Estudo de atributos de virulência e resistência a antimicrobianos em amostras de P. aeruginosa / Study of attributes of virulence and antimicrobial resistance in P. aeruginosa isolates

P. aeruginosa é um importante agente de infecções relacionadas à assistência em saúde. Habitualmente, o estabelecimento de infecções agudas é precedido pela colonização das mucosas dos pacientes. Não se sabe, porém, se os processos infecciosos são causados pelas próprias cepas bacterianas colonizadoras ou por outras com que os pacientes entrem em contato, dotadas ou não de maior potencial de virulência ou de resistência a antimicrobianos que as tornem mais eficientes como agentes infecciosos. Assim, este estudo teve como objetivos i) investigar a existência de potenciais diferenças entre amostras de P. aeruginosa que causaram apenas colonização e aquelas responsáveis por infecção, isoladas de um mesmo paciente, quanto a seus fenótipos de virulência e de não susceptibilidade a antimicrobiamos; ii) pesquisar a existência de associação entre características dos paciente, incluindo o tipo de evolução clínica, com as demais variáveis estudadas. No estudo foram incluídos 21 pacientes que desenvolveram infecção por P. aeruginosa durante sua internação no Centro de Terapia Intensiva do Hospital Universitário Clementino Fraga Filho, entre abril de 2007 e abril de 2008. De cada paciente foram selecionadas duas amostras bacterianas: a primeira isolada durante o episódio de infecção e a amostra colonizadora obtida imediatamente antes da ocorrência da infecção. As amostras selecionadas foram estudadas quanto a i) expressão de três mecanismos de virulência (citotoxicidade, aderência a células epiteliais respiratórias humanas e capacidade de formação de biofilme); ii) presença de genes codificadores das proteínas efetoras do sistema de secreção do tipo 3 (SST3 - exoS, exoT, exoU e exoY); iii) perfil de susceptibilidade a antimicrobianos, iv) perfil de fragmentação do DNA cromossômico por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). As amostras bacterianas obtidas de infecções agudas foram significativamente mais citotóxicas que aquelas obtidas de colonização...

P. aeruginosa is an important agent of healthcare-associated infections. The establishment of acute infectious episodes is usually preceded by colonization of patient mucosa. However, it remains unknown whether the infectious processes are caused by bacterial strains previously colonizing the patient or by additional strains the patient may come into contact. These new isolates may carry greater virulence potential or antibiotic resistance that makes them more efficient as an infecting agent. Thus, the objetives of the present study were i) to investigate the existence of potential differences between P. aeruginosa isolates obtained from a colonized mucosa and isolates accounting for infectious processes, recovered from the same patient, with respect to virulence phenotypes and non-susceptibility to antimicrobial agents; ii) to investigate the existence of association between patient features, including the type of clinical outcome, with bacterial characteristics. The study included 21 patients who developed P. aeruginosa infection during their stay in the Intensive Care Unit of the University Hospital Clementino Fraga Filho, from April 2007 to April 2008. Two P. aeruginosa isolates were selected from each patient: the first isolate recovered from the infectious episode and the colonizing isolate obtained immediately before the onset of the infection. Features from the isolates investigated included: i) expression of three virulence mechanisms (cytotoxicity, adherence to human respiratory epithelial cells and biofilm formation); ii) presence of the genes encoding type III secretion system effector proteins (TTSS, exoS , exoT , exoU and exoY); iii) antimicrobial susceptibility profile; iv) profile of the bacterial chromossomic DNA fragmentation following analysis by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The bacterial isolates obtained from acute infections were significantly more cytotoxic than colonizing strains...

Diarreia associada a Shigella em crianças e sensibilidade a antimicrobianos / Diarrhea associated with Shigella in children and susceptibility to antimicrobials

OBJETIVO: Avaliar a distribuição e suscetibilidade a antimicrobianos de Shigella isolada de crianças com diarreia aguda e sem diarreia em Teresina (PI). MÉTODOS: Quatrocentas crianças com idade até 60 meses foram estudadas. Fezes foram coletadas de todos os pacientes entre janeiro de 2004 e agosto de 2007. Shigella foi identificada por métodos convencionais e antibiograma e pesquisa de β-lactamase de espectro ampliado (ESBL) foram realizados por difusão em ágar. RESULTADOS: Shigelose foi detectada apenas em crianças com diarreia aguda (26/250; 10,4%), especialmente naquelas entre 6 e 24 meses de idade e nos meses chuvosos. Shigella foi suscetível a ceftriaxona, ciprofloxacina e ácido nalidíxico. Mais da metade das amostras foram resistentes a sulfametoxazol-trimetoprim e ampicilina. ESBL não foi detectada. CONCLUSÕES: S. flexneri é comum em Teresina. A resistência a ampicilina e sulfametoxazol-trimetoprim é preocupante, pois estas drogas são amplamente utilizadas na prática e sulfametoxazol-trimetoprim ainda é recomendada para tratamento de crianças com suspeita de shigelose.

