Eficiencia de la respuesta superovulatoria del ganado Brahman al protocolo P-24 / Efficiency of superovulatory response to P-24 protocol in fixed time embryo transfer in Brahman cattle

Objetivo. Evaluar la eficiencia de la respuesta superovulatoria del ganado Brahman al protocolo P-24. Materiales y métodos. Se utilizaron doce vacas Brahman donadoras con más de 60 días postparto, a las cuales se les realizó un total de 21 tratamientos superovulatorios con base en el protocolo P-24. Se realizó la colecta de los embriones a través del método convencional y los embriones fueron clasificados (IETS). Resultados. Se obtuvo un promedio de 9.1 estructuras, 4.4 embriones transferibles, 3.7 embriones congelables y 3.2 embriones degenerados recuperados por colecta. Los estadíos de desarrollo que predominaron fueron mórula (32.6%), blastocisto temprano (38%) y blastocisto (18.5%). Se presentó efecto (p<0.05) del número de superovulaciones sucesivas sobre la producción de embriones congelables. Sin embargo, no hubo efecto (p>0.05) sobre las demás variables estudiadas. Se presentó efecto (p<0.05) de la producción promedio de estructuras recuperadas, embriones transferibles y congelables entre las donadoras con una producción mayor o igual a 5, y menor a 5 embriones transferibles. Por el contrario, no hubo efecto (p>0.05) de la producción promedio de embriones degenerados y ovocitos sin fecundar entre ambos grupos. No obstante, la proporción de éstos fue mayor en las donadoras con una menor producción de embriones transferibles (50 y 22.4%) vs. las donadoras con mayor producción (39.3 y 14%) para embriones degenerados y ovocitos sin fecundar respectivamente. Conclusiones. El ganado Brahman tuvo una respuesta superovulatoria eficiente al protocolo P-24 para transferencia de embriones a tiempo fijo.

Efecto del númeoo de aplicaciones de cloprostenl sobre la regresión de cuerposs lúteos, el retorno al celo y la ovulación, después de un tratamiento superovulatorio en donantes de embriones bovinos / The effectof nummber of clprostenol aplications on corpus luteum regressiion, return to estrus and ovulation, after a superovulatory treatment in bovine embryoddonors

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la respuesta de la aplicación doble o triple de prostaglandina sobre la regresión de CL, ovulación y retorno al celo después de un tratamiento superovulatorio en vacas donantes de embriones. Para este experimento se tomaron 44 vacas asignadas al azar a dos grupos de tratamiento. Al primero (n = 23; CLO 0 & 7) se le aplicó una dosis de 500 μg de cloprostenol los días 0 (denominado día de la colecta) y 7; al segundo grupo (n = 21; CLO 0, 1 & 7) se le aplicó una inyección adicional el día 1. Los animales fueron examinados por ultrasonografía los días 0, 4, 7, 10 y 13 para evaluar la regresión de cuerpos lúteos y la ovulación. Se realizó observación del celo dos veces al día (mañana y tarde). El 60,8 y 52,3% de los grupos CLO 0 & 7 y CLO 0, 1 & 7, respectivamente, presentaron signos de celo. No se presentaron diferencias en el día del celo entre los grupos (7,2 ± 0,3, 7,3 ± 0,5 días). Tampoco hubo diferencia para la variable ovulación (8,5 ± 0,9 y 9,8± 0,9 días). Todas las vacas tratadas regresaron los cuerpos lúteos antes de finalizar el experimento. Cuando se analizó el tiempo de ovulación, se encontró que las vacas con 4 o menos cuerpos lúteos ovulan en un tiempo menor (P < 0,01) que las vacas con 5 o más cuerpos lúteos. Se concluye que no hay diferencia entre la doble o triple aplicación de cloprostenol para las variables. Sería innecesaria una aplicación adicional de cloprostenol el día 7.

