Prevalence of methicillin resistant staphylococcus aureus isolated from saliva samples of patients with oral squamous cell carcinoma / revalencia de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina en muestras de saliva de pacientes con carcinoma oral de células escamosas

Objectives: To study the prevalence of methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in saliva samples of pre-surgical oral squamous cell carcinoma (OSCC) patients along with their resistance pattern to other antibiotics. Methods: Saliva samples of OSCC patients were collected and processed for isolation of MRSA. Staphylococcus aureus isolates were primarily identified using standard microbiological methods like biochemical assays, specialized media and latex agglutination test. Confirmation of MRSA strains was done by growing the isolates on MRSA agar and by using PCR to amplify two MRSA specific genes. All the isolated Staphylococcus aureus strains were subjected to antibiotic sensitivity tests. Results: A total of 17 Staphylococcus aureus strains were isolated from 50 saliva samples of pre-surgical OSCC patients of which 13 were confirmed to be MRSA. These MRSA strains were also found to be mostly resistant to other commonly used antibiotics. Univariate analysis revealed that most patients with MRSA infections had a prior history of hospitalization and surgery. Also, it was confirmed that patients with other comorbidities and infections were more prone to having MRSA present in the saliva. Conclusion: The majority of Staphylococcus aureus isolates from the saliva of OSCC patients were MRSA, and were resistant to several other commonly used antibiotics.

Objetivos: Estudiar la prevalencia de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (MRSA) en muestras de saliva prequirúrgicas de pacientes con carcinoma oral de células escamosas (COCE) junto con su patrón de resistencia a otros antibióticos. Métodos: Se recolectaron muestras de saliva de pacientes con COCE y se procesaron para el aislamiento de SARM. Los aislamientos de Staphylococcus aureus se identificaron principalmente mediante métodos microbiológicos estándar, como los análisis bioquímicos, los medios especializados y la prueba de aglutinación con látex. La confirmación de las cepas de SARM se realizó cultivando los aislados en agar SARM y utilizando PCR para amplificar dos genes específicos de SARM. Todas las cepas aisladas de Staphylococcus aureus se sometieron a pruebas de sensibilidad a los antibióticos. Resultados: Se aislaron un total de 17 cepas de Staphylococcus aureus a partir de 50 muestras de saliva de pacientes prequirúrgicos con COCE, de los cuales solo se confirmó que 13 eran SARM. También se encontró que estas cepas de SARM son resistentes a otros antibióticos de uso común. El análisis univariado reveló que la mayoría de los pacientes con infecciones por SARM tenían antecedentes previos de hospitalización y cirugía. Además, se confirmó que los pacientes con otras comorbilidades e infecciones eran más propensos a las infecciones por SARM. Conclusión: la mayoría de los aislamientos de Staphylococcus aureusde la saliva de los pacientes con OSCC fueron MRSA y fueron resistentes a varios otros antibióticos de uso común.

Síntesis de nanopartículas de ácido poliláctico cargadas con antibióticos y su actividad antibacteriana contra Escherichia coli O157:H7 y Staphylococcus aureus resistente a meticilina / Synthesis of antibiotic loaded polylactic acid nanoparticles and their antibacterial activity against Escherichia coli O157:H7 and methicillin-resistant Staphylococcus aureus

