Ecological and biological patterns of stream fish studies from the Piracicaba-CapivariJundiaí Basin (PCJ Basin, SP) assessed through a systematic review / Padrões ecológicos e biológicos de estudos de peixes de riachos da Bacia PiracicabaCapivari-Jundiaí (Bacia PCJ, SP) avaliados por meio de uma revisão sistemática

Tropical streams are among the most threatened ecosystems in the world. As such, studies carried out and compiled over spatial and temporal scales can provide useful information to examine patterns of species diversity and threats to their survival. Here we conducted a systematic review of published research on biological and ecological aspects of stream fish fauna found in the Piracicaba-Capivari-Jundiaí Basin, an industrial watershed of São Paulo State. We aimed to detect main patterns, trends and gaps in studies related to species composition, distribution, spatial and temporal scales, as well as in the covered topics. Results were related to main land uses, biomes and Conservation Units. A constant increase in published articles occurred from 2003 until 2016 with an average of 1.8 articles/year. Twenty-six publications were considered for the present study, reporting on fish samples obtained in 67 sites and resulting in 89 species. A high proportion of studies were concentrated in the Corumbataí sub-basin, and rarefaction curves indicated that stream fish richness in the PCJ Basin may be considerably higher than that shown by the actual numbers. Basin studies were unevenly distributed and did do not include such highly preserved areas as the Camanducaia, Jaguari and Jundiaí sub-basins. We emphasize the importance of further surveys in these regions, as well as in high priority conservation areas, which may lead to new insights for developing appropriate conservation strategies for this basin.

Riachos tropicais estão entre os ecossistemas mais ameaçados do mundo e a compilação de estudos temporais e espaciais pode fornecer informações úteis para examinar padrões de diversidade de espécies e ameaças nesses sistemas. Realizamos uma revisão sistemática das pesquisas publicadas sobre aspectos biológicos e ecológicos da ictiofauna de riachos da bacia do Piracicaba-Capivari-Jundiaí, uma bacia industrial do Estado de São Paulo. O objetivo foi detectar os principais padrões, tendências e lacunas em estudos relacionados à composição, distribuição de espécies, escalas espaciais, temporais e temas abordados. Os resultados foram relacionados aos principais usos do solo, biomas e Unidades de Conservação. Foi verificado um aumento constante de artigos entre 2003 e 2016, com média de 1,8 artigos/ano. Vinte e seis publicações foram consideradas para o estudo, que indicaram 67 locais amostrados, e o registro de 89 espécies. Uma alta proporção deles concentrou-se na sub-bacia de Corumbataí e curvas de rarefação indicaram que a riqueza de peixes de riacho na bacia do PCJ deve ser consideravelmente maior do que os números atuais. A distribuição desigual de estudos na bacia, que não inclui áreas altamente preservadas como as sub-bacias de Camanducaia, Jaguari e Jundiaí, enfatiza a necessidade de se obter mais informações nessas regiões, bem como em áreas de conservação de alta prioridade. Novas abordagens relacionadas a conceitos e teorias ecológicas em estudos futuros poderão fornecer informações que ajudem a desenvolver estratégias de conservação adequadas para esta bacia.

Effective interventions for the promotion of breastfeeding and healthy complementary feeding in the context of Primary Health Care / Intervenções efetivas para a promoção da amamentação e da alimentação complementar saudável no contexto da Atenção Primária à Saúde

Abstract Objective: To develop a rapid review on effective actions for the promotion of breastfeeding and healthy complementary feeding in primary health care and to summarize a list of actions and their elements for implementation. Data source: The review included systematic reviews on the effectiveness of interventions to promote breastfeeding and/or healthy complementary feeding for mothers and other caregivers, and/or professionals who work with this population, in comparison with any usual approach or none. Data synthesis: A total of 32 systematic reviews were included in the evidence synthesis. Ten types of interventions were evaluated in systematic reviews on promotion of breastfeeding and four types of interventions on promotion of healthy complementary feeding. The synthesis allowed six aspects to be discussed, and these must be considered to increase the chances of interventions' impact: type of intervention, target audience, timing of intervention, actors that can implement it, strategies and methods of intervention, and intensity of intervention. Conclusions: It was possible to assemble a list of actions whose effectiveness has already been demonstrated, providing elements for local adaptations. Evidence is expected to support and strengthen the implementation of programs aimed at promoting breastfeeding and complementary feeding in primary health care.

Resumo Objetivo: Desenvolver uma revisão rápida sobre intervenções efetivas para a promoção do aleitamento materno e da alimentação complementar saudável na Atenção Primária à Saúde e sintetizar um cardápio de ações e seus elementos para implementação. Fontes de dados: Foram incluídas revisões sistemáticas que avaliaram a efetividade de intervenções para promoção do aleitamento materno e/ou alimentação complementar saudável com mães e outros cuidadores e/ou profissionais que atuam com essa população em comparação com qualquer abordagem usual ou nenhuma. Síntese dos dados: Na síntese das evidências, foram incluídas 32 revisões sistemáticas. Nas revisões sistemáticas, foram avaliados dez tipos de intervenções no tema "promoção do aleitamento materno" e quatro tipos de intervenções no tema "promoção da alimentação complementar saudável". A síntese dos resultados permitiu discutir seis aspectos da implementação que devem ser considerados para aumentar as chances de impacto das intervenções: tipo de intervenção, público-alvo, momento da intervenção, atores que podem implementar, estratégias e métodos para conduzir a intervenção, e intensidade da intervenção. Conclusões: Os resultados permitiram apresentar um cardápio de ações cuja efetividade já foi demonstrada, fornecendo elementos para adaptações locais. Espera-se que as evidências apresentadas possam apoiar e fortalecer a implementação de programas de promoção do aleitamento materno e da alimentação complementar saudável na Atenção Primária à Saúde.

Use of X-Ray Photoelectron Spectroscopy as an analytical tool for the study of contamination by Teflon in the synthesis of Mo(VI)Cl2O2Bipy/ TiO2 catalysts

The preparation of catalysts can involve various sources of contamination, which can seriously affect the quality of the prepared materials. In the present work, a case of fluorine contamination in a set of catalyst samples was studied, in which using the X-Ray Photoelectron Spectroscopy (XPS) technique, it was evidenced by the F 1s signal that this element was present in the form of Teflon, since its binding energy corresponded mainly to the CF2 species. Furthermore, using the C 1s signal, it was also possible to corroborate the presence of the CF2 group, which is associated with the main component of the Teflon carbon chains. The use of this information made it possible to identify that the solvent dehydration procedure (previous step to obtaining the catalysts) could lead to contamination with Teflon since it involved various accessories with Teflon, organic solvents and high temperature; the Teflon tape and the magnetic stirrer being the possible sources of contamination.

La preparación de catalizadores puede contener diversas fuentes de contaminación, las cuales pueden afectar seriamente las propiedades de los materiales preparados. En este artículo se estudió un caso de contaminación con flúor en una serie de muestras de catalizadores. Empleando la técnica de espectroscopia fotoelectrónica de rayos X (XPS) se evidenció la presencia de flúor en la superficie de los materiales, el cual estaba asociado al polímero teflón, ya que su energía de enlace correspondía principalmente con la de la especie CF2. Además, empleando la señal C 1s, se logró corroborar la presencia de la especie CF2, el cual está asociado al componente principal de las cadenas carbonadas de teflón. El uso de la información obtenida por XPS permitió determinar que durante la deshidratación del solvente (paso previo para la obtención de los catalizadores en el cual se emplean solventes orgánicos y alta temperatura) se podría estar llevando a cabo la contaminación con teflón, ya que este componente está presente en diversos accesorios empleados en el proceso de deshidratación, siendo la cinta de teflón y el agitador magnético las posibles fuentes de contaminación.

