The female reproductive system of Zearaja chilensis (Quichenot, 1848) (Chondrichthyes, Rajidae): gametogenesis and microscopic validation of maturity criteria / El sistema reproductor femenino de Zearaja chilensis (Quichenot, 1848) (Chondrichthyes, Rajidae): gametogénesis y validación microscópica de los criterios de madurez

Chondrichthyans are extremely susceptible to overfishing due, among other things, to their reproductive adaptations. Basic knowledge of reproductive parameters is essential, both of ecological and for economic points of view. Zearaja chilensis is a valuable economic resource in South America. This work analyzes the microanatomy of female reproductive system, as well as the size of the onset of vitellogenesis. The material was fixed in Bouin and processed using routine histological techniques. Both ovaries are equally functional. Folliculogenesis depicts the same pattern of other Chondrichthyans. Follicles with different degrees of maturation coexist in mature animals, with the exception of oogonia, which were only found in immature individuals. Likewise, atretic follicles were recorded in all stages of maturation. The size of yolk input, microscopically recorded, is lower than the detected at naked eye. Oviductal glands and uterus show similarity with those reported in other lecitotrophic cartilaginous fish. This work reports, for the first time, the morfofunctional microanatomy of the species, and puts to the test the accuracy of the commonly employed criteria for the determination of sexual maturity, a critical data when determining management policies.

Los condrictios son extremadamente susceptibles a la explotación pesquera debido, entre otras cosas, a sus adaptaciones reproductivas. Los conocimientos básicos de sus parámetros reproductivos son esenciales, ya sea desde el punto de vista ecológico como económico. Zearaja chilensis constituye un importante recurso económico en América del Sur. En este trabajo se analiza la anatomía microscópica del sistema reproductor femenino y la talla de inicio de la vitelogénesis. El material se fijó en Bouin y se procesó mediante técnicas histológicas de rutina. Ambos ovarios son igualmente funcionales. La foliculogénesis presenta el mismo patrón de otros condrictios. Los folículos con diferentes grados de maduración coexisten en animales maduros, con la excepción de las oogonias, que sólo se observaron en los individuos inmaduros. Los folículos atrésicos se registraron en todas las etapas de la maduración. La talla de inicio de la vitelogénesis, microscópicamente registrada, es inferior a la detectada en el ojo desnudo. La glándula oviductal y el útero muestran similitud con lo reportado en otros peces cartilaginosos lecitotróficos. Este trabajo describe por primera vez, la microanatomía morfofuncional de la especie y pone a prueba la precisión de los criterios comúnmente empleados para la determinación de la madurez sexual, una información crítica para la determinación de las políticas de gestión.

One case of triphallia in the marine snail Echinolittorina peruviana (Caenogastropoda: Littorinidae) / Un caso de trifalia en el caracol marino Echinolittorina peruviana (Caenogastropoda: Littorinidae)

Gonochoric representatives of Littorinidae have a reproductive system organized with transit organs that connects the testicle with a penis specialized for internal fertilization. However, malformations at this level can produce, like triphallia (presence of triple penis). This description corresponds to one case of triphallia found in Echinolittorina peruviana (Lamarck, 1822) inhabitant of the South Pacific coasts. The macro and microscopic analysis reveals that every penis is an independent appendix whose individual morphology is similar to that in normal individuals, characterized by a non pigmented conic penis associated with a mammilliform gland located at the base of the right ocular tentacle. The cervical sperm groove lined by a simple ciliated and secretory columnar epithelium, runs along the neck of the animal, is subdivided into the base of each penis forming the penile seminal groove in each of them, and ascends dorsally from the base to the tip. The other organs that make up the reproductive system have a normal organization (no duplication or triplets), and the testicle organized in acini contains all the cell types of the male germ line. Although the cause of this condition is still unknown, might be associated with genetic causes and not of environmental kind...

