Good practices in collecting umbilical cord and placental blood / Boas práticas para a coleta de sangue de cordão umbilical e placentário / Buenas prácticas para la recolección de sangre del cordón umbilical y de la placenta

Abstract Objective: to identify the factors related to the quality of umbilical cord and placental blood specimens, and define best practices for their collection in a government bank of umbilical cord and placental blood. Method: this was a descriptive study, quantitative approach, performed at a government umbilical cord and placental blood bank, in two steps: 1) verification of the obstetric, neonatal and operational factors, using a specific tool for gathering data as non-participant observers; 2) definition of best practices by grouping non-conformities observed before, during and after blood collection. The data was analyzed using descriptive statistics and the following statistical software: Statistica(r) and R(r). Results: while there was a correlation with obstetrical and neonatal factors, there was a larger correlation with operational factors, resulting in the need to adjust the professional practices of the nursing staff and obstetrical team involved in collecting this type of blood. Based on these non-conformities we defined best practices for nurses before, during and after blood collection. Conclusion: the best practices defined in this study are an important management tool for the work of nurses in obtaining blood specimens of high cell quality.

Resumo Objetivos: identificar fatores relacionados à qualidade das amostras do sangue de cordão umbilical e placentário e definir boas práticas para sua coleta em um banco público de sangue de cordão umbilical e placentário. Método: pesquisa descritiva, abordagem quantitativa, realizada em um banco público de sangue de cordão umbilical e placentário, desenvolvida em duas etapas: 1) verificação dos fatores obstétricos, neonatais e operacionais, obtidos por coleta em instrumento próprio e observação não participante; 2) definição das boas práticas, por meio do agrupamento de não-conformidades observadas antes, durante e após a coleta do sangue. Os dados foram analisados por meio da estatística descritiva, utilizando-se dos softwares Statistica(r) e R(r). Resultados: houve correlação da influência dos fatores obstétricos e neonatais em menor escala quando comparados aos fatores operacionais, resultando na necessidade de readequar a prática profissional do enfermeiro e da equipe obstétrica envolvida no processo da coleta desse tipo de sangue. A partir das não-conformidades foram definidas boas práticas para o enfermeiro antes, durante e após a coleta. Conclusão: as boas práticas definidas neste estudo são importante ferramenta gerencial para o trabalho do enfermeiro na obtenção de amostras de sangue com alta qualidade celular.

Resumen Objetivos: identificar factores relacionados a la calidad de las muestras de la sangre del cordón umbilical y de la placenta y definir buenas prácticas para su recolección en un banco público de sangre del cordón umbilical y de la placenta. Método: investigación - descriptiva, abordaje cuantitativo, realizada en un banco público de sangre - del cordón umbilical y de la placenta, desarrollada en dos etapas: 1) verificación de los factores obstétricos, neonatales y operacionales, obtenidos por recolección con instrumento propio y observación no participante; 2) definición de las buenas prácticas, por medio del agrupamiento de no-conformidades observadas antes, durante y después de la recolección de la sangre. Los datos fueron analizados por medio de la estadística descriptiva, utilizando los softwares Statistica(r) y R(r). Resultados: hubo correlación de la influencia de los factores obstétricos y neonatales en menor escala cuando comparados a los factores operacionales, resultando en la necesidad de readecuar la práctica profesional del enfermero y del equipo obstétrico que participa en el proceso de la recolección de ese tipo de sangre. A partir de las no-conformidades fueron definidas buenas prácticas para el enfermero antes, durante y después de la recolección. Conclusión: las buenas prácticas definidas en este estudio son importante herramienta administrativa para el trabajo del enfermero en la obtención de muestras de sangre con alta calidad celular.

Celularidade do sangue de cordão umbilical de gestantes hipertensas: estudo caso-controle / Cellularity of the umbilical cord blood of hypertensive pregnant women: a case control study / Celularidad de la sangre de cordón umbilical de gestantes hipertensas: estudio caso-control

OBJETIVO(S): analisar a relação entre celularidade do sangue do cordão umbilical e placentário de gestantes hipertensas e não hipertensas. MÉTODO: estudo caso-controle, com abordagem quantitativa, amostra de 73 gestantes, no período de março a setembro de 2011. Os dados fazem parte do estudo aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa sob o protocolo de número 126/10. RESULTADOS: foi concluído que 80% das bolsas de sangue de cordão umbilical e placentário coletados de gestantes com hipertensão arterial apresentaram celularidade ≥5 x 108, quantidade adequada no total de células nucleadas, atendendo aos critérios estabelecidos pela Resolução 56. CONCLUSÃO: os resultados contribuíram para a identificação de fatores que possibilitam a obtenção de um quantitativo adequado de células tronco-hematopoiéticas, resultando no aumento do número de transplantes de células tronco-hematopoiéticas no Brasil.

AIM: To analyze the relationship between the cellularity of placental and umbilical cord blood of hypertensive and non-hypertensive pregnant women. METHOD: This is a case-control study that used a quantitative approach. The sample consists of 73 pregnant women and it was conducted from March to September 2011. The data are part of the study approved by the Research Ethics Committee under protocol number 126/10. RESULTS: It was found that 80% of the Umbilical Cord and placental blood bags collected from pregnant women with hypertension presented cellularity ≥5 x 108. This is the appropriate amount in relation to the totality of nucleated cells, given the criteria established by Resolution 56. CONCLUSION: The results contributed to the identification of factors that make it possible to obtain an adequate number of hematopoietic stem cells, resulting in the increased number of hematopoietic stem cell transplantation in Brazil.

OBJETIVO(S): analizar la relación entre celularidad de la sangre del cordón umbilical y placentario de gestantes hipertensas y no hipertensas. MÉTODO: estudio caso-control, con abordaje cuantitativo, muestra de 73 gestantes, en el período de marzo a septiembre de 2011. Los datos hacen parte del estudio aprobado por el Comité de Ética en Investigación bajo el protocolo de número 126/10. RESULTADOS: fue concluido que 80% de las bolsas de sangre de cordón umbilical y placentario colectados de gestantes con hipertensión arterial presentaron celularidad ≥5 x 108, cantidad adecuada en el total de células nucleadas, atendiendo a los criterios establecidos por la Resolución 56. CONCLUSIÓN: los resultados contribuyeron para la identificación de factores que posibilitan la obtención de un cuantitativo adecuado de células madre-hematopoyéticas, resultando en el aumento del número de trasplantes de células madre-hematopoyéticas en Brasil.