A preparação de catalisadores pode conter diversas fontes de contaminação, as quais podem afeitar seriamente as propriedades dos materiais preparados. No presente trabalho estudou-se um caso de contaminação com flúor numa série de amostras de catalisadores. Usando a técnica da espectroscopia fotoeletrônica de raios X (XPS), evidenciou-se a presença de flúor na superfície dos materiais, o qual estava associado ao polímero Teflon, já que sua energia de ligação correspondia principalmente à da espécie CF2. Além disso, usando a sinal C 1s, foi possível corroborar a presença do grupo CF2, o qual está associado ao componente principal das cadeias carbônicas do Teflon. O uso da informação obtida por XPS permitiu determinar que durante a desidratação do solvente (passo prévio para a obtenção dos catalisadores no qual são usados solventes orgânicos e alta temperatura) tem-se a contaminação com Teflon, já que este componente está presente em diversos acessórios utilizados no processo de desidratação, sendo a fita do Teflon e o agitador magnético as possíveis fontes da contaminação.

A função sintética do Eu e seus impasses na teoria freudiana / The Ego's synthetic function and its impasses on freudian theory / La fonction synthétique du Moi et ses impasses dans la théorie freudienne

O presente artigo objetiva abordar a função sintética do Eu e os impasses inerentes a sua plena realização, considerando a ambiguidade que tal instância carrega nos escritos de Freud. Em primeiro lugar, a ideia de que as psiconeuroses resultam de um caso de inconciliabilidade entre representações sexuais e o Eu será retomada, a fim de explicitar os problemas resultantes do fato de certos conteúdos psíquicos não se harmonizarem com o último. Em segundo lugar, será recuperado o conceito de narcisismo, já que neste contexto Freud concebe o Eu como uma unidade que precisa ser constituída. Por fim, na principal parte deste ensaio será abordada a função sintética que Freud atribui ao Eu já no quadro da segunda tópica psíquica e do segundo dualismo pulsional. Ao mesmo tempo em que a marca do Eu é sua tendência à síntese, esta fracassa constantemente e conduz à patologia. Isso se relaciona ao fato de essa instância operar não só a favor das pulsões de vida e das atividades de ligação, mas também das pulsões de morte e de sua busca pelo desligamento, o que, por sua vez, afeta os rumos da concepção freudiana da clínica.

This article aims to address the synthetic function of the Ego and the impasses inherent to its full realization, considering the ambiguity that such an instance carries in Freud's writings. Firstly, the idea that psychoneuroses result from a case of irreconcilability between sexual representations and the Ego will be resumed, in order to explain the problems resulting from the fact that certain psychic contents do not harmonize with the latter. Second, the concept of narcissism will be recovered, since in this context Freud conceives the Ego as a unit that needs to be constituted. Finally, in the main part of this essay the synthetic function that Freud attributes to the Ego in the context of the second psychic topography and the second drive dualism will be approached. At the same time that the stamp of the Ego is its tendency to synthesis, it constantly fails and leads to pathology. This is related to the fact that this instance operates not only in favor of life drives and binding activities, but also of death drives and his search for unbinding, which, in its turn, affects the direction of freudian's conception of the clinic.

Cet article objective aborder la fonction synthétique du Moi et les impasses inhérentes à sa pleine réalisation, en considérant l'ambiguïté que cette instance charge dans les écrits freudiens. Au début, l'idée selon laquelle les psychonévroses résultent d'un cas d'inconciliabilité entre les représentations sexuelles et le Moi sera repris, afin d'expliciter les problèmes résultants du fait que certains contenus psychiques ne s'harmonisent pas avec le dernier. Ensuite, le concept de narcissisme sera récupéré, puisque dans ce contexte Freud conçoit le Moi comme une unité qui réclame d'être constituée. À la fin, dans la partie plus importante de cet essai sera abordée la fonction synthétique que Freud attache au Moi déjà dans le cadre de la deuxième topique psychique et du deuxième dualisme pulsionnel. À la fois que le signe du Moi est sa tendance à là synthèse, elle fracasse constamment et conduit à la pathologie. Ceci se rapporte au fait de cette instance opérer non seulement en profit des pulsions de vie et des activités de liaison, mais encore des pulsions de mort et sa recherche pour la déliaison, ce que, de son côté, affecte les destins de la conception freudienne de la clinique.

A conversão eletrocatalítica de etanal em glioxal. Uma avaliação teórica

Introdução: uma proposta de modificação da síntese industrial de glioxal, o dial-deído mais simples, amplamente usado nas indústrias cosmética e farmacêutica, tem sido avaliada teoricamente. Trata-se, de fato, de uma adaptação de um método químico para a síntese eletroorgânica no ânodo, modificado por um revestimento polimèrico condutor, dopado pelo íon selenito. Metodologia: o modelo matemático correspondente tem sido desenvolvido e analisado mediante a teoria de estabilidade linear e análise de bifurcações. O conjunto de equações de balanço, para o modo potenciostático é bivariante. Resultados: foi provado que as capacitâncias da dupla camada elétrica (DCE) vêm sendo afetada tanto na etapa eletroquímica como na química. Essas influências são responsáveis pela aparição do comportamento osci-latório no sistema. Por outro lado, o estado estacionário se estabelece e se mantém facilmente, indicando um processo eletrocatalítico eficiente e com rendimento superior ao do processo químico. Conclusão: o elétrodo polimérico condutor, dopado pelo íon selenito é uma ferramenta eficiente para a conversão eletroorgânica do etanal em glioxal. Ao contrário do método clássico, este processo pode ser usado em escala industrial.

SUMMARY Introduction: A proposal for industrial synthesis for glyoxal, the simplest dialdehyde, widely used in cosmetics and pharmaceutical industry, has been theoretically evaluated. In fact, this is an adaptation of a chemical method for electroorganic synthesis over an anode, modified by a conducting polymer coating, doped by the selenite-ion. Methodology: A correspondent mathematical model has been developed and analyzed by means of linear stability theory and bifurcation analysis. The balance equation-set for potentiostatic mode is bivariant. Results: It was proven that the double electric layer (DEL) capacitances are affected on both electrochemical and chemical stages. These influences are responsible for the appearance of the oscillatory behavior in the system. On the other hand, the steady-state becomes stable and maintains stable, indicating an efficient electroorganic method. The yield is expected to be higher than for the chemical system. Conclusion: The selenite-doped conducting polymer electrode is an efficient tool for ethanal electroorganic conversion into glyoxal. Contrarily to the classic method, it may be used in industrial scale.

Introducción: una propuesta de síntesis industrial de glioxal se ha evaluado teóricamente, este es el dialdehído más simple y es ampliamente utilizado en la industria cosmética y farmacéutica. De hecho, se trata de una adaptación de un método químico de síntesis electroorgánica sobre un ánodo, modificado por un recubrimiento de polímero conductor, dopado por el ion selenito. Metodología: se ha desarrollado y analizado un modelo matemático adecuado mediante la teoría de la estabilidad lineal y el análisis de bifurcaciones. El conjunto de ecuaciones de equilibrio para el modo potenciostático es bivariante. Resultados: se comprobó que las capacitancias de doble capa eléctrica (DEL) se ven afectadas tanto en las etapas electroquímicas como químicas. Estas influencias son las responsables de la aparición del comportamiento oscilatorio en el sistema. Por otro lado, el estado estacionario se vuelve estable y se mantiene estable, lo que indica un método electroorgá-nico eficiente. Se espera que el rendimiento sea mayor que para el sistema químico. Conclusión: el electrodo de polímero conductor dopado con selenita es una herramienta eficiente para la conversión electroorgánica de etanal en glioxal. A diferencia del método clásico, puede utilizarse a escala industrial.

Green synthesis of gold nanaoparticles using Delphinium Chitralense tuber extracts, their characterization and enzyme inhibitory potential / Síntese verde de nanaopartículas de ouro utilizando extratos de tubérculos Delphinium chitralense, sua caracterização e potencial inibitório enzimático

Greeen synthesis has been introduced as an alternative to chemical synthesis due to the serious consequences. Metal nanoparticles synthesized through green approach have different pharmaceutical, medical and agricultural applications. The present study followed a green and simple route for the preparation of potentially bioactive gold nanoparticles (Au NPs). Au NPs were prepared via green synthesis approach using crude basic alkaloidal portion of the tuber of Delphinium chitralense. The green synthesized Au NPs were characterized by transmission electron microscopy (TEM), scanning electron microscopy (SEM), X-ray diffraction (XRD) fourier transform infrared (FTIR), and UV-Visible spectrophotometer. Morphological analysis shows that Au NPs have cubic geometry with different sizes. UV-Vis spectroscopic analysis confirmed the synthesis of Au NPs while XRD proved their pure crystalline phase. The Au NPs showed promising dose dependent inhibition of both AChE and BChE as compared to the crude as well as standard drug.

