Estabilidade dos anticorpos anti-HIV em amostras de soro armazenadas por períodos de dois a dezoito anos / Stability of anti-HIV antibodies in serum samples stored for two to eighteen years periods

Introduction: The antibodies have an important role in the serodiagnosis, constituting the most widely used biomarkers to detect and confirm various diseases. Objective: To investigate the reproducibility of anti-human immunodeficiency virus (HIV) antibodies reactivity, to assess the stability of the sera samples stored at -20ºC for two to eighteen years. Method: Sera were collected in the period 1988-2004 for routine anti-HIV antibodies diagnostic testing. The remaining samples stored at -20ºC, were analyzed in this study. Serum sample stability was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), indirect immunofluorescence assay (IFA), and Western blot (WB) for detecting anti-HIV antibodies. The previously found results (1988-2004) and those obtained in 2006 were subjected to Kappa index analysis. Result: In the period 1988-to 2004, the degree of concordance of the ELISA/EIA, IFA and WB results were considered, good (k = 0.80), regular (k = 0.35), and good (k = 0.63), respectively. Conclusion: Regarding HIV serologic test, the serum samples were stable for 18 years in ELISA/EIA and for 4 years in IFA technique, however, for the WB methodology it was not possible to determine the time of stability of the anti-HIV antibodies...

Introdução: Os anticorpos possuem papel fundamental no sorodiagnóstico e constituem os mais difundidos biomarcadores empregados na detecção e na confirmação de diversas doenças. Objetivo: Verificar a reprodutibilidade dos resultados de anticorpos contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV) para avaliar a estabilidade dos soros armazenados a -20ºC durante período de dois a dezoito anos. Método: Os soros utilizados foram provenientes de amostras remanescentes da rotina diagnóstica para detecção de anticorpos anti-HIV, no período de 1988 a 2004, os quais estavam armazenados em freezer a -20ºC. A estabilidade das amostras de soro foi avaliada por meio de enzyme-linked immunosorbent assay/enzyme immunoassay (ELISA/EIA), imunofluorescência indireta (IFI) e Western blot (WB) para detecção de anticorpos anti-HIV, e os resultados dos testes realizados anteriormente (1988-2004) e os obtidos em 2006 foram submetidos à análise do índice Kappa. Resultado: No período de 1988-2004, os graus de concordância dos resultados do ELISA/EIA, IFI e WB foram considerados, respectivamente, bom (k = 0,80), regular (k = 0,35) e bom (k = 0,63). Conclusão: No que diz respeito à sorologia para HIV, as amostras de soro foram estáveis por 18 anos no ELISA/EIA e por quatro anos na técnica de IFI, no entanto, para a metodologia de WB, não foi possível determinar o tempo de estabilidade dos anticorpos anti-HIV...

Influência de diferentes condições de armazenamento sobcongelamento na reatividade de anticorpos séricos / Influence of different freezing storage conditions on the the reactivity of serum antibodies

Anticorpos, importantes marcadores sorológicos usados rotineiramente no imunodiagnóstico para caracterizar diversas doenças, possuem uma estrutura quaternária crucial no reconhecimento antigênico e na reação imunológica. A estocagem de amostrasde soro é um fator determinante na alteração da estrutura química dessas glicoproteínas. A estabilidade de amostras soropositivas para a doença de Chagas (DC), Toxoplasmose e Streptoccocidiose foi avaliada após estocá-las em diferentes temperaturasde congelamento (-8ºC e -20ºC) e a -20°C em freezer tipo Frost-free (FF) poraferição dos títulos sorológicos em períodos de tempo (0, 60 e 90 dias), testando as reatividades por Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) e hemaglutinação HAI para DC, ELISA e imunofluorescência indireta (IFI) para toxoplasmose, e aglutinação enefelometria para anticorpo antiestreptolisina O (ASLO). O armazenamento em FF mostrouser a melhor condição para conservar amostras para análises por HAI para DC, por IFI para toxoplasmose e por nefelometria (ASLO). As análises por ELISA para DC e toxoplasmose e as de ASLO (aglutinação) mostraram uma alta redução de reatividade quando comparadas àquelas estocadas a -8ºC e -20ºC. Isto pode indicar heterogeneidade entre grupos de anticorpos e/ou possíveis diferenças de especificidade nos métodos dediagnóstico utilizados.