OBJECTIVE: To evaluate the distribution and susceptibility to antimicrobials of Shigella isolated from children with acute diarrhea and without diarrhea in Teresina, state of Piauí, Brazil. METHODS: Four hundred children aged up to 60 months were studied. Stools were collected from all the patients between January 2004 and August 2007. Shigella was identified by conventional methods and antibiogram and extended-spectrum β-lactamase (ESBL) were performed by agar diffusion. RESULTS: Shigellosis was only detected in children with acute diarrhea (26/250; 10.4%), especially in those aged from 6 to 24 months and in the rainy months. Shigella was susceptible to ceftriaxone, ciprofloxacin and nalidixic acid. More than half of the strains were resistant to sulphametoxazole-trimethoprim and ampicillin. ESBL was not detected. CONCLUSIONS: S. flexneri is common in Teresina. The resistance to ampicillin and sulphametoxazole-trimethoprim gives cause for concern, as these drugs are widely used in practice and sulphametoxazole-trimethoprim is also recommended for treating children suspected of having shigellosis.

Actividad in vitro de piperacilina-tazobactam en combinación con aminoglucósidos y fluoroquinolonas en Pseudomonas aeruginosa productoras de metalo-β-lactamasas / In vitro piperacillin-tazobactam activity in combination with aminoglycosides and fluoroquinolones in Pseudomonas aeruginosa metallo-β-lactamases producers

Pseudomonas aeruginosa es un bacilo gramnegativo, capaz de adquirir genes que codifican la producción de metalo-β-lactamasas (MBL) haciéndose multirresistente, lo cual dificulta el tratamiento de las infecciones causadas por este microorganismo. Se evaluó la actividad in vitro de piperacilina-tazobactam, en combinación con aminoglucósidos y fluoroquinolonas, en 8 aislamientos de P. aeruginosa productoras de MBL, provenientes de cuatro hospitales del oriente y sur de Venezuela mediante el método epsilométrico. Las combinaciones de antimicrobianos que presentaron mayor efecto sinérgico fueron piperacilina-tazobactam/gentamicina y piperacilina-tazobactam/ciprofloxacina en 5/8 aislamientos. La combinación de piperacilina-tazobactam/amikacina presentó sinergia en 4 de los casos y adición en los otros 4, manifestando el menor índice de concentración inhibitoria fraccionada promedio. No hubo antagonismo en ninguna combinación de antimicrobianos. Los resultados de este estudio sugieren que piperacilina-tazobactam en combinación con gentamicina, amikacina o ciprofloxacina podrían ser utilizadas como alternativas terapéuticas en las infecciones por P. aeruginosa multirresistentes productoras de MBL en los hospitales del estado Bolívar, mientras que en los hospitales del oriente de Venezuela se sugiere la combinación piperacilina-tazobactam/amikacina.

Pseudomonas aeruginosa is a gram negative bacillus able to acquire genes which codify for production of metallo-β-lactamases (MBL) becoming multiresistant, which difficults the treatment of infections produced by this microorganism. The in vitro activity of piperacilline-tazobactam, in combination with aminoglycosides and fluoroquinonolones was evaluated in 8 P. aeruginosa MBL producers obtained at four hospitals of the west and south areas of Venezuela through an epsilometric method. The antimicrobial combinations which showed the greatest synergic effect were piperacillin-tazobactam/gentamicin and piperacillin-tazobactam/amikacin in 5/8 isolates. The piperacilline-tazobactam/amikacin combination showed synergy in 4 cases and addition in the other 4, with the lowest index of mean fractionated inhibitory concentration. There was no antagonism in any of the antimicrobial combinations. The results of this study suggest that piperacilline-tazobactam in combination with gentamicin, amikacin or ciprofloxacin, could be used as therapeutic alternatives in multiresistant P. aeruginosa MBL producers at all the hospitals of Bolivar State, while in hospitals located in the west of Venezuela, the piperacilline-tazobactan/amikacin combination is suggested.