A síntese verde foi introduzida como uma alternativa à síntese química devido às graves consequências. As nanopartículas metálicas sintetizadas através da abordagem verde têm diferentes aplicações farmacêuticas, médicas e agrícolas. O presente estudo seguiu uma rota verde e simples para a preparação de nanopartículas de ouro potencialmente bioativas (Au NPs). As NPs de Au foram preparadas via abordagem de síntese verde usando a porção alcaloide básica bruta do tubérculo de Delphinium chitralense. As NPs de Au sintetizadas verdes foram caracterizadas por microscopia eletrônica de transmissão (TEM), microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raios X (DRX), infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e espectrofotômetro UV-Visível. A análise morfológica mostra que as NPs de Au possuem geometria cúbica com tamanhos diferentes. A análise espectroscópica UV-Vis confirmou a síntese de Au NPs enquanto a XRD provou sua fase cristalina pura. O Au NPs mostrou inibição dependente da dose promissora de AChE e BChE em comparação com a droga bruta e padrão.

Green synthesis of gold nanaoparticles using Delphinium Chitralense tuber extracts, their characterization and enzyme inhibitory potential

Abstract Green synthesis has been introduced as an alternative to chemical synthesis due to the serious consequences. Metal nanoparticles synthesized through green approach have different pharmaceutical, medical and agricultural applications. The present study followed a green and simple route for the preparation of potentially bioactive gold nanoparticles (Au NPs). Au NPs were prepared via green synthesis approach using crude basic alkaloidal portion of the tuber of Delphinium chitralense. The green synthesized Au NPs were characterized by transmission electron microscopy (TEM), scanning electron microscopy (SEM), X-ray diffraction (XRD) fourier transform infrared (FTIR), and UV-Visible spectrophotometer. Morphological analysis shows that Au NPs have cubic geometry with different sizes. UV-Vis spectroscopic analysis confirmed the synthesis of Au NPs while XRD proved their pure crystalline phase. The Au NPs showed promising dose dependent inhibition of both AChE and BChE as compared to the crude as well as standard drug.

Resumo A síntese verde foi introduzida como uma alternativa à síntese química devido às graves consequências. As nanopartículas metálicas sintetizadas através da abordagem verde têm diferentes aplicações farmacêuticas, médicas e agrícolas. O presente estudo seguiu uma rota verde e simples para a preparação de nanopartículas de ouro potencialmente bioativas (Au NPs). As NPs de Au foram preparadas via abordagem de síntese verde usando a porção alcaloide básica bruta do tubérculo de Delphinium chitralense. As NPs de Au sintetizadas verdes foram caracterizadas por microscopia eletrônica de transmissão (TEM), microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raios X (DRX), infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e espectrofotômetro UV-Visível. A análise morfológica mostra que as NPs de Au possuem geometria cúbica com tamanhos diferentes. A análise espectroscópica UV-Vis confirmou a síntese de Au NPs enquanto a XRD provou sua fase cristalina pura. O Au NPs mostrou inibição dependente da dose promissora de AChE e BChE em comparação com a droga bruta e padrão.

Planejamento, síntese e avaliação biológica de candidatos a fármacos: busca de inibidores epigenéticos da Sirtuína 2 Sir2 / Design, synthesis and biological evaluation of drug candidates: search for Sirtuin 2 (Sir 2) epigenetic inhibitors

As doenças negligenciadas são causadas por agentes infecciosos e parasitários, como vírus, bactérias, protozoários e helmintos. Essas doenças são prevalentes em populações de baixa renda que vivem em países em desenvolvimento e são responsáveis por incapacitar e levar milhares de pessoas à morte. Este nome se dá pois, apesar de sua grande relevância médica, recebem pouca atenção dos governos e indústrias farmacêuticas. Dentre essas doenças podemos destacar a Doença de Chagas, doença infecciosa causada pelo parasita hemoflagelado Trypanosoma cruzi. Endêmica em 21 países, com 6 a 7 milhões de pessoas infectadas resultando em 7500 mortes por ano. A quimioterapia disponível contra essa parasitose é baseada em apenas dois medicamentos, o benznidazol e o nifurtimox, ativos principalmente na fase aguda da doença e com efeitos adversos graves que comprometem a adesão ao tratamento e, além disso, apesar dos enormes esforços na pesquisa de novos agentes antichagásicos em nível nacional e internacional, na maioria realizada academicamente, ainda não foram encontradas alternativas terapêuticas para a doença, persistindo, assim, a necessidade de descoberta e desenvolvimento de novos fármacos. O início de um planejamento de um novo fármaco se dá pela definição de um alvo bioquímico a ser utilizado na busca de moléculas que possam exercer a função de inibidores ou moduladores, conforme a atividade biológica desejada. Neste sentido, as sirtuínas 2 (Sir2) são enzimas que se mostraram essenciais para o crescimento in vitro do T. cruzi em suas formas amastigota e epimastigota. No caso de tripanossomatídeos, em geral, a superexpressão de Sir2 está relacionada à sobrevivência de formas amastigotas. Assim, essas evidências indicam que a Sir2 de tripanosomatídeos tem grande potencial como alvo biológico na busca e desenvolvimento de novos fármacos antichagásicos. O objetivo principal deste projeto foi identificar moléculas que apresentaram atividade inibitória para a sirtuína 2 de T. cruzi por meio da utilização da estratégia de Planejamento de Fármacos Baseada no Ligante - Ligand Based Drug Design (LBDD) e o desenvolvimento de análogos dos inibidores da Sir2. A modificação molecular está entre algumas das técnicas tradicionais usadas no desenvolvimento racional de um fármaco, e é usada principalmente no desenvolvimento de análogos, e busca melhorar as propriedades farmacocinéticas e/ou farmacodinâmicas de um protótipo, obter propriedades de interação semelhantes ao alvo e, em alguns casos, revelar uma atividade biológica. Com este intuito, análogos do sirtinol e da salermida foram sintetizados e uma nova rota sintética utilizando o microrreator em fluxo contínuo foi desenvolvida e apresentou rendimento superior quando comparado à síntese em bancada. A partir desta metodologia foram obtidos 20 compostos. Os ensaios in vitro contra formas amastigotas do T. cruzi indicaram que 8 compostos inibiram a atividade parasitária em mais de 50%, na dose de 10 µM, sendo que alguns destes apresentaram maior inibição parasitária quando comparados ao benznidazol, o fármaco de referência e único disponível no Brasil. Com estes resultados preliminares, novos ensaios estão sendo realizados para identificar potência e mecanismo de ação destes candidatos a agentes tripanomicidas