Los representantes gonocóricos de Littorinidae presentan un sistema reproductor organizado con órganos de tránsito que conectan al testículo con un pene especializado para la fecundación interna. Sin embargo, pueden ocurrir malformaciones a este nivel, como la trifalia (presencia de pene triple). Esta descripción corresponde a un caso de trifalia encontrado en el representante gonocórico Echinolittorina peruviana (Lamarck, 1822), habitante de las costas del Pacífico Sur. El análisis macro y microscópico revela que cada pene es un apéndice independiente cuya morfología individual es semejante a la de individuos normales, caracterizada por un pene de forma cónica no pigmentado asociado a una glándula de tipo mamiliforme ubicada en la base del tentáculo ocular derecho. El surco espermático cervical revestido por un epitelio simple cilíndrico ciliado y secretor, recorre el cuello del animal, se subdivide en la base de cada pene conformando el surco espermático peneano en cada uno de ellos, y asciende dorsalmente desde la base hasta el ápice. Los otros órganos que conforman el sistema reproductor poseen una organización normal (sin duplicaciones o triplicaciones), y el testículo organizado en acinos contiene todos los tipos celulares de la línea germinal masculina. Aunque aún la causa de esta patología es desconocida podría estar asociada a causas genéticas y no de tipo ambiental...

Expresión de receptores de estrógenos y progesterona en el tracto genital de ovejas raza Texel / Expression of estrogen and progesterone receptors in the genital tract of Texel ewes

El comportamiento reproductivo de los ovinos varía entre las diferentes razas. Dentro de los factores que inciden en la capacidad reproductiva, el nivel de expresión de receptores de estrógenos y progesterona en su tracto genital parece tener un rol relevante. En el endometrio, oviducto y ovario los estrógenos y progesterona, regulan la expresión de numerosas proteínas comprometidas en su desarrollo morfofuncional. Factores genéticos como la raza estarian relacionados con los niveles de expresión de estos receptores. Las ovejas de raza Texel tienen elevados índices de fertilidad, son muy prolíficas y presentan un alto porcentaje de gestación múltiple lo cual podría tener relación con la expresión de estos receptores en el tracto reproductivo. El objetivo del presente estudio fue evaluar la expresión de receptores de estrógenos y progesterona en tracto genital de ovejas de raza Texel de alta prolificidad. La expresión de la proteína receptora de ambos receptores se detectó mediante análisis inmunohistoquímico y el nivel de expresión de los transcritos por RT-PCR en Tiempo Real Cuantitativo. Los resultados muestran expresión inmunohistoquímica del receptor de estrógeno principalmente en zonas glandulares y carunculares del endometrio. Se destaca además una menor expresión de ambos receptores en ovario, epitelio del oviducto y cervix. La expresión del receptor de progesterona a nivel inmunohistoquímico es bastante menor en cuanto a la señal destacándose marcas débiles en endometrio y ovarios. El nivel de expresión de los transcritos mantiene la misma distribución que las señales inmunohistoquimicas para ambos receptores. Concluimos que ambos receptores son expresados en el sistema reproductivo de ovejas de raza Texel en una distribución similar a lo encontrado en otras razas de ovejas quedando por definir si los niveles de expresión son similares en las distintas razas.

Reproductive performance of sheep varies between different races. Among the factors that affect the reproductive capacity, the level of expression of estrogen and progesterone receptors in the genital tract appears to have a relevant role. In the endometrium, oviduct and ovarian estrogen and progesterone regulate the expression of numerous proteins involved in morphofunctional development. Genetic factors such as race would be related to expression levels of these receptors. The Texel ewes have high fertility rates, are very prolific and have a high percentage of multiple births which could be related to the expression of these receptors in the reproductive tract. The aim of this study was to evaluate the expression of estrogen and progesterone receptors in the genital tract of ewes and Texel high prolificacy. The expression of the receptor protein of both receptors was detected by immunohistochemistry and the level of expression of the transcripts by Quantitative RT-PCR Real-Time. The results showed immunohistochemical expression of estrogen receptor mainly in areas of glandular and caruncular endometrium. It also highlights a lower expression of both receptors in ovarian tissue, epithelium of the oviduct and cervix. Expression of progesterone receptor immunohistochemical level is much lower with weaker signal in endometrium and ovaries. The expression level of transcripts remains the same distribution as immunohistochemical signals for both receptors. We conclude that both receptors are expressed in the reproductive system Texel ewes in a distribution similar to that found in other breeds of sheep, must be defined if the levels of expression are similar in different races.

