Anthelmintic Resistance of Gastrointestinal Strongyles Infecting Sheep in Nziih, West Cameroon

Aims: This study aimed to investigate the levels of efficacy of anthelmintics that were most commonly used in sheep farms in Nziih locality. Study Design: Longitudinal prospective study. Place and Duration of Study: The study was carried out in Nziih locality in August 2019 and September 2020. Methodology: Resistance against Albendazole (12.5 mg/kg) and Ivermectin (0.2 mg/kg) was evaluated using faecal egg count reduction test in naturally occurring gastrointestinal strongyles of sheep in Nziih. A total of 300 young animals were randomly selected from 5 farms in 2019 and in 2020. Faecal samples were collected from each animal on the first day of treatment (D0) and collected again 14 days later (D14). Faecal Egg Counts were performed using the Willis and Mac Master techniques and resistance was declared when faecal egg count reduction (FECR) was less than 95 % and the lower limit of confidence interval (LCI) less than 90%. Pooled faecal samples for each treatment group were set for D0 and D14 to identify resistant strongyles genera by calculating persistent larval rate (PLR). Results: Resistance against Ivermectin was detected while there was none against Albendazole. Moreover, it was declared only in 2 farms out of the 5 selected. From 2019 to 2020, the status of resistance has shifted from suspicion to resistance for ivermectin and from absence of resistance to suspicion to Albendazole. Resistance was recorded in 2 sites: Pastorale1 (FECR= 85 %, LCI= 42.61 %) and Pastorale 3 (FECR=90.5 %, LCI= 72.26 %) in large flock herds and in farms where sheep were dewormed at least 4 times per year. Trichostrongylus were more persistent than Haemonchus and Oesophagostomum/Chabertia with PLR of 21.22 %, 13.71 %, and 7.40 % respectively. Conclusion: Anthelmintics must be used correctly in conjunction with farmer education in Nziih.

Eliminación de huevos de los pequeños estróngilos en la materia fecal de los equinos y su importancia práctica en la posibilidad de tratamientos selectivos / Fecal shedding of equine small strongyle eggs and its practical importance for selective treatment

Resumen Los pequeños estróngilos son los parásitos de mayor prevalencia e importancia en los equinos de todo el mundo, y el desarrollo generalizado de la resistencia de estos nematodos a los antihelmínticos está impulsando la aplicación de tratamientos selectivos (TS) para disminuir o demorar el desarrollo de estos fenómenos. Esta estrategia se basa en conteos de huevos de nematodos en la materia fecal de todos los integrantes del grupo animal para tratar solamente aquellos que sobrepasan un determinado umbral o cut off. Este principio de TS se ve favorecido por la consistencia de los conteos de huevos por gramo de heces (hpg) en los equinos y está siendo empleada en algunos países del hemisferio norte, especialmente en los animales adultos. En la Argentina, existe una ausencia de información básica en relación a las condiciones climáticas, de pastoreo y manejo que podrían resultar en cargas parasitarias y transmisión de nematodos diferentes a las observadas en el hemisferio norte. En este contexto, el objetivo de este estudio fue caracterizar la eliminación de huevos de pequeños estróngilos en 436 equinos de diferentes edades pertenecientes a 19 establecimientos del área central de la Argentina. El 90% de los equinos mostró huevos de estróngilos en las heces y los valores de hpg fueron menores a 200 y mayores a 1.000 en el 32% y 22% de los equinos respectivamente. La distribución de los huevos de estróngilos entre individuos de todas las edades fue sobre-dispersa o agregada, con una media aritmética general de 671,59 ± 789,76 y un valor de k o parámetro de agregación inversa de 0,72 (distribución de la binomial negativa). La edad de los animales (potrillos vs adultos) y los biotipos (deportivo vs trabajo) en la categoría adultos influenciaron la magnitud de los valores del hpg (p<0,001). En esta última categoría el 35% de los animales fue responsable de la excreción de aproximadamente el 80% de los huevos eliminados en las pasturas. Si bien existen algunas diferencias con lo observado en países del hemisferio norte con poblaciones parasitarias más agregadas o sobre-dispersas, los TS para el control de los pequeños estróngilos en equinos adultos podrían también ser una estrategia válida bajo nuestras condiciones para disminuir la presión de selección sobre el genoma parasitario y permitir el desarrollo de poblaciones en refugio.