Resumen Introducción: Las nanopartículas poliméricas constituyen una herramienta nanotecnológica que podría ayudar a combatir los microorganismos patógenos que han desarrollado resistencia a los antibióticos convencionales. Objetivo: Sintetizar nanopartículas de ácido poliláctico cargadas con ofloxacina y vancomicina, y determinar su actividad antibacteriana frente a Escherichia coli O157:H7 y Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM). Materiales y métodos: Las nanopartículas de ácido poliláctico cargadas con ofloxacina y vancomicina se sintetizaron utilizando el método de emulsión y evaporación de solvente. Se caracterizaron mediante dispersión de luz en modo dinámico, electroforesis Doppler con láser y microscopía electrónica de barrido (S-TEM). Se evaluó la actividad antibacteriana in vitro de las nanopartículas de ácido poliláctico con ofloxacina contra E. coli O157:H7 y nanopartículas de ácido poliláctico con vancomicina contra SARM, mediante el método de microdilución en caldo. Resultados: Se obtuvieron nanopartículas poliméricas con tamaños inferiores a 379 nm y carga superficial positiva de hasta 21 mV. Las nanopartículas cargadas con ofloxacina presentaron una concentración inhibitoria mínima (CIM50) de 0,001 μg/ml frente a E. coli O157:H7, valor 40 veces menor que la concentración de antibiótico libre necesaria para lograr el mismo efecto (CIM50=0,04 μg/ml). Para SARM, las nanopartículas mejoraron la potencia farmacológica in vitro de la vancomicina al exhibir una MIC50 de 0,005 μg/ml, comparada con la de 0,5 μg/ml del antibiótico libre. Conclusiones: Se mejoró el efecto antibacteriano de la ofloxacina y la vancomicina incorporadas en la matriz polimérica de ácido poliláctico. Las nanopartículas poliméricas constituirían una alternativa para el control de cepas bacterianas de interés en salud pública.

Abstract Introduction: Polymeric nanoparticles are promising nanotechnology tools to fight pathogenic bacteria resistant to conventional antibiotics. Objective: To synthesize polylactic acid nanoparticles loaded with ofloxacin and vancomycin, and to determine their antibacterial activity against Escherichia coli O157:H7 and methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Materials and methods: We synthesized ofloxacin or vancomycin loaded polylactic acid nanoparticles by the emulsification-solvent evaporation method, and characterized them by dynamic light scattering, laser Doppler electrophoresis and scanning electron microscopy. We evaluated in vitro antibacterial activity of ofloxacin- and vancomycin-loaded polylactic acid nanoparticles against E. coli O157:H7 and MRSA using the broth microdilution method. Results: Ofloxacin- and vancomycin-loaded polylactic acid nanoparticles registered a positive surface charge density of 21 mV and an average size lower than 379 nm. In vitro minimum inhibitory concentration (MIC50) of ofloxacin-polylactic acid nanoparticles was 0,001 μg/ml against E. coli O157:H7, i.e., 40 times lower than the free ofloxacin (MIC50: 0.04 μg/ml), indicating enhanced antibacterial activity while the in vitro MIC50 of vancomycin-polylactic acid nanoparticles was 0,005 μg/ml against MRSA, i.e., 100 times lower than that of free vancomycin (MIC50: 0.5 μg/ml). Conclusion: Polylactic acid nanoparticles loaded with ofloxacin and vancomycin showed a higher antibacterial activity. Polymeric nanoparticles are a possible alternative for drug design against pathogenic bacterial strains of public health interest.

Impacto de la resistencia a la meticilina sobre la mortalidad y vigilancia de la sensibilidad a la vancomicina en bacteriemias causadas por Staphylococcus aureus / Impact of methicillin resistance on mortality and surveillance of vancomycin susceptibility in bacteremias caused by Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus es uno de los principales patógenos nosocomiales y produce una alta morbimortalidad en numerosos hospitales del mundo. Además, la incidencia de bacteriemias por este microorganismo ha aumentado significativamente en las últimas décadas. Los objetivos del presente trabajo fueron identificar los factores de riesgo que favorecen la aparición de resistencia a la meticilina en aislamientos de S. aureus y los factores que afectan la mortalidad por bacteriemias asociadas a este patógeno, así como evaluar la sensibilidad a la vancomicina de las cepas resistentes a la meticilina. Se estudiaron 39 aislamientos de S. aureus provenientes de hemocultivos de pacientes internados con bacteriemia en la Nueva Clínica Chacabuco de Tandil (Pcia. de Buenos Aires, Argentina) en el período 01/2006-12/2008. La mortalidad global fue del 51,3% y estuvo significativamente asociada con la resistencia a la meticilina (OR: 4,20; IC95%: 1,08-16,32; p: 0,05); aunque dicho factor no fue un predictor independiente de mortalidad. La cirugía previa (OR: 17,23; IC95%: 1,80-164,60) y la estancia previa en la unidad de cuidados intensivos (OR: 21,12; IC95%: 2,33-191,30) fueron predictores independientes de la resistencia a la meticilina y la asistencia respiratoria mecánica (OR: 15,99; IC: 3,24-78,86) fue un predictor independiente de la mortalidad. No se detectaron cepas con sensibilidad disminuida a la vancomicina. Todos los aislamientos estudiados fueron sensibles in vitro a la vancomicina, con una CIM50 y una CIM90 de 0,5 μg/ml.