The purpose of the present study was to evaluate the effect of prostaglandin (PG) treatment schedule on luteal regression and return to estrus in superovulated cows. A group of 44 donor cows were randomly assigned to two groups on the day of ova/ embryo collection (day 0). The first group (n = 23; CLO 0 & 7) was treated with 500 μg of cloprostenol on days 0 and 7 after embryo recovery; the second group (n = 21; CLO 0, 1 & 7) received an additional treatment with cloprostenol on day 1. All animals were scanned by transrectal ultrasonography on days 0 (embryo recovery), 4, 7, 10 and 13 to evaluate CL regression and subsequent ovulation. Estrus detection was done twice daily (am/pm) starting on day 4. There were no significant differences between groups in the percentage of animals returning to estrus (60.8% and 52.3%, respectively), or the intervals from the first PG treatment to estrus (7.2 ± 0.3 vs 7.3 ± 0.5 days), or ovulation (8.5 ± 0.9 vs 9.8± 0.9 days). All cows had luteolysis before the end of the experiment. Animals that had 4 CL or less ovulated earlier than cows that had 5 or more CL (P<0.01). In summary, there was no difference in luteal regression and the return to estrus and ovulation in donor cows treated with cloprostenol twice or three times after superovulation. It would not appear to be necessary to treat donors with PG 7 days later, since all cows had luteal regression after the first PG treatment.

Superovulación: estrategias, factores asociados y predicción de la respuesta superovulatoria en bovinos: [revisión] / Superovulation: strategies, associated factors, and prediction of the superovulatory reponse in cows: [review]

La transferencia de embriones tiene su origen en los años cincuenta, pero solo hasta los setenta se consideró como una alternativa comercial. A pesar de llevar más de 30 años, las tasas de superovulación y de preñez no se han mejorado sustancialmente. El número de ovulaciones varía entre 0 y 40 y, además, un 30% de las vacas superovuladas no responden al tratamiento o producen muy pocos embriones de mala calidad. Los investigadores del área han tratado de disminuir esta variabilidad sin mucho éxito. Por otra parte, se ha mejorado mucho en el conocimiento del ciclo estral, lo cual ha permitido que los esquemas se lleven a cabo en menos tiempo y se logren manejar los protocolos en tiempo fijo. El propósito de esta revisión es discutir los factores que afectan las tasas de superovulación en las vacas donadoras de embriones, y las posibles estrategias para mejorarlas.

Embryo transfer in cattle started to be explored in the 50´s but only in the 70´s was considered as a commercial alternative. Even though the technology has been around for more than 30 years, the superovulatory response and the pregnancy rate after transfer of the embryos have not improved substantially. The number of ovulations varies between 0 y 40 and additionally about 40% of the superovulated cows do not respond to treatment or produce very few embryos or bad quality embryos. Research in this area has been done to reduce this variability without much success. On the other hand, the studies have helped in the understanding of the bovine estrous cycle, allowing the improvement and implementation of better and shorter protocols to obtain embryos as well as to program fixed time embryo recoveries. The purpose of this review is to discuss the factors that can affect the superovulatory response of embryo donor cows and the different strategies available to improve this response.

Análisis de costos de esquemas de transferencia de embriones bovinos utilizados en Colombia / Custo análise de esquemas de transferência de embriões de bovinos utilizado na Colômbia / Cost analysis of protocols for transfer of bovine embryos used in Colombia

En el presente trabajo se presenta el análisis de los costos de tres esquemas de transferencia de embriones aplicados en Colombia, realizado con base en la cotización de los productos en las casa comerciales a precios actualizados del año 2008. Las fuentes de variación consideradas en el análisis fueron las siguientes:1) superovulación (SOV) de donadoras, 2) sincronización de las receptoras, y 3) mano de obra. Los esquemas comparados fueron:esquema 1 (E1), sincronización con implantes de progesterona, dosis constante de FSH y sincronización de la ovulación con GnRH, seguidas de la IA; esquema 2 (E2), sincronización con prostaglandinas, dosis constante de FSH, LH e inseminación; y esquema 3 (E3), sincronización con progesterona, dosis constante de FSH, prostaglandina, GnRH (36h), LH e IA. El costo por embrión transferible producido se calculó con base en 6.3, 6.6, y 10.3 embriones transferibles/lavado, para los esquemas 1, 2, y 3, respectivamente; cuatro lavados/donadora/año, y 50 o 100% de embriones implantados, para los tres esquemas. Los costos estimados por embrión transferible, asumiendo un 100% de tasas de gestación fueron:US 239.8 ($ 479.585.7), US 156 ($ 312.879.0), y US 115.1 ($ 230.186.5), para los esquemas E1, E2 y E3, respectivamente, sin diferencias estadísticas significativas (p>0.05) en los componentes de costos entre esquemas. Los costos aumentaron a US 359.7 ($719.378.6), US 234.7 ($ 469.318.4), y US 172.6 ($ 345.279.7), respectivamente, cuando se incluyeron las pérdidas por embriones transferidos no implantados (50%). En el trabajo se discuten otros costos fijos del proceso de TE que fueron invariables para los tres esquemas. Hasta donde se pudo consultar la literatura, este es el primer reporte que hace un análisis de costos de programa de TE en Colombia. Este trabajo aporta elementos del sistema de costos que se proponen para el cálculo de costos en programas de transferencia de embriones.