Abstract Small strongyles are the most prevalent and important parasites in grazing horses throughout the world and the widespread development of antihelminthic resistance has prompted in some countries of the northern hemisphere the application of selective treatments (ST) to reduce or delay the development of these phenomena. This strategy is based on determining strongyle fecal egg counts of all herd members and treating only those exceeding a certain threshold or cut off. However, there is an absence of basic information on horses maintained under climatic, grazing or management conditions different from those observed in the northern hemisphere. In this context, the aim of this study was to characterize the elimination of eggs of small strongyles in horses of different ages from 19 farms in the central area of Argentina. Out of a total of 436 horses, 90% showed positive strongyles egg counts and in these animals the count of eggs per gram of feces (epg) was under 200 and over 1,000 in 32% and 22% of the horses respectively. The distribution of strongyle eggs among individuals of all categories was over-dispersed or aggregated with a general epg arithmetic mean of 671.59 ± 789.76 and a value of the inverse aggregation parameter of 0.72 (negative binomial distribution). The age of the animals (foals vs. adults) and the biotypes in the adult category (sports vs. work) influenced the magnitude of the epg values (P <0.001). In the latter category, approximately 35% of the animals were responsible for the excretion of approximately 80% of the eggs in the pastures. Although some differences on magnitude and distribution of strongyle fecal egg counts were observed in countries of the northern hemisphere, ST of small strongyles in adult equines could also be a valid strategy under Argentinian conditions to reduce the selection pressure on the parasitic genome and allow the development of refugia populations.

Resistencia antihelmíntica en equinos: Observaciones sobre el período de reaparición de huevos luego del tratamiento con ivermectina en potrancas y yeguas madres

En los equinos parasitados por los pequeños estróngilos, un menor período requerido luego del tratamiento con antihelmínticos para la reaparición de huevos (PRH) de los nematodes en la materia fecal, puede ser utilizado como un indicador de la presencia de resistencia o pérdida de eficacia a estas drogas. En el presente trabajo se evaluó la eficacia clínica y el PRH luego de tratamientos con ivermectina (0,2 mgr/kg) en equinos adultos (yeguas madres) y jóvenes (potrancas) naturalmente parasitados por pequeños estróngilos en un establecimiento de la provincia de Tucumán. La eficacia clínica determinada en la segunda semana post-tratamiento y utilizando un test de reducción en el conteo de huevos, osciló entre el 99,8 y el 100% en yeguas y potrancas respectivamente. Por su parte el PRH (considerado como el período post- tratamiento en que se alcanza el 10% del hpg pre-tratamiento o una reducción del mismo < 90%) fue de seis y siete semanas para las potrancas y yeguas madres respectivamente (p=0,001). En la sexta semana post- tratamiento, las potrancas mostraron poseer 11,74 veces más riesgo (IC 95% = 2,58-53,38) de reaparición de huevos que las yeguas madres. Estas diferencias ocasionadas por la edad de los animales deberían considerarse cuando se realizan estudios para establecer el status de susceptibilidad o resistencia a los antihelmínticos basados en el PRH para evitar asunciones incorrectas sobre el mismo.

In horses parasitized by small strongyles, a shortened strongyle egg reappearance period (ERP) after treatment with anthelmintics is considered an early indicator of the presence of resistance or loss of efficacy to these drugs. In the present work, clinical efficacy and ERP were evaluated after treatments with ivermectin in adult horses (broodmares) and juveniles (its fillies) naturally parasitized by small strongyles in an farm of Tucumán province. The clinical efficacy determined in the second week after treatment, and using a test of reduction in the egg count, ranged between 99.8 and 100% in mares and fillies respectively. The ERP (considered as the post- treatment period in which 10% of the pre-treatment epg was reached or a reduction of it < 90%) was six and seven weeks for the fillies and mother mares respectively (p= 0.001). In the sixth week after treatment, the fillies showed 11.74 times more risk (95% CI = 2.58-53.38) of reappearance of eggs than the brood mares. These differences caused by the age of the animals should be considered when conducting studies to establish the status of susceptibility or resistance to anthelmintics based on the ERP to avoid incorrect assumptions.