A capacitação dos enfermeiros e o processo da coleta do sangue do cordão umbilical e placentário: o caso da Maternidade Escola da UFRJ / The training of nurses and the process of umbilical and placental cord blood collection: the case of the UFRJ Maternity School

Introdução: O sangue de cordão umbilical age como ligação entre a placenta e o feto durante a gestação e contém células-tronco que podem ser utilizadas como fonte de células-tronco hematopoéticas em transplantes. Objetivo geral: Analisar a capacitação dos enfermeiros para o processo da coleta SCUP, considerando os aspectos relevantes para a caracterização da Maternidade Escola/UFRJ como posto de coleta. Objetivos específicos: 1- Traçar a caracterização das potenciais doadoras de sangue de cordão e placentário na Maternidade Escola da UFRJ. 2- Descrever a capacitação dos enfermeiros no processo da coleta do sangue de cordão umbilical e placentário na Maternidade Escola da UFRJ. 3 - Avaliar a capacitação dos enfermeiros para o processo da coleta do sangue do cordão umbilical e placentário. 4 Elaborar um programa de educação e capacitação dos enfermeiros para o processo da coleta do sangue do cordão umbilical e placentário para a Maternidade Escola da UFRJ. Método: A primeira fase da pesquisa para atender o objetivo de traçar a caracterização das potenciais doadoras de sangue de cordão e placentário na Maternidade Escola da UFRJ utilizou a metodologia do estudo de caso, as fases seguintes se caracterizaram pela abordagem da pesquisa-ação, com dados descritivos realizada com 20 enfermeiros em uma Maternidade Escola pública do Rio de Janeiro. Para a coleta de dados utilizamos várias fontes de informações (pesquisa documental, entrevistas, observação participativa) para assegurar as diferentes perspectivas dos participantes e por outro, obter várias medidas do mesmo fenômeno. Os dados foram coletadas no período de janeiro de 2014 a novembro de 2015. Para atender a análise e tratamento quantitativos os dados foram tabulados em uma planilha do programa MS Excel® e analisados por meio de estatística descritiva. Para os objetivos qualitativos foram realizados uma análise descritiva de frequência e porcentagem para cada um dos itens dos instrumentos de coleta de dados aplicados, como também através da descrição da percepção subjetiva contidas nos questionários. A pesquisa observou os preceitos éticos contidos na resolução na resolução 466/2012. Aprovado com o número do parecer: 722.172 em 18/07/2014. Resultados: Considerando os critérios de qualificação 73,8% (n=404) aptas para a doação do SCUP, enquanto que nos critérios de desqualificação 89% (n=490) aptas. Apontaram que 62,5% (n=345) das pacientes da maternidade-escola estariam aptas para a doação do sangue do cordão umbilical e placentário, dependendo do seu consentimento. A oficina teórica teve um efeito positivo e significativo no aprendizado para os participantes da pesquisa. As oficinas práticas da CSCUP aconteceram no período de setembro a novembro de 2015, foram realizadas no centro obstétrico da ME/UFRJ, totalizando 18 oficinas e houve a participação de 20 enfermeiros participantes da pesquisa, nesse período foram coletadas 87 bolsas do SCUP. Após o término das oficinas práticas os enfermeiros participantes se sentiram aptos para realizarem a coleta SCUP. Conclusão: A Maternidade-Escola da UFRJ tem aptidão para ser posto de CSCUP com um grande diferencial: que os enfermeiros devidamente capacitados da instituição poderão realizar as coletas SCUP. Houve aprimoramento dos conhecimentos para enfermeiros em relação ao processo da coleta do sangue do cordão umbilical e placentário. A pesquisa possibilitou elaborar um programa de educação de capacitação para a coleta SCUP contribuindo para que as outras maternidades públicas com perfil de posto de coleta também possam usar este programa como modelo para capacitar os enfermeiros no processo de CSCUP. Assim as instituições poderão ser mais um posto de coleta SCUP

Introduction: The umbilical cord blood acts as a connection between the placenta and the fetus during pregnancy. It contains stem cells and can be used as a source for hematopoietic stem cell transplantation. General objective: To analyze the training of nurses for the process of UCB collection, considering specific aspects of the hospital Maternidade Escola/UFRJ as a collection station. Specific objectives: 1 - To outline the profile of potential placenta and cord blood donors at UFRJ´s Maternidade Escola hospital. 2 ­ To define nurses' training in the placental and umbilical cord blood collection process at UFRJ´s Maternidade Escola hospital. 3 ­ To assess nurses' training in the placental and umbilical cord blood collection process at UFRJ´s Maternidade Escola hospital. 4 ­ To elaborate a training program for nurses in the placental and umbilical cord blood collection process at UFRJ´s Maternidade Escola hospital. Method: The objective of the first phase of the research is to outline the profile of potential placenta and cord blood donors at UFRJ´s Maternidade Escola hospital using the case study methodology. The following stages resorted to the action research methodology, with descriptive data conducted with 20 nurses at the public Hospital Maternidade Escola in Rio de Janeiro. Several sources of information were used to collect data (documentary research, interviews, participant observation) in order to establish the participants' different perspectives, and also get multiple measures of the same phenomenon Data were collected in the period from January 2014 to November 2015. To present the quantitative analysis and treatment data were tabulated in a MS Excel® spreadsheet and analyzed using descriptive statistics. For qualitative objectives it was developed a descriptive analysis of frequency and percentage for each of the items of data collection instruments used. The description of the subjective perception in the questionnaires was also used. The research followed the ethical principles of the Resolution 466/2012. Accredited with the opinion number: 722.172 in 07/18/2014. Results: Considering the qualification criteria 73.8% (n = 404) were suitable for donation of UCB, while as per the disqualification criteria it was 89% (n = 490). It was indicated that 62.5% (n = 345) of the maternity hospital patients would be able to donate placenta and umbilical cord blood, depending on their consent. The theoretical workshop had a positive and significant effect on the survey participants' learning curve. UCB practical workshops took place from September to November 2015 at the ME/ UFRJ's obstetric center. 20 nurses participating in the research attended 18 workshops, collecting a total 87 UCB bags. Nurses that attended the practical workshops felt able to perform the UCB collection. Conclusion: UFRJ's Maternidade Escola hopsital is suited to be a UCB collection point with a significant advantage: the institution's properly trained nurses can conduct the UCB collections. Nurses' knowledge in the placenta and umbilical cord collection process improved. The research made it possible to draw up a training education program for UCB collection contributing to other public hospitals with a collection point profile, which can also use this program as a model to train nurses in UCB collection process. Thus these institutions may become another UCB collection point

