Uncommon anatomical sites and anatomopathological presentations of lymphoma in dogs / Sítios anatômicos e apresentações anatomopatológicas incomuns do linfoma em cães

Lymphomas are the tumors most frequently associated with the death or euthanasia of dogs in most parts of the world. In dogs, they almost always occur as disseminated (multicentric lymphoma), gastrointestinal (alimentary lymphoma), or nodal mediastinal (mediastinal lymphoma) diseases. However, other uncommon presentations can occasionally occur. This study aimed to establish the prevalence of these unusual types of lymphoma and demonstrate to veterinary pathologists how they present pathologically. From a total of 100 cases of lymphoma in dogs diagnosed between 1965 and 2017, 16 cases (16/100) were considered by us as non-traditional presentations of the disease: follicular lymphoma, (5/100), peripheral T-cell lymphoma, NOS (2/100), angiocentric lymphoma (2/100), intravascular large T-cell lymphoma (2/100), lymphomatoid granulomatosis (1/100), anaplastic large-cell lymphoma (1/100), hepatosplenic T-cell lymphoma (1/100), and chronic small B-cell lymphocytic lymphoma, intermediate type (1/100). We hope that the results presented here can help veterinary pathologists to recognize such cases of "atypical lymphoma" in their diagnostic routines.(AU)

Linfomas são os tumores mais associados a morte ou eutanásia de cães na maior parte do mundo. Nessa espécie animal ocorrem quase sempre como uma doença disseminada (linfoma multicêntrico), gastrintestinal (linfoma alimentar) ou nodal mediastinal (linfoma mediastínico), entretanto, ocasionalmente, outras apresentações bem menos comuns podem ser encontradas. O objetivo deste artigo é estabelecer a prevalência desses pouco usuais tipos de linfoma e demonstrar aos patologistas veterinários como eles se apresentam anatomopatologicamente. De um total de 100 casos de linfoma em cães diagnosticados entre os anos de 1965 e 2017, 16 casos (16/100) foram considerados como apresentações não tradicionais da doença: linfoma folicular (5/100), linfoma de células T periférico inespecífico (2/100), linfoma angiocêntrico (2/100), linfoma intravascular de grandes células T (2/100), granulomatose linfomatoide (2/100), linfoma de grandes células anaplásicas (1/100), linfoma hepatoesplênico de células T (1/100) e linfoma linfocítico crônico de pequenas células B - tipo intermediário (1/100). Esperamos que os resultados aqui demonstrados auxiliem patologistas veterinários a reconhecerem tais casos de "linfomas atípicos" em suas rotinas diagnósticas.(AU)

Species distribution and in vitro fluconazole susceptibility of clinical Candida isolates in a Brazilian tertiary-care hospital over a 3-year period / Distribuição de espécies e suscetibilidade in vitro ao fluconazol de isolados clínicos de Candida em um hospital terciário brasileiro num período de três anos

INTRODUCTION: In this study, we aimed at identifying Candida isolates obtained from blood, urine, tracheal secretion, and nail/skin lesions from cases attended at the Hospital Universitário de Londrina over a 3-year period and at evaluating fluconazole susceptibilities of the isolates. METHODS: Candida isolates were identified by polymerase chain reaction (PCR) using species-specific forward primers. The in vitro fluconazole susceptibility test was performed according to EUCAST-AFST reference procedure. RESULTS: Isolates were obtained from urine (53.4 percent), blood cultures (19.2 percent), tracheal secretion (17.8 percent), and nail/skin lesions (9.6 percent). When urine samples were considered, prevalence was similar in women (45.5 percent) and in men (54.5 percent) and was high in the age group >61 years than that in younger ones. For blood samples, prevalence was high in neonates (35 percent) and advanced ages (22.5 percent). For nail and skin samples, prevalence was higher in women (71.4 percent) than in men (28.6 percent). Candida albicans was the most frequently isolated in the hospital, but Candida species other than C. albicans accounted for 64 percent of isolates, including predominantly Candida tropicalis (33.2 percent) and Candida parapsilosis (19.2 percent). The trend for non-albicans Candida as the predominant species was noted from all clinical specimens, except from urine samples. All Candida isolates were considered susceptible in vitro to fluconazole with the exception of isolates belonging to the intrinsically less-susceptible species C. glabrata. CONCLUSIONS: Non-albicans Candida species were more frequently isolated in the hospital. Fluconazole resistance was a rare finding in our study.

INTRODUÇÃO: Neste estudo objetivamos a identificação de isolados de Candida obtidos de sangue, urina, secreção traqueal e de lesões de unha/pele, de casos atendidos no Hospital Universitário de Londrina num período de três anos. Avaliamos também a suscetibilidade dos isolados ao fluconazol. MÉTODOS: Os isolados de Candida foram identificados pela reação em cadeia da polimerase (RCP) usando oligonucleotídeos iniciadores espécie-específicos. O teste de suscetibilidade in vitro ao fluconazol foi realizado segundo o procedimento de referência EUCAST-AFST. RESULTADOS: Isolados foram obtidos de urina (53,4 por cento), sangue (19,2 por cento), secreção traqueal (17,8 por cento) e lesões de unha/pele (9,6 por cento). Considerando as amostras de urina, a prevalência foi similar em mulheres (45,5 por cento) e em homens (54,5 por cento) e foi alta no grupo de idade > 61 anos do que em grupos mais jovens. Para amostras de sangue a prevalência foi alta em neonatos (35 por cento) e idades avançadas (22,5 por cento). Para amostras de unha e pele a prevalência foi maior em mulheres (71,4 por cento) do que em homens (28,6 por cento). Candida albicans foi a mais frequentemente isolada no hospital, mas outras espécies de Candida corresponderam a 64 por cento dos isolados, incluindo predominantemente Candida tropicalis (33,2 por cento) e Candida parapsilosis (19,2 por cento). A tendência de Candida não-albicans como espécie predominante foi observada para todas as amostras clínicas, exceto para amostras de urina. Todos isolados de Candida foram considerados suscetíveis, in vitro, ao fluconazol com exceção dos isolados pertencentes às espécies intrinsecamente menos suscetíveis C. glabrata. CONCLUSÕES: Espécies de Candida não-albicans foram mais frequentemente isoladas no hospital. Resistência ao fluconazol foi rara no nosso estudo.