Relación entre indicadores clínicos del espermograma y variables redox en infertilidad masculina / Association between clinical indicators of spermogram and redox variables in the male infertility

En conjunción a los factores convencionales que originan la infertilidad se ha identificado el estrés oxidativo, asociado como el factor causal que ocasiona daño al espermatozoide, pero los métodos para su determinación a nivel clínico no han sido desarrollados. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la existencia de una correlación entre indicadores globales del estado redox a muestras de suero sanguíneo, lisado de eritrocitos, plasma seminal y lisado de espermatozoides con la finalidad de identificar posibles biomarcadores. Se analizaron muestras que procedían de 31 pacientes con diagnóstico de infertilidad masculina y 30 voluntarios aparentemente sanos. Se confirmó que en todas las muestras analizadas los indicadores de daño a biomoléculas se encontraban significativamente (p< 0,01) incrementados en los pacientes cuando se compararon con el grupo control. Los indicadores de daño se acompañaron con bajos niveles de la capacidad antioxidante total en la fase lipídica y un desbalance en la actividad de las enzimas catalasa y superóxido dismutasa (relación catalasa/superóxido dismutasa 10 veces superior en plasma seminal de pacientes con respecto al valor control). El incremento de indicadores como malonindialdehído y organoperóxidos totales medidos en plasma seminal se correlacionaron con el incremento de indicadores de hipofunción espermática como movilidad y características morfológicas. El comportamiento de las variables redox en el plasma seminal resultó de gran valor diagnóstico y se propone para que sea usado en el seguimiento de intervenciones nutricionales o farmacológicas a estos pacientes

In addition to the conventional factors originating infertility, the oxidative stress has been identified as the causative factor of spermatozoid damage; however, the methods for its clinical determination have not been developed yet. The present study was aimed at evaluating the correlation among the global redox state indicators of samples of blood serum, erythrocyte lysin, seminal plasma and sperm lysin in order to identify the possible biomarkers. Samples taken from 31 patients diagnosed with male infertility and 30 apparently health volunteers were analyzed. It was confirmed that all the samples had indicators of biomolecule damage which increased significantly (p< 0,01) in patients compared with the control group. The damage indicators comprised low total antioxidant capacity levels in the lipid phase and imbalance in the activity of enzymes catalase and superoxide dismutase (catalase/superoxide dismustase ratio is 10 times higher in seminal plasma of patients when compared to that of the controls). The increase of total malonindialdehyde and organoperoxide measured in the seminal plasma correlated with the increase of sperm hypofunction indicators such as mobility and morphological characteristics. The behaviour of redox variables in the seminal plasma had great diagnostic value and was submitted as a proposal for use in the follow-up of nutritional or pharmacological interventions in these patients

Desbalance redox en la infertilidad masculina / Lack of Redox balance in male sterility

La infertilidad masculina es considerada como uno de los factores que más contribuyen a la infertilidad de la pareja. En conjunción a los factores convencionales que la originan se ha identificado una causa de extraordinaria repercusión: el estrés oxidativo, el cual es el resultado del desequilibrio entre la generación de especies reactivas del oxígeno y los antioxidantes, que puede originar daños o deformidades a los espermatozoides y eventualmente infertilidad masculina. Las especies reactivas del oxígeno se producen por diversos mecanismos en el semen, por espermatozoides inmóviles o con problemas de movilidad, leucocitos y por espermatozoides normales morfológicamente pero funcionalmente anormales. Entre estos daños, se registran la peroxidación lipídica a la membrana espermática y la fragmentación del ADN tanto nuclear como mitocondrial. Los daños que causa el estrés oxidativo sobre el ADN pueden originar trastornos en la descendencia que incluyen cáncer y acondroplastia. La peroxidación lipídica, origina la alteración de la membrana que afecta su estructura y función. La membrana del espermatozoide humano contiene una elevada proporción de ácidos grasos poliinsaturados, por lo tanto su susceptibilidad a la peroxidación lipídica es muy elevada. Las especies reactivas del oxígeno tienen diversos efectos sobre las células espermáticas, constituyendo un tema muy controvertido, por lo que este artículo tuvo como propósito actualizar al lector sobre algunos de los aspectos bioquímicos relacionados con la producción de especies reactivas del oxígeno y los métodos de diagnóstico que se emplean para detectarlo en la infertilidad humana.