Neglected diseases are caused by infectious and parasitic agents such as viruses, bacteria, protozoa and helminths. These diseases are prevalent in low-income populations living in developing countries and are responsible for disabling and killing thousands of people. They get this name because, despite their great medical relevance, they end up receiving little attention from governments and pharmaceutical industries. Among these diseases, we can highlight Chagas disease, an infectious endemic disease caused by the hemoflagellate parasite Trypanosoma cruzi. This disease is endemic in 21 countries, with 6 to 7 million people infected resulting in 7,500 deaths per year. Chemotherapy is based on just two drugs, benznidazole and nifurtimox, which are mainly active in the acute phase of the disease. These drugs have adverse effects that compromise adherence, even more, considering that they are not effective from the point of view of the chronic phase of the disease. Despite the enormous efforts in researching new anti-chagasic agents at the national and international level, and mostly carried out academically, therapeutic alternatives for the disease have not yet been found, thus, the need for the discovery and development of new drugs persists. Sirtuins 2 (Sir2) are enzymes that have been shown to be essential for the in vitro growth of T. cruzi in its amastigote and epimastigote forms. In the case of trypanosomatids in general, Sir2 overexpression is related to the survival of amastigote forms. Sir2 inhibitors, such as sirtinol, have shown efficacy in leishmanicides. Thus, these evidences indicate that Sir2 from trypanosomatids can be considered as a biological target in the search and development of new anti-chagasic drugs. The beginning of a new drug planning study is the definition of a biochemical target to be used in the search for molecules that can play the role of inhibitors or modulators, according to the desired biological activity. The main objective of this project was to identify molecules that presented inhibitory activity to sirtuin 2 of T. cruzi using the Ligand Based Drug Design (LBDD) strategy of planning and the development of analogues of Sir2 inhibitors. Molecular modification is a traditional technique used in the rational development of a drug, as well as the use of natural products, combinatorial chemistry, high-throughput screening (HTS), among others. Mainly used in the development of analogues, molecular modification is applied for different purposes, among them, it seeks to improve the pharmacokinetic and/or pharmacodynamic properties of a prototype, obtain target-like interaction properties and, in some cases, reveal an activity biological. For this purpose, analogues of sirtinol and salermide were synthesized and a new synthetic route using the microreactor in continuous flow was developed and presented superior yield when compared to benchtop synthesis. From this methodology, 20 compounds were obtained. in vitro assays against amastigote forms of T. cruzi indicated that 8 compounds inhibited parasitic activity by more than 50% at a dose of 10 µM, and some of these showed greater parasitic inhibition when compared to benznidazole, the reference drug, and only available in Brazil. With these preliminary results, new assays are being carried out to identify the potency and mechanism of action of these candidate trypanocidal agents

Desenvolvimento de rota sintética da Rosiglitazona em processo batelada e microrreator capilar / Rosiglitazone synthetic route development in batch process and capillary microreactor

Para que os fármacos possam ser comercializados economicamente, a sua escala de produção deve ser aumentada para atender à demanda do mercado. Atualmente, a maior parte dos fármacos são sintetizados em processos batelada que possuem limitações quanto à eficiência de mistura, temperatura e pressão. O uso de microrreatores surge como alternativa na indústria químico-farmacêutica, aumentando a eficiência dos processos de maneira segura. Ferramentas utilizadas no segmento computacional multidisciplinar teórico, como o DFT (Density Functional Theory), podem prever e compreender o comportamento das reações químicas, podendo ter grande utilidade na síntese de novos fármacos economizando tempo, investimento e reduzindo a geração de resíduos. A diabetes mellitus é uma doença de caráter epidêmico, que a cada ano vem aumentando o número de casos. O emprego de fármacos derivados das glitazonas no tratamento de diabetes mellitus tipo 2 é recomendado devido ao excelente controle glicêmico que esta classe de fármacos oferece. Neste trabalho, foi sintetizada a Rosiglitazona, um fármaco derivado das glitazonas, que auxilia no tratamento da diabetes mellitus tipo 2, sendo estudadas duas rotas de síntese distintas, que foram otimizadas com o intuito de maximizar o rendimento de seus intermediários, obtendo a Rosiglitazona com pureza de cerca de 94%. Foi realizada, para os intermediários, aqui denominados, 1R, 2R2 e 3R2 a síntese one-pot e para os intermediários 1R, 2R1 e 3R2 foi realizada a transposição do processo usual em batelada para fluxo contínuo no microrreator, com rendimentos de até 93%. Com o auxílio da química quântica computacional, a reação de síntese do intermediário 1R, foi elucidada teoricamente e determinadas as grandezas termodinâmicas (ΔH‡, ΔG‡ e ΔS‡) no estado de transição, que foram comparadas com os valores experimentais, sendo constatada uma boa concordância, com desvio máximo de 14%

In order for drugs to be commercialized economically, their production scale must be increased to meet market demand. Currently, most drugs are synthesized in batch processes that have limitations in terms of mixing efficiency, temperature and pressure. The use of microreactors appears as an alternative in the chemical-pharmaceutical industry, increasing the efficiency of the synthesis processes in a safe way. Tools used in the theoretical multidisciplinary computational segment, such as DFT (Density Functional Theory), can predict and understand the behavior of chemical reactions, and can be very useful in the synthesis of new drugs, saving time, investment and reducing waste generation. Diabetes mellitus is an epidemic disease that has been increasing the number of cases every year. The use of drugs derived from glitazones in the treatment of type 2 diabetes mellitus is recommended due to the excellent glycemic control that this class of drugs offers. In this work, Rosiglitazone, a drug derived from glitazones, which helps in the treatment of type 2 diabetes mellitus, was synthesized. Two different synthetic routes were studied and optimized in order to maximize the yield of its intermediates, obtaining Rosiglitazone with purity of about 94%. One-pot synthesis was performed to 1R, 2R2 and 3R2 intermediates, and the transposition from the usual batch process to continuous flow in microreactor was performed to 1R, 2R1 and 3R2 intermediates, with yields of up to 93%. With the aid of computational quantum chemistry, the intermediate 1R synthesis reaction was theoretically elucidated and the thermodynamic properties were determined (ΔH‡, ΔG‡ and ΔS‡) in the transition state, which were compared with the experimental results, obtaining good agreement, with a maximum deviation of 14%.

Desenvolvimento de rota sintética da Rosiglitazona em processo batelada e microrreator capilar / Rosiglitazone synthetic route development in batch process and capillary microreactor

Para que os fármacos possam ser comercializados economicamente, a sua escala de produção deve ser aumentada para atender à demanda do mercado. Atualmente, a maior parte dos fármacos são sintetizados em processos batelada que possuem limitações quanto à eficiência de mistura, temperatura e pressão. O uso de microrreatores surge como alternativa na indústria químico-farmacêutica, aumentando a eficiência dos processos de maneira segura. Ferramentas utilizadas no segmento computacional multidisciplinar teórico, como o DFT (Density Functional Theory), podem prever e compreender o comportamento das reações químicas, podendo ter grande utilidade na síntese de novos fármacos economizando tempo, investimento e reduzindo a geração de resíduos. A diabetes mellitus é uma doença de caráter epidêmico, que a cada ano vem aumentando o número de casos. O emprego de fármacos derivados das glitazonas no tratamento de diabetes mellitus tipo 2 é recomendado devido ao excelente controle glicêmico que esta classe de fármacos oferece. Neste trabalho, foi sintetizada a Rosiglitazona, um fármaco derivado das glitazonas, que auxilia no tratamento da diabetes mellitus tipo 2, sendo estudadas duas rotas de síntese distintas, que foram otimizadas com o intuito de maximizar o rendimento de seus intermediários, obtendo a Rosiglitazona com pureza de cerca de 94%. Foi realizada, para os intermediários, aqui denominados, 1R, 2R2 e 3R2 a síntese one-pot e para os intermediários 1R, 2R1 e 3R2 foi realizada a transposição do processo usual em batelada para fluxo contínuo no microrreator, com rendimentos de até 93%. Com o auxílio da química quântica computacional, a reação de síntese do intermediário 1R, foi elucidada teoricamente e determinadas as grandezas termodinâmicas (ΔH‡, ΔG‡ e ΔS‡) no estado de transição, que foram comparadas com os valores experimentais, sendo constatada uma boa concordância, com desvio máximo de 14%

In order for drugs to be commercialized economically, their production scale must be increased to meet market demand. Currently, most drugs are synthesized in batch processes that have limitations in terms of mixing efficiency, temperature and pressure. The use of microreactors appears as an alternative in the chemical-pharmaceutical industry, increasing the efficiency of the synthesis processes in a safe way. Tools used in the theoretical multidisciplinary computational segment, such as DFT (Density Functional Theory), can predict and understand the behavior of chemical reactions, and can be very useful in the synthesis of new drugs, saving time, investment and reducing waste generation. Diabetes mellitus is an epidemic disease that has been increasing the number of cases every year. The use of drugs derived from glitazones in the treatment of type 2 diabetes mellitus is recommended due to the excellent glycemic control that this class of drugs offers. In this work, Rosiglitazone, a drug derived from glitazones, which helps in the treatment of type 2 diabetes mellitus, was synthesized. Two different synthetic routes were studied and optimized in order to maximize the yield of its intermediates, obtaining Rosiglitazone with purity of about 94%. One-pot synthesis was performed to 1R, 2R2 and 3R2 intermediates, and the transposition from the usual batch process to continuous flow in microreactor was performed to 1R, 2R1 and 3R2 intermediates, with yields of up to 93%. With the aid of computational quantum chemistry, the intermediate 1R synthesis reaction was theoretically elucidated and the thermodynamic properties were determined (ΔH‡, ΔG‡ and ΔS‡) in the transition state, which were compared with the experimental results, obtaining good agreement, with a maximum deviation of 14%