In this work an estimated calculation of the cost of three of the most common protocols for superovulation and embryo trasnsfer in Colombia is presented. Estimate costs were defined according to commercial avalilable products at december 2005, taking into account the following sources of costs: 1) Superovulation of donor cows, 2) sinchronization of receptor cows, and 3) personnel. Hormonal schedules that were analyzed included: schedule 1 (S1), sinchronization with progesterone implants, FSH (continuous dose) GnRH (synchronization of ovulation), and AI; schedule 2 (S2), sinchronization with two dose prostaglandins, FSH (continuous dose), LH source and insemination; and schedule 3 (S3), sinchronization with progesterone implants, FSH (continuous dose), prostaglandin, GnRH (36h) after, and AI. Costs were calculated on the basis of 6.3, 6.6, and 10.3 transferable embryos/flush, for schedule 1, 2 and 3, respectively; flushes/donor/year (n = 4), and global pregnancy rate (50 or 100%). The estimated costs for transferable embryo were US 239.8 ($ 479.585.7), US 156 ($ 312.879.0), y US 115.1 ($ 230.186.5) for S1, S2, and S3, respectively. No statistically significant differences (p>0.05) between schedules were found for cost components. Average costs/transferable embryo were increased to US 359.7 ($719.378.6), US 234.7 ($ 469.318.4), y US 172.6 ($ 345.279.7), respectively, when 50% of transferred embryo losses were included in the analysis. To our knowledge, this is the first report on estimated costs for embryo transfer in Colombia. In this work several cost components for calculating the cost of ET according to each hormonal schedule are provided.

Neste trabalho apresenta a análise dos custos de transferência embrionária três esquemas utilizados na Colômbia, feita com base no preço de produtos comerciais na casa dos preços em 2005. Os regimes avaliados hormônio-cio referência ao: esquema 1 (E1), sincronização com progesterona implantes, estável dose de FSH e de calendário da ovulação com GnRH, seguido pelo IA; esquema 2 (E2), sincronização com prostaglandinas, estável dose de FSH, LH e de inseminação; e esquema 3 (E3), sincronização com progesterona, estável dose de FSH, prostaglandina, GnRH (36h), LH e AI. As fontes de variação consideradas na análise foram as seguintes: 1) superovulação (SOV) da doadora, 2) sincronização do destinatário, ET 3) personel. Como fontes de variação na análise foram consideradas as seguintes: 6.3, 6.6 et 10.3 embriões transferibles produzidos/lavagem, lavados/doadora/ano (n = 4), e 50 o 100% taxa de gestação. Os custos estimados para a implantação do embrião para E1, E2 e E3, foram E.U. $ 239.8 ($ 479.585.7), E.U. 156 ($ 312.879.0), e E.U. 115.1 ($ 230.186.5), respectivamente, que passou a assumir as perdas embriões não implantados (50% aprox.) e receber o valor de E.U. $ 359.7 ($719.378.6), E.U. $ 234.7 ($ 469.318.4), e E.U. $ 172.6 ($ 345.279.7). No que diz respeito poderia consultar a literatura, este é o primeiro relatório que uma análise de custos TE programa na Colômbia. Este trabalho traz elementos do sistema de custos que são propostos para o cálculo dos custos de programas de transferência embrionária.