Staphylococcus aureus is a major nosocomial pathogen that causes severe morbidity and mortality in many hospitals worldwide. Besides, the incidence of S. aureus bacteremia has significantly increased over the past decades. The aims of this study were to detect the risk factors for methicillin resistance and mortality and to evaluate vancomycin susceptibility in methicillin-resistant isolates. Thus, 39 S. aureus isolates from blood cultures of hospitalized patients with bacteremia were studied in Nueva Clínica Chacabuco Tandil, Buenos Aires, Argentina during 01/2006-12/2008. The overall mortality was 51.3%, which was significantly associated with methicillin resistance (OR: 4.20, IC95%: 1.08-16.32, p: 0.05), even though it was not an independent mortality predictor as it was the mechanical ventilation (OR: 15.99, IC95%: 3.24 - 78.86). Previous surgery (OR: 17.23, IC95%: 1.80-164.60) and hospitalization in intensive care units (OR: 21.12, IC95%: 2.33-191.30) were independent predictors of meticillin-resistance. No isolates were found with reduced vancomycin susceptibility. All the studied isolates were in vitro susceptible to vancomycin with a MIC50 and MIC90 of 0.5 μg/ml.

The detection of mupirocin resistance and the distribution of methicillin-resistant Staphylococcus aureus at the University Hospital of the West Indies, Jamaica / Detección de la resistencia a la mupirocina y distribución de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina en el Hospital Universitario de West Indies, Jamaica

OBJECTIVES: The objectives of this study were to determine the susceptibility of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) isolates to Mupirocin and other antimicrobial agents and to record the prevalence and distribution of this organism at the University Hospital of the West Indies (UHWI). METHODS: MRSA isolates collected between January 1, 2008 and December 31, 2008, were tested for low and high level resistance to Mupirocin. Susceptibility testing to other antibiotics including cotrimoxazole, minocycline, tetracycline, clindamycin, erythromycin, gentamicin and vancomycin was also done. Laboratory records for all patients from whom MRSA was recovered were reviewed and data on type and source of isolates, clinical diagnosis, history of previous hospitalization and use of mupirocin were extracted. In addition, the laboratory records for 2004 and 2005 were also reviewed to determine prevalence during these periods. RESULTS: Seven per cent of Staphylococcus aureus isolates were resistant to methicillin (MRSA) and of these, 30% and 24% showed low level and high level resistance to mupirocin, respectively. Ninety-four per cent of MRSA strains were resistant to erythromycin while 52% showed resistance to clindamycin. Resistance to tetracycline, co-trimoxazole and minocycline was 27%, 12% and 6%, respectively, while about one-third ofthe isolates were resistant to gentamicin. There was no resistance to vancomycin. More than half (58%) of the isolates were from skin and soft tissue specimens while isolates from respiratory and urinary tracts and the bloodstream accounted for 19%, 13% and 4%, respectively. There has been a steady increase in prevalence from 4% in 2004 to 5% in 2007 and 7% in 2008. CONCLUSION: Resistance of MRSA to mupirocin appears to be an emerging problem at the UHWI and must be monitored carefully. There is also significant resistance to commonly used antimicrobial agents and strict adherence to antibiotic policy is required to preserve the usefulness of these agents.