Introducción: La sangre del cordón umbilical actúa como conexión entre la placenta y el feto durante el embarazo. Ésta contiene células madre y se puede utilizar como fuente de células madre en trasplantes hematopoyéticos. Objetivos generales: Analizar la capacitación de enfermeros en el proceso extracción de SCUP, teniendo en cuenta las características particulares del hospital Maternidade Escola/UFRJ como puesto de extracción. Objetivos específicos: 1. Determinar el perfil de los potenciales donantes de sangre de cordón umbilical y placenta en el hospital Maternidade Escola de la UFRJ.; 2 ­ describir el tipo de entrenamiento de enfermeros en el proceso de extracción de sangre de cordón umbilical y placenta; 3 ­ evaluar la formación de enfermeros en el proceso de extracción de sangre de cordón umbilical y placenta; 4 ­ elaborar un programa de entrenamiento de enfermeros en el proceso de extracción de sangre de cordón umbilical y placenta en el hospital Maternidade Escola de la UFRJ. Método: La primera fase de la investigación tiene el objetivo de determinar el perfil de los potenciales donantes de sangre de cordón umbilical y placenta en el hospital Maternidade Escola de la UFRJ mediante la metodología de estudio de caso. Las fases siguientes utilizan el proceso de investigación-acción, con datos descriptivos sobre 20 enfermeros en el Hospital Maternidade Escola de Río de Janeiro. Para recoger datos se utilizaron diversas fuentes de información (investigación documental, entrevistas, observación participante) para asegurar la representación de las diferentes perspectivas de los participantes y, asimismo, obtener múltiples medidas de un mismo fenómeno. Los datos fueron recolectados en el período comprendido entre enero de 2014 y noviembre de 2015. Los datos de análisis y tratamiento cuantitativos fueron tabulados una planilla de MS Excel® y analizados mediante estadística descriptiva. Para los objetivos cualitativos se llevo a cabo un análisis descriptivo de la frecuencia y porcentaje para cada uno de los instrumentos de recolección de datos usados, incluyendo también la descripción de percepción subjetiva en los cuestionarios. La investigación siguió los principios éticos de la Resolución 466/2012. Aprobado con el número de opinión: 722.172 del 18/07/2014. Resultados: Teniendo en cuenta los criterios de calificación un 73,8% (n = 404) son aptas para donación de SCUP, mientras que según los criterios de descalificación un 89% (n = 490) son aptas. Se indicó que el 62,5% (n = 345) de los pacientes del Maternidade Escola sería capaz de donar sangre de cordón umbilical y placenta, dando su consentimiento. El taller teórico tuvo un efecto positivo y significativo en el aprendizaje de los participantes en la investigación. Los talleres prácticos de colección SCUP se llevaron a cabo desde septiembre hasta noviembre de 2015 en el centro obstétrico del ME/UFRJ. Se realizaron un total de 18 talleres con la asistencia de 20 enfermeros que participaron en la investigación. Durante este período se recolectaron 87 bolsas de SCUP. Al finalizar los talleres prácticos los enfermeros que participaron se sentían capaces de realizar la extracción de SCUP. Conclusión: El hospital Maternidade Escola de la UFRJ tiene la capacidad de ser un puesto de extracción de SCUP con un gran diferencial: que los enfermeros de la institución debidamente capacitados podrán realizar las extracciones de SCUP. El conocimiento de los enfermeros sobre el proceso de extracción de sangre de cordón umbilical y placenta mejoró. La investigación ha permitido elaborar un programa de formación para la extracción de SCUP pudiendo contribuir con otros hospitales públicos que tengan el perfil de punto de extracción y que también puedan utilizar este programa como modelo para capacitar a sus enfermeros en el proceso de extracción de SCUP. De esta manera las instituciones pueden tornarse otro puesto de extracción de de SCUP

Boas práticas para a coleta de sangue de cordão umbilical e placentário: atuação do enfermeiro / Good practices for umbilical and placental cord blood collection: nurses' performance

Objetivos: O objetivo geral deste estudo foi definir as boas práticas para a coleta de sangue de cordão umbilical e placentário (SCUP) em um Banco Público de SCUP (BPSCUP) da Rede BrasilCord, enquanto que os objetivos específicos foram descrever a atuação do enfermeiro em um BPSCUP da Rede BrasilCord; identificar os fatores que influenciam no volume e celularidade de amostras de SCUP em um BPSCUP da Rede BrasilCord; investigar as causas de descartes de amostras de SCUP em um BPSCUP da Rede BrasilCord; estabelecer o padrão de descarte de amostras de SCUP em um BPSUP da Rede BrasilCord. Método: Pesquisa de intervenção de abordagem quantitativa, realizada com 50 doadoras de SCUP e 14 profissionais da equipe de obstetrícia, em uma unidade de coleta externa de um BPSCUP do Sul do Brasil. A coleta de dados ocorreu no período de abril de 2013 a agosto de 2014, pela análise documental, observação não-participante (12 horas e 50 minutos no total) e diário de campo. Os dados foram tabulados em planilha eletrônica do Excell® e pelos softwares estatísticos R® e Statistica®, sofrendo ajustes de normalidade não-paramétrica, considerando 5% como nível de significância. Resultados: Foram identificadas como influências no volume e celularidade do SCUP, os fatores obstétricos peso placentário (rs=0,382923, p=0,006057; rs=0,339155, p=0,015978) e características do cordão umbilical quanto ao calibre (p=0,0051, p= 0,0095) e fluxo sanguíneo (p=0,00001, p=0,00001); os fatores neonatais peso do recém-nato (rs=0,362558, p=0,009667) e os fatores operacionais volume e celularidade (rs=0,873151, p=0,000000), características do cordão umbilical quanto ao aspecto (p=0,0003, p=0,0001), secção inadequada do segmento do cordão umbilical (p=0,00054, p=0,0005), excesso de pressão manual durante a dequitação placentária por tração controlada (p=0,0004, p=0,0004), ruptura ou laceração do segmento do cordão umbilical (p=0,021, p=0,036), desclampeamento do segmento de cordão umbilical por esquecimento do profissional (p=0,0007, p=0,024), desclampeamento do segmento do cordão umbilical para esvaziamento placentário (p=0,024), desclampeamento do segmento do cordão umbilical para coleta de tipagem sanguínea (p=0,006), sequencia de clampeamentos no segmento do cordão umbilical (p=0,036) e tempo entre coleta, transporte e processamento de amostras de SCUP (p=0,0355, p=0,0233). O padrão de descartes das amostras foi estabelecido pelos fatores obstétricos e neonatais identificados. As boas práticas para a coleta de SCUP foram definidas a partir da descrição da atuação do enfermeiro em BPSCUP e das não-conformidades encontradas baseadas nos fatores operacionais de influencia no volume e celularidade de SCUP e foram validadas com profissionais da equipe obstétrica da instituição. Conclusão: As boas práticas para a coleta de SCUP definidas neste estudo surgem como uma importante ferramenta gerencial para o trabalho do enfermeiro de BPSCUP na perspectiva da obtenção de volume e celularidade adequadas para o suprimento de amostras de alta qualidade celular para o BPSCUP. Desta forma, a atuação do enfermeiro em um serviço de ponta, de alta complexidade, visa atender às necessidades da demanda dos TCTH advindos do SCUP à inúmeros candidatos, principalmente crianças, contribuindo para a melhoria da qualidade do SCUP armazenado nos BPSCUP.