Racionalidad de los esquemas de superovulación y sincronización en la transferencia de embriones en bovinos: ¿terapéutica basada en la evidencia o ausencia de ética / Racionalidade dos esquemas de superovulação e sincronização na transferência de embriões em bovinos: terapêutica baseada em provas ou falta de ética / Rational of superovulation and synchronization protocols for bovine embryo transfer ¿Evidence-based therapeutics or lack of ethics

Desde el inicio del uso intensivo de la transferencia de embriones (TE) en Colombia, los esquemas hormonales para la inducción de la superovulación (SOV) en las donadoras y la sincronización de las receptoras (SR), se han aplicado de conformidad con los estudios realizados en otras partes del mundo. Una gran cantidad de variaciones en los esquemas está disponible en la literatura, cuya aplicación no ha obedecido al diseño de estudios clínicos completos, sino que se basan en el principio de la utilización de productos hormonales por su presumida farmacología, sin hacer seguimiento ni de su farmacocinética ni de los potenciales efectos colaterales adversos en la fertilidad. Los esquemas utilizados podrían tener efectos colaterales asociados de manera directa o indirecta con el uso incontrolado de hormonas exógenas, o con el tiempo durante el cual las donadoras o receptoras son sometidas a los tratamientos, olvidando aspectos fundamentales de la ética en la experimentación animal. La proliferación de esquemas de SOV y de SR busca mejorar las tasas de respuesta en la producción de embriones de calidad I y II (transferibles o congelables), y aumentar las tasas de gestación de los embriones transferidos, pero los resultados no han mejorado significativamente a lo largo de los últimos 20, situación común en todos los países del mundo. En el presente trabajo se hace una revisión sobre el uso de hormonas en los esquemas de SOV y sincronización de receptoras, con énfasis en la racionalidad del uso de las hormonas y los resultados obtenidos. Finalmente, se proponen varios elementos de juicio para plantear una discusión sobre la racionalidad y la bioética de los esquemas utilizados en la TE.

Since the beginning of the use of bovine embryo transfer (ET) in Colombia, hormonal protocols for superovulation (SOV) of donors and for synchronization of recipients (RS) have been used in accordance with protocols reported elsewhere. Several variations of ET protocols have been reported most of they not based in controlled clinical studies but in the supposed pharmacological mechanisms of action of the used hormones, neither with pharmacokinetic studies nor considering the potential collateral effects on cow’s fertility. Such collateral effects could be directly or indirectly related with the uncontrolled use of exogenous hormones, or with the time-related additional open days of donor and recipients, without considering the bioethics for animal experimentation. The huge proliferation of protocols for SOV and RS aims for improving both grade I and II (transferable or freezable embryos) embryo yield per transfer, and pregnancy rates for transferred embryos, without having achieved significant improvements during the last 20 years all around the world. In the present review we critic the use of exogenous hormones in bovine ET with emphasis in the rationality of indiscriminating use of exogenous hormones and embryo yield. Finally, we suggest several arguments on the bioethics of the protocols for SOV and RS in bovine ET.

Desde o início da transferência de embriãos (TE) na Colômbia, nos esquemas hormonais para a indução da superovulação (SOV) no dadora e sincronização do receptor (SR), foram executadas de acordo com estudos realizados noutras partes do mundo. Um lote de variações nos esquemas está disponível na literatura, cuja execução não tenha obedecido a concepção dos estudos clínicos completos, sem controlo ou a sua farmacocinética ou potenciais efeitos colaterais adversos sobre a fertilidade. Os esquemas utilizados poderiam ter efeitos secundários associados direta ou indiretamente com o uso descontrolado de hormônios exógenos, ou o tempo durante o qual o doador ou receptor são submetidos a tratamento, ignorando os aspectos-chave da ética na experimentação animal. A proliferação de esquemas SOV e SR pretendem melhorar as taxas de resposta na produção de embriões qualidade I e II (transferíveis ou congeladas) eu aumento das taxas de gravidez de embriões transferidos, mas os resultados não têm melhorado significativamente ao longo dos últimos 20, uma situação comum em todos os países do mundo. Neste documento é uma revisão sobre o uso de hormônios nas formas de SOV e sincronização de receptores, com ênfase na utilização racional das hormonais e os resultados obtidos. Por último, propomos vários elementos de juízo para levantar uma discussão sobre a racionalidade e bioética dos esquemas utilizados na TE.