OBJETIVOS: Los objetivos de este estudio fueron determinar la susceptibilidad de aislados de Staphylococcus aureus resistentes (MRSA) frente a la mupirocina y otros agentes antimicrobianos, y grabar la prevalencia y distribución de este organismo en el Hospital Universitario de West Indies (UHWI). MÉTODOS: Aislados de MRSA recogidos entre el 1ero. de enero de 2008 y el 31 de diciembre de 2008, fueron sometidos a prueba a fin de determinar sus niveles bajo y alto de resistencia a la mupirocina. También se investigó la susceptibilidad frente a otros antibióticos tales como co-trimoxazol, minociclina, tetraciclina, clindamicina, eritromicina, gentamicina y vancomicina. Se revisaron las historias de laboratorio de todos los pacientes de quienes de recobró MRSA, y se extrajeron datos sobre el tipo y fuente de los aislados, el diagnóstico clínico, la historia de hospitalización previa, y el uso de mupirocina. Además, se revisaron las historias clínicas de laboratorio de 2004 y 2005 a fin de determinar la prevalencia durante estos periodos. RESULTADOS: Setenta por ciento de los ailados de estafilococo dorado era resistente a la meticilina (MRSA) y de éstos, 30% y 24% mostraron un bajo nivel y un alto nivel de resistencia a la mupirocina, respectivamente. Noventa y cuatro por ciento de las cepas de MRSA eran resistentes a la eritromicina, mientras que el 52% mostró resistencia a la clindamicina. La resistencia a la tetraciclina, el cotrimoxazol, y la minociclina fue de 27%, 12% y 6%, respectivamente, mientras que aproximadamente un tercio de los aislados eran resistentes a la gentamicina. No hubo resistencia a la vancomicina. Más de la mitad (58%) de los aislados procedían de especimenes de tejido blando y de la piel, mientras que los aislados de las vías respiratorias y urinarias así como del torrente sanguíneo constituyeron el 19%, 13% y 4%, respectivamente. Ha habido un aumento constante de la prevalencia de 4% en 2004 a 5% en 2007 y 7% en 2008. CONCLUSIÓN: La resistencia de MRSA a la mupirocina parece ser un problema emergente en el HUWI y debe monitorearse cuidadosamente. Hay también una resistencia significativa a los agentes antimicrobianos normalmente usados y se requiere una adhesión estricta a la política antibiótica a fin de preservar la utilidad de estos agentes.

Resistencia de Staphylococcus aureus a los antibióticos en un hospital de la orinoquia colombiana / Antimicrobial resistance of Staphylococus aureus at a hospital from the Colombian Orinoquia

Introducción: El objetivo de este estudio de cohorte retrospectivo fue analizar la resistencia de Staphylococcus aureus a los antibióticos en el Hospital Departamental de Villavicencio, centro de mediana y alta complejidad, entre 2005 y 2009. Materiales y métodos: Se analizaron los resultados de los estudios microbiológicos de los pacientes con cultivo positivo para S. aureus. No se hizo ninguna intervención. La variable de estudio fue la resistencia a la meticilina y el desenlace, la resistencia a los antimicrobianos. Resultados: Se tamizaron 29.451 estudios de microbiología y se encontraron 976 aislamientos de S. aureus, los cuales se analizaron para determinar su resistencia a los antibióticos por el método de microdilución en caldo. El 49,6 % de ellos (484) fueron clasificados como resistentes a la meticilina; se encontró un mayor grado de resistencia múltiple, especialmente para gentamicina (25,0% Vs. 2,9%), ciprofloxacina (25,1% Vs.2,4%), clindamicina (29,4% Vs.4,1%) y eritromicina (31,0% Vs.1,7%), y menor, para trimetoprim/sulfametoxazol (11,8% Vs.4,1%). Aunque era de esperarse que la resistencia simultánea para la vancomicina fuera muy baja, se encontraron algunas cepas intermedias y resistentes, pero este resultado no se puede analizar adecuadamente debido a que estas cepas no se remitieron a un laboratorio de referencia para pruebas de confirmación. La resistencia a la tetraciclina, aun en las cepas sensibles a la meticilina, fue alta. No se identificó ninguna cepa resistente al linezolid. No se realizaron estudios para evaluar la resistencia a la tigeciclina. Conclusiones: La resistencia de S. aureus a la meticilina es frecuente también en esta institución hospitalaria de la orinoquia colombiana. La resistencia múltiple es mayor en S. aureus resistente a la meticilina, especialmente a la gentamicina, la ciprofloxacina y la clindamicina. Cuando S. aureus es sensible a la meticilina, también se observa un alto grado de sensibilidad a estos antibióticos. Los hallazgos de sensibilidad a la ciprofloxacina y a la clindamicina en presencia de resistencia a la meticilina, sugieren la posibilidad de cepas asociadas a la comunidad en Villavicencio, al igual que en otras ciudades de Colombia, lo cual amerita estudios posteriores para confirmarlo.

