species recorded during this study using “enclosed anesthetic/rotenone samples” were new records for Gorgona Island. Although both sampling methods can detect a largely overlapping group of species, the “enclosed anesthetic/rotenone samples” method was able to detect more individuals and species, including several species that visual surveys fail to detect. Although this study is the first effort to describe the cryptobenthic fish assemblage associated to coral reefs in the Tropical Eastern Pacific, our results suggest that these assemblages are an important component of the reef fish community in the region in terms of biodiversity and functional roles. Rev. Biol. Trop. 62 (Suppl. 1): 359-371. Epub 2014 February 01.

Métodos de muestreo convencionales (censos visuales) usados en el estudio de peces arrecifales han llevado a una constante subestimación de la riqueza de especies, ya que estos tienden a ignorar especies pequeñas y crípticas. En este estudio describimos la estructura del ensamblaje de peces criptobentónicos en Isla Gorgona, Colombia y estimamos el grado en que este ensamblaje es subestimado al usar censos visuales. Al comienzo y al final de la estación cálida comparamos la capacidad de detección de censos visuales vs “muestreos cerrados con anestésico/rotenona” (N=54 comienzo; N=17 final). La fauna criptobentónica se caracterizó por mantener individuos de tamaños corporales pequeños, pertenecientes principalmente a las familias Antennaridae, Blennidae, Gobiidae, Labrisomidae, Muraenidae, Serranidae, Scorpaenidae and Syngnathidae. Los censos visuales subestimaron la riqueza de especies en un 28-36% y el número de individuos en un 16-35%. Aunque un gran número de especies son detectadas usando ambos métodos, los “muestreos cerrados con anestésico/rotenona” detectan un mayor rango de especies. Este estudio, el primer esfuerzo para describir el ensamblaje de peces criptobentónicos asociados a arrecifes coralinos en Colombia, sugiere que la fauna criptobentónica puede ser un componente importante de la comunidad arrecifal en términos de biodiversidad y papel funcional.

Estudo da degradação da proteína Tau hiperfosforilada por vias independentes do proteassoma, em modelo experimental de neurodegeneração / Study of hyperphosphorylated Tau protein degradation by proteasome-independent pathways, in an experimental model of neurodegeneration

O desenvolvimento das doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer, está associado à presença de agregados proteicos contendo Tau hiperfosforilada (p-Tau). Esta disfunção da Tau leva a prejuízos na homeostase celular. Um mecanismo chave para diminuir e/ou prevenir os danos promovidos pelos agregados contendo Tau seria o estímulo de sua degradação. Neste sentido, a proposta do presente estudo foi analisar a degradação da proteína Tau após aumento da expressão exógena da cochaperona Bag-2, a qual influencia o sistema proteassomal de degradação; bem como avaliar a ativação dos sistemas de degradação, a fim de correlacionar estes sistemas em cultura de células primárias e organotípica do hipocampo de ratos. Os resultados mostraram que a rotenona foi capaz de aumentar os níveis de p-Tau e que a superexpressão de Bag-2, foi eficiente em prevenir e degradar a p-Tau. O mecanismo envolvido neste processo envolve a coordenação dos sistemas proteassomal e lisossomal, já que a Rab7 e a Rab24 (envolvidas na via lisossomal) mostraram-se diminuídas na fase que antecede a agregação proteica, enquanto houve aumento da Rab24 na presença dos agregados proteicos. Com relação ao peptídeo beta amiloide, foi demonstrado tendência de aumento de p-Tau acompanhado de diminuição da atividade proteassomal e lisossomal. O tratamento com PADK (ativador lisossomal) foi capaz de reverter este efeito nestas diferentes condições. A análise da interrelação entre os sistemas mostrou que uma inibição do proteassoma favorece a via lisossomal e que o inverso não se repete. Os resultados sugerem que a modulação das vias de degradação pode ser interessante para o estudo, prevenção e tratamento das doenças neurodegenerativas associadas à agregação de proteínas...