Influencia de la suplementación en la dieta con levaduras y minerales sobre la producción de ovocitos de ovejas púberes estimuladas ováricamente / The influence of diet supplementation with yeasts and organic minerals over oocyte production of ovarian stimulated ewes

Para producir ovocitos cultivados “in vivo” se estudió la respuesta superovulatoria de ovejas púberes suplementadas con un alimento proteico que contiene levaduras o minerales orgánicos. Dieciocho hembras (7 meses de edad) fueron distribuidas en 3 grupos: TA:1 kg alimento 15% PC+Yea Sacc®, (levadura Saccharomyces cerevisiae cepa 1026). Dosis: 5 gr/animal/día+heno ad libitum. TB:1 kg alimento 15% PC+Bioplex Plus®, (cultivo de levaduras vivas y minerales orgánicos). Dosis: 4 gr/animal/día+heno ad libitum. TT:Testigo. 1 kg alimento 15% de PC+heno ad libitum. El estro se sincronizó con esponjas vaginales (40 mg FGA) durante 12d. A los 10d de la inserción de las esponjas se aplicó 225 mg de prostaglandina/oveja. La superovulación se realizó 36h antes de la retirada de las esponjas mediante 100 mg-NIH FSHp y 500 UI eCG en una sola dosis/oveja. 24h de la retirada de las esponjas se aplicaron 100 µg GnRH/oveja. La tasa de ovulación se midió por endoscopia. Los ovocitos se recuperaron del oviducto 48h de la retirada de las esponjas. La TO resultó superior (P<0,05) en los TA y TB (16,6±6,84 y 15,5±4,18), respecto al TT (9,16±3,81). La tasa de recuperación (TR) muestra diferencias (P<0,05) entre el TA (93,9%) respecto a los TB (56,9%) y TT (61,8%). La proporción (P<0,05) de ovocitos de calidad 1 en el TA respecto a los TB y TT fue mayor. En conclusión, la adición de levaduras en la dieta favorece la respuesta a un tratamiento de estímulo superovulatorio en ovejas púberes incrementando la tasa de ovulación y calidad de los ovocitos.

The superovulatory response of pre-pubertal or pubertal ewes fed with protein suplement that contained yeast or organic minerals was evaluated in order to obtain “in vivo” maturated oocytes. Eighteen females (7 months of age) were allocated to one of the following treatment and fed as follow: Treatment A (TA): 1 kg food with 15% PC+Yea sacc® (yeast Saccharomyces cerevisiae stump 1026), dose: 5 gr/animal/day and hay ad libitum. Treatment B (TB): 1 kg food with 15% PC+Bioplex Plus® (Cultivation of live yeasts and organic minerals), dose: 4 gr/animal/day and hay ad libitum. Treatment C (TT: Control): 1 kg food with 15% PC and hay ad libitum. The estrous cycle was synchronized through the insertion of vaginal sponges with 40 mg of fluorogestone acetate (FGA) during 12 days. At day 10th of the sponges insertion 225 mg of prostaglandin F2á was administered per ewe. To induce supra-ovulation 100 mg-NIH FSHp and 500 UI eCG in a single dose were applied 36 h before the withdrawal of the sponges, and 24 h from the last application 100 µg of GnRH was also injected. The ovulation rate was measured by endoscopy and ovulated oocytes collected by flushing. The total of ovulation (TO) was greater in the TA and TB (16.6±6.84 and 15.5±4.18) treatment, than on the control TT (9.16±3.81) (P<0.05). The oocyte recovery (TR) after flashing was significantly higher in the TA (93.9%) treatment compared to TB (56.9%) and TT (61.8%). Finally, the proportion (P<0.05) of grade I oocytes in the diet supplementation in TA was in higher than the quality of oocytes in the TB and TT treatment. In conclusion, the addition of with yeasts, to supra-ovulated pre-pubertal ewes promotes ovulation rate and oocytes quality.