Objective: Analyze the antimicrobial resistance patterns of Staphylococcus aureus at a hospital in Villavicencio, Colombia from 2005 to 2009. Design: Retrospective cohort study Setting: Villavicencio Departamental Hospital, a second and third level care center Target population: Patients’ microbiological records showing positive strains for S. aureus were analyzed. Interventions: None Variable: Methicillin resistance Outcomes: Antimicrobial resistance Results: Nine hundred and seventy six strains of S. aureus were isolated from 29,451 microbiological screened samples, and their antimicrobial resistance pattern was analyzed by standard micro-dilution broth tests. 49.6% strains were resistant to methicillin, and their co-resistance was higher mainly to gentamycin (25%), ciprofloxacin (25.1%), clindamycin (29.4%) and erythromycin (31.0), but lower to trimethoprim/sulfamethoxazole (11.8%). Although co-resistance to vancomycin was supposed to be low, some intermediate range and resistant isolates were found, but this statement cannot be established because they were not confirmed at a referenced laboratory. Tetracycline resistance was high even for methicillin sensitive stains. No resistance to linezolid was identified. Resistance to tigecycline was not evaluated. Conclusions: S. aureus resistance to methicillin is also common at the target hospital in the Colombian Orinoco region. Co-resistance is higher particularly to gentamycin, ciprofloxacin and clindamycin in methicillin resistant strains. High sensitivity to these antimicrobials is evidenced when S. aureus is also sensitive to methicillin. Some findings related to sensitivity to ciprofloxacin and clindamycin in the presence of methicillin resistance suggest the possibility of community- associated strains in Villavicencio as well as in other Colombian cities. This possibility deserves further confirmatory research.

Colonización por Staphylococcus aureus resistentea meticilina en las manos de individuosde la comunidad / Hand colonization by methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in the community

En la última década han sido cada vez más frecuentes los informes de infecciones causadas porcepas de Staphylococcus aureus resistente a meticilina asociadas a la comunidad (CA-MRSA,por Community-associated methicillin-resistant S. aureus). La colonización juega un papelimportante en la epidemiología de tales infecciones. Sin embargo, los estudios de colonizaciónse han centrado principalmente en el ambiente hospitalario y se han hecho muy pocos en lacomunidad. En este trabajo se investigó la frecuencia de colonización por S. aureus en generaly por MRSA en las manos de individuos de la población general no relacionados con el área dela salud, empleando métodos fenotípicos y moleculares. Se obtuvieron mediante hisopado 800muestras de las manos de otros tantos individuos. Se halló colonización por Staphylococcusaureus en 65 muestras (8,1%) y por MRSA en 5 (0,63%). Las 5 cepas de MRSA presentaban elcasete cromosómico mec (SCCmec) de los tipos IV o V, típicamente relacionados con CA-MRSA.Nuestro trabajo evidenció la colonización de las manos por MRSA en individuos de la comunidad,lo cual constituye un importante factor de riesgo, no solo por su asociación con el desarrolloulterior de infecciones, sino también por el potencial de diseminar este microorganismo a lapoblación general.

Community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections (CA-MRSA) havebeen reported with increasing frequency during the past decade. Colonization plays an importantrole in the epidemiology of such infections. However, colonization studies have focused mostlyon hospital settings and only a few have been carried out in communities. This was a study of thefrequency of hand colonization by S. aureus in generaland by CA-MRSA, by means of phenotypical andmolecular methods, in 800 adults from the communitywho had no relationship with the health area.Staphylococcus aureus colonization was found in 65individuals (8.1%) and MRSA was present in 5 (0.63%).The 5 MRSA strains were found to have mecchromosomic cassettes (SCCmec) of either type IV orV, typical of CA-MRSA. Our study provides evidence ofCA-MRSA colonization in the hands of individuals fromthe community. This constitutes an important riskfactor, not only by its association with subsequentinfections, but also for the risk of dissemination of thismicroorganism to the general population.