Estatuto do sujeito na clínica dos autismos / Statute of the subject in the autism clinic / Statut du sujet dans la clinique de l'autisme

Este artigo objetiva indicar a particularidade psicanalítica ao apostar no sujeito na clínica dos autistas.Sustenta que os autistas não estão em condição deficitária. Problematiza a existência do Outro no campo da subjetividade dos autistas recorrendo as indicações do ato inaugural de Rosine Lefort em propor a estutura autística. Busca no suplemento as teses de Lefort por Jean-Claude Maleval as hipóteses que os autistas recorrerem ao uso do objeto autístico, do duplo real e do Outro de síntese como recursos para lidar com a presença da alteridade

This article aims to indicate the psychoanalytic particularity when betting on the subject in the autistic clinic. It sustains that autistic people do not display a deficient condition. It problematizes the existence of the Other in the field of autistic subjectivity, employing the indications of Rosine Lefort's inaugural act in proposing the autistic structure. It seeks the hypotheses that autistic people resort to the use of the autistic object, the double real and the Other of synthesis as resources to deal with the presence of alterity in Lefort's theses by Jean-Claude Maleval in the supplement

Cet texte vise à indiquer la particularité psychanalytique lors qu'elle garantit le sujet dans la clinique de l'autisme. Il défend que les personnes autistes ne sont pas dans un état deficient. À partir des indications de l'acte inaugural de Rosine Lefort qui propose la structure autistique, il problématise l'existence de l'Autre dans le domaine de la subjectivité autistique. Dans les suppléments des thèses de Lefort, l'article travaille à partir de hypothèses de Jean-Claude Maleval selon lesquelles les personnes autistes utilisent l'objet autistique, le double réel et l'Autre de synthèse comme ressources pour faire face à la présence de l'alterité

Regulación de la actividad enzimática de la NMNAT de Leishmania braziliensis por péptidos representativos de su extremo N-terminal / Regulation of the enzymatic activity of the NMNAT of Leishmania braziliensis by representative peptides derived from its N-terminus end / Regulação da atividade enzimática do NMNAT de Leishmania braziliensis por peptídeos representativos derivados de sua extremidade N-terminal

Resumen El parásito intracelular Leishmania braziliensis es el agente causal de la leishmaniasis cutánea, enfermedad endémica de zonas tropicales, cuyos tratamientos farmacológicos son tóxicos y para la cual no se dispone de una vacuna en la actualidad. Por esta razón, el estudio de las proteínas relacionadas con el metabolismo energético del parásito es relevante dada su importancia para la supervivencia del mismo. En este estudio, utilizando como secuencia plantilla los primeros 18 residuos del extremo N-terminal de la proteína nicotinamida/ nicotinato mononucleótido adenilil transferasa de L. braziliensis (Lb-NMNAT), se sintetizaron péptidos implementando la estrategia Fmoc/ tert-Butilo en una resina Rink amida MBHA. Los péptidos se purificaron por cromatografía en columna C18 y se caracterizaron mediante RP-HPLC. La proteína recombinante 6xHisLb-NMNAT se expresó en células Escherichia coli M15 y se purificó parcialmente empleando cromatografía de afinidad a metales inmovilizados. De esta proteína se confirmó su actividad enzimática a través de ensayos enzimáticos directos analizados por RP-HPLC. Los péptidos sintetizados se utilizaron para evaluar su efecto sobre la actividad enzimática de la proteína 6xHisLb-NMNAT, observándose una modulación diferencial, lo cual resulta promisorio para el diseño de herramientas quimioterapéuticas basadas en la secuencia N-terminal de la proteína Lb-NMNAT.

Abstract The intracellular parasite Leishmania braziliensis is the etiological agent of cutaneous leishmaniasis, an endemic disease in the tropics, whose pharmacological treatments are toxic and for which there is currently no vaccine. For this reason, the study of proteins related to the energy metabolism of the parasite is relevant given its importance for its survival. In this study, based on the first 18 residues of the N-terminal end of the nicotinamide/nicotinate mononucleotide adenylyl transferase protein from L. braziliensis (Lb-NMNAT) as a template, peptides were synthesized implementing the Fmoc/tert-Butyl strategy in a Rink amide MBHA resin. The peptides were purified by C18 column chromatography and characterized by RP-HPLC. The recombinant 6xHisLb-NMNAT protein was expressed in Escherichia coli M15 cells and partially purified using immobilized metal affinity chromatography. The enzymatic activity of the protein was confirmed through direct enzymatic assays analyzed by RP-HPLC. The synthesized peptides were used to evaluate their effect on the enzymatic activity of the 6xHisLb-NMNAT protein, observing a differential modulation, which is promising for the design of chemotherapeutic tools based on the N-terminal sequence of the Lb-NMNAT protein.

Resumo O parasita intracelular Leishmania braziliensis é o agente causador da leishmaniose tegumentar, doença endêmica nos trópicos, cujos tratamentos farmacológicos são tóxicos e para a qual não existe vacina atualmente. Por este motivo, o estudo de proteínas relacionadas ao metabolismo energético do parasita é relevante dada a sua importância para a sua sobrevivência. Neste estudo, usando os primeiros 18 resíduos da extremidade N-terminal da proteína adenilil transferase de nicotinamida/mononucleotídeo nicotinato de L. braziliensis (Lb-NMNAT) como uma sequência modelo, os peptídeos foram sintetizados implementando a estratégia Fmoc/tert-Butil em uma resina Rink amida MBHA. Os peptídeos foram purificados por cromatografia em coluna C18 e caracterizados por RP-HPLC. A proteína recombinante 6xHisLb-NMNAT foi expressa em células de Escherichia coli M15 e parcialmente purificada usando cromatografia de afinidade com metal imobilizado. Desta proteína, sua atividade enzimática foi confirmada por meio de ensaios enzimáticos diretos analisados por RP-HPLC. Os peptídeos sintetizados foram utilizados para avaliar seu efeito na atividade enzimática da proteína 6xHisLb-NMNAT, observando uma modulação diferencial, o que é promissor para o projeto de ferramentas quimioterápicas baseadas na sequência N-terminal da proteína Lb-NMNAT

Inibidores de Desmetilase Lisina-Específica 1 (LSD1) como candidatos a agentes antineoplásicos / Lysine-Specif Demethylase 1 (LSD1) inhibitors as candidates for antineoplastic agents