The male sterility is considered as one of the factors more contributing to couple sterility. Join to conventional factors originate it condition it was possible to identify a cause with a high level of repercussion: the oxidative stress, which is the result of the imbalance between generation of reactive oxygen species and the antioxidants that may to cause damages or deformities in the spermatozoa and eventually male sterility. The reactive oxygen species are produced due to different mechanisms present in semen, motionless spermatozoa or with motility disorders, leukocytes and morphologically normal spermatozoa but functionally abnormal. Among these damages it is present the lipid peroxidation to spermatic membrane and the nuclear and mitochondrial DNA fragmentation. The damages of oxidative stress on DNA may also to cause disorders in offspring including cancer and achondroplasia. Lipid peroxidation leads to an alteration in the membrane affecting its structure and function. The human spermatozoon membrane contains a high proportion of poly-non-saturated fatty acids therefore its oversensitivity to lipid peroxidation is very high. The reactive oxygen species have different effects on spermatic cells, being a very controversial topic. The aim of present paper was to update readers on some of the biochemical features related to the production of reactive oxygen species and the diagnostic methods used to detect the human sterility.

Estudio de la expresión de los receptores de progesterona y estrógeno en el endometrio de ovejas alimentadas con dieta normal y dieta suplementada / Study of the expression of progesterone receptors in the endometrium of ewes with normal and supplementary diet

La influencia de la nutrición sobre la reproducción en ovinos es compleja y los resultados observados son variables. Planes nutricionales bajos pueden ser causa de una reducción de la sensibilidad del endometrio a la progesterona lo que afecta el desarrollo morfofuncional del endometrio en estadios tempranos de la preñez y por lo tanto va en directo detrimento de la sobrevida del embrión. La progesterona y los estrógenos actúan a través de receptores intracelulares específicos que median su efecto fisiológico. Por lo tanto el nivel de expresión de estos receptores es fundamental para el efecto hormonal. El objetivo del presente estudio fue analizar en forma conjunta la expresión de receptores de progesterona (RP) y estrógeno (RE), en el endometrio de ovejas en ciclo alimentadas con dieta suplementada y dieta normal. La expresión de la proteína receptora como del transcrito de ambos receptores se detectó mediante análisis inmunohistoquímico y RT-PCR en Tiempo Real. Los resultados muestran expresión inmunohistoquímica contra ambos receptores en zonas glándulares y carunculares, destacándose una intensa inmunorreacción en núcleo de células estromales y del epitelio glandular. Se detectó mayor expresión del transcrito de ambos receptores en ovejas alimentadas con suplemento respecto a las que no recibieron suplemento alimenticio.

The influence of nutrition on reproduction in sheep is complex and the reported results are variable. Low nutritional programs can cause a reduction in the sensitivity of the endometrium to progesterone which affects morphofunctional development of the endometrium in early stages of pregnancy and therefore is in direct expense of the survival of the embryo. Progesterone and estrogens act through specific intracellular receptors that mediate its physiological effect. Therefore the level of expression of these receptors is essential for the hormonal effect. The aim of this study was to analyze the expression of progesterone receptors (PR) and estrogen (ER) in the endometrium of sheep supplemented diet cycle and fed normal diet. The expression of the receptor protein and the transcript of both receptors was detected by immunohistochemistry and RT-PCR Real Time. The results show immunohistochemical expression against both receptors in caruncular and glandular areas, highlighting an intense immunoreaction in the nucleus of stromal cells and glandular epithelium. Were detected increased expression of the transcript of both receptors in sheep fed on the supplement that did not receive food supplement. We discuss the possible use of this information for applications in breeding programs in sheep breeding.

Morphology of an infundibulum of the oviduct of the sexually mature hens

Studied functional morphology of an infundibulum oviduct of the hens in an age interval 150-540 days. As indicators of development the following parameters served: length, weight, diameter of a infundibulum, sizes epithelial cells, height and width folds of a tunica mucosa, histological structure of a wall of a infundibulum. The results show dynamical increase of investigated parameters with 150- till 360-day's age, with their subsequent decrease to 540-day's age.