Objectives: This study aims to define the best practices for umbilical cord and placental blood (UCPB) collecting in a umbilical cord blood and placental public bank (UCPPBB) of BrasilCord network, while the specific objectives were to describe the nurse's role in a UCPPBB of BrasilCord network; identify the factors that influence the volume and cellularity of samples UCPB in a UCPPBB of BrasilCord network; investigate the causes of discharges of samples UCPB in a UCPPBB BrasilCord network; setting standards for disposal of samples UCPB in a UCPPBB BrasilCord Network. Method: Intervention quantitative research, performed with 50 donors and 14 UCPB professional obstetrics team in an external unity collection of a UCPPBB in the South of Brazil. Data collection realized between April 2013 and August 2014, by documentary analysis, non-participant observation (12 hours and 50 minutes in total) and a field journal. The data were tabulated in a spreadsheet and the Excell® and the statistical software R® and the Statistica®, suffering adjustments nonparametric normality, considering 5% level of significance. Results: We identified the influence on the volume and cellularity of the UCPB linked obstetric factors like a placental weight (rs=0.382923, p=0.006057; rs=0.339155, p=0.015978) and characteristics of the umbilical cord as size (p=0.0051, p=0.0095) and blood flow (p=0.00001, p=0.00001); neonatal factors newborn weight (rs=0.362558, p=0.009667) and operational factors volume and cellularity (rs=0.873151, p=0.000000), characteristics of the umbilical cord in appearance (p=0,0003, p=0.0001), inadequate section of the umbilical cord (p=0.00054, p=0.0005) manual excess pressure for blood placental expulsion by a controlled traction (p=0.0004, p=0.0004), rupturing or lacerating the umbilical cord (p=0.021, p=0.036) segment unclamping the umbilical cord segment through forgetfulness professional (p=0.0007, p=0.024), unclamping the umbilical cord segment for placental deflating (p=0.024), unclamping the umbilical cord segment for collecting blood type (p=0.006), the sequence of clamping umbilical cord (p=0.036) and related time for collection, transportation and processing of samples UCPB (p=0.0355, p=0.0233). The discharges pattern of the samples were established by identified obstetric and neonatal factors. Best practices for UCPB collecting were defined from description of the nurse works in UCPPBB and non-conformities found based on operational factors influencing the volume and cellularity of UCPB and were validated by a professional obstetric staff. Conclusion: The best practices of UCPB collecting, defined in this study, emerged as an important management tool for the job of UCPB nurse, prospect of obtaining volume and suitable for the supply of high quality samples for UCPPBB cell cellularity. Thus, the nurses work in a rush service with a high complexity, which aims to meet the needs of the demand arising from UCPB HSCT for many candidates, especially children, contributing to improve the quality of UCPB stored in UCPPBB.

Malformações do sistema nervoso central e a presença da mutação C677T-MTHFR no sangue fetal / Central nervous system malformations and the presence of the MTHFR-C677T mutation in fetal blood

OBJETIVO: Avaliar a associação entre as malformações do sistema nervoso central (SNC) e a mutação C677T-MTHFR no sangue fetal. MÉTODOS: Foi realizado um estudo caso-controle que comparou a presença da mutação C677T-MTHFR entre 78 fetos com malformações de SNC e 100 fetos morfologicamente normais. O DNA genômico foi extraído e purificado do sangue fetal utilizando o Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega Corp., Madison, WI, USA), de acordo com o protocolo do fabricante. A reação em cadeia da polimerase (PCR, na sigla em inglês) foi realizada para a detecção da mutação C677T-MTHFR termolábil. A análise estatística descritiva foi realizada usando o teste exato de Fisher e o γ² e o teste de Wilcoxon foi utilizado para a análise univariada. Uma análise de regressão logística foi realizada para identificar as variáveis preditoras de malformações do SNC fetal. RESULTADOS: Os casos e controles foram similares quanto às características maternas, incluindo idade e paridade. A mutação C677T-MTHFR foi detectada em 20 casos (25,6%) e em 6 controles na forma heterozigota (OR 10,3; IC95% 3,3-32,2) e em 6 casos (7,7%) e em 1 controle na forma homozigota (OR 12,3; IC95% 1,3-111,1), e essas diferenças foram estatisticamente significativas. CONCLUSÃO: A presença da mutação C677T-MTHFR no sangue fetal foi consistente com maior risco de malformações de SNC, tanto na forma heterozigota quando homozigota.