O câncer é uma das principais causas de morte no mundo sendo, atualmente, a segunda principal causa de morte, perdendo apenas para as doenças cardiovasculares, tornando-se um grande desafio para as autoridades de saúde pública. No Brasil são estimados 625000 novos casos desta enfermidade para o triênio de 2020-2022. Nesse cenário, vários alvos epigenéticos são considerados alternativas no desenvolvimento de inibidores para a terapia do câncer devido serem identificados e relacionados com a carcinogênese, incluindo modificações no perfil de metilação do DNA e modificações de histonas como a metilação, acetilação e fosforilação. Dentre estas modificações, a metilação de histonas é regulada reversivelmente por histonas metiltransferases e desmetilases. A enzima desmetilase lisina-específica 1 (LSD1) foi a primeira histona desmetilase caracterizada e catalisa a remoção de grupos metila das lisinas 4 e 9 da histona H3 (H3K4 e H3K9), utilizando o FAD como cofator. Superexpressa em vários tumores de alto risco e tendo seus níveis correlacionados com a reincidência do tumor durante o tratamento, a LSD1 apresenta papel fundamental na tumorgênese. Portanto, tem sido considerado um alvo biológico promissor no desenvolvimento de novos fármacos para terapêutica contra o câncer. Sendo assim, neste trabalho, a partir de dados de triagem virtual baseado neste alvo biológico, selecionou-se um hit, o qual foi utilizado como protótipo para o planejamento de análogos visando melhorar as características farmacológicas, pois possuem grupos químicos passíveis das mesmas interações com o alvo. Foram sintetizadas 16 moléculas, sendo 7 compostos finais inéditos derivados carboxamídicos e 9 derivados sulfonamídicos. Todos os compostos foram caracterizados por RMN (1H e 13C), espectrometria de massas de alta resolução, espectroscopia de infravermelho, ponto de fusão, polarímetro e a pureza dos compostos foi avaliada por CLAE. Os compostos finais foram submetidos ao ensaio enzimático frente à LSD1, acoplado a Enzima Horseradish Peroxidase (EHP), mostrando que apenas o composto 4g apresentou atividade inibitória de 64% e 57% em 50 µM e 500 µM respectivamente. No ensaio de viabilidade celular na linhagem HEL (linhagem leucêmica) os 16 compostos (4a- 4g, 5a-5d e 6a-6d) apresentaram-se ativos com valores de CI50 na faixa de 5,3 µM a 20,25 µM. Os compostos mais potentes foram os 4e (CI50 = 6,9 µM), 5d (CI50 =5,30 µM) e 6ª (CI50 =6,61 µM), evidenciando que os compostos possuem elevada potência, tornando-se moléculas promissoras em linhagens leucêmicas. Os estudos de ancoramento molecular com a LSD1 sugeriram que a mudança de orientação do composto 4g, permitiu que o grupo benzila da porção benzilamida faça interação com os resíduos PHE560 e TYR807 no bolso hidrofóbico, o que possivelmente acarretou um bloqueio na entrada da cavidade, permitindo a inibição pelo composto

Cancer is one of the leading causes of death in the world and is currently the second leading cause of death, second only to cardiovascular disease, making it a major challenge for public health authorities. In Brazil, approximately, 625000 new cases of this disease are estimated for the 2020-2022 period. In this scenario, several epigentic targets are considered alternatives in the development of inhibitors in cancer therapy, since they are identified and related to carcinogenesis, including changes in the DNA methylation profile and changes in histones such as methylation, acetylation and phosphorylation. Among these modifications, histone methylation is reversibly regulated by histones methyltransferases and demethylases. Lysine-specific demethylase1 (LSD1) was the first histone demethylase characterized and catalyzes the removal of methyl groups from lysines 4 and 9 of histone H3 (H3K4 and H3K9), using FAD as a cofactor. LSD1 has been found to be overexpressed in several high-risk tumors and these levels are correlated with tumor recurrence during treatment. Therefore, it has been considered a promising biological target in the development of new drugs with therapeutic potential against cancer. Thus, in this work, the virtual screening technique based on the biological target was used to discover LSD1 interactions, and then based on the hit found, we propose to synthesize compounds that have chemical groups susceptible to such interactions, seeking to evaluate the enzymatic activity in LSD1 enzyme. Were synthesized 16 molecules, 7 of which are unpublished final compound derived from carboxamides and 9 sulfonamide derivatives. All compounds were characterized by NMR (1H and 13C), high resolution mass spectrometry, infrared spectroscopy, melting point, polarimeter and the purity of the compounds was assessed by CLAE. The final compounds were subjected to enzymatic assays Against LSD1, coupled with enzime Horseradish Peroxidase (HRP), showing that only the 4g compound showed 64% and 57% inhibitory activity in 50 µM and 500 µM respectively. In the cell viability assay in the HEL line (Leukemic line) the 16 compounds (4a-4g, 5a-5d and 6a-6d) were active with IC 50 values in the range of 5.3 µM to 20.25 µM. The most potent compounds were 4e (CI50 = 6.9 µM), 5d (CI50 = 5.30 µM) and 6a (CI50 = 6.61 µM), showing that the compounds have high potency, becoming promising molecules in leukemic lines. Docking studies with LSD1 suggested, that the change in orientation of the 4g compound allows the benzyl group of the benzylamide portion to interact with the PHE560 and TYR807 residues in the hydrophobic pocket, which possibly cause a block in the entrance of the cavity, allowing the inhibition by the compound. Thus, the results obtained indicate that the class of compounds described is likely to continue to be investigated, both in the search for new LSD1 inhibitory hits based on the structure of the 4g compound, how to deepen the studies with 16 compounds of the present work in the performance of more specific tests in leukemic cells, in order to unravel the mechanism of action and possible targets

Synthesis and cytotoxic evaluation of protoanemonin and three brominated derivatives / Síntesis y evaluación citotóxica de la protoanemonina y tres derivados bromados / Síntese e avaliação citotóxica de protoanemonina e três derivados bromados

Abstract The protoanemonin, a natural furanone, was synthesized from (Z)-4-bromo-5-(bromomethylene)-furan-2(5H)-one by a reductive dehalogenation reaction with zinc. The 5-(dibromomethylene)-2(5H)-furanone and (E)-5-(bromomethylene)-2(5H)-furanone were also synthetized from levulinic acid bromination and acid promoted cyclization. The antiproliferative activity of all synthesized compounds against the human cancer cell lines PC-3 (prostate) and U-251 (glioblastoma) was investigated. The results showed that all the obtained furanones are more active than the reference drug cisplatin, with iC50 values in the range of 0.31 ± 0.02 to 7.30 ± 0.08 µM. However, (E)-5-(bromomethylene)-2(5H)-furanone, with a bromine atom in the double bond, was the most active, and demonstrated to be about 25-fold more active than the reference drug cisplatin.

Resumen La protoanemonina, una furanona de origen natural, fue sintetizada a partir de la (Z)-4-bromo-5-(bromometilen)-furan-2(5H)-ona mediante una deshalogenación reductiva con zinc. La 5-(dibromometilen)-2(5H)-furanona y la (E)-5-(bromometilen)-2(5H)-furanona también fueron sintetizadas a partir del ácido levulínico mediante bromación y posterior ciclación promovida por ácido. Se investigó la actividad antiproliferativa de todos los compuestos sintetizados en las líneas celulares de cáncer humano PC-3 (próstata) y U-251 (glioblastoma). Los resultados demostraron que todas las furanonas obtenidas son más activas que el fármaco de referencia cisplatino, con un intervalo de Ci50 de 0,31 ± 0,02 hasta 7,30 ± 0,08 µM. Sin embargo, la (E)-5-(bromometilen)-2(5H)-furanona, con un átomo de bromo en el doble enlace, demostró ser 25 veces más activa que el fármaco de referencia cisplatino.

Resumo Protoanemonina, uma furanona natural, foi sintetizada de (Z)-4-bromo-5-(bromometileno)-furan-2(5H)-ona por desalógenação redutora do zinco. Também foram sintetizados 5-(Dibromometileno)-2(5H)-furanona e (E)-5-(Bromometileno)-2(5H)-furanona a partir da brominação com ácido levulínico e ciclização promovida por ácido. Foi investigada a atividade antiproliferativa de todos os compostos sintetizados nas linhas celulares humanas de câncer PC-3 (próstata) e U-251 (glioblastoma). Os resultados mostram que todos os furanonas obtidos são mais ativos que a cisplatina do medicamento de referência, com intervalo Ci50 de 0,31 ± 0,02 até 7,30 ± 0,08 µM. Entretanto, a mais ativa foi a (E)-5-(Bromometileno)-2(5H)-furanona, que com um átomo de bromo na dupla ligação exocíclica, provou ser 25 vezes mais ativa que a medicamento de referência cisplatina.