Factors associated with the prevalence of helminths in Mangalarga Marchador horses in southern of Minas Gerais, Brazil / Fatores associados com a prevalência de helmintos em cavalos da raça Mangalarga Marchador em propriedades do Sul de Minas Gerais

Horses are highly susceptible to parasitism. Helminth infections cause great harm to the animals and to their breeders. This study aimed at evaluating socioeconomic, cultural and management factors associated with the prevalence of gastrointestinal helminths of horses. A total of 40 farmas the Mangalarga Marchador horse breed were visited in southern Minas Gerais, Brazil, where interviews were conducted. Horse feces were collected on the farms and coproparasitological laboratory tests were conducted to quantify the infection and to identify parasites. Data were tabulated in Epidata and analyzed using the SPSS 20.0 software. A great similarity between breeds was observed, specifically in their profiles, as well as in their animal management techniques and in their parasite control habits. The cyathostome was the most prevalent helminth, followed by Oxyuris and large strongyles. The farms which prioritize only equine production are less likely to have animals with massive helminth infection.(AU)

Os equinos são animais muito susceptíveis ao parasitismo. As helmintoses causam grandes prejuízos tanto para os animais, quanto para os criadores. Este estudo teve como objetivo avaliar os fatores sócio-econômicos-culturais e de manejo associados à prevalência de helmintos gastrointestinais de equinos. Foram visitados 40 criatórios de equinos Mangalarga Marchador no Sul de Minas Gerais, nos quais foram realizadas entrevistas. Foram coletadas fezes dos animais nas propriedades e realizados exames laboratoriais coproparasitológicos a fim de quantificar a infecção dos animais e identificar os parasitos. Os dados foram tabulados no Epidata e analisados no software SPSS 20.0. Observou-se uma grande semelhança no perfil dos criadores, assim como na caracterização da propriedade, manejo e controle de parasitos. Os ciatostomíneos foram os helmintos mais prevalentes, seguidos pelo Oxyuris e os grandes estrôngilos. As propriedades que priorizam a equinocultura têm menor chance de apresentar animais com infecção maciça.(AU)

Pequeños estróngilos de los equinos: Eficacia clínica y periodo de reaparición de huevos luego del tratamiento con moxidectina y pirantel

El control de los pequeños estróngilos de los equinos (grupo Ciatostoma) se basa casi exclusivamente en la aplicación de antihelmínticos. En nuestro país, el desarrollo de resistencia generalizada a los bencimidazoles, está limitando las alternativas químicas disponibles a las lactonas macrocíclicas (ivermectina y moxidectina) y al pirantel, consideradas como drogas de larga y corta acción respectivamente. La información actualizada sobre la actividad de estas drogas en el campo es crítica para determinar su eficacia y detectar el desarrollo de fenómenos de resistencia a los antihelmínticos. En los equinos el período de reaparición de huevos (PRH) luego del tratamiento es considerado como un indicador temprano de la presencia de resistencia. En el presente trabajo se evaluó la eficacia clínica y el PRH luego de tratamientos con moxidectina y pirantel en equinos adultos de cinco establecimientos de las provincias de Santa Fe y Córdoba naturalmente parasitados por pequeños estróngilos. La eficacia clínica determinada al día 15 pos tratamiento utilizando un test de reducción en el conteo de huevos, osciló entre el 99,8 y el 100% para la moxidectina y entre el 98,9 y el 98,8% para el pirantel. Por su parte en el presente estudio el PRH fue de al menos 100 días para la moxidectina y de 35 días para el pirantel. Estos resultados indican que ambas drogas se muestran activas para el control de estos nematodes y que las poblaciones estudiadas (alguna de ellas resistentes a bencimidazoles) permanecen actualmente susceptibles a la moxidectina así como al pirantel. Esta última droga es de uso limitado en nuestro país, pero su inclusión en los programas de control contra los pequeños estróngilos podría reducir la dependencia y la presión de selección sobre las lactonas macrocíclicas y contribuir a mantener la vida útil de las mismas.