PURPOSE: To evaluate the association between central nervous system (CNS) malformations and the C677T-MTHFR mutation in fetal blood. METHODS: A case-control study was conducted to compare the MTHFR-C677T mutation detected in 78 fetuses with CNS malformations and with 100 morphologically normal fetuses. Genomic DNA was extracted and purified from fetal blood using the Wizard® Genomic DNA Purification Kit (Promega Corp., Madison, WI, USA) according to manufacturer's protocol. The polymerase chain reaction (PCR) was used to assay the thermolabile MTHFR-C677T mutation. The γ² and the Fisher's exact tests were used for descriptive analysis and the Wilcoxon test was used for univariate analysis. Logistic regression analysis was performed to identify which variables were predictors of CNS malformation. RESULTS: Cases and controls were similar regarding maternal characteristics such as age and number of deliveries and abortions. The MTHFR-C677T mutation was detected in 20 cases (25.6%) and in 6 controls in its heterozygous form (OR 10.3; 95%CI 3.3-32.2) and in 6 cases (7.7%) and in 1 control in its homozygous form (OR 12.3; 95%CI 1.3-111.1), and the differences were statistically significant. CONCLUSION: The presence of the MTHFR-C677T mutation in fetal blood was consistent with a higher risk of CNS malformations, both in the heterozygous and homozygous forms.

Análise dos resultados maternos e fetais dos procedimentos invasivos genéticos fetais: um estudo exploratório em Hospital Universitário / Analysis of fetal and maternal results from fetal genetic invasive procedures: an exploratory study at a University Hospital

OBJETIVO: Caracterizar as indicações das gestantes que procuraram o serviço de Medicina Fetal do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo para realização de procedimentos invasivos diagnósticos e avaliar os resultados dos cariótipos fetais e de suas gestações. MÉTODOS: Estudo observacional retrospectivo das gestantes que realizaram biópsia de vilo corial (BVC), amniocentese e cordocentese no período de fevereiro de 2005 a dezembro de 2009. Não foram incluídos outros procedimentos diagnósticos ou procedimentos terapêuticos. O resultado da gestação foi obtido através de consulta de prontuário eletrônico e/ou físico e/ou contato telefônico. RESULTADOS: Foram realizados 713 procedimentos (113 BVC, 340 amniocenteses e 260 cordocenteses). A principal indicação para a realização dos procedimentos invasivos foi a presença de alterações estruturais nos fetos, seguido por valores aumentados da translucência nucal e pela idade materna avançada. O cariótipo fetal esteve alterado em 186 casos (26,1%). A trissomia do cromossomo 18 foi a aneuploidia mais comum, seguida pela trissomia do 21, a monossomia do X e a trissomia do cromossomo 13. Ocorreram 4,9% de abortamento, 25,7% de natimortos e 13% de neomortos. Oito gestantes optaram pela interrupção judicial, e 99% das gestantes cujos fetos não apresentavam malformação e que apresentavam cariótipo fetal normal tiveram nativivos.

OBJECTIVE: To characterize the indications of pregnant women who sought the Fetal Medicine Services of the Hospital das Clínicas, at the Medical School of the Universidade de São Paulo for performing invasive diagnostic procedures, and to evaluate the results of fetal karyotypes and their pregnancies. METHODS: A retrospective and observational study on pregnant women who underwent chorionic villus sampling (CVS), amniocentesis, and cordocentesis in the period from February, 2005 to December, 2009. Other diagnostic or therapeutic procedures were not included. The result of pregnancy was obtained by consulting patient electronic records, medical records, and/or telephone call. RESULTS: 713 procedures were performed (113 CVS, 340 amniocenteses, and 260 cordocenteses). The main indication for performing invasive procedures was the presence of structural changes in fetuses, followed by increased values of nuchal translucency, and advanced maternal age. Fetal karyotype was altered in 186 cases (26.1%). The 18 trisomy was the commonest aneuploidy followed by the 21 trisomy, X monosomy, and 13 trisomy. There were 4.9% cases of miscarriage, 25.7% cases of stillborn infants, and 13% cases of neonatal deaths. Eight pregnant women opted for legally induced abortion. 99% of pregnant women whose fetuses did not present abnormalities and presented normal fetal karyotype had infants who were born alive.

Marcadores inflamatórios e oxidativos em sangue de cordão umbilical como preditores de gravidade em sepse neonatal / Inflammatory and oxidative cord blood parameters as predictors of neonatal sepsis severity

OBJETIVOS: Sepse neonatal corresponde a uma síndrome complexa, causada por resposta inflamatória sistêmica descontrolada, associada a um foco infeccioso que pode determinar disfunção ou falência de um ou mais órgãos ou mesmo a morte. Apresenta incidência elevada em neonatos prematuros, sendo importante correlacionarmos fatores prognósticos para otimizar nosso diagnóstico precoce e resposta a terapêutica nestes pacientes. Este estudo teve por objetivo determinar a relação entre marcadores inflamatórios e parâmetros oxidativos com fatores prognósticos em sepse neonatal precoce. MÉTODOS: Foi realizado um estudo observacional, prospectivo e foram coletados os dados de 120 pacientes, da maternidade de hospital universitário. Foram incluídos na pesquisa neonatos prematuros (< 37 semanas de gestação) com pelo menos um outro fator de risco para sepse neonatal. Foram determinados os níveis de interleucina (IL)-6, IL-10, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e de proteínas carboniladas em sangue do cordão umbilical e sua relação com gravidade de sepse. RESULTADOS: Os níveis das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e IL-6, mas não IL-10 e proteínas carboniladas, apresentaram correlação significativa com o escore de gravidade SNAPPE-II (r=0,385, p=0,017 e r=0,435 / p=0,02, respectivamente). Não houve relação dos marcadores com a mortalidade dos pacientes. CONCLUSÃO: Substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e IL-6 têm uma correlação de média a moderada com o escore de gravidade SNAPPE-II, mas não com mortalidade.