Neurodegenerative diseases, such as Alzheimer's, are associated to protein inclusions containing hyperphosphorylated Tau (p-Tau). It is well established that Tau dysfunction impairs cell homeostasis. A key mechanism to prevent and/or reduce the damage promoted by aggregates of Tau might be its degradation. In view of this, the aims of the present study are to evaluate p- Tau clearance following exogenous expression of Bag-2, which stimulates proteasome; as well as to analyze the activation of both lysosome and proteasome pathways in order to understand the crosstalk between these two systems in primary and organotypic cultures of rat hippocampus. Results showed that rotenone was able of increasing p-Tau that was prevented and degraded by Bag-2 overexpression. Mechanisms involved in this process involve the coordination of cell degradation systems, depending upon aggregation status, since Rab7 and Rab24 (involved in lysosomal pathway) were decreased before protein aggregation, while Rab24 increased in the presence of protein inclusions. Amyloid-beta peptide also increased p-Tau accompanied by decreased proteasome and lysosome activity. PADK (lysosomal activator) treatment reverted the inhibition promoted by amyloidbeta peptide. Inhibition of proteasome leads to activation of lysosome, but lysosome inhibition does not affect proteasome. Overall, results suggest that targeting degradation pathways might be useful to understand, prevent and treat neurodegenerative diseases associated with protein deposits...

Efecto de la exposición al pesticida rotenona sobre el desarrollo del sistema dopaminérgico nigro-estriatal en ratas / Developmental effects of rotenone exposure on the rat nigro-striatal dopaminergic system

Rotenone is a pesticide used in Mexico, despite the experimental evidence showing dopaminergic neurons degeneration induced by this compound, which may lead to a psychomotor impairment. However, the possible effects of rotenone on the offspring when they are indirectly exposed through their mothers are still unknown. In this study rotenone was administered to female rats during pregnancy and nursing, in order to assess its effects on the offspring's dopaminergic neurons in the substantia nigra, as well as on motor coordination at 30 or 60 postnatal days. Six groups of pregnant Wistar rats were used: an intact control group, a vehicle group injected with the rotenone solvent, and four groups injected subcutaneously with the following doses of rotenone: 0.2, 0.4, 0.6, and 1 mg/kg/day. In a parallel experiment, the offspring of other groups of dams treated with rotenone 1 mg/kg/day, or controls vehicle-treated, were used to evaluate motor coordination at 30 and 60 postnatal days. Rotenone treated dams showed a significant lower amount of dopaminergic neurons in the substantia nigra, but only with the 1 mg/kg dose. This effect was also observed in the offspring but at all doses of rotenone tested, either at 30 or 60 postnatal days. Furthermore, the offspring of rotenone exposed dams significantly increased the time in which they accomplished the motor coordination test, compared to the offspring of control dams. These data indicate that rotenone is able to damage the dopaminergic neurons of the offspring though their mothers. This effect requires lower rotenone doses than in adult rats. The reduced number of dopaminergic neurons at early stages of life enhances the risk of developing disorders related to the brains' dopaminergic system.

La rotenona es un pesticida utilizado en México a pesar de que se ha demostrado experimentalmente que produce una degeneración de las neuronas dopaminérgicas, y puede derivar en deterioro psicomotor. Sin embargo, no existen estudios de la exposición indirecta a rotenona a través de las madres en el efecto que produzca sobre su descendencia. Nosotros administramos rotenona a ratas durante la gestación y la lactancia para evaluar las alteraciones producidas sobre las neuronas dopaminérgicas y la coordinación motora de sus crías, a los 30 o 60 días posnatales. Para cuantificar las neuronas inmunorreactivas a tirosina hidroxilasa de la sustancia nigra, se inyectaron subcutáneamente seis grupos de hembras Wistar: intactas (control), con solvente de rotenona (vehículo) y cuatro grupos con rotenona en dosis: 0.2, 0.4, 0.6 y 1.0 mg/kg/día. En un experimento paralelo, las crías de otros grupos de hembras tratadas con rotenona 1 mg/kg/día o controles fueron evaluados en la prueba de coordinación motora a los 30 y 60 días posnatales. Las madres tratadas con 1 mg/kg de rotenona tuvieron menos neuronas dopaminérgicas en la sustancia nigra. Dicho efecto se observó también en las crías, pero con todas las dosis de rotenona utilizadas, tanto a los 30 como a los 60 días posnatales. Además, la exposición indirecta a rotenona aumentó significativamente el tiempo que requirieron las crías para ejecutar la prueba de coordinación motora. Estos datos indican que la rotenona es capaz de inducir daño en las neuronas dopaminérgicas de las crías cuando son expuestas a través de sus madres. Este efecto en las crías se observa con dosis menores de rotenona que en ratas adultas. Por lo tanto, los individuos indirectamente expuestos a rotenona podrían tener menos neuronas dopaminérgicas desde etapas tempranas de la vida, lo que aumenta el riesgo de desarrollar trastornos relacionados con el sistema dopaminérgico.