L-asparaginase de Erwinia chrysanthemi: expressão proteica livre de células e bioconjugação a bacteriófagos / L-asparaginase from Erwinia chrysanthemi: cell-free protein expression and bioconjugation to bacteriophages

A L-Asparaginase (L-ASNase) de Erwinia chrysathemi (ErA) é uma enzima amplamente utilizada para o tratamento da leucemia linfoblástica aguda (LLA). Embora o seu uso como segunda linha de tratamento para a LLA tenha proporcionado consideráveis benefícios clínicos, reações de hipersensibilidade e rápida depuração plasmática ainda são problemas recorrentes. Ademais, extensivos e custosos processos de produção da ErA são necessários para a obtenção da enzima pura. Com base nesses problemas, o presente trabalho propõe (1) o estudo de viabilidade de expressão da ErA em um sistema de síntese proteica livre de células (SPLC) e (2) a conjugação da proteína em bacteriófagos como ferramenta alternativa para o isolamento e monitoramento da depuração plasmática da ErA. Foram utilizados extratos celulares de Escherichia coli suplementados com solução energética contendo creatina fosfato (CP) como fonte de energia para síntese in vitro de ErA. Para conjugação da ErA a bacteriófagos, o sistema SpyTag/SpyCatcher foi implementado: SpyCatcher foi fusionado à porção N-terminal da ErA e bacteriófagos filamentosos da linhagem M13 e fd foram modificados de modo a expressar SpyTag nas proteínas de capsídeo pIII e pVIII, respectivamente. Em relação ao primeiro objetivo, o sistema de SPLC foi capaz de expressar a ErA com atividade. A proteína foi expressa na fração solúvel e apresentou atividade enzimática significativamente superior em relação à reação controle (7,07 ± 0,68 U/mL vs. 1,83 ± 0,14 U/mL). Tempo necessário para obtenção do extrato celular foi reduzido de 45 para 26 hrs, e sete componentes da solução energética foram removidos da composição original sem implicações negativas na eficiência de expressão da ErA, simplificando desta forma o processo de SPLC. Em relação ao segundo objetivo, ErA fusionada à SpyCatcher (SpyCatcher_ErA) foi conjugada com êxito em bacteriófagos capazes de expressar SpyTag fusionadas na porção N-terminal das proteínas pIII (SpyTag_pIII) e pVIII (SpyTag_pVIII). A porcentagem de formação dos conjugados entre SpyCatcher_ErA e SpyTag_pIII ((ErA)5-pIII) foi de 6% enquanto formação dos conjugados entre SpyCatcher_ErA e SpyTag_pVIII ((ErA)50-pVIII) foi de 46%, valores estes confirmados por atividade enzimática. Solução contendo conjugados foram injetados em camundongos e sequenciados/titulados com êxito. Não houve diferença de depuração plasmática entre (ErA)5-pIII e bacteriófago controle, mas houve maior taxa de eliminação de (ErA)50-pVIII em relação ao mesmo bacteriófago não conjugado à SpyCatcher_ErA. Os resultados aqui apresentados confirmam ser possível expressar ErA com atividade biológica em sistemas de SPLC. Além disso, o sistema de conjugação da ErA a bacteriófagos aqui desenvolvido foi capaz de monitorar a concentração de ErA presente na circulação em função do tempo, tornando-se uma potencial plataforma de desenvolvimento de novas proteoformas da ErA com características clínicas melhoradas

L-Asparaginase (L-ASNase) from Erwinia chrysanthemi (ErA) is a widely used enzyme for treatment of acute lymphoblastic leukemia (ALL). Although its use as a second-line treatment has provided significant clinical benefits, hypersensitivity reactions and a fast clearance rate are recurring L-ASNase-related problems. In addition, extensive and costly production processes are required for the manufacturing of pure ErA. Based on these drawbacks, this current work proposes (1) the study of the use of a cell-free protein synthesis (CFPS) system as a viable platform for the synthesis of ErA and (2) the conjugation of the protein on bacteriophages as an alternative tool for the isolation and monitoring of ErA clearance. Escherichia coli-derived cell extracts supplemented with a creatine phosphate-based energy solution were used to synthesize ErA in vitro. To conjugate ErA on bacteriophages, the SpyTag/SpyCatcher system was implemented: SpyCatcher was fused to the N-terminus of the ErA while filamentous phage strains M13 and fd were engineered in order to display SpyTag on their pIII and pVIII capsid proteins, respectively. Regarding the first goal, the CFPS system was able to express an active ErA. The protein was expressed in the soluble fraction and there presented a significant higher enzymatic activity compared to the control reaction (7.07 ± 0.68 U/mL vs. 1.83 ± 0.14 U/mL). Time required to obtain the cell extract was reduced from 45 to 26 hours, and seven energy solution reagents were removed from the original solution without compromising the efficiency of ErA expression, thus simplifying the CFPS process. With respect to the second goal, ErA fused to SpyCatcher (SpyCatcher_ErA) was sucessfully conjugated on bacteriophages capable of displaying SpyTag fused to the Nterminus of the pIII (SpyTag_pIII) or pVIII (SpyTag_pVIII) proteins. Percentage of conjugate formation between SpyCatcher_ErA and SpyTag_pIII (ErA)5-pIII was 6% whereas conjugate formation between SpyCatcher_ErA and SpyTag_pVIII (ErA)50-pVIII was 46%, values that were confirmed by enzymatic activity. Sample containing conjugates were injected into mice and sucessfully sequenced/titrated. No clearance differences were observed between (ErA)5- pIII and a control bacteriophage, but a higher clearance rate was observed for (ErA)50-pVIII compared to SpyTag_VIII non conjugated to SpyCatcher_ErA. The results here presented confirm the expression of a biologically active ErA from a CFPS system. Besides, the development of a conjugation system capable of linking ErA to bacteriophages could be used as a means to monitor the ErA concentration in the blood as a function of time and also as a potential platform to be used in the development of novel ErA proteoforms with improved clinical properties

Susceptibility of soybean looper to lufenuron and spinosad / Susceptibilidade da lagarta falsa-medideira a lufenuron e espinosade

The soybean looper (Chrysodeixis includens) is an important defoliation pest in crops such as soybean and cotton in Brazil. Its main control tactic is chemical insecticides. Considering the importance of chemical control for this pest, monitoring the susceptibility of C. includens populations is strategic for an efficient Insect Resistance Management. Therefore, the objective of this study was to evaluate the susceptibility levels of C. includens populations in the state of Mato Grosso - Brazil to lufenuron and spinosad. Seven populations were collected in soybean fields around the state. For the bioassays, early L3 larvae were exposed to insecticides using the diet-overlay method. Although the compounds have distinct modes of action, Tangará da Serra population had the highest resistance ratios for lufenuron (11.62) and spinosad (7.84), compared to laboratory population (susceptibility reference). Even with low resistance levels, it is necessary to maintain regional monitoring of C. includens susceptibility to the evaluated insecticides, as well as to extend the range of molecules monitored.(AU)

A lagarta falsa-medideira (Chrysodeixis includens) é uma importante praga desfolhadora em culturas como soja e algodão no Brasil e seu principal método de controle é o uso de inseticidas químicos. Considerando a importância do controle químico para essa praga, o monitoramento da suscetibilidade de populações de C. includens é estratégico para um eficiente programa de Manejo da Resistência de Insetos. Portanto, objetivou-se com este estudo avaliar os níveis de suscetibilidade de populações de C. includens no estado de Mato Grosso, Brasil, aos inseticidas lufenurom e espinosade. Sete populações foram coletadas em cultivos de soja ao longo do estado. Para os bioensaios, lagartas em terceiro ínstar foram expostas aos inseticidas utilizando o método de contaminação superficial de dieta. Embora os compostos apresentem modos de ação distintos, a população de Tangará da Serra obteve as maiores razões de resistência para lufenurom (11,62) e espinosade (7,84) em relação à população de laboratório (referência de suscetibilidade). Apesar dos níveis de resistência terem sido baixos, é necessário manter a manutenção do monitoramento dos níveis de suscetibilidade aos inseticidas avaliados, assim como ampliar a gama de moléculas monitoradas.(AU)

Otherness in Autism: From the Fellow Human-Being to the Other Synthesis / A Alteridade no Autismo: do Próximo ao Outro de Síntese

Abstract The present article investigates an essential question raised by the experience of the psychoanalytic clinic of autism: otherness. The goal of this research is to establish the specificity and the variety of forms of otherness in autism. From the Freudian premise of the complex of the 'fellow human being' (Nebenmensch) to the distinction between this and the Other as a place of language, this research examines the forms of otherness that can arise in autism, such as identified by J.-C. Maleval. They are as follow: the autistic object, the double, and the synthetic Other. For this purpose, this paper finds support on life events narrated by autistics as well as clinical fragments from the specialized literature.