OBJECTIVES: Neonatal sepsis is a complex syndrome involving an uncontrolled systemic inflammatory response associated with an infection. It may result in the dysfunction or failure of one or more organs or even death. Given its high incidence in premature neonates, the identification of prognostic factors to optimize the early diagnosis and therapeutic interventions are highly desirable. This objective study determine the relationship between inflammatory markers and oxidative parameters as prognostic factors in early neonatal sepsis. METHODS: We conducted a prospective observational study by collecting data from 120 patients in the maternity unit of a university hospital. Preterm (<37 weeks of pregnancy) infants with at least one additional risk factor for neonatal sepsis were included. The levels of interleukin (IL)-6, IL-10, thiobarbituric acid reactive species (TBARS) and protein carbonyls and their association with sepsis severity were determined in the cord blood. RESULTS: Levels of IL-6 and TBARS, but not IL-10 and protein carbonyls, demonstrated a mild to moderate correlation with the SNAPPE-II severity score (r=0.435, p=0.02 and r = 0.385, p = 0.017, respectively). No correlations were found between these markers and mortality. CONCLUSION: TBARS and IL-6 have a mild to moderate correlation with SNAPPE-II, but none of the studied markers were able to predict mortality in our sample.

Isolamento de células osteoprogenitoras derivadas de sangue de cordão umbilical humano: um candidato promissor para terapias celulares para o reparo ósseo / Isolation of human umbilical cord blood-derived osteoprogenitor cells: a promising candidate for cell-based therapy for bone repair

Objective: The aim of this study was to evaluate the osteogenic potential of human umbilical cord blood-derived osteoprogenitor cells and to prove its applicability as a promising candidate for cell-based therapeutics for bone repair. Methods: Primary cultures of human umbilical blood cord adherent cells were expanded in vitro until passage 2 and seeded for osteodifferentiation study. Morphological (light microscopy), cytochemical (Von Kossa's method), and functional analyses (calcium level, alkaline phosphatase activity, and total protein content in cell culture) were carried out 7, 14, 21, and 28 days after the osteoinduction protocol. Results: The proliferative step showed colony-forming units in 7 days. After osteoinduction, cuboidal cellular morphology similar to osteoblasts at 14 days and mineralization nodules and biochemical changes (increased alkaline phosphatase level and calcium deposits) at 21 days confirmed the osteodifferentiation process. Conclusion: Cell culture of human umbilical blood cord is a reliable technique, constituting itself as an alternative source of osteoprogenitor cells for experimental needs. More animal tests and clinical trials must be carried out to validate its use and to establish quality control of future autologous or allogeneic cell-based therapy aimed at bone repair.

Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial osteogênico de células osteoprogenitoras de sangue de cordão umbilical humano e provar sua aplicabilidade como candidato promissor para terapias celulares de reparo ósseo. Métodos: Culturas primárias de células aderentes de sangue de cordão umbilical humano foram expandidas in vitro até a passagem 2 e semeadas para estudo de osteodiferenciação. Análises morfológicas (microscopia de luz), citoquímicas (método de Von Kossa), e funcionais (dosagem de cálcio, atividade de fosfatase alcalina e conteúdo total de proteína na cultura celular) foram conduzidas em 7, 14, 21, e 28 dias após o protocolo de osteoindução. Resultados: A fase proliferativa demonstrou unidades formadoras de colônia em 7 dias. Após osteoindução, a morfologia celular cuboidal similar a osteoblastos em 14 dias e nódulos de mineralização e mudanças bioquímicas (aumento do nível de fosfatase alcalina e depósitos de cálcio) em 21 dias confirmaram o processo de osteodiferenciação. Conclusões: A cultura celular de sangue de cordão umbilical humano é uma técnica segura, constituindo-se uma fonte alternativa de células osteoprogenitoras para usos experimentais. Mais testes em animais e ensaios clínicos devem ser conduzidos para validar seu uso e estabelecer controle de qualidade de futuras terapias celulares autólogas ou alogênicas objetivando o reparo ósseo.

O intervalo de tempo entre coleta e processamento do sangue de cordão umbilical influencia na qualidade da amostra? / Does the time between collecting and processing umbilical cord bloodsamples affect the quality of the sample?

Objective: To assess the association between the time from umbilical cord blood collection until processing and the quality of the sample. Methods: Umbilical cord blood samples collected during the third stage of labor were placed in temperature-controlled boxes for the transport of biological material and sent to an umbilical cord blood bank, where the number of nucleated cells, viable cells and CD34+ cells were counted, and samples were additionally tested for contamination at the following time intervals: up to 24 hours, up to 48 hours and up to 72 hours following sampling. Data were analyzed using the multivariate analysis of variance (MANOVA) and compared using McNemar's X2 test. Significance was defined at p < 0.05. Results: Means and medians of the number of nucleated cells, viable cells and CD34+ cells decreased significantly (p < 0.0001) as a function of the increased time between sampling and analysis, the difference between 24 and 48 hours being less than the difference between 24 and 72 hours. A linear correlation was found between the mean number of viable cells and CD34+ cells at the three moments of analysis. Contamination testing was negative in all samples. Conclusion: The increase in time interval from sampling until analysis negatively affected the number of nucleated cells, viable cells and CD34+ cells but was not associated with specimen contamination. A linear correlation was found between decrease in the number of viable cells and CD34+ cells.

Objetivo: Avaliar a associação do intervalo de tempo entre coleta e processamento do sangue de cordão umbilical e a qualidade da amostra. Métodos: As amostras de sangue de cordão umbilical, colhidas no terceiro período do parto, foram acondicionadas em caixas homologadas para transporte de material biológico, com monitoração da temperatura, e enviadas a um banco de sangue de cordão umbilical, onde foram submetidas à contagem do número de células nucleadas, do número de células viáveis, do número de células CD 34+ e pesquisa de contaminação, nos intervalos de tempo de até 24, até 48 e até 72 horas. Os dados foram analisados pelo teste de variância para medidas repetidas MANOVA e comparados por meio do teste do X2 de Mc Nemar, considerando-se nível de significância de 5%. Resultados: As médias e as medianas do número de células nucleadas, número de células viáveis e número de células CD34+ tiveram quedas significativas (p < 0,0001) com o aumento do intervalo de tempo de coleta/processamento, sendo entre 24 e 48 horas menor do que a comparação entre 24 e 72 horas. Constatada correlação linear entre as médias de células viáveis e células CD34+ nos três momentos da análise. A pesquisa de contaminação foi negativa em todas as amostras. Conclusão: O aumento do intervalo de tempo de coleta/processamento influenciou negativamente na contagem de células nucleadas, células viáveis e CD34+ e não esteve associado à contaminação das amostras. Foi constatada correlação linear entre a queda do número de células viáveis e de células CD34+.