Bioactivity of aqueous extracts of Clibadium sylvestre (Aubl.) Baill. and Derris amazonica Killip on the aphid Myzus persicae (Sulzer, 1776) (Hemiptera: Aphididae) / Bioatividade de extratos aquosos de Clibadium sylvestre (Aubl.) Baill. e Derris amazonica Killip no controle do pulgão Myzus persicae (Sulzer) (Hemiptera: Aphididae)

Studies with botanical insecticides have become more popular as an alternative to Integrated Pest Management. The purpose of this study was to evaluate the effect of leaf and fruit aqueous extracts, from the species Clibadium sylvestre, and leaves and root of Derris amazonica species at concentrations of 0, 1, 2, 4 and 8 percent, in the control of the aphid Myzus persicae (Hemiptera: Aphididae). Four experiments were conducted; two tests with choice preference and two tests with no choice preference, giving nine treatments and five repetitions. Phytochemical screening was carried out from the leaves and fruit of the species C. sylvestre and leaves and root of D. amazonica. Evaluations of mortality, number of nymphs, and deterrence index of the insects were conducted 24, 48 and 72 h after the application of the extracts. The aqueous extracts tested from C. sylvestre fruit concentrations had the highest mortality compared to the control; in the analysis of the number of the nymphs, the aqueous extract from fruit at 8 percent concentration had a higher efficiency than the other treatments. The D. amazonica leaves extract at 1 percent concentration showed the highest mortality and the lowest number of nymphs. The D. amazonica root extracts increased mortality at all concentrations tested, and the 8 percent concentration had the fewest nymphs. All treatments showed a deterrent effect. The 72 h period showed the greatest effect of the extracts, on two species of insects.

Estudos com inseticidas botânicos vêm ganhando espaço como alternativa no Manejo Integrado de Pragas. Conduziu-se este trabalho com o objetivo de avaliar o efeito de extratos aquosos de folhas e frutos da espécie Clibadium sylvestre, e folhas e raízes da espécie Derris amazonica nas concentrações 0, 1, 2, 4 e 8 por cento, no controle do pulgão Myzus persicae (Hemiptera: Aphididae). Foram conduzidos quatro ensaios, dois testes de preferência sem chance de escolha e dois testes de preferência com chance de escolha, totalizando nove tratamentos com cinco repetições. Foi realizada a triagem fitoquímica das folhas e dos frutos da espécie C. sylvestre e das folhas e das raízes de D. amazonica. As avaliações de mortalidade, número de ninfas e índice de deterrência dos insetos, foram realizadas 24, 48 e 72 horas após a aplicação dos extratos. Os extratos aquosos do fruto do C. sylvestre nas concentrações testadas apresentaram maior mortalidade frente à testemunha, na análise do número de ninfas, o extrato aquoso do fruto do C. sylvestre a 8 por cento apresentou maior eficiência que os demais tratamentos. O extrato da folha de D. amazonica na concentração 1 por cento apresentou maior mortalidade e menor número de ninfas que os demais tratamentos. Os extratos da raiz de D. amazonica aumentaram a mortalidade em todas as concentrações testadas e a concentração 8 por cento da raiz de D. amazonica, apresentou menor número de ninfas. Todos os tratamentos testados apresentaram efeito deterrente. O período de 72 horas foi o que apresentou maior efeito dos extratos, das duas espécies estudadas sobre os insetos.