SDS-Page and numerical analysis of Candida albicans from human oral cavity and other anatomical sites

The aim of the present research was to evaluate the protein polymorphism degrees among forty-eight C. albicans isolates from fourteen anatomical sites of clinical patients by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and numerical analyzes, in order to identify subspecies and their similarities in some infectious niches. Cell cultures were grown in YEPD medium, collected by centrifugation, and washed in cold saline solution. The whole-cell proteins were extracted by cell disruption using glass beads and submitted to SDS-PAGE technique. After electrophoresis, the protein bands were stained with coomassie-blue and analyzed by statistics package NTSYS-pc version 1.70 software. Similarity matrixes and dendrograms were generated by application of similarity coefficient of simple matching and UPGMA algorithm, respectively. The results obtained showed several C. albicans subtypes and their similarity degrees (80% to 100%). Such data showed that same patients may be infected by two or more C. albicans subtypes in certain anatomical sites (i.e. only in oral cavity of immunocompromised patients, blood, or tracheal secretion), or yet, two or more patients can be infected in identical anatomical sites (i.e. bronchial washing, urine, oral cavity, tracheal secretion, vaginal secretion, and healthy saliva) with a same C. albicans subtype. However, two or more patients also can show infections in corresponding sites (i.e. oral cavity of immunocompromised patients, blood, oropharyngeal secretion, oral cavity, tracheal secretion, vaginal secretion, and healthy saliva) by different C. albicans subtypes. Besides, two or more patients also can be infected with identical or different C. albicans subtypes in different anatomical sites (i.e.1. identical subtypes in vaginal secretion, tracheal secretion, and urine; abdominal secretion and spittle; drainage and oral cavity; catheter and healthy saliva - i.e.2. subtypes different in bronchial washing, oropharyngeal secretion, pulmonary secretion, oral cavity of immunocompromised patients, and blood). Complementary studies involving C. albicans sample isolated from several anatomical sites of immunocompetent or immunocompromised patients (before, during and after specifics therapies) and their families or hospital workers must be done in order to establish the sources of C. albicans colonization. The whole-cell proteins profile performed by SDS-PAGE associated with computer-assisted numerical analysis may provide preliminary criteria for taxonomic and epidemiological studies of such microorganisms.

O objetivo da presente pesquisa foi analisar os graus de polimorfismos protéicos entre isolados de C. albicans provenientes de diversos sítios anatômicos de quarenta e dois pacientes clínicos, através do emprego da eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e análise numérica, a fim de se identificar subespécies e suas similaridades nos diversos nichos infecciosos. Culturas celulares foram desenvolvidas em meio YEPD, coletadas por centrifugação e lavadas com solução salina gelada. As proteínas celulares totais, foram extraídas por rompimento celular, usando pérolas de vidro e submetidas à técnica de SDS-PAGE. Após a eletroforese, as bandas de proteínas foram coradas com coomassie-blue e analisadas pelo conjunto de programas estatístico NTSYS-pc versão 1,70. Matrizes de similaridade e dendrogramas foram gerados pela aplicação do coeficiente de similaridade simple-matching e do algoritmo UPGMA, respectivamente. Os resultados obtidos revelaram vários subtipos de C. albicans e seus graus de similaridade (80% a 100%). Tais dados permitiram demonstrar que, certos pacientes podem estar infectados com dois ou mais subtipos de C. albicans em determinados sítios anatômicos (i.e. apenas na cavidade oral de pacientes imunocomprometidos, sangue ou secreção traqueal), ou ainda, dois ou mais pacientes podem estar infectados em sítios anatômicos idênticos (i.e. apenas em lavagem brônquica, urina, cavidade oral, secreção traqueal, secreção vaginal ou saliva saudável) com um mesmo subtipo de C. albicans. No entanto, dois ou mais pacientes também podem apresentar infecções em sítios correspondentes (i.e. apenas na cavidade oral de pacientes imunocomprometidos, sangue, secreção orofaríngea, cavidade oral, secreção traqueal, secreção vaginal e saliva saudável) por diferentes subtipos de C. albicans. Além disso, dois ou mais pacientes também podem estar infectados com subtipos idênticos ou não de C. albicans em diferentes sítios anatômicos (i.e.1. idênticos subtipos na secreção vaginal, secreção traqueal e urina; secreção abdominal e escarro; drenagem e cavidade oral; cateter e saliva saudável - i.e.2. diferentes subtipos em lavagem brônquica, secreção orofaríngea, secreção pulmonar, cavidade oral de pacientes imunocomprometidos e sangue). Dados complementares envolvendo amostras de C. albicans isoladas de vários sítios anatômicos de pacientes imunocompetentes ou imunocomprometidos (antes, durante e após terapias específicas) e seus familiares ou trabalhadores hospitalares, deverão ser obtidos a fim de se estabelecer as possíveis fontes de colonização por esses microrganismos. De modo geral, os perfis de proteínas totais obtidos por SDS-PAGE associados com análise numérica computadorizada, permitem a obtenção de critérios adicionais para os estudos epidemiológicos e taxonômicos de C. albicans.