Gestantes com hipertensão arterial: implicações na celularidade do sangue de cordão umbilical e placentário / Pregnant women with arterial hypertension: implications on the cellularity of umbilical cord and placental blood

As atividades desenvolvidas pelo enfermeiro nos Bancos de Sangue de Cordão Umbilical Placentário demanda alta complexidade assistencial e funcional, fato que imputam a responsabilidade de identificar situações que devam ser avaliadas, pesquisadas e reformuladas, como por exemplo os critérios de doação de sangue de cordão umbilical e placentário (SCUP), critérios de inclusão e exclusão de doadoras, padronização de técnicas e demais situações que envolvem a atuação do enfermeiro. A celularidade tem sido alvo de atenção por parte dos enfermeiros, devido a necessidade de obtenção de um número adequado células-tronco hematopoiéticas. Este estudo objetivou discutir a associação entre a celularidade do sangue do cordão umbilical e placentário e a hipertensão arterial e; traçar perfil das gestantes com hipertensão arterial e sem hipertensão arterial. A metodologia correspondeu a um estudo observacional do tipo caso-controle. O local da pesquisa foi o Hospital Maternidade Oswaldo de Nazareth e o Laboratório de Processamento e Criopreservação do Instituto Nacional de Câncer e os sujeitos do estudo foram setenta de três gestantes internadas, e que tiveram o sangue de cordão umbilical e placentário coletados após a dequitação. A análise estatística foi processada pelo software estatístico SAS® System, versão 6.11 e o critério de determinação de significância adotado foi o nível de 5%. A análise estatística apresentou resultados satisfatórios, constatamos que a celularidade inicial do sangue do cordão umbilical de gestantes hipertensas não apresentou diferença significativa comparado com a celularidade de gestantes não-hipertensas. Das bolsas de SCUP coletas de gestantes hipertensas, 80% apresentou celularidade ≥ 5 x 108 e 20% celularidade < 5 x 108 (de acordo com padrão estabelecido pela RDC 56). A partir deste estudo, podemos concluir que gestantes com hipertensão arterial apresentaram uma quantidade adequada no total de células nucleadas, atendendo aos critérios estabelecidos pela RDC 56. Com base nestes resultados e com a intensificação de pesquisas neste campo, sugerimos a reavaliação dos critérios de doação do sangue do cordão umbilical e placentário das gestantes com hipertensão arterial. A celularidade do SCUP apresentou uma relação positiva com alguns fatores neonatais e características da placenta/cordão, o conhecimento destes fatores permitirá as equipes dos BSCUP, a identificação de características importantes relacionadas à mãe, ao recém-nascido e as características da placenta e do cordão que possam otimizar o quantitativo de células obtidas do SCUP

The activities performed by nurses in the Blood Banks Umbilical Cord Placental high demand and functional complexity of care, a fact that indirectly responsible to identify situations that should be evaluated, researched and reworked, such as the criteria for donation of umbilical cord blood and placental (SCUP), inclusion and exclusion criteria for donors, standardization of techniques and other situations that involve the performance of nurses. WBC has been the subject of attention from nurses, due to the need to obtain an adequate number of hematopoietic stem cells. This study aimed to discuss the relation between cellularity and cord blood and placental and hypertension, a profile of pregnant women with hypertension and no hypertension. The methodology corresponded to an observational case-control. The research site was the Maternity Hospital and Oswaldo de Nazareth Processing and Cryopreservation Laboratory of the National Cancer Institute and the study subjects were pregnant women admitted seventy three, and had the blood of the umbilical cord and placenta collected after dequitação. Statistical analysis was performed with SAS ® System software, version 6.11 and the criterion for determining significance was set at 5%. Statistical analysis showed satisfactory results, we found that the initial cellular cord blood of pregnant women with hypertension showed no significant difference compared with the cellularity of pregnant women not hypertensive. SCUP collections of the stock of pregnant women with hypertension, 80% had WBC ≥ 5 x 108 and 20% cellularity <5 x 108 (according to standards established by the DRC 56). From this study, we conclude that pregnant women with hypertension had an adequate amount of total nucleated cells, meeting the criteria established by the RDC 56. Based on these results and the intensification of research in this field, we suggest a reassessment of the criteria for donation of umbilical cord blood and placenta of pregnant women with hypertension. The cellularity of the SCUP presented a positive relationship with some factors and characteristics of neonatal placental / cord, the knowledge of these factors will allow teams of BSCUP, the identification of important features related to the mother, the newborn and the characteristics of the placenta and umbilical that can optimize the quantity of cells obtained from SCUP

Atualizações na profilaxia da isoimunização Rh / Updates in the prophylaxis of the Rh isoimmunization

O conhecimento da isoimunização Rh e das bases moleculares do gene RHD e de suas variantes cresceu muito nos últimos anos. Esse crescimento permitiu a introdução de ferramentas realmente úteis no acompanhamento a gestantes isoimunizadas ou em risco de desenvolver a doença hemolítica perinatal (DHPN). A introdução da imunoprofilaxia RhD, por volta dos anos 1960, propiciou uma significativa redução na incidência de aloimunização materna por anti-D. Essa redução torna-se ainda mais significante quando há a associação da profilaxia pós-natal à antenatal, entretanto, seu uso ainda não é amplamente difundido no Brasil e sua eficiência está diretamente relacionada à dose correta, que vai depender da idade gestacional e da quantidade de hemorragia feto-materna (HFM). Sabe-se ainda que a imunoglobulina anti-D policlonal, por ser de origem humana, não é isenta de riscos à gestante ou ao concepto. Dada essa limitação, anticorpos monoclonais têm sido produzidos e avaliados a fim de substituir o anti-D policlonal. Todavia, até o momento, o sucesso dessa nova tecnologia tem sido apenas parcial. Como uma importante alternativa, entretanto, tem sido estudada a habilidade de indução de tolerância à proteína RhD, em ratos transgênicos, a partir de peptídios sintéticos