Ação inseticida do extrato de Derris amazonica Killip para Cerotoma arcuatus Olivier (Coleoptera: Chrysomelidae) / Insecticide action of the extract of Derris amazonica Killip for Cerotoma arcuatus Olivier (Coleoptera: Chrysomelidae)

A abundância e o potencial inseticida de Derris amazonica e a necessidade de controle de Cerotoma arcuatus Olivier (Coleoptera: Chrysomelidae) na cultura do feijão-caupi (Vigna unguiculata L. Walp) estimularam a realização desta pesquisa, que objetivou avaliar a ação inseticida do extrato de D. amazonica a adultos de C. arcuatus em condições de laboratório. Os bioensaios testaram as vias de intoxicação por ingestão de folhas contaminadas, contato com superfície contaminada e aplicação tópica, com delineamento experimental inteiramente casualizado, com quatro repetições. Os valores de mortalidade e consumo foliar dos insetos foram submetidos à análise de regressão, sendo utilizada a análise de Probit para determinação das CL50, da DL50 e dos TL50. O extrato de D. amazonica, contendo 3,7% de rotenona, foi tóxico para adultos de C. arcuatus via ingestão de folhas contaminadas (CL50=15,14 µL do extrato.mL-1 de água), superfície contaminada (CL50=0,45 µL do extrato.cm-2) e aplicação tópica (DL50=1,44 µL do extrato.g-1 do inseto). Mortalidades de adultos de C. arcuatus superiores a 80% e os menores tempos letais médios foram obtidos na concentração de 5% (v v-1) do extrato em todos os bioensaios. O consumo foliar de adultos de C. arcuatus foi inversamente proporcional a concentração do extrato quando expostos por via de ingestão foliar ou aplicação tópica, sendo inclusive observada inibição da alimentação dos indivíduos. O extrato de D. amazonica é tóxico para C. arcuatus e inibe a alimentação dos insetos a partir da concentração de 1% (v v-1).

The abundance and insecticidal potential of Derris amazonica in addition to need of controlling Cerotoma arcuatus for bean crop stimulated this research. The objective of this work was to evaluate insecticide action of the extract of D. amazonica to adults of C. arcuatus in laboratory conditions. The bioassays were carried out using three distend methodologies: leaf intake, contact in treated surface (filter paper) and topical application. A completed randomized experimental design was used with four replications. Mortality values and leaf consumption of the insects were subjected to regression analyses, being the Probit analyses used to determine of the i.e., LC50, LT50 and LD50. The extract of D. amazonica containing 3.7% of rotenone was toxic to adults C. arcuatus when exposed to treated leaves (LC50 = 15.14 µl.mL-1), treated surface (LC50 = 0.45 µl.cm-2) and subjected to topical exposure (LD50 = 1.44 µl.g-1). In all bioassays the adults mortality was higher than 80% with lower median lethal times obtained with 5% (v.v-1) concentrations of the extract. Leaf consumption by adults C. arcuatus was inversely proportional to the concentration of the extract when exposed by leaf intake or topical application, also being observed inhibition of feeding individuals. The extract of D. amazonica is toxic to C. arcuatus and inhibits the feeding of insects from the concentration of 1% (v v-1).

Sistema de pastejo, rotenona e controle de parasitas em bovinos cruzados: efeito no ganho de peso e no parasitismo / Grazing systems, rotenone and parasites control in crossbred calves: effect on live weight gain and on parasites burdens