Se estudió la morfología funcional del infundibulum del oviducto de gallinas en un intervalo de edad de 150-540 días. Sirvieron como indicadores de desarrollo los siguientes parámetros: longitud, peso, diámetro del infundibulum, tamaño de las células epiteliales, altura y ancho de los pliegues de la túnica mucosa y estructura histológica de la pared del infundibulum. Los resultados muestran incrementos dinámicos de los parámetros investigados con 150 días hasta 360 días de edad, con su posterior disminución a los 540 días de edad.

Microscopic anatomy of the male reproductive system in Echinolittorina peruviana (Mollusca: Caenogastropoda) / Anatomía microscópica del sistema reproductor masculino de Echinolittorina peruviana (Mollusca: Caenogastropoda)

Echinolittorina peruviana (Lamarck, 1822), a gonochoric representative of the Littorinidae on the SE Pacific coast, has a male reproductive system adapted for internal fertilization. We describe this system at both macro- and microscopic levels, particularly the compartmentalized organization of the gonad, and the morphology of the penis. The male reproductive system has a variegated conical gonad-digestive gland complex. The gonad presents three compartments, 1) gametogenic acinar among the glandular acini, 2) periacinar with a layer of fusiform somatic cells and, 3) interacinar with glycogen storage cells shared with glandular acini. Spermatogenesis occurs within the acinar gametogenic compartment, with the germinal line organized in centripetal form towards the lumen. The seminal vesicle stores the products of spermatogenesis; in its cephalic region the euspermatozoa are united to the epithelium and the paraspermatozoa are distributed in the lumen. A short duct connects the seminal vesicle to the prostate gland that is open to the pallial cavity over its entire length. The anterior zone of the prostate gland is joined to the cervical spermatic groove that runs along the neck of the snail through the right pallial region; this continues as the penile spermatic groove, ascending from the base to the point of the penis. The penis is acutely conical and unpigmented; towards the anterior and adjacent to its base there is a glandular complex with a mamilliform process and a discoidal glandular region. The secretion from the discoidal region is transformed in a spicule of unknown function, whose histology is described here for the first time. The mamilliform process is formed by the spicular projection and a connective-muscle tissue band which surrounds it and separates it from the discoidal follicular glandular region; the follicular secretion crosses this band and is incorporated into the epithelium which lines the interior of the process.

Echinolittorina peruviana (Lamarck, 1822), representante gonocórico de Littorinidae en el Pacífico Sur, tiene un sistema reproductor masculino adaptado para la fecundación interna, que en este estudio se describe a niveles macrocoscópico y microscópico; enfatizando la organización compartimentalizada de la gónada y la morfología del pene. El sistema reproductor masculino se presenta como un complejo cónico gónada-glándula digestiva abigarrado. La gónada presenta tres compartimientos: 1) gametogénico acinar entre los acinos glandulares, 2) periacinar con una capa de células somáticas fusiformes y 3) interacinar con células almacenadoras de glicógeno, compartido con los acinos glandulares. En el compartimiento gametogénico acinar ocurre la espermatogénesis con la línea germinal organizada en forma centrípeta hacia el lumen. Hacia anterior, la vesícula seminal almacena los productos de la espermatogénesis; en su región cefálica los euespermatozoides se unen al epitelio y los paraespermatozoides se distribuyen en el lumen. Este órgano se conecta con un conducto corto a la glándula prostática, abierta hacia la cavidad paleal en toda su longitud. La zona anterior de la glándula prostática se une al surco espermático cervical, que recorre el cuello del animal por la región paleal derecha; éste continúa como surco espermático peniano ascendiendo desde su base hasta la punta. El pene es cónico aguzado no pigmentado; hacia anterior adyacente a su base, hay un complejo glandular con un proceso mamiliforme y una región glandular discoidal. Su producto de secreción sería una espícula de función desconocida, cuya histología es descrita por primera vez. En este complejo glandular, el proceso mamiliforme está constituido por la proyección espicular y una banda conjuntivo-muscular que lo rodea y separa de la región glandular folicular discoidal; su secreción atraviesa dicha banda, incorporándose al epitelio de revestimiento interno del proceso.