The control of the small strongyles (Ciathostoma group) in horses is based on the application of anthelmintics. In our country, the development of generalized resistance to benzimidazoles is limiting the chemical alternatives available to macrocyclic lactones (ivermectin and moxidectin) and to pyrantel, considered as long-acting and short-acting drugs respectively. Updated information on the activity of these drugs in the field, is critical for determining its efficacy and detecting the development of anthelmintic resistance. In these horse nematodes the period of egg reappearance (ERP) after treatment is considered as an early indicator of the presence of resistance. The present study evaluated the clinical efficacy and ERP after moxidectin and pirantel treatments in adult horses naturally parasitized by small strongyles from five farms from Santa Fe and Córdoba provinces. Clinical efficacy determined at day 14 or 15 post treatment using a test of reduction in the egg count ranged from 98.9 to 98.8% for the pirantel and 99.8 to 100% for moxidectin. The ERP was at least 100 days for moxidectin and 35 days for the pirantel. These results indicate that both drugs are active for the control of these nematodes and that the populations studied (some of them resistant to benzimidazoles) remain currently susceptible to moxidectin as well as to pyrantel. This last drug is of limited use in Argentina, but its inclusion in the control programs against the small strongyls could reduce the dependence and the selection pressure on the macrocyclic lactones and contribute to maintain the useful life of the same ones.

Parasitismo por estrongilos en caballos salvajes Venezolanos del hato el frío (Edo. Apure, Venezuela): Estudio preliminar / Strongyles parasitism in wild Venezuelan horses from hato el frío, State of Apure, Venezuela: A preliminary study

Los estróngilos son los parásitos más comunes en los caballos, causando serios problemas aún en aquellos animales que reciben tratamiento antihelmíntico. Existe en el país escaso conocimiento del comportamiento de este parasitismo en caballos salvajes cuyas poblaciones de helmintos no están influenciadas por el uso de fármacos antiparasitarios, por lo que el objetivo del presente estudio fue determinar las características de la infección por nematodos Strongylidae en caballos salvajes venezolanos no sometidos a tratamiento antihelmíntico en base a examen coprológico. El estudio se realizó en Abril 2006 en el Hato El Frío, ubicado cerca de Mantecal, estado Apure, Venezuela. Se tomó una muestra de heces directamente del recto a un total de 35 caballos salvajes (21 machos, 14 hembras, representando el 15% de la población), las cuales se procesaron por la técnica de Mc Master modificada y se realizaron cultivos a partir de 4 grupos (pool) de muestras positivas para la identificación de las larvas Strongylidae de tercer estado. Se obtuvo una prevalencia general de 82,86% (29/35) con un promedio general de 818,57 huevos por gramo de heces (hpg) [0-2.300]. De los animales examinados, el 25,71% tenía entre 500 y 1.000 hpg, mientras que 37,14% tenía más de 1.000 hpg. Strongylus vulgaris fue encontrado en 3 de 4 coprocultivos (75%) en porcentajes de 2, 12 y 7%, respectivamente. S. edentatus fue encontrado en 1 de 4 coprocultivos (25%) en porcentaje del 2%. La presencia de grandes estróngilos (S. vulgaris, S. edentatus) encontrados en los coprocultivos fue bastante marcada, así como el significativo número de animales con contajes superiores a 1.000 hpg.

Strongyles are the most common parasites in horses, which can cause serious health problems, even in regularly dewormed horses. There is practically no information in this country on this parasitic infection in wild horses which helminth populations are not influenced by using of antiparasitic drugs. So, the aim of this research was to determinate the caracteristics of Strongylidae nematode infection in wild Venezuelan horses which have never received anthelmintic therapy, on the basis of coprological examination. Study was performed in April 2006 in “Hato El Frío” near to Mantecal, State of Apure, Venezuela. Faecal samples were taken from the rectum, once from each of thirty five randomly selected wild horses (21 males, 14 females), representing approximately 15% of the total population of the herd, and processed using the McMaster modified technique. Four cultures of bulked positive samples for identification of Strongylidae larvae were also performed. General prevalence was 82.86% (29/35), with a general epg mean of 818,57 epg (0-2,300). From the animals sampled 25,71% showed epg counts between 500-1,000 epg but 37,14% had more than 1,000 epg. Strongylus vulgaris was found in 3 out of 4 cultures (75%) in a proportion of 2, 12 and 7%, respectively. Strongylus edentatus was found in 1 out of 4 cultures (25%) in a proportion of 2%. There must be remarkable the presence of large strongyles in cultures as well as the important number of animals harboring more than 1,000 epg.