Resumo O presente artigo investiga uma problemática suscitada pela experiência clínica e essencial à psicanálise com autistas: a alteridade. O objetivo da pesquisa consistiu em estabelecer a especificidade e a variedade das formas de alteridade nesses casos. Partindo da premissa freudiana do complexo do próximo (Nebenmensch) e passando pela distinção entre o próximo e o Outro enquanto lugar da linguagem, a pesquisa percorre as formas de alteridade suscetíveis de se delinearem no autismo, tais como identificadas por J.-C. Maleval: o objeto autístico, o duplo e o Outro de síntese. Para tal, recorre a relatos de vida narrados pelos autistas e a fragmentos clínicos da literatura especializada.

Guanidinoacetic acid supplementation on growth performance and molecular mechanisms of lean mass gain in nursery pigs / Suplementação de ácido guanidinoacético no desempenho e mecanismo moleculares de ganho de massa magra em leitões

ABSTRACT: The objective with the present study was to evaluate the effect of guanidinoacetic acid (GAA) on the growth performance of nursery piglets as well as a possible molecular mechanism of action on lean mass gain. Seventy-two pigs, weaned at 21 d, weighing 6.80 ± 1.2 kg were distributed in a completely randomized design into one of three dietary treatments (control, control + 1.2 g/kg GAA or control + 2.4 g/kg GAA) and 8 replicates per treatment. The control diet was an animal protein-free diet based on corn and soybean meal. Body weight, average daily weight gain, average daily feed intake and feed efficiency were evaluated at 35, 49, and 56 days. At the end of the experiment, one animal per pen was slaughtered and samples of the vastus lateralis muscle were collected for RT-qPCR and protein abundance analysis. Overall (from 21 to 56 d), GAA supplementation improved feed efficiency (P < 0.03). Skeletal muscle of pigs fed with GAA diet had greater mRNA expression of Akt (P < 0.04) and RPS6KB2 (P<0.01). In conclusion, supplementation with 2.4 g/kg GAA to nursery piglets improves feed efficiency and activates molecular mechanisms important to lean mass gain.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do ácido guanidinoacético (GAA) no desempenho de leitões, bem como um possível mecanismo de ação molecular no ganho de massa magra. Setenta e dois leitões, desmamados aos 21 dias, pesando 6,80 ± 1,2 kg, foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado com três tratamentos dietéticos (controle, controle + 1,2 g / kg ou controle + 2,4 g / kg GAA) e 8 repetições por tratamento. A dieta controle não continha proteína animal e foi formulada a base de milho e farelo de soja. O desempenho dos animais foi avaliado aos 35, 49 e 56 dias. Ao final do experimento, um animal por unidade experimental foi abatido e amostras do músculo Vastus lateralis foram coletadas para análise de RT-qPCR e abundância de proteínas. A suplementação com GAA melhorou a eficiência alimentar (P<0,03) aos 56 dias. O músculo dos leitões suplementados apresentou maior expressão de mRNA de Akt (P<0,04) e RPS6KB2 (P <0,01). Em conclusão, a suplementação de 2,4 g / kg de GAA em leitões (21 a 56 d) melhora a eficiência alimentar e ativa mecanismos moleculares importantes para o ganho de massa magra.

Acacia mearnsii tannin extract as a feed additive: impact on feed intake, digestibility and nitrogen excretion by sheep fed a tropical grass-based diet / Extrato tanífero de Acacia mearnsii como aditivo alimentar: impacto sobre o consumo, digestibilidade e excreção de nitrogênio em ovinos alimentados com uma dieta a base de gramínea tropical

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the effect of the dietary inclusion of Acacia mearnsii tannin extract (TA) on nutrients intake and digestibility, and nitrogen (N) retention by sheep given a tropical grass-based diet. The trial was conducted with six castrated male sheep in a cross-over design in two 21-days experimental periods. The sheep were housed in metabolic cages and offered Tifton 85 hay (Cynodon dactylon) ad libitum plus concentrate at a rate of 12 g of dry matter (DM)/kg body weight (BW). The treatments were concentrate without (Control) or with 10 g TA/kg DM (Tannin). Concentration of TA in the diet was 3.8 g/kg DM and did not affect the feed intake or apparent digestibility. The TA decreased the true digestibility of n compounds (P<0.05) whereas did not impact the N retention, microbial N flow to the small intestine or the efficiency of rumen microbial protein synthesis. In conclusion, a low dietary concentration of TA did not impact the nutrients supply and N use by sheep fed with a tropical grass-based diet.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da inclusão alimentar de extrato tanífero de Acacia mearnsii (TA) sobre o consumo, a digestibilidade e a retenção de nitrogênio (N) em ovinos alimentados com uma dieta a base de gramínea tropical. O experimento foi conduzido com seis ovinos machos castrados, em delineamento em reversão simples, com dois períodos experimentais de 21 dias cada. Os animais foram alojados em gaiolas metabólicas e alimentadas ad libitum com feno de Tifton 85 (Cynodon dactylon) mais concentrado oferecido a uma taxa de 12 g de matéria seca (MS)/kg de peso corporal. Os tratamentos foram: concentrado sem (Controle) ou com 10 g de TA/kg MS (Tanino). A concentração de TA na dieta foi de 3,8 g/kg MS e não afetou o consumo e nem a digestibilidade aparente dos nutrientes. O TA diminuiu a digestibilidade verdadeira do N (P<0,05), mas não afetou a retenção de N, o fluxo microbiano de N para o intestino delgado ou a eficiência de síntese de proteína microbiana no rúmen. Em conclusão, a inclusão de uma baixa dose de TA/kg MS na dieta não afetou a oferta de nutrientes nem o uso de N em ovinos alimentados com uma dieta baseada em uma gramínea tropical.

Scoping review: a relevant methodological approach for knowledge synthesis in Brazil's health literature / Revisão de escopo: uma abordagem metodológica relevante para a síntese de evidências da literatura em saúde no Brasil

A methodologically robust approach to synthesize relevant knowledge in health literature is the scoping review, which is used to answer broader questions (e.g., "What is known about this concept?") and can be used to map evidence for research and practice decision-making. This paper discussed the importance of scoping reviews as a methodological approach for knowledge synthesis in Brazil's health literature. Definitions and methodological steps were discussed. We examined 45 scoping reviews that were published in Brazil's journals or available as thesis or dissertations to dis-cuss their content and methodological characteristics. Recommendations for authors were presented in order to improve the planning, executing and reporting of further scoping reviews in Brazil. This will help Brazilian researchers and health professionals to understand when and how scoping reviews can be helpful for knowledge synthesis on health topics, including for physical activity and health research area

Uma abordagem metodologicamente robusta para sintetizar a literatura relevante em saúde é a revisão de escopo, a qual é utilizada para responder questões abrangentes (por exemplo, "O que se conhece sobre um de-terminado conceito em saúde?") e pode ser utilizada para mapear evidências para a tomada de decisão prática e em pesquisa. Este artigo discutiu a importância de revisões de escopo como uma abordagem metodológica para síntese de conhecimento da literatura em saúde no Brasil. As definições e as etapas metodológicas foram discutidas. Um sumário das 45 revisões de escopo que foram publicadas em periódicos brasileiros ou como tese/dissertação foi apresentado para discutir seu conteúdo e suas características metodológicas. Recomendações para os autores foram apresentadas para melhorar o planejamento, execução e descrição de revisões de escopo a serem realizadas no Brasil. Este estudo pode ajudar pesquisadores e profissionais de saúde brasileiros a compreender quando e como revisões de escopo podem ser úteis na síntese de evidências, incluindo para o campo de pesquisas em atividade física e saúde