Foram realizados dois experimentos para avaliar o controle de endo e ectoparasitos de bovinos. No primeiro avaliou-se in vitro e, em animais experimentalmente infestados, o efeito da rotenona no carrapato Rhipicephalus(Boophilus) microplus e, no segundo, avaliou-se o efeito do pastejo rotacionado e de tratamentos contra endo e ectoparasitos na carga parasitária e no desenvolvimento de animais naturalmente parasitados. In vitro a rotenona mostrou ação acaricida nas larvas e nas teleóginas, e nas larvas nos animais estabulados. Três tratamentos com endectocida, no período seco, diminuiram significativamente a contagem de ovos por grama de fezes (OPG) e o número de teleóginas, e, aumentou significativamente o ganho médio de peso. Os animais tratados com uma aplicação de levamisol estavam nesse período com médias de OPG intermediárias e significativamente diferentes dos grupos controle e tratados com endectocida. O ganho de peso, entretanto, não diferiu significativamente do grupo controle. No período das águas, os animais tratados com fipronil estavam significativamente menos parasitados por teleóginas, mosca-dos-chifres e por larvas de Dermatobia hominis; e os tratados com rotenona. menos parasitados por mosca-dos-chifres que os animais controle. Diferentemente do esperado, os animais sob pastejo rotacionado estavam no período seco com OPG significativamente maior que os em sistema contínuo. Três tratamentos com endectocida, no período seco, e três tratamentos acaricida com fipronil, na estação chuvosa, diminuíram significativamente o OPG, o número de teleóginas e o de larvas de berne, e proporcionou um aumento significativo de 23 kg de peso vivo em relação aos animais não tratados.

Practices for endo and ectoparasite control in beef cattle were evaluated in two independent experiments. First, the effects of rotenone® on Rhipicephalus (Boophilus) microplus ticks were evaluated in vitro and in experimentally infected calves. In the second trial, the effects of grazing systems associated with endo and ectoparasite treatments on parasite burden and weight gain of naturally parasited animals were evaluated. Rotenone showed acaricide action on larvae and engorged ticks during in vitro tests and on larvae in experimentally infected calves. Three treatments with endectocide decreased (P < .05) the number of EPG and ticks and increased (P < .05) the weight gain in the dry season. Animals treated with only one application of levamisole showed EPG intermediate and different (P < .05) from the groups treated with endectocide (lower) and control (higher) in the dry season, but the weight gain obtained with this treatment did not differ from the control group. During the raining season the animals treated with fipronil were significantly less parasited by horn fly, tick and larvae of Dermatobia hominis and the group treated with rotenone were significantly less parasited by horn fly in relation to control. Animals under rotational grazing showed significantly higher EPG than those under continuous grazing. Three treatments with endectocide in the dry season plus three acaricide treatments with fipronil in the raining season reduced EPG, tick, and screw worm larva counts, and provided a significant increase (23 kg) of live weight gain in relation to untreated animals.

Teores de rotenona em Clones de Timbó (Derris Spp. Fabaceae) de diferentes regiões da Amazônia e os seus efeitos na emergência de Imagos em Musca Domestica L

The rotenone contents analysis in clones of three timbó species permited the classification of these plants based on their efficiency to control Musca domestica larvae. The results showed significant correlations between the rotenone contents in the Derris urucu and D. nicou clones with the capacity to control the larvae. The plants with high rotenone contents were more effective. The rotenone contents, the effect of Derris species clones on the flics and the localization of the plants origin, showed that among the plants could have happened a populational isolation in the Amazonia during the pleistocene epoch. In Derris sp., that presented lower rotenone contents and was ineffective to control of the larvae, these differences were not observed.

A análise dos teores de rotenona, em clones de três espécies de timbó, permitiram a classificação destas plantas de acordo com as suas eficiências no controle de larvas de Musca domestica. Os resultados evidenciaram correlações significativas entre os teores de rotenona apresentados pelos clones de Derris urucu e de Derris nicou, com relação a capacidade de controle das larvas. As plantas com os maiores teores de rotenona foram as mais eficientes. O conteúdo de rotenona, os efeitos dos clones das espécies de Derris nas moscas, além dos locais de origem das plantas, mostraram que deve ter ocorrido entre estes timbós, a existência de isolamento populacional, durante a época do pleistoceno na Amazônia. Em Derris sp., que apresentou menor teor de rotenona, sendo ineficiente no controle das larvas, estas diferenças não foram assinaladas.