The knowledge of the Rh isoimmunization and the molecular bases of RHD gene and its variants has grown in recent years. This growth allowed the introduction of useful tools in monitoring pregnant women with alloimmunization or at risk of developing hemolytic disease of the newborn (HDN). The introduction of RhD immunoprophylaxis, in the 1960 years, provided a significant reduction in the incidence of maternal alloimmunization by anti-D. This reduction becomes even more significant when associated with antenatal prophylaxis, however, its use is not yet widespread in Brazil and its efficiency is directly related to the correct dose that will depends on the gestational age and the fetomaternal hemorrhage (FMH) quantity. It is also known that anti-D polyclonal, to be of human origin, is not without risk to the mother or the fetus. Given this limitation, monoclonal antibodies have been produced and evaluated in order to replace the polyclonal anti-D. Nevertheless, so far the success of this new technology has been only partial. As an important alternative, however, the ability to induce tolerance to the RhD protein in transgenic mice from synthetic peptides has been studied

Bancos de sangue de cordão umbilical e placentário para uso familiar, de caráter privado, no Brasil: subsídios técnicos, legais e éticos para uma análise de implementação / Private umbilical cord blood banks for family use, in Brazil: technical, legal and ethical issues for an implementation analysis

Os bancos de sangue de cordão umbilical e placentário foram criados a partir da comprovação de que o sangue de cordão umbilical e placentário (SCUP) é uma fonte rica em células progenitoras hematopoéticas (CPH) e alternativa às células provenientes da medula óssea para transplante, fato que gerou o interesse pelo armazenamento das células nele contidas. A legislação brasileira distingue bancos para uso alogênico não aparentado (públicos) e para uso exclusivamente autólogo (privados). Por sua vez, o armazenamento de SCUP para uso familiar (doação dirigida) pode ser realizado em bancos de sangue de cordão umbilical e placentário públicos, serviços de hemoterapia ou centros de transplante, quando há um membro da família do nascituro com doença diagnosticada e que necessite de transplante de CPH como tratamento. Apesar de a legislação ser clara, a Anvisa tem identificado o interesse sobre a possibilidade da liberação de unidades de SCUP, armazenadas em bancos autólogos, para a utilização de outrem, familiar, além do recém-nascido beneficiário. O objetivo do trabalho visa promover a reflexão sobre uma possível modificação dos parâmetros legais nacionais que regem os bancos de SCUP autólogo, tornando-os bancos com vistas ao uso familiar, por meio da exposição dos principais elementos relacionados ao tema. O estudo analisou os critérios técnico-sanitários legais para regulamentação dos bancos; descreveu as características das CPH de diversas fontes e tipos de doação para transplante; contextualizou a relação com os princípios da Bioética; avanços sobre terapia e pesquisas relativas às CPH; e discutiu possíveis riscos envolvidos no processo.

Umbilical cord blood banks have been created worldwide after the discovery that umbilical cord blood (UCB) is a rich source of Hematopoietic Stem Cells (HSC) and an alternative to HSC from bone marrow for allogeneic transplantation. According to Brazilian legislation, banks for allogeneic use (government services) and exclusively autologous use (private services) can be created in the country. The storage of UCB units for direct donation (family use) can occur in public cord blood banks, hemotherapy services and transplant centers when there is a specific need to treat a known patient that is a member of the newborn's family. Even with the legislation being quite clear about the creation of cord blood banks and distribution of UCB units, ANVISA has identified an interest, demonstrated by the population and regulated sector, in the possibility of releasing UCB units, stored in autologous cord blood banks, with the purpose of clinical applicability to another family member other than the newborn owner of the cells. The objective of this study is to promote a discussion on a possible alteration in the legal parameters that support the implementation of autologous cord blood banks, towards the constitution of private banks for family use, pointing out the main issues. The study analyzed the technical and legal criteria related to cord blood banks, described the characteristics of HSC from different sources and types of transplant donations and procedures; discussed concerns related to Bioethical principles, current and potential clinical HSC applications, and possibly risks and benefits.

Erythrocyte indices and serum ferritin in newborns / Indices de eritrócitos e ferritina sérica em recém-nascidos

Hematological values for newborn babies differ depending on the gestational age and intrauterine growth. However, information in published studies about hematological values for cord blood according to weight-for-gestational-age categories is limited and inconsistent, especially regarding small-for-gestational-age (SGA) newborns. With the aim of describing hematological values for umbilical cord blood, we conducted a cross-sectional study in two government maternity hospitals in Salvador, Brazil. Eighty-eight healthy, term, appropriate-for-gestational-age (AGA), 23 term, small-for-gestational-age (SGA), and 13 preterm, AGA newborns were studied. Means and standard deviation, and maximum and minimum values were used to describe the level of hemoglobin (Hb), red blood cells (RBC), hematocrit (HCT), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), red cell distribution width (RDW) and serum ferritin. The highest values of RBC, Hb, HCT and serum ferritin were recorded for term SGA newborns and the lowest values were recorded for preterm AGA newborns. Term AGA newborns had intermediate values for all these parameters. In this study we observed the highest hematological values in SGA newborns. Because, these infants are at the highest risk of iron deficiency, the use of more detailed screening tests for iron deficiency in these newborns at birth, using a combination of biomarkers, should be considered.

Valores hematológicos dos recém-nascidos (RN) diferenciam-se em função da idade gestacional e do crescimento intrauterino. Na literatura, as informações sobre valores hematológicos de acordo com categorias de peso para a idade gestacional em RN são escassas e inconsistentes, especialmente referindo-se a RN pequenos para a idade gestacional (PIG). Para descrever os valores hematológicos do cordão umbilical foi realizado um estudo transversal, em duas maternidades públicas de Salvador, Brasil, envolvendo 88 RN a termo adequados para a idade gestacional (AIG), 23 RN a termo PIG e 13 RN pré-termo AIG. A média, desvio-padrão (DP), e valor máximo e mínimo foram usados para descrever os níveis de hemoglobina (Hb), número de hemácias (Hm), hematócrito (HCT), volume globular médio (VGM), hemoglobina globular média (HGM), amplitude de distribuição das hemácias e ferritina sérica. Os valores mais altos de Hm, Hb, HCT e ferritina sérica foram identificados nos RN a termo PIG, e os mais baixos foram encontrados nos RN pré-termo AIG. Os RN a termo AIG apresentaram valores intermediários para todos referidos parâmetros eritrocitários. Neste estudo foram observados valores hematológicos mais elevados em RN a termo PIG, apesar desses RN apresentarem maior probabilidade de deficiência de ferro; indicando a necessidade de um diagnóstico mais detalhado da deficiência de ferro ao nascer, neste grupo de RN, usando a combinação de vários testes.